人喉鳞癌组织中HPV16E7、CyclinD1和Rb蛋白的表达

目的:探讨喉鳞癌组织中人乳头瘤病毒(HPV)16型E7、CyclinD1和Rb蛋白表达的变化.方法:采用免疫组织化学SABC法检测80例喉鳞癌、30例声带息肉组织中HPV16E7、CyclinD1和Rb蛋白的表达状况.结果:声带息肉组织中HPV16E7未见表达,喉鳞癌组织中的表达率为34/80(P＜0.000 1);声带息肉与喉鳞癌组织中Cy-clinD1的表达率分别为2/30和42/80(P＜0.000 1),Rb的表达率分别为25/30和42/80(P＜0.05).HPV16E7与CyclinD1的表达与临床分期、淋巴结转移情况和5 a生存率有关(P＜0.05或0.01).喉鳞癌组织中HPV16E7与Rb的表达相关(P＜0.01).结论:HPV16感染和Rb、CyclinD1的异常表达与喉鳞癌发生、发展有关.HPV16E7与CyclinD1可作为判定喉鳞癌预后的指标.     

胃癌组织中P16和Rb蛋白的表达

目的 :探讨P1 6和Rb蛋白在胃癌发生发展中的作用。方法 :采用免疫组化方法检测 4 0例胃癌标本和1 8例癌旁正常胃黏膜中的P1 6和Rb蛋白的表达。结果 :P1 6和Rb蛋白在胃癌组织中的表达阳性率 (35 .5 % ,4 0 % )明显低于癌旁正常胃黏膜组织 (88.6 % ,85 .7% ) (P <0 .0 5 ) ;P1 6和Rb蛋白在胃癌中的表达阳性率呈明显负相关(P <0 .0 5 ,rs=- 0 .5 1 2 ) ;P1 6表达与胃癌的淋巴结转移 ,浸润深度 ,TNM分期有关 (P <0 .0 5 ) ;Rb表达与胃癌的淋巴结转移有关 (P <0 .0 5 ) ,与浸润深度 ,TNM分期无关 (P >0 .0 5 )。结论 :P1 6和Rb蛋白在胃癌中相互抑制表达 ,在胃癌发生发展过程中起一定的作用 ,对胃癌的预后判断有一定的帮助     

宫颈癌组织中P16和HPV16/18 E7的表达及意义

①目的研究宫颈癌组织中抑癌基因p16 mRNA和蛋白质的表达,以及与HPV16/18 E7表达的关系.②方法采用聚合酶链反应(PCR)技术检测45例宫颈浸润癌组织、12例宫颈原位癌组织和20例正常宫颈组织中HPV16/18的感染情况;采用RT-PCR技术检测上述标本中HPV16/18阳性者E7 mRNA的表达水平及所有标本中p16 mRNA表达水平;采用免疫组化技术进一步检测HPV16/18 E7、P16蛋白的表达情况.③结果宫颈原位癌和浸润癌HPV16/18的感染率、HPV16/18 E7 mRNA和蛋白表达阳性率明显高于正常宫颈组织,差异有显著性(χ2=5.12～15.78,P<0.05、0.01),原位癌和浸润癌组之间比较差异无显著性(χ2=0.119、0.000,P>0.05);原位癌和浸润癌p16 mRNA的相对表达量明显高于正常宫颈,差异有显著性(F=5.412,q=4.125、5.519,P<0.05);HPV16/18 E7阳性组p16 mRNA的表达阳性率明显高于阴性组,差异有显著性(t=4.127,P<0.01);P16蛋白在宫颈原位癌和浸润癌组织中呈现过表达,在正常组织中为阴性表达或弱表达;p16 mRNA的相对表达量与HPV16/18 E7 mRNA的相对表达量呈显著正相关(r=0.813,P<0.05);P16蛋白的过表达与HPV16/18 E7蛋白表达有相关关系(χ2=8.959,P<0.01);HPV16/18 E7 mRNA和蛋白及p16 mRNA和蛋白的表达与肿瘤的组织学分级、淋巴结转移、肿瘤的大小和病人的年龄无关(P均>0.05).④结论抑癌基因p16的过表达发生在宫颈癌的早期和癌前病变阶段,可用于临床筛查和早期诊断宫颈癌.     

