肝癌切除术对肝癌患者外周血CD4+CD25+T调节细胞的影响

目的:探讨肝癌切除术对肝癌患者外周血CD4+CD25+T调节细胞(Treg)的影响及临床意义?方法:42例原发性肝癌患者均行肝癌切除术,采用流式细胞术检测患者手术前及术后1个月外周血中Treg占单个核细胞(PBM)的比例,同样的方法检测肝癌组织和正常肝组织中Treg占单个核细胞的比例;采用ELISA检测肝癌组织和正常肝组织中转化生长因子-β(TGF-β),白介素-10(IL-10)的水平?结果:肝癌患者外周血及肝癌组织中Treg比例明显高于对照组 (13.98±3.03)% vs (8.23±2.15)%,(17.74±4.12)% vs (6.98±2.36)%,P均 < 0.05,且Ⅲ~Ⅳ期患者外周血中Treg比例显著高于Ⅰ~Ⅱ期患者?肝癌切除术后1个月外周血Treg较术前明显减少(13.98±3.03)% vs (9.87±2.78)%,P < 0.05?肿瘤组织中TGF-β?IL-10的水平明显高于正常肝组织(P < 0.05)?结论:肝癌患者外周血Treg水平明显升高,且与TNM分期呈正相关?肝癌切除术能明显降低外周血Treg比例,这可能与手术切除肿瘤微环境中高水平Treg?TGF-β?IL-10有关?     

肝细胞癌患者外周血中调节性T细胞、NK细胞及NKT细胞的表达及意义

目的 探讨CD4+CD25+调节性T细胞、CD3-CD57+NK细胞及CD3+CD57+NKT细胞在肝细胞癌患者外周血中的表达及意义.方法 利用流式细胞仪对31例肝细胞癌患者、59例慢性肝炎、肝硬化患者及48例正常人外周血中的CD4+CD25+调节性T细胞、CD3-CD57+NK细胞及CD3+CD57+NKT细胞进行定量分析.结果 肝细胞癌组外周血中CD4+CD25+T细胞较正常对照组及慢性肝炎、肝硬化组明显减少(P<0.05),肝细胞癌组外周血中CD3-CD57+NK细胞及CD3+CD57+NKT细胞较正常对照组及慢性肝炎、肝硬化组明显增加(P<0.05).结论 CD4+CD25+调节性T细胞可能通过对CD3-CD57+NK细胞及CD3+CD57+NKT细胞功能的抑制参与了肝癌细胞的免疫逃逸作用.     

膀胱尿路上皮癌微环境中CD4~+CD25~+Treg细胞的分布及其临床意义研究

目的探讨膀胱尿路上皮癌微环境中CD4~+CD25~+Treg细胞与临床病理之间的关系,探讨其在膀胱尿路上皮癌进展复发及预后中的价值。方法通过免疫组织化学Elivision法检测50例膀胱尿路上皮癌组织及20例正常膀胱组织中CD4~+CD25~+Treg细胞的数量分布情况,分析膀胱尿路上皮癌微环境中CD4~+CD25~+Treg细胞分布情况与各项临床病理之间的关系。结果 CD4~+CD25~+Treg细胞在膀胱尿路上皮癌微环境中均见分布,在正常膀胱组织中未见分布。CD4~+CD25~+Treg细胞在膀胱尿路上皮癌微环境中的分布与病理分级呈显著正相关(r=0.917),差异有统计学意义(P<0.05);与淋巴结转移呈显著正相关(r=0.723),差异有统计学意义(P<0.05);与进展复发呈显著正相关(r=0.670),差异有统计学意义(P<0.05)。CD4~+CD25~+Treg细胞在膀胱尿路上皮癌微环境中的分布与患者的年龄、性别、肿瘤大小及肿瘤个数之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论膀胱尿路上皮癌微环境中CD4~+CD25~+Treg细胞的分布情况与其病理分级、淋巴结转移及进展复发均表现为显著正相关。膀胱尿路上皮癌微环境中CD4~+CD25~+Treg细胞分布数量增加与肿瘤的进展复发及预后具有紧密联系,CD4~+CD25~+Treg细胞可能促进膀胱尿路上皮癌的发生发展。CD4~+CD25~+Treg细胞或许能够成为一个潜在的重要指标用来判断膀胱尿路上皮癌的进展复发及预后情况。     

