中剂量rhG-CSF对正常供者外周血CD34+细胞动员效果

本研究探讨中等剂量600μg/d粒细胞集落刺激因子(GCSF)对正常供者CD34 细胞的动员效果及动员前后外周血单个核细胞中T细胞亚群的变化。对2002-2004年我科31例健康供者给予rhGCSF600μg/d,在动员的第4天开始采集外周血干细胞(PBSC),并检测动员前后白细胞总数、动员后的有核细胞(NC)数、单个核细胞(MNC)数、CD34 细胞数及粒巨噬细胞集落形成单位(CFUGM),同时观察动员及采集过程中的不良反应。对12例供者GCSF动员前后外周血单个核细胞中T细胞亚群的变化进行了观察。结果显示:600μg/d组与既往使用的300μg/d组相比,rhGCSF动员后的外周血细胞中NC、MNC和CD34 细胞及CFUGM显著增加(P<0.05),受者造血重建时间缩短(P<0.05),动员和采集过程中的不良反应发生率无明显上升(P>0.05),无严重不良反应发生。动员后CD3 细胞在PBMNC中的比例较动员前下降(15.05±3.3)%,(P<0.05)。动员前后CD4 /CD8 淋巴细胞的比值无明显变化(P>0.05)。结论:600μg/d的GCSF对正常供者的动员效果好,受者造血重建快,无严重不良反应发生。动员后PBMNC中CD3 细胞的下降及CD4 /CD8 淋巴细胞比值无明显变化,从而使得移植后急性GVHD的发生率无明显上升。     

骨髓瘤患者外周血中CD4+ CD25+ CD127low/-调节性T细胞及淋巴细胞亚群的研究

目的研究多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中CD4~+CD25~+CD~(127low/-)调节性T细胞(Treg)及淋巴细胞亚群的比例,初步探讨其在MM患者发生免疫抑制机制中作用。方法采用流式细胞术分别检测65例MM患者和20例健康对照组外周血中CD4~+CD25~+CD~(127low/-)Tregs以及淋巴细胞亚群的比例。结果 MM患者外周血中CD4~+CD25~+CD~(127low/-)Treg比例[(10.85±2.19)%]高于健康对照组[(7.48±1.66)%],差异有统计学意义(P0.01);MM患者外周血中CD3~+CD4~+(Th)细胞的比例[(31.39±5.19)%]低于健康对照组[(36.55±3.02)%],差异有统计学意义(P0.01);MM患者外周血中CD3~+CD8~+(Tc)细胞的比例[(34.80±4.29)%],高于健康对照组[(28.93±3.61)%],差异有统计学意义(P0.01);同时,MM组外周血中Th/Tc的比值(0.95±0.24)低于健康对照组(1.29±0.27),差异有统计学意义(P0.01)。结论 MM患者存在淋巴细胞亚群的比例异常,导致MM患者更易产生免疫功能失调;同时,由于MM患者CD4~+CD25~+CD~(127low/-)Treg细胞比例的增加可能进一步加剧骨髓瘤患者的免疫抑制,促进了肿瘤细胞的免疫逃逸。     

DA-EPOCH化疗联合G-CSF有效动员非霍奇金淋巴瘤患者自体外周血造血干细胞

目的:探讨CTX+G-CSF和DA-EPOCH+G-CSF方案对非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者外周血干细胞动员采集及造血恢复的效果。方法:回顾性分析我科收治的40例NHL患者分别采用CTX+G-CSF及DA-EPOCH+GCSF方案进行外周血造血干细胞(PBSC)动员、采集,并予BEAM方案预处理后回输自体外周血干细胞,分析动员效果、不良反应及自体移植后造血恢复情况。结果:CTX+G-CSF组动员期间1例患者外周血白细胞(WBC)计数降至0.8×10~9/L,其余WBC数最低值均2.0×10~9/L,3例血小板数降至80×10~9/L左右,其余患者血小板数均正常,单次采集物CD34~+细胞比例中位数0.99(0.35-1.30)%,共采集单个核(MNC)数(3.80±2.05)×10~10~,累计MNC(5.84±2.48)×10~8/kg,CD34~+细胞数中位数3.84(3.91-6.5)×10~6/kg。DA-EPOCH+G-CSF组动员期间患者外周血白细胞(WBC)计数最低降至(0.2-1.4)×10~9/L,1例血小板(Plt)数最低为8×10~9/L,其余均在40×10~9/L以上,单次采集物CD34~+细胞比例中位数0.85(0.34-1.2)%,共采集MNC中位数(3.68±1.56)×10~(10),累计MNC数(6.01±2.26)×10~8/kg,CD34~+细胞数中位数4.44(2.7-7.10)×10~6/kg。2组患者采集物CD34~+细胞比例中位数、总MNC中位数,累计每公斤体重MNC数及CD34~+细胞数中位数比较无统计学差异(P0.05)。CTX+G-CSF组自体干细胞移植后粒细胞植活平均时间为10.00(9.00-11.00)d,血小板植活平均时间为12.00(11.00-13.50)d;DA-EPOCH组自体干细胞移植后粒细胞植活平均时间为10.00(9.00-11.00)d,血小板植活平均时间为12.50(11.00-17.25)d,2组比较无统计学差异(P0.05),在移植过程中无死亡病例。结论:DA-EPOCH联合G-CSF方案可有效动员NHL患者的外周血干细胞,安全性高,且经济实惠,值得临床推广     

