缺血性心律失常相关微小RNA在大鼠心脏的表达变化

目的 筛查缺血预适应大鼠心脏微小RNA(microRNA,或miRNA)的表达变化,寻找与缺血性心律失常相关的微小RNA.方法 SD大鼠随即分为假手术组和缺血预适应组(IP),每组3只.应用手术套管法建立在体大鼠心肌缺血预适应模型(5min缺血、5min再灌,三个循环).建模4h后取材提取RNA,应用微小RNA芯片技术检测IP组非缺血再灌注区(a)、IP组缺血再灌注区(b)和假手术组(c)心肌组织小RNA的表达情况.结果 同假手术组相比,缺血再灌区心肌有4个miRNA上调,5个miRNA下调;缺血预适应组非缺血再灌区有23个miRNA上调,包括三个肌肉特异表达的miRNA(mir-1、mir-133和mir-206),另有9个miRNA表达下调.结论 在心肌缺血预适应过程中,心肌微小RNA的表达发生明显变化,这些微小RNA可能对缺血预适应介导的抗心律失常起重要调节作用,为缺血性心律失常机制研究提供了新思路.     

再灌注后移植肺组织ICAM-1的表达及其意义

目的 :探讨再灌注后移植肺组织ICAM 1表达的变化及其意义。方法 :4 2只大鼠随机分成正常对照组、假手术组、缺血再灌注组。建立大鼠自体左肺模拟原位移植模型 ,采用免疫组化法检测肺组织ICAM 1表达的变化 ,并进行图像分析。结果 :①正常对照组及假手术组ICAM 1仅在少量肺血管内皮细胞 (VECs)和肺泡Ⅰ型上皮细胞 (PⅠ )中呈弱阳性表达 (分别为 1.0 8± 0 .0 4和 1.0 8± 0 .0 5 ) ;②再灌注后肺VEC、PⅠ、肺泡巨噬细胞及支气管上皮细胞等均可见大量ICAM 1表达 ,至再灌注 12h达到最高峰 (3.4 3± 0 .6 6 ) ,与再灌注 0h比较 ,P <0 .0 1;③ICAM 1表达呈强阳性部位伴有中性粒细胞的聚集。结论 :再灌注后移植肺组织ICAM 1表达上调 ,可能参与移植肺再灌注损伤     

大鼠肺缺血再灌注损伤中补体的激活和调节

目的 探讨大鼠肺缺血再灌注(IR)后多时间点的补体及其调节因子的动态变化规律,为靶向补体抑制治疗提供理论依据及临床指导.方法 SD雄性大鼠随机分为对照组(假手术组,5只)和实验组(IR组,25只),实验组又分为再灌注后0、1、3、6 和24 h组(各5只).建立大鼠肺缺血再灌注模型,按不同时间点取标本,应用实时荧光定量PCR法检测肺组织中补体C1qa、C2、C3、C4-2、C5以及调节因子C3ar1、C4bpa、Cfi的表达.结果 缺血再灌注后肺组织C1qa、C2和C4-2表达明显高于对照组,3 h达高峰;C3和C3ar1基因表达升高趋势一致,于缺血再灌注后24 h达高峰;C5于再灌注后0 ～3 h内表达无明显变化,其后表达升高并于6 h达高峰;C4bpa和Cfi表达在各时间点均明显高于对照组.结论 补体系统的激活是肺缺血再灌注损伤机制之一,早期经典途径参与补体激活,后期(6 h后)旁路途径可能放大补体激活,补体调节因子在缺血再灌注后发挥代偿调节补体过度激活的作用.     

急性心肌梗死大鼠心脏内生型一氧化氮合酶基因表达减少

目的:探讨急性心肌缺血对大鼠心脏组织内生型一氧化氮合酶(eNOS)基因表达的影响。方法:26只健康成年SD大鼠随机分为对照组(假手术组)、缺血组两组。缺血组取1 h,2 h,24 h三个不同时间点。采用开胸结扎冠状动脉左前降支的方法建立心肌缺血模型,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测大鼠心梗后不同时间eNOS mRNA表达。结果:冠脉结扎后1 h,两组大鼠缺血心肌组织中eNOS mRNA表达无明显变化(P>0.05);结扎2h时则检测到缺血组大鼠梗死及梗死周围区域心肌组织eNOS mRNA表达下降(P<0.05),eNOS mRNA表达降低持续至结扎后24 h;结扎后24 h组eNOS mRNA表达与结扎后2 h组相比差异无显著性(P>0.05)。结论:在心梗早期(缺血后2 h开始)缺血心脏即有eNOs基因表达减少,eNOs基因表达量不足可能是心肌缺血性损伤的重要机制之     

