糖尿病性高血糖大鼠脑缺血再灌注后脑组织胶质细胞源性神经生长因子的表达及意义

目的探讨糖尿病性高血糖大鼠脑缺血再灌注后脑组织胶质细胞源性神经生长因子(GDNF)的表达及意义。方法41只Wistar大鼠随机分为正常对照组、假手术组、正常血糖脑缺血再灌注组(NIR)和糖尿病性高血糖脑缺血再灌注(DIR),用链脲佐菌素腹腔注射和线栓法分别诱发大鼠糖尿病和复制大脑中动脉缺血再灌注模型,应用免疫组化法检测再灌注6小时和24小时脑组织GD-NF蛋白的表达。结果大鼠脑缺血再灌注后GDNF主要表达于缺血周边区,NIR组GDNF表达在再灌注6小时组和24小时组均较假手术组和正常对照组表达明显增加(P<0.05);DIR组GDNF表达在再灌注6小时和组和24小组较NIR组表达明显下降(P<0.05)。结论大鼠脑缺血再灌注后脑组织GDNF表达增加可能是内源性保护机制;糖尿病性高血糖大鼠脑缺血再灌注后脑组织GDNF表达降低可能是糖尿病加重缺血损伤的机制之一。     

碱性成纤维细胞生长因子保护大鼠前脑抗缺血再灌注损伤

AIM: To study the effect of basic fibroblast growth factor (bFGF) on acute forebrain ischemia-reperfusion injury in rats. METHODS: Both vertebral arteries were occluded by electrocautery and severe but transient bilateral cerebral ischemia was produced by clamping both common carotid arteries for 20 min in rats. The contents of dopamine (DA) and 3,4-dihydroxyphenylacetic acid (DOPAC) in striatum were determined by HPLC with electrochemic detector (HPLC-EC) at 3, 6, 12, 24 h after the onset of reperfusion. The contents of sodium, potassium in forebrain were determined by atomic absorption spectro-photometric method at 6-h reperfusion. Morphological changes of the striatum were also examined. RESULTS: At 6-h reperfusion, the DA content in striatum decreased from (99 +/- 16) micrograms.g-1 (protein) in sham-operation group to (70 +/- 20) micrograms.g-1 (protein); the water and the sodium contents in forebrain increased from 77.34% +/- 0.19% to 79.6% +/- 0.6% and from (9.3 +/- 0.6) to (10.5 +/- 0.6) mg.g-1 (dry weight), respectively. bFGF (i.v. 45 micrograms.kg-1.h-1 for 3 h) from the start of reperfusion prevented the decrease of DA in striatum and the increases of water and sodium contents in forebrain. Histological examination also indicated that bFGF ameliorated the injury of neurons. CONCLUSION: bFGF prevented the brain from injury of ischemia and reperfusion.     

注射用鼠神经生长因子对大鼠缺血脑组织神经生长因子及脑源性神经营养因子表达的影响

目的研究注射用鼠神经生长因子对大鼠缺血脑组织中脑源性神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)表达的影响。方法健康雄性Wistar大鼠,采用改良的Zea-Longa法建立大脑中动脉局灶缺血模型(MCAO)。实验分为模型对照组和注射用鼠神经生长因子组,每组各20只大鼠。注射用鼠神经生长因子组予以腹腔内注射鼠神经生长因子,每天1次,每次9 k U;模型对照组每天注射等量0.9%氯化钠注射液。72 h后行神经功能评分,然后处死,分别取脑梗死周围、海马区和梗死区脑组织作免疫组织化学染色检测BDNF、NGF蛋白表达变化,原位杂交检测BDNF m RNA、NGF m RNA的表达。结果治疗3 d后注射用鼠神经生长因子组神经功能缺损评分低于模型对照组(P<0.05)。注射用鼠神经生长因子治疗组BDNF和NGF蛋白、BDNF m RNA和NGF m RNA在梗死区周围和海马区表达均高于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.05),在梗死区差异均无统计学意义(P>0.05)。结论注射用鼠神经生长因子可上调大鼠梗死区周围和海马区缺血脑组织中BDNF和NGF的表达,并可能通过此机制起到保护作用。     