肝癌患者外周血CD4+/CD25+调节T细胞分析

目的 探讨肝癌患者外周血CD4+/CD25+调节T细胞(Treg)水平的变化特点及其临床意义.方法 采用流式细胞仪检测63例原发性肝癌患者和30例健康人外周血CD4+/CD25+调节T细胞水平,并进行水平比较和分层分析.结果 肝癌组外周血CD4+/CD25+调节T细胞水平(14.06±2.34)%,明显高于健康对照组(6.05±1.57)%(P＜0.05);外周血CD4+/CD25+调节T细胞水平与肝癌病理类型无相关性(P＞0.05);与临床分期密切相关,Ⅰ+Ⅱ期亚组(8.31±1.43)%与健康对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),而与Ⅲ期亚组(13.68±2.31)%、Ⅳ期亚组(18.50±2.98)%比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 肝癌患者外周血CD4+/CD25+调节T细胞水平明显升高,且与肿瘤的发生发展密切相关,可作为评估肝癌患者预后的一项指标.     

寻常型银屑病患者外周血CD4+CD25+Treg细胞水平的表达

目的 研究寻常型银屑病患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg细胞)水平的表达,探讨CD4+CD25+Treg细胞在寻常型银屑病发病机制中的作用.方法 对寻常型银屑病患者分期并进行Pasi评分,采用流式细胞术检测银屑病患者外周血CD4+CD25+Treg细胞表达.结果 银屑病患者外周血CD4+CD25+Treg细胞占T细胞淋巴细胞的比例表达,寻常型明显低于正常对照组(P<0.05);其中进行期明显低于静止期和正常对照组(P<0.05);CD4+CD25+Treg细胞占T淋巴细胞的比例与Pasi及病程评分无相关关系(P>0.05).结论 寻常型银屑病的发病与外周血CD4+CD25+Treg细胞数目的减少有关,CD4+CD25+Treg细胞占T淋巴细胞的比例与Pasi评分及病程无相关关系.     

外周血T细胞亚群及Th17细胞/Treg细胞比值在乙肝病毒感染者诊断中的价值

目的:探讨外周血T细胞亚群及Th17细胞/Treg细胞比值在乙肝病毒感染者诊断中的价值。方法:选取193例乙肝病毒感染者,包括无症状HBV携带者47例,急性乙肝42例,慢性乙肝63例,原发性肝癌41例,同期,选取健康者45例作为正常对照组。利用流式细胞仪对外周血T淋巴细胞亚群、Th17细胞和Treg细胞进行检测。结果:与正常对照组相比,急性乙肝、慢性乙肝和原发性肝癌外周血CD3~+、CD4~+和CD4~+/CD8~+均降低,而CD8~+升高(P<0.05);与急性乙肝相比,慢性乙肝和原发性肝癌外周血CD3~+、CD4~+和CD4~+/CD8~+均降低,而CD8~+升高(P<0.05);与慢性乙肝相比,原发性肝癌外周血CD3~+、CD4~+和CD4~+/CD8~+均降低,而CD8~+升高(P<0.05);与正常对照组相比,慢性乙肝和原发性肝癌外周血Treg细胞、Th17细胞和Th17/Treg比值均升高(P<0.05);与慢性乙肝相比,原发性肝癌外周血Treg细胞、Th17细胞和Th17/Treg比值均升高(P<0.05);Pearson相关分析显示,不同乙肝感染组患者外周血Treg和Th17细胞呈正相关(r=0.410,P<0.05),不同组患者外周血CD4~+/CD8~+比值和Th17/Treg比值呈负相关(r=-0.357,P<0.05)。结论:随着乙肝患者病情进展,外周血CD3~+、CD4~+和CD4~+/CD8~+均降低,而CD8~+升高,且Th17/Treg比值均升高,外周血T细胞亚群及Th17/Treg比值监测可为评估乙肝患者病情及预后提供参考。     