脓毒症大鼠肺组织细胞间黏附分子-1表达的变化

目的:探讨脓毒症大鼠肺组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达变化及其与急性肺损伤的关系.方法:采用盲肠结扎穿孔术复制脓毒症动物模型,将大鼠分为假手术组,脓毒症 4、8、12、24 h组共5组,每组8只,所有大鼠于相应时点活杀,检测支气管肺泡灌洗液白细胞计数、肺湿/干重比和观察肺组织的病理变化,采用免疫组织化学方法和免疫印迹法检测肺组织ICAM-1蛋白的表达.结果:与假手术组比较,脓毒症4 h后大鼠肺组织中ICAM-1的表达水平升高(P<0.01),并持续升高至24 h,同时伴有支气管肺泡灌洗液白细胞计数、肺湿/干重比的增加和肺组织病理损害的加重.免疫印迹法测定ICAM-1的表达与支气管肺泡灌洗液白细胞计数、肺湿/干重比呈正相关,相关系数分别为0.79、0.86(P<0.01).结论:脓毒症大鼠肺组织中ICAM-1呈过度表达,参与脓毒症肺损伤过程.     

地塞米松对大鼠肺缺血再灌注损伤保护的研究

目的:通过观察地塞米松对大鼠肺缺血再灌注后病理形态变化的影响,探讨其对肺缺血再灌注损伤的保护机制。方法:健康的SD大鼠40只,雌雄不拘,随机分为5组:假手术组(S)、单纯缺血组(I)、缺血再灌注组(IR)、小剂量地塞米松干预组(D1)及大剂量地塞米松干预组(D2),每组8只。根据Eppinger模型制作SD大鼠单侧肺缺血再灌注动物模型,用Western印迹法分析各实验组中一氧化氮合酶蛋白表达的变化,HE染色观察肺组织病理形态学改变结果:与其它组比较,缺血再灌注组肺组织中蛋白一氧化氮合酶表达明显增高(P<0.01),在地塞米松干预后,一氧化氮合酶蛋白下降,以D2组明显,病理切片显示IR组肺结构损害分级显著重于其它组,在地塞米松干预后,肺结构损害分级下降,以D2组明显。结论:正常肺脏一氧化氮合酶蛋白的表达微弱,缺血再灌注可使一氧化氮合酶蛋白表达增加,肺组织损伤加重,地塞米松可使一氧化氮合酶蛋白表达下降,肺组织损伤减轻,这种效应以大剂量时明显。     

急性肺缺血再灌注引起肺组织表面活性物质相关蛋白A变化实验研究

目的:探讨肺急性肺缺血再灌注(ischemia reperfution,I/R)时表面活性物质相关蛋白A(surfactant-associated protein A,SP-A)含量的变化与肺损伤的关系。方法:40只健康的SD大鼠,雌雄不拘,随机分成5组:假手术组(S)、单纯缺组(I)、再灌注1h组(R1组)、再灌注2h组(R2组)、再灌注6h组(R3组)。根据Eppinger模型建立原位阻断左肺门大鼠温肺I/R模型。术毕测定各组血清丙二醛(MDA)及肺湿/干重比例(W/D)、病理观察、用Western-Blot及免疫组化法检测各组肺组织中SP-A。结果:(1)MDA、肺W/D在I组即较S组开始升高,予再灌注后,各组MDA、肺W/D随再灌注时间的延长明显升高(P<0.05);(2)SP-A在S组表达最多,在I组表达减少,再灌注后随时间的延长表达更少(P<0.05)。结论:大鼠肺急性I/R后,肺表面活性物质相关蛋白A减少是造成肺一系列损害的重要因素。     

降钙素基因相关肽受体对大鼠肺缺血再灌注损伤中核因子-κb表达的影响

目的使用降钙素基因相关肽(CGRP)和CGRP受体拮抗剂CGRP8-37研究CGRP受体对大鼠肺缺血再灌注后肺核因子-κb(NF-κb)表达的影响。方法将32只成年健康大鼠随机分为4组:假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、CGRP8-37预处理的缺血再灌注组(CGRP8-37组)、CGRP预处理的缺血再灌注组(CGRP组)。再灌注末抽取动脉血进行血气分析,观察动脉血氧分压(PaO2)及肺泡动脉氧分压差(A-aDO2)的变化,同时取肺组织以RT-PCR法检测NF-κb mRNA的表达,并用光学显微镜观察再灌注后肺组织病理学变化。结果与假手术组比,缺血再灌注降低PaO2,增加A-aDO2,上调NF-κb mRNA的表达(P<0.05),加重肺的组织病理损伤;与IR组比较,CGRP预处理可改善肺的气体交换功能,降低NF-κb mRNA的表达(P<0.05),同时减轻缺血再灌注引起的病理学损伤;CGRP8-37预处理的作用则相反。结论 CGRP受体在肺缺血再灌注损伤中可能通过下调NF-κb而发挥保护作用。     