糖尿病大鼠缺血再灌注脑组织核转录因子-κB的表达及意义

目的观察糖尿病大鼠缺血再灌注脑组织NF-κBp65的表达及意义。方法89只Wistar大鼠随机分为正常对照组、假手术组、正常血糖缺血再灌注组(nIR)和糖尿病缺血再灌注组(dIR),观察时间点为再灌注0小时、6小时、12小时、24小时,每个时间点各5只。用小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱发形成糖尿病大鼠模型,采用线拴法复制大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,应用免疫组化的方法测定NF-κBp65的表达。结果dIR组和nIR组NF-κBp65主要表达于缺血周边区,dIR组再灌注0小时、6小时、12小时、24小时NF-κBp65阳性细胞百分率分别为24.7±4.2、53.4±8.0、72.4±7.2、60.7±5.0,与nIR组同一时间点比较,差异有显著性(P<0.05)。结论糖尿病大鼠缺血再灌注脑组织NF-κBp65表达增加和表达时间提前可能是糖尿病加重脑缺血再灌注损伤的机制之一。     

改构型酸性成纤维细胞生长因子对大鼠肾缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨改构型酸性成纤维细胞生长因子(modified aFGF,MaFGF)对大鼠肾缺血/再灌注损伤的影响。方法Wistar大鼠32只,随机分为4组,即假手术组、模型组、MaF-GF1组(8μg.kg-1)和MaFGF2组(16μg.kg-1),每组8只。以肾缺血/再灌注损伤为模型,通过光、电镜观察肾组织病理变化。结果MaFGF能明显减轻肾组织水肿、间质浸润以及肾小管扩张与破坏,电镜下见肾小管上皮细胞内细胞器(微绒毛、线粒体、溶酶体等)损伤较轻或基本正常。结论MaFGF对大鼠肾缺血/再灌注损伤有一定的保护作用。     

活络通脑片对大鼠脑缺血再灌注损伤的治疗作用

目的探究活络通脑片对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用。方法取SPF级雄性Wistar大鼠利用栓线法制备大鼠脑缺血再灌注模型,按照Zea Longa的5分制评分标准进行神经病学评分。将1～3分的模型动物随机分为模型对照组,活络通脑片低、中、高剂量组(85、170、340 mg·kg-~1)和阳性对照组(银杏叶片26 mg·kg-~1),同法另设假手术组。造模24 h后开始灌胃给药,连续给药14 d。观察活络通脑片对神经功能缺损及行为学评分、血小板活化因子(PAF)诱导的血小板聚集、脑源性神经营养因子(BDNF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达和脑组织病理学的影响。结果与模型对照组相比,活络通脑片可改善神经功能缺损及行为学评分(P<0.05);可抑制血小板聚集(P<0.05),提高脑组织中bFGF和BDNF的表达(P<0.05),并对脑皮质和海马损伤有一定的改善作用。结论活络通脑片对大鼠脑缺血再灌注损伤有较好的治疗作用。     

碱性成纤维细胞生长因子在大鼠脊髓损伤后的表达及意义

目的:探讨脊髓损伤后的自我保护修复机制.方法:采用改良的Allen’s法建立SD大鼠T11节段脊髓损伤模型,观察术后不同时间段脊髓内碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)蛋白表达分布及变化情况.结果:脊髓损伤各时间段bFGF阳性神经元数较正常组显著增加.7 d达高峰,21 d恢复正常.结论:脊髓损伤后bFGF表达,提示其参与了脊髓损伤后神经元的保护作用.     