ICU危重症患者免疫功能的研究

目的 观察危重症患者T淋巴细胞亚群、NK细胞活性、免疫球蛋白、白蛋白和补体水平,了解危重症患者的免疫功能状态.方法 观察20例ICU的危重症患者(APACHEⅡ评分≥16分)和20例健康体检者的细胞免疫、体液免疫和白蛋白水平.结果 ①危重症患者CD3、CD4、NK细胞活性和IgM、补体C3水平比健康者明显降低[(55.41±21.09)%与(73.93±5.77)%;(20.87±8.16)%与(39.04±4.24)%;(11.56±6.65)%与(16.94±4.55)%;(0.88±0.43)%与(1.32±0.50)%;(0.91±0.36)g/L与(1.31±0.44)g/L;均P＜0.01];IgA水平升高[(3.02±1.23)g/L与(2.05±0.71)g/L,P＜0.01];②白蛋白和CD4细胞活性APACHEⅡ评分≤25分患者明显高于APACHE Ⅱ评分＞25分的患者[(26.99±3.98)g/L与(20.39±3.30)g/L;(25.38±6.05)%与(17.36±6.17)%;均P＜0.05];③外周血T淋巴细胞CD4细胞活性和白蛋白水平与APACHEⅡ评分负相关r=-0.476,P=0.0335;r=-0.6659,P=0.0014).结论 危重症患者细胞免疫功能和体液免疫功能受到抑制,外周血CD4细胞活性可以反映危重症患者免疫功能.     

妊娠期重症甲型H1N1流感肺炎病例特点分析

目的 探讨妊娠期重症甲型H1N1流感肺炎患者的临床特点,提高对妊娠期重症甲型H1N1流感肺炎的认识.方法 分析我院2009年11月26日至12月20日收治的15例妊娠期重症甲型H1N1流感肺炎患者临床资料.结果 15例患者平均年龄24岁,平均孕周32周,白细胞总数平均值(6.76±3.30)×109/L[(1.30～14.60)×109/L],2例低于4×109/L,最低1.3×109/L;3例高于10×109/L,最高14.6×109/L.中性粒细胞比率(87.62±4.00)%[(79.40～92.90)%],均高于正常.淋巴细胞绝对值(0.70±0.24)×109/L[(0.20～1.20)×109/L],13例(86.7%)低于1×109/L.单核细胞计数平均值(0.10±0.13)×109/L[(0～0.4)×109/L],13例(86.7%)低于0.2 × 109/L,6例计数为0.12例患者检查T淋巴细胞亚群CD4/CD8中有6例(54.5%)<1.4,其中5例<1.CDl9相对值21.09±10.39(12～47),其中6例(40%)>18.CD16+56相对值为8.45±3.83(3～15),4例(26.7%)<8,其余所有测定值接近低限.14例患者血乳酸脱氢酶平均(400.84±262.84)U/L[(0.80～850.00)U/L],其中10例(71.4%)增高.肌酸激酶(512.47±1250.67)U/L[(25～5088)U/L],4例患者(26.6%)高于正常值,同时伴有同工酶升高.15例中4例(26.7%)血钾<3.5 mmol/L.12例患者免疫相关检查中有4例(33.3%)补体CA>0.36g/L,1例(6.7%)<0.09 g/L;4例(33.3%)C3<0.75 g/L;免疫球蛋白及免疫复合物大致正常.15例患者放射影像均确定存在多发、多叶肺炎,主要呈间质样改变或大片实变渗出.需要机械通气辅助呼吸的病例影像学特点为双肺弥漫大面积实变影,连续监测进展迅速,符合ARDS影像学表现.4例出现少量胸腔积液,1例合并少量心包积液.患者中有2例晚期妊娠孕妇胚胎死亡,7例及时终止妊娠者病情稳定.结论 妊娠期妇女是甲型H1N1病毒感染的高危人群,并易迅速发展成为ARDS.妊娠期免疫耐受可能参与重症H1N1流感肺炎肺部损伤过程.     

