环磷酰胺对实验性自身免疫性葡萄膜炎的疗效观察

目的：探讨环磷酰胺对实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）治疗效果。方法选取SPF级雄性动物Lewis大鼠54只。随机将大鼠分为实验组48只和正常对照组6只。抽取浓度为lmg/ml的牛S视网膜抗原溶液与弗氏完全佐剂等体积混合制备EAU诱导剂;实验组大鼠取30μg诱导液,在大鼠双后足垫皮内注射;正常对照组注射等量的生理盐水。造模第3天后每天裂隙灯显微镜下观察大鼠眼内炎症反应情况,判断造模是否成功。随机将实验组大鼠分为环磷酰胺组24只和空白对照组24只,环磷酰胺组大鼠于造模成功后每天在大鼠尾静脉注射1 ml环磷酰胺,连续3 d;空白对照组每天在大鼠尾静脉注射等量的生理盐水,参照Caspi临床分级法进行评分。结果环磷酰胺组造模后第6、9、12和18天大鼠眼睛炎症反应Caspi临床分级评分均分别显著低于空白对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;而正常对照组均为0级。结论环磷酰胺能减轻免疫性葡萄膜炎的严重程度并抑制其进展,对葡萄膜炎有明确治疗效果。     

慢性及急性实验性自身免疫性葡萄膜炎中眼浸润细胞比较

目的:探讨实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis, EAU)眼浸润细胞在C57BL/6及B10.RⅢ品系小鼠中的差异。方法:通过完全弗氏佐剂结合光感受器间维生素A类结合蛋白在C57BL/6和B10.RⅢ品系小鼠中建立慢性及急性EAU疾病模型,通过视网膜成像技术及视觉电生理技术分析比较两种EAU小鼠临床评分,通过流式细胞技术分析疾病高峰期炎性眼组织中浸润细胞类型及比例。结果:急性EAU比慢性EAU更早发病、更早到达疾病高峰且临床评分高~([1])。在炎性眼组织中,急性EAU小鼠的CD4~+ T淋巴细胞和CD11b~+细胞比例显著高于慢性EAU小鼠,而CD8~+ T淋巴细胞、自然杀伤性细胞及自然杀伤性T细胞在两种EAU小鼠模型中无显著性差异,其中眼浸润CD11b~+细胞中,急性EAU小鼠巨噬细胞及骨髓来源抑制性细胞比例显著高于慢性EAU小鼠。结论:急性EAU和慢性EAU的疾病差异与眼浸润CD4~+ T淋巴细胞、巨噬细胞及骨髓来源抑制性细胞相关。     

FTY720治疗实验性自身免疫性神经炎的研究

目的 探讨FTY720对实验性自身免疫性神经炎(experimental autoimmune neuritis,EAN)的作用.方法34只Lewis大鼠随机分为FTY720组(n=12)、EAN组(n=12)和完全弗氏佐剂(FCA)组(n=10),FTY720组于注射P257-81抗原乳剂后0天开始每日腹腔注射FTY...     

复发性实验性自身免疫性葡萄膜炎小鼠模型的诱导及其特点

目的 诱导复发性实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveoretinitis,EAU)小鼠模型,评价其发生过程及特点.方法 完全弗氏佐剂(CFA)乳化的光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP) 161-180肽段免疫B10.RⅢ小鼠作为诱导组(35只),用CFA-PBS免疫小鼠作为对照组(6只).小鼠免疫后7、14、21、28、35 d裂隙灯显微镜和光学显微镜观察及评价眼部炎症发生、眼部表现和病理学变化;待炎症完全消失时,再次免疫小鼠,评价小鼠眼部炎症复发.结果 诱导组首次免疫后7d出现初发炎症,14 d炎症达高峰,随后炎症消退,至35 d完全消失.第35天进行再次免疫,36 d出现复发炎症,42 d达炎症高峰,随后炎症消退,但至观察期第96天部分鼠(1/5)仍维持炎症.眼部表现为睫状充血、前房渗出、瞳孔受损.病理学表现为视网膜和脉络膜炎性细胞浸润,血管炎、肉芽肿性炎,光感受器细胞层破坏,视网膜下渗出.对照组未见明显炎症.结论 建立的EAU呈现慢性复发性病程,其眼部表现和病理学特征与人类葡萄膜炎相似,可作为葡萄膜炎研究的新型动物模型.     