布地奈德对哮喘大鼠碱性成纤维细胞生长因子蛋白和mRNA表达的影响

目的：观察碱性成纤维细胞生长因子在急性哮喘大鼠肺组织的表达情况及布地奈德的干预影响.方法：36只雄性SD大鼠随机分为对照组、哮喘组和布地纳德治疗组,以卵清白蛋白激发法制备哮喘模型,采用ELISA法测定支气管肺泡灌洗液中碱性成纤维细胞生长因子的含量,免疫组化和原位杂交法测定肺组织中碱性成纤维细胞生长因子蛋白和mRNA的表达情况.结果：支气管肺泡灌洗液中的碱性成纤维细胞生长因子浓度、肺组织碱性成纤维细胞生长因子蛋白和mRNA的表达水平哮喘组显著高于对照组（P＜0.01）,治疗组显著低于哮喘组（P＜0.01）,但与对照组相比仍较高（P＜0.01）,上皮细胞为主要表达细胞.结论：碱性成纤维细胞生长因子参与了哮喘的发病机制,布地奈德可抑制哮喘急性期碱性成纤维细胞生长因子蛋白和mRNA的表达增加效应,这可能是布地奈德抑制哮喘气道重塑的重要机制之一.     

大鼠局灶性脑缺血/再灌注后NF-kB表达和细胞凋亡

目的:研究脑缺血再灌注后大鼠脑组织半暗区核因子(nuclear factor kappa B,NF-kB)基因表达的变化与神经细胞凋亡的关系。方法:用插线法制作大鼠大脑中动脉(M CAO)栓塞/再灌注模型,原位杂交法检测大鼠脑重度缺血(3h)及再灌注损伤不同时间点(2、3d)半暗区NF-kB表达;TUNEL法测定凋亡细胞。结果:脑缺血再灌注后,缺血半暗区NF-kB的表达明显升高(P<0.01)。凋亡细胞数量亦显著增加(P<0.01)。细胞凋亡的时程变化与NF-kB的表达基本一致。结论:局灶性重度脑缺血再灌注后可引起NF-K b表达的增加,参与缺血再灌注神经细胞损伤机制。     

不同脑温对缺血脑组织细胞坏死和凋亡的影响

目的研究脑缺血后不同脑温对细胞坏死和凋亡的影响,探讨亚低温脑保护作用的机制。方法 36只雄性远交系(sprague dawley,SD)大鼠,随机分为脑缺血常温(37～38℃)、亚低温(31～32℃)、高温(41～42℃)和对照组,每组9只。脑缺血动物模型采用改良四动脉阻断法,制作大鼠全脑缺血再灌注模型(Pulsinelli法)。凋亡细胞的检测采用原位末端脱氧核糖核酸酶介导的地高辛标记的脱氧三磷酸腺苷(dUTP)缺口末端标记(TUNEL)法。结果常温脑缺血再灌注海马CA1区神经细胞变性坏死,锥体细胞密度下降;亚低温组较常温组脑缺血CA1区锥体细胞密度明显增加(P<0.01);脑缺血后高温组则使锥体细胞密度进一步下降(P<0.01)。常温脑缺血再灌注后48～72h,大脑皮质和海马可见到凋亡细胞,亚低温组CA1区锥体细胞凋亡的密度明显减少,高温则使锥体细胞凋亡密度增加。结论脑缺血后即时开始亚低温可减少神经细胞的坏死和凋亡,是亚低温脑保护作用的机制之一;脑缺血后高温则加剧脑缺血损伤。     

Effectiveness of memantine on depression-like behavior,memory deficits and brain mRNA levels of BDNF and TrkB in rats subjected to repeated unpredictable stress

Background

Previous clinical and preclinical studies have indicated that the N-methyl-d-aspartate (NMDA) receptor antagonist, memantine, has neuroprotective properties as well as antidepressant effects. The present study was designed to examine behavioral and molecular effects of memantine administration in rats subjected to the repeated unpredictable stress (RUS) paradigm.

赤芍801对大鼠脑缺血/再灌注损伤后脑源性神经营养因子表达的影响

目的:探讨赤芍801(propyl gallate,PG)对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤后神经功能损伤、细胞凋亡及脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达的影响。方法:线栓右侧大脑中动脉(middle cerebral artery,MCA)制成SD大鼠短暂局灶性脑缺血模型,实验大鼠随机分成:正常对照组、假手术组、模型组、溶媒组、PG组(分PG23.5、47、94μmol/kg3个亚组)等5组。采用Longa等评分法进行大鼠神经功能评分;TUNEL染色法观察缺血/再灌注不同时段(1、2、4、7d)模型鼠缺血区周边组织阳性神经元数量;免疫组织化学、蛋白免疫印迹法检测缺血/再灌注后不同时段各组缺血区周边组织BDNF的表达情况。结果:脑缺血/再灌注后1d,模型大鼠神经功能缺损评分、TUNEL阳性细胞数均达到高峰。与此相仿,该时段缺血周边区的BDNF表达亦达到高峰,此后逐渐下降。该时段TUNEL阳性细胞数和BDNF表达与其它各时段(2、4、7d)比较均有升高(P<0.01)。予上述不同剂量组的PG干预后,47、94μmol/kg组大鼠的神经功能缺损评分、T...     