原发免疫性血小板减少症患者外周血Tr1细胞表达

目的探讨原发免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia, ITP)患者外周血1型调节性T(type 1 regulatory T, Tr1)细胞表达及与血小板计数的关系。方法 ITP患者15例为ITP组,同期体检健康者13例为对照组。2组均行血常规检查,记录血小板计数、淋巴细胞计数;采用流式细胞仪检测2组外周血CD4~+T淋巴细胞、Tr1细胞计数,计算Tr1细胞占淋巴细胞百分比(Tr1/Lym)、CD4~+T淋巴细胞占淋巴细胞百分比(CD4~+T/Lym)、Tr1占CD4~+T淋巴细胞百分比(Tr1/CD4~+T);Pearson法分析ITP组Tr1细胞计数与血小板计数的相关性。结果 ITP组Tr1细胞计数[(0.940 9±0.672 2)×10~6/L]、血小板计数[(25.152 6±16.159 0)×10~9/L]、Tr1/Lym[(0.058 3±0.047 7)%]均较对照组[(1.644 0±0.992 6)×10~6/L、(282.738 5±95.414 4)×10~9/L、(0.130 8±0.122 1)%]降低(P0.05),Tr1/CD4~+T[(0.167 5±0.164 0)%]、CD4~+T/Lym[(39.559 4±9.918 4)%]与对照组[(0.383 5±0.382 4)%、(38.810 5±10.152 8)%]比较差异无统计学意义(P0.05)。Pearson相关分析结果显示,ITP组Tr1细胞计数与血小板计数无线性相关(r=0.530,P=0.063)。结论 ITP患者外周血Tr1细胞计数减少,免疫抑制作用减弱,Tr1细胞计数与血小板计数无明显相关。     

连续流动离心式血液成分分离机高量减除白细胞治疗的采集效果评价

目的探讨采用连续流动离心式血液成分分离机,对高白细胞性白血病患者进行高量减除白细胞治疗的采集效果。方法采用COBE Spectra连续流动离心式血液成分分离机MNC程序,以ACD-A配方血液保存液作为抗凝剂,对高白细胞性白血病患者实施减除白细胞治疗,每次治疗处理2.5-3.0倍总血容量,采集1/5-1/4倍总血容量的白细胞悬液,对39名患者共进行56次减除白细胞治疗。结果单次治疗运行时间(233.63±27.41)min;处理血量(12 268.77±1 978.25)m L;ACD-A配方血液保存液用量(991.04±185.06)m L;采集白细胞悬液容量(922.89±213.26)m L,悬液中白细胞计数551.05×109/L[(396.76-756.45)×109/L],白细胞总数491.52×109[(341.53-754.51)×109],据此计算可减低患者血液白细胞计数(白细胞减除值)111.35×109/L[(80.98-158.18)×109/L];单次治疗前、后患者白细胞计数分别为233.30×109/L[(163.62-367.05)×109/L]、167.34×109/L[(94.40-260.06)×109/L](s=765,P0.001),治疗后白细胞计数减低值53.35×109/L[(35.72-107.03)×109/L],低于计算的白细胞减除值(s=681,P0.001);治疗结束时增、减液体容量与患者总血容量的比值为8.22%(4.76%-11.83%)。结论采用连续流动离心式血液成分单采技术,可在保持患者循环动力学相对稳定的前提下对高白细胞性白血病患者进行高量(1/5-1/4倍总血容量)减除白细胞治疗,显著降低患者体内白细胞负荷;减除患者白细胞总数比患者外周血白细胞计数的减低值,对评价减除白细胞治疗的效果更有意义。     