HPV16、HPV16 E7蛋白与Rb蛋白在喉癌发生中的作用

目的观察HPV16及其早期区基因E7表达蛋白与Rb蛋白在喉癌发生中的相关性,为探索喉癌的病因学提供依据。方法用免疫组织化学方法检测82例喉鳞癌、39例非癌组织标本中HPV16、HPV16 E7以及Rb的蛋白表达。结果HPV16 E7和Rb蛋白表达的阳性率在非癌及癌组织中有非常显著的差异（P〈0.01）,HPV16的阳性率在非癌及癌组织中有显著性差异（P〈0.05）。喉癌组织中,Rb蛋白在HPV16和HPV16 E7阳性及阴性组中的阳性率显著不同（P〈0.01）,而在非癌组织中则无此现象（P〉0.05）。结论喉癌组织中HPV16 E7的高表达导致的pRb功能失活是引起喉癌的主要原因之一。     

贲门癌前病变组织P16和Rb蛋白的表达

为了解贲门癌变的分子生物学发生基础，采用免疫组织化学方法，观察取自食管癌高发区河南林州市的３７例贲门癌前病变组织Ｐ１６和Ｒｂ肿瘤抑制基因蛋白的表达，并对二者的免疫组化结果进行比较。结果：贲门上皮各级病变组织均出现不同程度的细胞核Ｐ１６和Ｒｂ蛋白免疫阳性反应。且随着贲门上皮病变的加重，Ｐ１６蛋白免疫阳性率呈下降趋势，而Ｒｂ蛋白免疫阳性率呈升高趋势，两者具有显著的相关性（Ｐ〈０．０５）。提示：Ｐ１６和     

贲门癌前病变组织 P16 和 Rb 蛋白的表达

为了解贲门癌变的分子生物学发生基础，采用免疫组织化学方法，观察取自食管癌高发区河南林州市的３７例贲门癌前病变组织Ｐ１６和Ｒｂ肿瘤抑制基因蛋白的表达，并对二者的免疫组化结果进行比较。结果：贲门上皮各级病变组织均出现不同程度的细胞核Ｐ１６和Ｒｂ蛋白免疫阳性反应。且随着贲门上皮病变的加重，Ｐ１６蛋白免疫阳性率呈下降趋势，而Ｒｂ蛋白免疫阳性率呈升高趋势，两者具有显著的负相关性（Ｐ＜０．０５）。提示：Ｐ１６和Ｒｂ蛋白的变化可能是贲门癌变早期的重要分子学改变。     

食管癌前病变组织 Rb 和 P16 蛋白的表达

采用免疫组织化学方法，测定人食管正常上皮和癌前病变组织中肿瘤抑制基因Ｒｂ和Ｐ１６蛋白表达。结果：在２５例食管粘膜活检组织中，共发现８例食管正常上皮、１３例基底细胞增生和４例间变。在正常组织未见Ｒｂ和Ｐ１６免疫阳性反应，而基底细胞增生中Ｒｂ和Ｐ１６的免疫阳性反应率分别为１６％和９％，间变均为３３％。提示：食管癌变的早期阶段已发生Ｒｂ和Ｐ１６蛋白表达变化。     

食管癌前病变组织Rb和P16蛋白的表达

采用免疫组织化学方法，测定人食管正常上皮和癌前病变组织中肿瘤抑制基因Ｒｂ和Ｐ１６蛋白表达。结果：在２５例食管粘膜活检组织中，共发现８例食管正常上皮、１３例基底细胞增生和４例间变。在正常组织未见Ｒｂ和Ｐ１６免疫阳性反应，而基底细胞增生中Ｒｂ和Ｐ１６的免疫阳性反应率分别为１６％和９％，间变均为３３％。提示：食管癌变的早期阶段已发生Ｒｂ和Ｐ１６蛋白表达变化。     

喉鳞癌组织中HPV16、18E6和HPV16E7蛋白表达及其相关性研究

目的 :探讨人乳头瘤病毒 (HPV) 16、18型E6和E7蛋白与喉鳞癌发生的关系以及两种蛋白在致病过程中的相互关系。方法 :采用免疫组化SABC方法对 5 8例喉鳞癌 ,30例癌旁组织和 30例声带息肉进行检测。结果 :在喉鳞癌和癌旁组织中的E6蛋白的表达率分别为 31 0 % (18/5 8)和 2 0 0 % (6 /30 ) ;E7蛋白的表达率分别为 32 7%(19/5 8)和 2 0 3 % (7/30 )。声带息肉组中未见E6和E7蛋白阳性表达。E6和E7蛋白表达率在喉癌组与息肉组之间 ,有颈淋巴结转移组与无颈淋巴结转移组之间均有显著性差异 (P <0 .0 1)。E6和E7蛋白在喉鳞癌中的表达结果具有明显的相关性。结论 :HPV16、18E6和HPV16E7蛋白与喉鳞癌发生、发展关系密切 ,E6与E7蛋白在致癌过程中有协同作用     