阿米洛利对肺缺血再灌注损伤大鼠细胞凋亡的影响

目的:探讨阿米洛利对大鼠肺缺血再灌注损伤后肺细胞凋亡的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠54只随机分为假手术组(S组),缺血再灌注组(IR组),阿米洛利组(A组),建立大鼠在体单肺原位LIRI模型,各组在缺血45min、再灌60、120min 3个时点分别处死6只大鼠,留取右肺组织,原位细胞凋亡检测(TUNEL)法检测肺组织中细胞凋亡指数(AI)及免疫组化法检测Caspase-3蛋白的表达,同时电镜下观察肺组织超微结构。结果:IR组肺组织AI、Caspase-3蛋白的表达均升高明显,而A组可以减轻缺血再灌注诱导上述指标的升高。电镜检查显示阿米洛利干预可减轻肺缺血再灌注损伤引起的细胞内超微结构的损伤。结论:阿米洛利可通过减轻肺组织细胞凋亡,继而起到对肺缺血再灌注损伤的保护作用。     

鼠肺缺血预处理后肺组织中热休克蛋白27检测

目的:探讨鼠肺缺血预处理后肺组织中热休克蛋白27(HSP27)的变化.方法:30只SD大鼠,随机分为缺血预处理组、对照组和假手术组,每组10只.缺血预处理组和对照组大鼠常规开胸后建立左上肺缺血再灌注模型,均遭受了缺血再灌注损伤,但缺血预处理组在缺血再灌注前给予缺血预处理干预,假手术组大鼠开胸后不予特*中国博士后科学研究基金资助项目 2004036433;湖南省科技厅科研基金资助项目 05sk3063;湖南省卫生厅科研基金资助项目 B2004024殊处理.以免疫印迹方法比较不同组间肺组织中HSP27的表达差异.采用二维凝胶电泳分离缺血预处理组和对照组样本的总蛋白质,对相对分子质量介于20 000～30 000差异表达的蛋白质点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析.结果:缺血预处理组和对照组中HSP27的表达量均多于假手术组,但缺血预处理组中HSP27的表达量高于对照组.质谱分析显示有9个蛋白质斑点的表达量存在差异,其中3个斑点(点11、17和28)为同一个蛋白.结论:缺血预处理对肺脏缺血再灌注损伤有明显的改善作用,其作用可能与HSP27的高表达有关.     

肺结核化疗中发生肺念珠菌病的临床观察

我院近两年共收治肺结核病人９７６例，住院化疗过程中有２４例并发肺念珠菌病，发生率２．５％。临床特征为：①以热带念珠菌和白色念珠菌为主；②基础病多为重症肺结核或有较严重的合并症；③抗痨药物联用种类越多，发生率越高；④酮康唑及制霉菌素治疗效果较差，本组治愈率仅为４３．８％。     

AQP-1在高原低氧肺损伤大鼠肺组织中的表达变化

目的研究大鼠在高原低氧肺损伤形成过程中水通道蛋白-1(aquaporin-1,AQP-1)的表达变化和意义。方法检测AQP-1在高原低氧肺损伤大鼠肺组织中的表达,并与平原健康大鼠作对照研究。结果高原低氧10 d组、20 d组、30 d组和对照组IOD值分别为0.5564±0.0456、0.5881±0.0243、0.7023±0.0142和0.3194±0.0305,各实验组跟对照组比较均有统计学意义(P<0.05)。各组大鼠肺组织均有AQP-1表达且表达部位相同,位于胸膜脏层周围毛细血管内皮细胞和脏层胸膜的间皮细胞,肺泡Ⅱ型上皮细胞顶膜面也有少量表达。结论随着高原低氧肺损伤的加重,AQP-1表达水平增高。提示AQP-1表达水平可作为判断高原低氧肺损伤程度的指标。     

74例肺癌的病理学观察

分析外科手术切除74例肺癌的病理形态学变化。中心型、周围型和弥漫型分别为47.3％、51.3％和1.4％。鳞状细胞癌40例、小细胞癌14例、腺癌16例、巨细胞癌1例、腺鳞癌3例。对肺癌的大体类型、组织学分型、癌周淋巴细胞反应与预后之间的关系进行了探讨。     

肺炎性假瘤的X线诊断

（１）目的 提高Ｘ线对肺炎性假瘤的诊断水平。（２）方法 对临床与Ｘ线检查资料较全并经手术病理证实的３１例肺炎性假瘤进行回顾性分析。（３）结果 ３１例肺炎性假瘤中Ｘ线诊断正确者仅５例,占１６％;误诊为肺癌１２例,占３９％;良性病变１０例,占３２％;结核瘤３例,占１０％;错构瘤１例,占３％。总误诊２６例,占８４％。（４）结论 肺炎性假瘤Ｘ线表现以肺部“桃尖征”为较特征性改变。对诊断确有困难者,经皮穿刺