血脂康对实验性自身免疫性神经炎的治疗潜能

目的探讨传统中药血脂康对实验性自身免疫性神经炎(EAN)大鼠的治疗潜能及免疫调节机制。方法应用周围髓鞘蛋白(P0)抗原180~199肽段免疫雌性Lewis大鼠建立EAN模型,将15只EAN大鼠随机、平均分为大剂量治疗组[1 000 mg/(kg·d)]、小剂量治疗组[200 mg/(kg·d)]和对照组(每组n=5),采用双盲法每日观察大鼠临床症状并评分;流式细胞技术检测淋巴结单个核细胞悬液细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-10和IL-17的分泌情况以及调节性T细胞在淋巴结单个核细胞及CD4+T细胞中所占百分比。结果与对照组相比,血脂康大、小剂量治疗组的临床评分均降低,TNF-α的分泌均减少(P均<0.01);IL-10的分泌量均明显受到抑制(P<0.001和P<0.01);大剂量治疗组IL-17的分泌较对照组减少(P<0.01)。与对照组相比,小剂量治疗组CD4+CD25+T细胞占淋巴结单个核细胞的百分比、大剂量治疗组CD4+CD25+T细胞和CD4+Foxp3+T细胞占淋巴结单个核细胞及CD4+T细胞的比例均明显降低(P均<0.05)。与对照组比较,大剂量治疗组CD4+CD25+Foxp3+Treg占淋巴结单个核细胞及CD4+T细胞的比例降低(P值分别为0.075和0.066)。结论血脂康通过抑制TNF-α、IL-10和IL-17细胞因子产生,缓解了EAN大鼠病情,但同时抑制了CD4+T细胞向Treg的分化。     

MHC-Ig/肽复合体在实验性自身免疫性葡萄膜炎CTLs研究中的应用

目的 探讨MHC-Ig/肽复合体用于小鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)研究的应用价值.方法 用人类光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP)合成多肽IRBP161-180免疫B10RⅢ小鼠制备EAU动物模型.将源于IRBP161-180多肽序列的10种不同短肽片段与MHC-Ig多聚体形成复合体,用于检测BIORⅢ小鼠EAU中特异性CTLs.比较各种MHC-Ig/IRBP短肽复合体与CTLs的结合能力,以及刺激CTLs的增殖和lFN-γ的表达水平,并选用对CTLs作用最强的复合体,检测小鼠在EAU不同发病期外周血CTLs的表达情况.结果 各MHC-Ig/IRBP短肽复合体能够检测出抗原特异CTLs,其中MHC-Ig/IRBP168-177短肽复合体检测出CTLs的阳性率达12.3%;并且其刺激CTLs的增殖和IFN-γ的表达水平明显高于其它短肽组(P＜0.01),可初步推断短肽序列IRBP168-177为该EAU模型特异CTLs主要的抗原识别表位.用MHC-Ig/IRBP168-177短肽复合体检测EAU疾病过程中外周血CTLs的表达发现,EAU在炎症急性期特异性CTLs的阳性表达最高(4.9%±1.1%).结论 MHC-Ig/肽复合体技术,是一种新的定量分析抗原特异性CTLs的方法 ,能检测抗原特异性CTLs的表达情况,分析CTLs的抗原识别表位,为动物模型EAU的研究提供了高效、特异、敏感的检测手段.     

妊娠对实验性自身免疫性妊娠对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的免疫调节作用

目的 明确妊娠期实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠的神经功能的变化情况,并进一步探索其可能的作用机制.方法 采用MOG35-55多肽诱导制作雌性EAE小鼠模型,按雌雄小鼠2:1比例合笼受孕,以成功妊娠的小鼠为妊娠组(n=10);未配...     