HPV16相关宫颈癌细胞系和组织中E7和DRR1蛋白的表达

目的:研究人乳头瘤病毒16(HPV16)相关宫颈癌细胞系和组织中E7和肾细胞癌下调基因1(DRR1)表达的关系。方法:以HPV16 E7阳性的宫颈癌Ca Ski和Si Ha细胞、HPV16 E7阴性的宫颈癌C-33A细胞及184例宫颈鳞状细胞癌组织为研究对象,采用Western blot方法和免疫组化染色方法检测E7和DRR1蛋白的表达,分析E7与DRR1蛋白表达的关系。结果:Western blot结果显示,C-33A细胞中HPV16 E7无表达,DRR1蛋白的表达显著高于Ca Ski细胞和Si Ha细胞(F=454.982,P<0.001);Ca Ski细胞和Si Ha细胞表达HPV16 E7,二者DRR1蛋白的表达差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化染色结果显示,HPV16 E7阳性宫颈鳞状细胞癌组织141例,其中DRR1蛋白阳性34例;HPV16 E7阴性宫颈鳞状细胞癌组织43例,其中DRR1蛋白阳性32例;HPV16 E7阳性组织中DRR1蛋白的表达显著低于HPV16 E7阴性组织(χ2=36.250,P<0.001)。结论:DRR1可能是HPV16 E7作用的潜在靶基因。     

食管癌中P16蛋白和Rb蛋白的表达及其意义

目的：探讨 Ｐ１６ 和 Ｒｂ 两种基因所表达的蛋白在食管癌形成中的作用。方法：采用免疫组化法对５０ 例粤东地区食管癌进行检测。结果：在５０ 例食管鳞癌标本中，１０ 例表现 Ｐ１６ 蛋白阳性，３８ 例表现为 Ｒｂ 蛋白阳性。在３８ 例 Ｒｂ 蛋白阳性病例中，有３１ 例 Ｐ１６ 蛋白阴性，另有５ 例呈现 Ｐ１６ 蛋白低表达。１７ 例Ⅰ级食管鳞癌均表达 Ｒｂ 蛋白，２８ 例Ⅱ级食管鳞癌中有１９例 Ｒｂ 蛋白表达阳性，５ 例Ⅲ级食管鳞癌中有２ 例表达 Ｒｂ 蛋白。结论： Ｐ１６ 蛋白在食管癌中的异常是一经常发生的事件， Ｐ１６蛋白的表达与 Ｒｂ 蛋白的表达之间存在明显的负相关， Ｐ１６ 蛋白的异常在不同地区之间可能存在差异； Ｒｂ 蛋白的表达与食管癌的分化程度相关，即分化越好， Ｒｂ 蛋白表达率越高。细胞周期调控的 Ｒｂ 路径异常，可能参与食管癌的形成。     

食管癌中P16蛋白和Rb蛋白的表达及其意义

目的；探讨Ｐ１６和Ｒｂ两种基因所表达的蛋白在食管癌形成中的作用。方法：采用免疫组化法对５０例粤东地区食管癌进行检测。结果：在５０例食管鳞癌标本中，１０例表现Ｐ１６蛋白阳性，３８例表现为Ｒｂ蛋白阳性。在３８例Ｒｂ蛋白阳性病例中，有３１例Ｐ１６蛋白阴性，另有５例呈现Ｐ１６蛋白低表达。１７例Ｉ级食管鳞癌均表达Ｒｂ蛋白，２８例Ⅱ级食管鳞癌中有１９例Ｒｂ蛋白表达阳性，５例Ⅲ级食管鳞癌中有２例表达Ｒｂ蛋白，结     