健康人群外周血各类血细胞CD55/CD59的表达

目的了解健康人群外周血细胞CD55/CD59表达情况。方法用流式细胞仪检测健康人红细胞、粒细胞、单核细胞、淋巴细胞膜上CD55/CD59表达。结果80名健康人外周血不同类型的血细胞膜上CD55/CD59表达不同。正常红细胞CD55/CD59双阳性的红细胞中位数为85.100%,阵发性血红蛋白尿症(PNH)细胞<0.200%;正常中性粒细胞双阳性细胞中位数为99.900%,PNH细胞<0.100%;单核细胞双阳性细胞的中位数为93.000%,PNH细胞<2.900%。淋巴细胞双阳性细胞中位数为72.600%,PNH细胞<18.000%。正常淋巴细胞中所含的PNH细胞比例明显高于其他细胞(P<0.01),且主要为T淋巴细胞。结论健康人的外周血各种血细胞CD55/CD59表达不同,分析结果有助于对PNH等干细胞疾病的诊断和发病机制进行探讨。     

昆明地区甲型H_1N_1流感患者白细胞计数、分类及形态分析

目的探讨甲型H1N1流感患者外周血白细胞分析结果。方法采用SysmexXS-1000i全自动血细胞分析仪检测了261例甲型H1N1流感患者的外周静脉血,并对其中76例做了血涂片细胞形态观察。结果白细胞计数多为正常,中位数为5.03×109/L,范围为(1.5～18.59)×109/L。分类以淋巴细胞增多为主,淋巴细胞比例增高者占54.8%。涂片镜检异形淋巴细胞的阳性率为65.8%,单核细胞比例增高的占41%,嗜酸性粒细胞比例增高的占9.6%,减低的占14.6%。结论甲型H1N1流感患者的白细胞多为正常(85.1%)或减少(12.6%),增多者仅占2.3%;分类以淋巴细胞增高为主,其次为单核细胞比例轻度增高者,形态可见部分患者异形淋巴细胞轻度增高。     

ITP患者大剂量地塞米松治疗前后外周血B-1a细胞的变化

目的研究免疫性血小板减少症(ITP)患者大剂量地塞米松治疗前后外周血B-1a细胞水平的动态变化。方法用流式细胞仪和CD5CD19双标抗体检测20名正常对照,31例ITP患者大剂量地塞米松治疗前后外周血B细胞和B-1a细胞占淋巴细胞的比例和绝对值,并比较地塞米松治疗有效和无效患者之间B-1a细胞变化的差别。结果 ITP患者治疗前外周血B-1a细胞占淋巴细胞比例为(4.01±3.32)%,绝对值为(74.8±26.6)×106/L,均较正常对照组明显升高(P<0.01),地塞米松治疗结束后ITP患者外周血B-1a细胞水平下降至(31.9±14.5)×106/L,其中地塞米松有效和无效患者治疗前B-1a细胞分别为(91.8±44.3)×106/L和(48.9±25.8)×106/L(P<0.05),治疗结束后有效和无效患者外周血B-1a细胞分别为(22.5±12.3)×106/L和(43.9±13.2)×106/L。结论 ITP患者外周血B-1a细胞水平升高,接受大剂量地塞米松治疗后,B-1a细胞绝对值明显下降,治疗前B-1a细胞水平较低者提示对大剂量地塞米松治疗反应较差。     

低剂量rhG-CSF对56例非血缘供者外周造血干细胞动员

本研究观察低剂量人重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对非血缘健康供者的影响,探讨用于中华造血干细胞捐赠者资料库提供的非血缘健康供者外周造血干细胞动员方案。56例非血缘健康供者接受rhG-CSF 5μg/(kg.d)皮下注射,在动员第4、5两天或第5、6两天采集干细胞,观察动员效果及不良反应,检测动员前后血常规指标、CD3+、CD4+、CD8+和CD20+细胞比例;对采集物进行单个核细胞(MNC)和CD34+细胞计数;对所有供者随访至2006年5月31日。结果显示:在rhG-CSF动员过程中出现1级毒副作用(按WHO分级标准):腰背酸痛17.9%(10/56)、焦虑失眠8.9%(5/56)、疲乏4.5%(3/56)等,无需特殊处理,无需终止动员。第4、5两天采集和第5、6两天采集所得的MNC分别是(5.95±1.52)×108/kg和(7.19±2.12)×108/kg;CD34+细胞分别是(3.03±1.09)×106/kg和(7.92±2.50)×106/kg。血红蛋白水平、血小板量、CD3、CD4、CD8、CD20百分比动员前后无变化。结论:5μg/(kg.d)rhG-CSF用于非血缘健康供者的动员是安全而有效的。     