肝癌患者外周血CD4+CD25highT淋巴细胞亚群变化及临床意义

目的 探讨原发性肝细胞癌(肝癌)患者外周血调节性T细胞亚群变化及其临床意义.方法 应用流式细胞仪检测34例肝癌患者及30例同龄健康人群外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+D25highT细胞占CD4+T细胞的比例;MTT法用于检测部分病人外周血PBMC的增殖情况.结果 肝癌组CD4+CD25high/CD4+的比率较健康对照组显著增加(P<0.01);肝癌Ⅲ期患者CD4+CD25high/CD4+比例高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.01);肝癌组PBMC增殖水平较健康对照组明显下降(P<0.01).结论 肝癌患者CD4+CD25high调节性T细胞比例显著升高,外周血PBMC增殖水平较健康人群明显下降,可能与肝癌导致机体免疫功能异常有关.     

贲门癌组织中CD3+T细胞的数量与临床病理指标间的关系

目的 探讨贲门癌中CD3+T细胞数量与贲门癌临床病理指标间的关系.方法 用免疫组化Elivision法对42例贲门癌、18例癌旁组织以及12例正常贲门黏膜组织中的CD3+T细胞进行染色,并分析其与临床病理指标间的关系.结果 (1)标本中CD3+T细胞平均数量从高到低依次为癌旁组织,癌组织和正常黏膜(P<0.05).(2)贲门癌中CD3+T细胞平均数量与患者的年龄、性别、肿瘤的组织类型及分化程度无相关性(P>0.05).(3)贲门癌中CD3+T细胞平均数量与肿瘤浸润深度及淋巴结转移情况呈明显负相关(P<0.05).结论 CD3+T细胞的数量与肿瘤浸润深度和淋巴结转移情况呈负相关,CD3+T细胞可能在延缓贲门癌的病情进展方面起到一定作用.     

CD4~+T、CD8~+T细胞和PD-L1在结直肠癌中的表达及意义

目的 探讨结直肠癌中CD4+T、CD8+T细胞和PD-L1的表达情况,并分析其相关性及临床病理学意义。方法 收集2019年1—12月包头市肿瘤医院手术切除的结直肠癌肿物及癌旁5 cm、10 cm石蜡组织标本各41例,免疫组化法检测CD4+T、CD8+T细胞和PD-L1的表达水平,Sanger测序法检测微卫星不稳定性。结果 结直肠癌癌组织CD4+T细胞表达阳性的细胞数为108.8个,高于癌旁5 cm的73.8个及癌旁10 cm的38.0个,差异有统计学意义（P＜0.05）;癌组织CD8+T细胞表达阳性的细胞数为63.8个,高于癌旁5 cm的33.8个及癌旁10 cm的22.4个,差异有统计学意义（P＜0.05）;癌组织PD-L1表达阳性的细胞数为18.0个,高于癌旁5 cm的3.2个及癌旁10 cm的1.2个,差异有统计学意义（P＜0.05）。神经侵犯、脉管癌栓与结直肠癌癌组织CD4+T细胞表达相关,MSI、淋巴结转移、脉管癌栓与CD8+T细胞表达有关,MSI、淋巴结转移、神经侵犯、脉管癌栓与PD-L1的表达均无关。PD-L1和CD8+T细胞的表达呈低度正相关（r=0.350,P＜0.05）,PD-L1与CD4+T细胞表达无相关性（r=0.138,P＞0.05）。结论 CD4+T、CD8+T细胞和PD-L1在癌组织高表达,CD8+T与CD4+T细胞两者的高表达可作为预后良好的辅助判断指标,PD-L1与CD8+T细胞表达呈正相关。     