实验性自身免疫性心肌炎小鼠的免疫功能变化

目的 观察肌凝蛋白诱导Balb／c小鼠发生自身免疫性心肌炎后小鼠免疫功能的变化。方法 以猪心肌中提取并纯化的肌凝蛋白免疫Balb／c小鼠,建立自身免疫性心肌炎模型。流式细胞仪检测小鼠外周血和脾淋巴细胞CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋、Th1、Th2及TCRVβ8．1＆8．2和TCRVβ10的变化,酶联吸附试验观察外周血TGF-β1和抗肌凝蛋白抗体的变化。^3H—TdR检测小鼠脾脏单个核细胞对肌凝蛋白刺激的增殖反应。结果 940（15／16）小鼠在免疫后第18天出现不同程度的心肌炎病理改变,主要表现为心肌间质单个核细胞浸润;免疫鼠血浆肌钙蛋白Ⅰ水平升高,TGF-β1水平显著下降,并出现较高滴度的抗肌凝蛋白自身抗体。免疫小鼠外周血CD3^＋CD4^＋细胞较正常对照小鼠显著增高。外周血和脾脏Th1、Th1／Th2及TCRVβ8．1＆．8．2阳性T淋巴细胞显著增加;小鼠脾脏单个核细胞对肌凝蛋白的增殖反应较对照组明显增加。结论猪心肌肌凝蛋白可以诱导Balb／c小鼠出现典型的自身免疫性心肌炎,是一种以Th1细胞介导为主的自身免疫反应。     

妊娠对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的免疫调节作用

目的明确妊娠期实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)小鼠的神经功能的变化情况,并进一步探索其可能的作用机制。方法采用MOG35-55多肽诱导制作雌性EAE小鼠模型,按雌雄小鼠2:1比例合笼受孕,以成功妊娠的小鼠为妊娠组(n=10);未配孕的小鼠为对照组(n=10)。比较2组神经功能评分(5分评分法),脊髓实质内炎症细胞的浸润(HE法)及神经脱髓鞘(Bielshowsky’s-Luxol fast blue staining染色)情况,血清IFN-γ、IL-17、IL-10浓度(ELISA法),脾脏中Treg细胞数百分比(流式细胞术)。结果妊娠组小鼠神经功能缺损程度在妊娠后第10、13天较对照组显著降低(P<0.05),且妊娠组小鼠脊髓病灶区炎症细胞浸润程度较对照组显著降低(P<0.05);2组小鼠的脑和脊髓白质内均可见神经脱髓鞘改变,妊娠组的脱髓鞘程度较对照组轻(P<0.05);妊娠组小鼠血清的IFN-γ、IL-17浓度较对照组显著降低(P<0.05),但血清IL-10浓度较对照组显著升高(P<0.05);妊娠组小鼠脾脏中调节性T细胞(Treg细胞)数百分比较对照组显著升高(P<0.05)。结论妊娠期EAE小鼠的临床症状缓解且脊髓实质内炎症反应减轻;其可能的作用机制为上调Treg细胞的抗炎因子和抑制促炎因子的分泌。     

中药黄芪的研究概况

从资源分布、化学成分、药理作用、病虫害等方面介绍了中药黄芪基础研究概况，以供对其进行开发利用者参考。     

玄参与黄芪配伍的实验研究

报道在生理盐条件及磷酰胺（ＣＰＡ）所致免疫国能抑制条件不玄参，黄芪不同剂量配伍前后对小鼠的影响，结果表明：二药合用与单用时比较，其镇痛，抗炎，凝血，白细胞数，胸腺指数，耐缺氧能力等作用二有不同程度的降低或减弱，提示二药配伍为“相恶”。     

红芪和黄芪水提物对小鼠免疫功能影响的差异

目的 探讨红芪和黄芪水提物对小鼠免疫功能影响的差异,进一步指导临床用药.方法清洁级昆明种小鼠120只,随机分为5组,黄芪组(20 g/kg黄芪),红芪低、中、高剂量组(10、20、40g/kg红芪)和空白组(0.02 mL/g生理盐水).所有动物灌胃给药,1次/d,连续15 d,检测脾脏和胸腺指数、巨噬细胞吞噬功能、迟...     