重组人粒细胞集落刺激因子动员对CD4+T淋巴细胞迁移和黏附功能的影响

目的探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员对CD4+T淋巴细胞表面分子CXCR4和淋巴细胞功能相关抗原1(LFA-1)所介导功能和相关信号机制的影响.方法在rhG-CSF动员前和动员后第5天抽取供者外周血,用三色荧光标记检测动员前后CD4+T淋巴细胞LFA-1和CXCR4的表达率,并应用免疫磁性分选法分离纯化CD4+T淋巴细胞,检测动员前后CD4+T淋巴细胞对基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)的迁移能力和对细胞间黏附分子1(ICAM-1)的黏附能力.结果rhG-CSF动员前后CD4+T淋巴细胞的LFA-1(CD11a)和CXCR4表达率差异无统计学意义(P＞0.05),动员前后CD4+T细胞LFA-1表达率均为100%;动员前CD4+T淋巴细胞CXCR4表达率为(84.58±20.31)%,动员后为(81.23±22.46)%.动员前后CD4+T淋巴细胞向SDF-1α的4 h迁移率分别为(28.5±10.3)%和(31.2±8.9)%,差异无统计学意义(P＞0.05);动员前后CD4+T淋巴细胞在CD3单抗作用下对ICAM-1的黏附率分别为(85.59±14.21)%和(61.45±15.07)%,动员前显著高于动员后(P＜0.05).结论rhG-CSF动员不影响CD4+T淋巴细胞LFA-1和CXCR4的表达,但影响CD4+T淋巴细胞通过LFA-1对ICAM-1的黏附能力.     

重组人G-CSF对健康供者外周造血干／祖细胞动员和采集效果的影响因素分析

应用重组人粒系集落刺激因子（rhG—CSF）对健康供者进行动员并采集造血干细胞用于异基因外周血造血干细胞移植已在临床广泛应用，本研究通过对影响外周干细胞动员和采集效果的多因素分析，进一步探讨最佳动员方案及采集时机。采取回顾性方法分析了431例健康供者外周血干细胞动员采集效果，并进一步分析了供者一般特征、rhG—CSF动员天数、每日皮下注射次数、剂量与采集效果的关系。结果表明：rhG—CSF在动员中平均应用剂量为5．7μg／（kg·d），平均采集1．7次，收获单个核细胞数平均为9．57×10^8／kg，CD34^＋细胞平均为4．91×10^6／kg。绝大多数供者不良反应轻微。多因素分析结果显示，采集效率主要与供者体重指数，采集天数相关。rhG—CSF动员第5天采集的供者，其MNC数、CD34^＋细胞数及第一次单采成功率均优于其他时间采集的供者。同时，本组供者应用rhG—CSF剂量较小且剂量范围较窄，rhG—CSF剂量不如采集时间对采集物质量的影响明显。结论：小剂量应用rhG—CSF动员并于第5天开始采集是健康供者造血干细胞动员的较理想方案。     