bFGF，GDNF，PDGF，IGF-I在大鼠脊髓中的定位表达

目的　碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)、血小板源性生长因子 (PDGF)和胰岛素样生长因子 -I (IGF -I)对神经细胞起特殊的营养作用 ,但它们在脊髓中的定位分布和生物学作用还不十分清楚。本研究旨在探索这一问题 ,方法　取正常成年SD大鼠脊髓分别用抗bFGF ,GDNF ,PDGF ,IGF -I抗体行免疫组化染色 ,观察上述 4种神经营养因子免疫阳性反应物在大鼠脊髓中的分布。结果　bFGF ,GDNF ,PDGF ,IGF -I的免疫阳性反应物主要见于脊髓灰质内各板层神经元 ,腹角和背角深部明显 ,背角浅层较少见。但II板层还可见bFGF阳性细胞和GDNF阳性膨体 ,中央管可见PDGF、bFGF阳性的室管膜细胞。结论　bFGF ,GDNF ,PDGF ,IGF -I在维持脊髓神经元的生理功能中可能起重要作用     

金雀异黄素对肾小管间质纤维化模型大鼠肾组织DDR1、bFGF表达的影响

目的 探讨DDR1在肾小管损伤及间质纤维化过程中的表达以及金雀异黄素在肾小管损伤及间质纤维化过程中对肾脏的保护作用及可能机制.方法 采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠模型,将45只大鼠随机分为三组:假手术组、模型组、金雀异黄素干预组,分别于术后7d、14d、21d每组各处死5只大鼠,收集血清测定尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)水平,结扎侧肾组织行HE染色观察肾脏病理变化,Masson染色分析肾间质纤维化程度,免疫组化半定量检测各组大鼠肾组织DDR1、bFGF的表达.结果 模型组DDR1、bFGF表达及肾间质纤维化程度明显高于假手术组,BUN、Scr水平显著升高(P＜0.01);金雀异黄素干预组DDR1、bFGF表达及肾间质纤维化程度较模型组明显降低(P如.01或0.05),部分时间段BUN、Scr水平有所下降(P＜0.05).结论 金雀异黄素可能通过降低DDR1及bFGF的表达而减轻肾小管损伤及间质纤维化程度.     

益脑胶囊对大鼠脑缺血再灌注后脑组织细胞间黏附分子表达的影响

目的：观察益脑胶囊对大鼠脑缺血再灌注后脑组织中细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达及其影响。方法：用45只Wistar大鼠,随机分为假手术组、模型组、益脑胶囊组,利用线栓法制作大脑中动脉缺血-再灌注模型。使用神经功能评分NSS标准进行评分;免疫组化染色观察再灌注后不同时间点细胞间黏附分子ICAM-1的表达。比较不同实验组相同灌注时间点ICAM-1表达的变化及神经功能改变。结果：局灶性脑缺血再灌注后,相同时间点模型组的神经功能评分和ICAM-1表达均较假手术组升高,治疗组均低于模型组。结论：益脑胶囊通过降低ICAM-1在缺血区的表达,抑制炎症反应,达到健脑益智之功效。     