不同分期非小细胞肺癌与Treg细胞、细胞因子相关研究

目的 探讨不同临床分期非小细胞肺癌外周血中CD4+CDhi25 CDlow127 Treg细胞、白介素(IL)-2、IL-10及干扰素(IFN)-γ的表达水平,并评价其之间的相关性.方法 采用流式细胞术检测55例非小细胞肺癌外周血CD4+CDhi25 CDlow127 Treg细胞占CD4+T细胞的比例,采用酶联免疫吸附反应检测IL-2、IL-10及IFN-γ值.比较不同临床分期肺癌CD4+CDhi25 CDlow127 Treg细胞、IL-2、IL-10及IFN-γ的表达水平,并进行相关性分析.结果 随着肺癌临床分期的增加,外周血中CD4+CDhi25 CDlow127 Treg细胞占CD4+T细胞的比例明显上升(P<0.05),IL-10值也明显升高(P<0.05);而IL-2、IFN-γ值则随肺癌临床分期的增加而明显下降(P<0.05).CD4+CDhi25 CDlow127Treg细胞与IL-10呈正相关性(P<0.05),IL-2与IFN-γ呈正相关性(P<0.05).CD4+CDhi25CDlow127Treg细胞、IL-10均与IL-2、IFN-γ 呈负相关性(P<0.05).结论 CD4+CDhi25 CDlow127 Treg细胞、IL-10的升高和IL-2、IFN-γ的下降可能是晚期肺癌患者抗肿瘤免疫低下、受抑制的原因之一,对其监测可作为评估晚期肺癌患者抗肿瘤免疫的参考指标.     

肝癌相关成纤维细胞的培养和鉴定及其对肝癌细胞增殖的影响

目的：分离、培养及鉴定原代肝癌相关成纤维细胞(hCAF),阐明其在肝癌发生发展中的作用。方法：采用酶消化法分离、纯化人hCAF, Western blotting法鉴定其相关蛋白标记物的表达,流式细胞术检测肝癌细胞Hep3B经hCAF上清处理后的增殖速度及细胞周期的变化,建立裸鼠移植瘤模型,观察hCAF对肝癌细胞生长的影响。结果：在肝癌组织标本中成功分离出hCAF,Western blotting结果显示hCAF特异性地高表达α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）。CCK8细胞增殖检测试剂盒检测证实,经hCAF上清处理后的Hep3B细胞增殖量为完全培养基处理48 h细胞增殖量的126.0%、125.0%及120.5%,细胞增殖量差异有统计学意义（P<0.05）。流式细胞术结果显示,经hCAF上清处理后的Hep3B细胞增殖速度及细胞周期中处于S期的细胞数目均高于完全培养基处理的Hep3B细胞（P<0.05）。hCAF与Hep3B共同接种至裸鼠皮下的成瘤体积［（1.34±0.52） cm3］明显大于单独接种Hep3B组［(0.51±0.09)　cm3］,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：hCAF可以明显促进肝癌细胞系Hep3B的生长,其可能在肝癌生长过程中发挥重要作用。     

MiR-105抑制肝癌细胞增殖能力的实验研究

目的 探讨miR-105对人肝癌细胞增殖的影响及可能机制.方法 改变QGY-7703及HepG2两种细胞的miR-105表达,细胞克隆形成实验和软琼脂增殖试验检测细胞增殖能力的改变;流式细胞仪检测细胞周期改变.结果 细胞克隆形成和软琼脂增殖实验显示,过表达miR-105可抑制QGY-7703及HepG2细胞增殖,反之抑制miR-105表达则促进细胞增殖;细胞流式检测显示miR-105过表达能促进两种癌细胞G0/G1期阻滞.结论 miR-105抑制肝癌细胞增殖,其机制与引起细胞周期阻滞有关.     

调节性T 细胞与肝癌的研究进展

调节性T细胞(regulatory T lymphocytes,Treg)是一类具有独特免疫调节功能的T细胞亚群,可通过多种方式 抑制肿瘤免疫,在肿瘤的发生、发展过程中发挥着极为重要的作用,越来越多的证据表明Treg通过多种机制参与了肝 癌特别是肝细胞肝癌的形成和发展,对Treg参与肝癌进展机制的研究从免疫学角度为肝癌治疗提供了新的思路。     