骨髓增生异常综合征患者外周血树突细胞数量、亚群及其表面协同刺激分子表达的研究

目的 检测骨髓增生异常综合征（MDS）患者外周血树突细胞（DC）总量、亚群（pDC和mDC）比例及其表面协同刺激分子（CD80、CD86和CIMO）表达，探讨MDS患者细胞免疫异常的形成机制。方法 选取38例MDS患者及19名正常对照，采用荧光素单克隆抗体标记法和流式细胞术检测MDS患者外周血中Lin1^—HLA-DR^＋细胞（DC）、Lin1^-HLA—DR^＋CD123^＋细胞（pDC）、Lin1—HLA—DR^＋CD11c^＋细胞（mDC）的数量以及CD80、CD86和CIMO在DC膜上的表达。结果低危MDS组、高危MDS组和正常对照组外周血DC总量分别为（33．7±7．0）×10^6／L、（56．3±29．0）×10^6／L和（12．1±1．4）×10^6／L（P〈0．05），pDC数量分另U为（12．6±4．1）×10^6／L、（3．6±1．0）×10^6／L和（6．6±0．7）×10^6／L（P〉0．05），mDC数量分别为（16．7±6．3）×10^6／L、（28．7±17．6）×10^6／L和（5．5±0．9）×10^6／L（P〈0．05）。低危MDS组、高危MDS组和正常对照组DC占外周血单个核细胞（PBMNC）百分比分别为（2．37±0．53）％、（3．58±1．39）％和（0．68±0．08）％（P〈0．05），pDC占PBMNC百分比分别为（0．82±0．29）％、（0．31±0．06）％和（0．37±0．04）％（P〉0．05），mDC占PBMNC百分比分别为（0．96±0．35）％、（1．51±0．70）％和（0．32±0．05）％（P〈0．05）。低危MDS组、高危MDS组和正常对照组外周血中CD80^＋DC分别为（30．6±11．8）×10^6／L、（2．3±0．9）×10^6／L和（2．3±0．6）×10^6／L（P〈0．05），CD86^＋DC分别为（25．1±7．4）×10^6／L、（12．4±6．3）×10^6／L和（6．2±3．2）×10^6／L（P〈0．05），CD40^＋DC分别为（2．8±1．0）×10^6／L、（1．5±0．9）×10^6／L和（3．2±2．3）×10^6／L（P〉0．05）。结论 MDS患者外周血中DC数量增多、比例异常；以mDC增多为主，pDC无明显增多；MDS患者DC高表达CD80和CD86，CD40表达不增高。提示MDS患者诱导抗肿瘤细胞免疫的抗原呈递细胞（pDC）数量及功能不足；而与正常造血克隆炎性损伤有关的抗原呈递细胞（mDC）却增多。这可能是导致MDS患者细胞免疫异常的重要机制之一。     

环磷酰胺联合重组人粒细胞集落刺激因子动员自体外周血干细胞

目的：观察环磷酰胺（ＣＴＸ）联合重组人粒细胞集落刺激因子对自体外周血干细胞（ＡＰＢＳＣ）的动员效果。方法：ＣＴＸ３．７±０．２ｇ／ｍ＾２第１天静滴，白细胞（ＷＢＣ）降至最低点时开始皮下注射ｒｈＧ－ＣＳＦ４．５±０．６μｇ．ｋｇ＾－１．ｄ＾－１，直至采集结束前一天，ＷＢＣ恢复至２．５×１０＾９／Ｌ以上时开始连日采集ＡＰＢＳＣ，采集用ＣＳ３０００ｐｌｕｓ或Ｃｏｂｅ血细胞分离机，当累计采集的单个核细胞（     

rhG-CSF动员对供者T细胞增殖和细胞毒的影响

为了解rhG-CSF动员对供者T细胞增殖和细胞毒的影响,在rhG-CSF动员前和动员后第5天抽取供者外周血分离单个核细胞(PBMNC),在PBMNC中加入CD3单克隆抗体和rhIL-2以激活T细胞,培养96小时后检测T细胞增殖率和细胞毒性,并进一步对动员前后激活的T细胞用流式细胞术检测Fas表达率,用RT-PCR检测穿孔素(perforin)和Fas配体(FasL)mRNA表达情况,应用放射免疫分析方法检测细胞的γ干扰素(IFN-γ)分泌情况。结果发现,供者外周血T细胞增殖能力在应用rhG-CSF后下降(68.5±15.1)%(P<0.05);动员后CD3单克隆抗体和rhIL-2激活后T细胞对K562细胞的细胞毒性均比动员前细胞有显著减弱(P<0.05);动员前后T细胞在激活后的Fas表达率无明显差异(P>0.10);动员前后T细胞在激活后均表达perforinmRNA,不表达FasLmRNA;动员前T细胞激活后分泌IFN-γ的能力明显高于动员后(P<0.01)。结论:rhG-CSF动员致使供者T细胞在CD3单克隆抗体与rhIL-2激活后的增殖率和细胞毒性下降。     