黄芪丹参有效组分不同比例配伍对肾纤维化模型大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响

目的:研究黄芪丹参有效组分不同比例配伍对肾纤维化模型大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响。方法:将56只雄性SPF级大鼠随机分为正常组(n=8)、造模组(n=48)。造模组建立大鼠肾纤维化模型,分为模型组(n=8)、黄芪丹参药对组分1∶1配伍组(n=10)、黄芪丹参药对组分1∶2配伍组(n=10)、黄芪丹参药对组分2∶1配伍组(n=10)、福辛普利组(n=10)。造模后第2天开始各组给予相应干预措施,共干预14 d。观察大鼠肾组织病理变化,检测大鼠肾功能,并采用免疫组织化学方法检测大鼠肾组织上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况。结果:黄芪丹参有效组分不同剂量配伍各组对肾纤维化大鼠肾脏组织病理变化有不同程度的缓解作用。与正常组比较,模型组的Scr升高,差异有统计学意义(P<0.05),说明造模成功。与模型组比较,不同剂量配伍治疗组肾组织E-cadherin表达灰度值水平均明显降低(P<0.05),其阳性表达增强。而福辛普利组、组分配伍1∶1组肾组织α-SMA表达灰度值均明显升高(P<0.05),其阳性表达降低。结论:黄芪丹参药对有效组分1∶1配伍可以通过抑制肾小管上皮细胞转分化(EMT)而延缓肾纤维化的进展,其抑制转分化作用与福辛普利相当;其余不同剂量配伍对肾小管上皮细胞转分化抑制作用效果不明显。     

黄芪建中汤对脾虚大鼠胃粘膜组织代谢的影响

目的：探讨黄芪建中汤调节脾胃的机能。方法：用2％水杨酸钠灌胃诱导大鼠胃粘膜损伤同时，再用饥饱失常、劳倦过度的方法复制出脾气虚大鼠模型，观察黄芪建中汤对大鼠胃粘膜组织细胞中Mg-ATPase、SDHCA等酶活性的影响。结果：脾虚组大鼠的上述酶组织化学指标明显低于正常组；黄芪建中汤可使之提高至正常水平。结论：组织细胞代谢低下是脾虚证的重要表现之一，黄芪建中汤对此有调整作用，可恢复到接近正常水平。     

健康人服用黄芪当归合剂后体内阿魏酸的HPLC法测定

目的　建立健康人服用黄芪当归合剂后的血清预处理方法。方法　应用沸水浴一次处理、甲醇二次处理去除血清蛋白质方法 ,用HPLC直接测定健康人服用黄芪当归合剂后体内阿魏酸 (FA)。色谱条件 :甲醇 冰醋酸 水 (4 0∶0 .3∶5 9 .7)为流动相 ,C1 8(Diamonsil)柱 (15 0mm× 4.6mm ,5 μm)为固定相。FA用内标 (香豆精 )法定量。 结果　FA的最低检测限为 2 .5 1ng ;沸水浴 10min的最低检测血清浓度为 2 5 .10ng/mL ,线形范围 40 .16～ 80 3 2 .0 0ng ,r=0 .9975。黄芪当归合剂口服后 5min血清中即能测出阿魏酸 ,在 3 0min达高峰 ,在 90min出现第 2次高峰。结论　该方法保留了水浴法的优点 ,灵敏、快速、简便、专一和重现性好     