紫草素对肝癌细胞增殖的影响

目的研究紫草素对肝癌细胞株HepG2增殖和表达增殖诱导配体（A proliferation-inducing ligand，APRIL）水平的影响，并与化疗药顺铂进行对比。方法MTT法检测紫草素对HepG2细胞增殖的抑制作用，采用免疫组化法和实时荧光定量PCR法证实肝癌细胞株HepG2上APRIL的表达，实时荧光定量PCR法检测加入不同终浓度的紫草素和顺铂后24h、48h和72h HepG2细胞表达APRIL mRNA的水平。结果紫草素对HepG2细胞有明显的增殖抑制作用，呈时间和剂量依赖性，HepG2细胞上有APRIL的表达，加入不同浓度的紫草素和顺铂后，HepG2细胞A-PRIL mRNA的水平均逐渐升高，至72h表达最高并与空白对照相比均有显著差异（P〈0．05）。结论紫草素可抑制肝癌细胞的增殖，但与顺铂一样，残存癌细胞有因APRIL表达升高而增殖能力增强的潜在趋势。     

醛缩酶A基因促进肝癌细胞增殖

目的：初步探索醛缩酶A基因敲除与过表达对肿瘤细胞生长的影响,确定无氧代谢过程中醛缩酶与肿瘤生长代谢之间的关系。方法通过表达载体质粒构建与慢病毒感染构建稳定表达的醛缩酶A过表达与基因敲除细胞,在基因和蛋白水平验证重组细胞,观察细胞增殖速度改变。结果实时定量PCR结果显示,过表达细胞系中目的基因的表达约为正常细胞的2倍;根据醛缩酶A RNA序列设计5个干扰靶点,其中醛缩酶A4对于目的基因的干扰效果最为显著,重组后的细胞醛缩酶A mRNA表达水平为正常细胞的1/50。与正常对照组相比,醛缩酶A过表达细胞在48 h增殖率增加40%,增殖率与对照组相比有显著性差异（P＜0.05）;醛缩酶A RNA干扰表达细胞在24 h增殖率降低86%,与对照组相比有显著性差异（P＜0.05）。结论醛缩酶A的表达差异对肝癌肿瘤细胞生长有明显影响。     

TM6SF2在肝癌中的差异表达及其对肝癌细胞生物学行为的影响

目的 探究TM6SF2在肝癌中的差异表达及其对肝癌细胞生物学行为的影响.方法 免疫组化检测15例肝癌/癌旁组织TM6SF2表达量,Western blot检测人肝癌细胞系Hep G2及正常肝细胞L-02 TM6SF2表达量.基于TCGA数据库分析TM6SF2在肝癌中表达及生存曲线.基于PCD-NA 3.1质粒构建TM6...     

Bevacizumab抑制人肝癌细胞及其移植瘤的生长

目的探讨Bevacizumab对肝癌细胞株HepG2及荷肝癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法不同浓度Bevacizumab处理HepG2细胞48 h后,MTT法检测Bevacizumab对细胞增殖的抑制作用,设不加药物的HepG2细胞为对照组。建立荷肝癌细胞株HepG2裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为Bevacizumab组和空白对照组,观察用药前后肿瘤大小,计算抑瘤率;应用免疫组化计算肿瘤微血管密度。结果 Bevacizumab可抑制HepG2细胞增殖;与空白对照组比较,Bevacizumab可延缓移植瘤的生长,MVD值明显降低(P=0.000)。结论 Bevacizumab可直接抑制肝癌细胞株HepG2的增殖;Bevacizumab主要通过抑制新生血管的形成而抑制移植瘤的生长。     

Bevacizumab inhibit the growth of hepatocellular carcinoma cells and hepatoma carcinoma xenografts in nude mice

目的 探讨Bevacizumab对肝癌细胞株HepG2及荷肝癌裸鼠移植瘤生长的影响.方法 不同浓度Bevacizumab处理HepG2细胞48 h后,MTT法检测Bevacizumab对细胞增殖的抑制作用,设不加药物的HepG2细胞为对照组.建立荷肝癌细胞株HepG2裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为Bevacizumab组和空白对照组,观察用药前后肿瘤大小,计算抑瘤率;应用免疫组化计算肿瘤微血管密度.结果 Bevacizumab可抑制HepG2细胞增殖;与空白对照组比较,Bevacizumab可延缓移植瘤的生长,MVD值明显降低(P=0.000).结论 Bevacizumab可直接抑制肝癌细胞株HepG2的增殖;Bevacizumab主要通过抑制新生血管的形成而抑制移植瘤的生长.