MAG方案对恶性血液病患者造血干细胞动员作用的研究

目的　研究米托蒽醌 (MTZ)联合大剂量阿糖胞苷 (Ara C)、重组人粒细胞集落刺激因子(rhG CSF)组成MAG方案对恶性血液病患者外周血干细胞的动员作用。方法　 1995年 12月至2 0 0 3年 4月 ,采用MAG方案对 14例恶性淋巴瘤和 2 9例急性白血病患者外周血干细胞进行动员 ,其用量为MTZ 10mg/m2 ,第 2 ,3天 ;Ara C 2 g/m2 ,每 12h 1次 ,第 1,2天 ;rhG CSF 30 0 μg/d。首先用MA方案联合化疗 ,白细胞 <1.0× 10 9/L时开始用rhG CSF ,白细胞回升时用CS 30 0 0plus或CobeSpectra血细胞分离机采集外周血干细胞。结果　 14例恶性淋巴瘤患者除 1例外周血干细胞采集失败外 ,其余 13例均 1次性采集成功 ,所得单个核细胞 (MNC) (3.91± 2 .70 )× 10 8/kg ,CD34 细胞 (17.79± 12 .90 )× 10 6/kg。采集 2 9例急性白血病患者外周血干细胞平均 2 .13次 ,2 4例采集成功 ,5例采集失败 ,所得MNC (3.6 2± 2 .89)× 10 8/kg ,CD34 细胞 (7.37± 6 .6 0 )× 10 6/kg。rhG CSF平均使用时间为 7d。经MAG方案动员后 ,除 8例患者有胃肠道反应、14例患者骨髓抑制期合并感染外无明显不良反应 ,无动员相关死亡。MAG方案动员后进行微小残留病检测 ,部分病例转为阴性。结论　MAG方案在恶性淋巴瘤和急性白血病患者外周血干细胞动员中安全     

Changes in immunological and virological parameters in HIV-1 infected subjects following leukapheresis

In order to assess immune responses during HIV-1 therapeutic immunization, a large number of blood mononuclear cells (PBMC) are needed. Clinical tolerance and safety, as well as changes in immunological and virological parameters, were assessed, following leukapheresis in HIV-1 infected subjects with CD4(+) cell count >200 x 10(6)/l. PBMC were collected using a Fenwal CS3000 cell separator in 29 subjects with mean CD4(+) cell counts of 503 x 10(6)/l (range 172-1,119) and viral load of 2.5 log(10) copies/ml (range <1.7-5.4). Twenty-four (83%) subjects were on antiretroviral therapy while 5 (17%) were untreated. The blood volume processed was 7 L over a period of 3 hours. A mean value (+/- standard error) of 82 +/- 26 x 10(9)/l lymphocytes was collected by a single apheresis in a mean volume of 200 +/- 1.8 ml, containing 9.0 +/- 1.3 x 10(9)/l CD4(+) and 10.2 +/- 1.3 x 10(9)/l CD8(+) cells. The leukapheresis procedures were well tolerated and no immediate or delayed side effects were observed within 90 days of follow-up. No changes from blood pre-leukapheresis values were detected for white blood cells, lymphocytes, monocytes, CD8(+), CD34(+), naive and memory CD4(+) cell counts immediately after, 1 h, 7 days, or within 90 days after leukapheresis. However, absolute CD4(+) cell counts and percentage significantly increased from pre-leukapheresis values after 1 h (530 +/- 43 vs. 700 +/- 75 cell x 10(6)/l; 32.6 +/- 1.6 vs. 36.9 +/- 1.9%; P < 0.001 for both paired t-tests) before returning to pre-leukapheresis levels on day 7. No significant changes in viral load from pre-leukapheresis levels in treated or untreated subjects were detected at any time points. We conclude that leukapheresis in HIV-1 infected subjects with CD4(+) cell counts >200 x 10(6)/l is safe and induces a transient increase in the absolute and percentage of CD4(+) cell count without enhancing viral replication.     

G-CSF对供者外周血CD34+细胞黏附分子表达的影响

目的通过观察健康供者外周血CD34+细胞黏附分子表达的变化,探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员的机制及其对供者的影响。方法应用流式细胞仪分析15名健康供者在接受G-CSF10μg.kg-1.d-1动员前(Pre-G)、动员d4和停止动员后7d(Pro-G)外周血CD34+细胞比例及其表面黏附分子非常延迟抗原-5(VLA-5,CD49e)和L-选择素(CD62L)的表达情况。结果G-CSF动员后供者外周血CD34+细胞比例较动员前增高5-10倍,停止动员后恢复至动员前水平。G-CSF动员后CD34+CD49e+细胞比例(97.74%)明显高于动员前(79.95%),停止动员后7d CD34+CD49e+细胞比例基本恢复至动员前水平;CD34+CD62L+细胞比例在G-CSF动员过程中无明显改变;CD34+细胞表面CD49e与CD62L的平均荧光强度于动员后呈减弱趋势,但无显著统计学意义。结论G-CSF动员后d4可显著增加供者外周血CD34+细胞比例,可致CD34+CD49e+细胞比例一过性增加,但不影响CD34+CD62L+细胞群的比例。