Rb和P16蛋白在食管癌组织中的表达及意义

目的 :探讨Rb和P16基因异常在食管癌发生中的作用。方法 :应用免疫组织化学LSAB法检测 113例食管癌 ,6 0例癌旁组织中Rb蛋白和P16蛋白的表达。结果 :食管鳞状细胞癌Rb和P16蛋白表达阳性率分别为 43.3%(4 9/ 113)和 5 3.0 % (6 0 / 113) ,明显低于非瘤组织 6 3.3% (38/ 6 0 )和 73.3% (4 4/ 6 0 ) ,P <0 .0 5 ;Rb、P16蛋白表达随着肿瘤分级增高而降低。结论 :肿瘤抑制基因Rb、P16缺失突变 ,丧失活性与食管鳞状细胞癌发生肿瘤分级有关     

HPV16E7蛋白和Rb 蛋白在人喉鳞状细胞癌中的表达及相关性研究

目的:探讨HPV16E7蛋白和Rb蛋白在人喉鳞状细胞癌(鳞癌)组织中的表达及其在喉鳞癌发生和发展过程中的相互关系.方法:用免疫组织化学方法检测78例喉鳞癌、26例喉癌前病变、24例声带息肉和10例癌周正常喉组织标本中HPV16E7蛋白和Rb蛋白的表达.结果:癌周正常喉组织、声带息肉、喉癌前病变和喉鳞癌组织中HPV16E7蛋白的阳性表达率分别为0(0/10)、4.1%(1/24)、27.0%(7/26)和43.6%(34/78),Rb蛋白的阳性表达率分别为80.0%(8/10)、79.2%(19/24)、61.5%(16/26)和50.0%(39/78);HPV16E7蛋白和Rb蛋白的阳性表达率在癌周正常喉组织、声带息肉与喉鳞癌组之间均有显著性差异(P＜0.05),HPV16E7蛋白表达呈明显升高趋势,而Rb蛋白表达呈明显下降趋势.HPV16E7蛋白的阳性表达率,喉鳞癌病理Ⅲ级明显高于Ⅰ级或Ⅱ级(P＜0.05),临床Ⅲ～Ⅳ期明显高于Ⅰ～Ⅱ期(P＜0.05);而Rb蛋白的表达正相反,肿瘤病理Ⅲ级明显低于Ⅰ级或Ⅱ级(P＜0.05),临床Ⅲ～Ⅳ期明显低于Ⅰ～Ⅱ期(P＜0.05).结论:HPV16E7蛋白的表达升高和Rb蛋白的表达下降可能会导致人喉鳞癌的发生和发展;检测HPV16E7蛋白和Rb蛋白的表达可用于喉鳞癌恶性程度的评定.     

宫颈癌细胞SiHa中HPV16 E6 E7蛋白的表达LSCM研究

0　引言　应用免疫荧光组织化学方法结合激光扫描共聚焦显微镜 ( LSCM) ,观察了人乳头瘤病毒 HPV1 6型 ( Human pa-pillomavirus type1 6) E6,E7基因区表达的 E6,E7蛋白产物在宫颈癌细胞系 Si Ha中的表达情况 .1　材料和方法1 .1　细胞培养　含 HPV基因组织的宫颈癌细胞系 Si Ha由西安医科大学分子生物研究中心李旭教授提供 ,细胞于含 1 0 0m L· L- 1 胎牛血清 (美国 Gibco)的 RPMI-1 640培养基 (美国Gibco)常规培养 .将细胞悬液滴于盖玻片上培养 ,制成单层细胞爬片 .1 .2　免疫荧光染色　正常羊血清封闭 30 min,分别加入鼠抗H…     

HPV16 E7蛋白编码基因原核表达与鉴定

目的研究HPV16E7蛋白的生物学特性及其细胞转化机制,对HPV16E7蛋白原核表达质粒进行构建、表达和鉴定。方法以临床确诊的HPV16感染患者子宫颈细胞DNA为模板,采用PCR方法扩增HPV16E7基因,经BamH Ⅰ和Hind Ⅱ双酶切后插入相同酶切pET32a（＋）载体,转化JM109感受态细胞,并进行阳性克隆筛选。经IPTG对重组质粒进行蛋白诱导表达,SDS—PAGE和Western blot检测目标蛋白表达情况。结果成功构建了原核表达质粒pET32／E7,HPV16E7-TRX融合蛋白在BL21（DE3）菌株中高效表达,在1mmol／L IPTG、30℃诱导条件下融合蛋白表达量占菌体总蛋白的30％左右。结论pET32／E7原核表达质粒的构建、HPV16E7融合蛋白的表达为进一步深入研究HPV16E7蛋白的生物学特性及其致细胞转化的作用机制奠定了基础。