干烧黄芪鱼对衰老小鼠SOD、GSH-Px、NO和NOS的影响

目的研究药膳干烧黄芪鱼对造模衰老小鼠SOD、GSH-Px、NO和NOS的影响,并探讨药膳保健的可能性。方法用干烧黄芪鱼掺和到饲料中饲养实验性衰老小鼠40 d,测定小鼠脑、肾超氧化物歧化酶(SOD)活力、小鼠肝谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,小鼠睾丸、脑中一氧化氮(NO)含量和睾丸、血清中一氧化氮合成酶(NOS)活力。结果干烧黄芪鱼低、中剂量组肾SOD活力与实验对照组比较差异有显著性(P<0.05),高剂量组与实验对照组比较有极显著性差异(P<0.01)。干烧黄芪鱼高剂量组肝GSH-Px活力与实验对照组比较有十分显著性差异(P<0.01)。干烧黄芪鱼低、中剂量组睾丸NO含量与实验对照组比较有显著性差异(P<0.05)。干烧黄芪鱼低剂量组睾丸NOS活力与实验对照组比较差异有显著性(P<0.05)。结论药膳干烧黄芪鱼具有一定的抗氧化作用,并对雄性衰老小鼠生殖系统NO含量及NOS活力有一定影响;以药膳的形式能够达到保健作用。      

黄芪对2型糖尿病大鼠心肌MMP-9表达及活性的影响

目的探讨黄芪对2型糖尿病大鼠心肌基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达及活性的影响。方法将SD大鼠36只随机分为正常对照组、2型糖尿病模型组和黄芪治疗组(黄芪8 g/kg)。各组分别给药12周后,显微镜观察其心肌结构,采用苦味酸-甲苯胺蓝染色、免疫组化和明胶酶图的方法检测心肌组织中胶原(CL)含量、MMP-9的蛋白表达和活性水平。结果模型组大鼠心肌纤维局灶性坏死、细胞外基质堆积,心肌CL含量、MMP-9的蛋白表达和活性水平均高于正常对照组,黄芪治疗组以上病理改变较模型组减轻。结论黄芪可通过改善全身代谢及降低心肌MMP-9的蛋白表达、活性水平和CL含量等途径来发挥其在2型糖尿病中的心脏保护作用。     

青藤碱治疗大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的研究

目的：探讨盐酸青藤碱对大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的治疗作用。方法：对EAE大鼠动物模型给予3种不同剂量的青藤碱，并以甲氨蝶呤作为对照，观察青藤碱对EAE动物模型发病程度、脑和脊髓的病灶数目及血清肿瘤坏死因子-α(TNF—α)、干扰素-γ(IFN-γ)、IL-10的影响。结果：青藤碱减轻EAE动物发病程度、减少脑和脊髓的病灶数目，降低血清TNF—α、IFN-γ水平，但对血清IL—10水平无明显影响。结论：青藤碱具有治疗EAE动物模型的作用，其机制可能与抑制TNF-α、IFN-γ为主的免疫应答有关。     

含红芪、黄芪玉屏风散对SAMP8小鼠脾淋巴细胞活化影响

目的比较研究含红芪或黄芪玉屏风散对快速老化模型(SAMP8)小鼠脾淋巴细胞活化的影响。方法体外实验分别以含黄芪玉屏风散、含红芪玉屏风散及等体积生理盐水灌胃青龄小鼠14d制备含药血清,将含药血清与SAMP8小鼠脾淋巴细胞共培养。体内实验分别以含黄芪玉屏风散、含红芪玉屏风散、胸腺肽溶液及等体积生理盐水灌胃SAMP8小鼠14 d后取血和脾脏制备成血清及脾淋巴细胞悬液。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞培养上清液及血清中的肿瘤坏死因子(TNF-α)水平,实时荧光定量PCR检测脾淋巴细胞中CD28分子、p38MAPK mRNA表达及蛋白质印迹法(Western blot)检测其蛋白表达。结果与空白血清组及生理盐水组比较,含药血清组上清液及血清中TNF-α含量均增高,脾淋巴细胞中CD28分子、p38MAPK mRNA及其蛋白表达量均增高。其中体外实验中含红芪玉屏风散组TNF-α含量及CD28分子、p38MAPK mRNA表达均高于含黄芪玉屏风散组(P0.01),体内实验中含黄芪玉屏风散组TNF-α含量高于含红芪玉屏风散组(P0.05),含红芪玉屏风散组CD28分子、p38MAPK mRNA表达均高于含黄芪玉屏风散组(P0.05),中药组效果均不及胸腺肽组(P0.05)。结论含红芪或黄芪的玉屏风散对SAMP8小鼠脾淋巴细胞的活化均具有增强作用,起到一定的抗免疫老化作用。