异丙酚对大鼠局灶性脑缺血和蛋白激酶C γ亚单位的作用

目的观察异丙酚对大鼠局灶性脑缺血和脑内蛋白激酶Cγ亚单位(PKCγ)变化的作用。方法♂SD大鼠随机分为Ⅰ:假手术组,Ⅱ:损伤组,Ⅲ:异丙酚(25mg·kg-1)+损伤组,Ⅳ:异丙酚(50mg·kg-1)+损伤组,Ⅴ:脂肪乳剂+损伤组,每组8例。采用大脑中动脉线栓法缺血3h再灌注24h。异丙酚和脂肪乳剂于再灌注前30min腹腔注射。通过原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法观察局灶性脑缺血产生的神经细胞凋亡和异丙酚作用效果,免疫细胞化学法观察各组PKCγ蛋白在脑内表达变化的差异。结果再灌注24h后Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组大鼠体重较缺血前降低(P<0.01),和Ⅰ组比较:Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组大鼠再灌注24h后出现明显的神经体征缺陷(P<0.01),Ⅱ组大鼠额叶皮层和纹状体区域大量神经细胞凋亡,纹状体PKCγ蛋白表达明显下降。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组大鼠纹状体区域凋亡细胞密度与PKCγ染色阳性面积均没有差异(P>0.05)。结论再灌注前30min腹腔注射异丙酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤所致的神经细胞凋亡和PKCγ表达降低无保护作用。     

BCPT对CUS大鼠大脑皮质BDNF、Bax及海马超微结构的影响

目的观察细脚拟青霉代谢物提取物(BCPT)对慢性应激抑郁模型大鼠行为、海马组织超微结构、大脑皮质脑源性神经营养因子(BDNF)和Bax的影响。方法采用慢性不可预见性应激法(CUS)造成大鼠抑郁模型;采用Openfield法观测大鼠行为;采用免疫组织化学的方法对BDNF和Bax进行染色,并用图像分析仪进行半定量分析;用电镜观察海马超微结构的变化情况。结果慢性应激抑郁模型大鼠水平和垂直运动次数明显减少,BDNF阳性神经元数目明显减少,Bax阳性神经元数目明显增加,电镜显示海马超微结构出现病理变化,而BCPT对其有明显的保护作用。结论BCPT具有抗抑郁作用,增加BDNF表达、降低Bax表达、改善海马超微结构的病理变化有关。     

氯胺酮对大鼠全脑缺血再灌注损伤的预防与治疗作用

目的 观察氯胺酮对全脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 采用改良Pulsinelli 4血管法建立大鼠全脑缺血模型，缺血时间为15min。32只SD大鼠随机分假手术、缺血再灌注、氯胺酮治疗及氯胺酮预注4组。于动物存活第6天行Y-型迷宫检测大鼠的学习能力，第7天检测记忆能力并行海马CAl区组织病理学检查。结果 大鼠缺血再灌注后学习和记忆能力明显下降，海马CAl区大量神经元细胞坏死，氯胺酮治疗组与氯胺酮预注组能不同程度减轻海马CAl区神经元的损伤，改善缺血再灌注后学习和记忆的障碍。结论 氯胺酮对全脑缺血再灌注损伤有预防和治疗作用。     

安神补脑液对睡眠剥夺模型大鼠学习记忆及脑源性神经营养因子表达的影响

目的：研究安神补脑液对睡眠剥夺大鼠的学习记忆能力影响，并从脑源性神经营养因子（BDNF）角度探讨其机理。方法：SD大鼠，随机分成正常对照组、正常对照＋安神补脑液小剂量组及模型＋蒸馏水组及模型＋安神补脑液大、小剂量组。灌胃给予安神补脑液2周后，用多站台水环境法进行睡眠剥夺造模4d，用避暗法测试其学习记忆能力，并取海马组织用Westem blot法测定BDNF表达量。结果：与正常对照组比较，睡眠剥夺大鼠避暗测试潜伏期显著减短，表明出现学习记忆能力障碍；大剂量安神补脑液给药能显著延长模型大鼠的潜伏期，表明该药可有效减轻大鼠睡眠剥夺后的学习记忆障碍。安神补脑液也能延长正常大鼠避暗实验的潜伏期。在睡眠剥夺大鼠海马组织BDNF表达量显著降低，而用安神补脑液干预后模型大鼠BDNF表达量增加，在大剂量组出现显著性差异。结论：安神补脑液能提高睡眠剥夺鼠的学习记忆能力，其机理之一可能与提高海马BDNF含量有关。