宫颈端粒酶hTERC基因的表达和人乳头瘤病毒的型别关系的临床研究

目的：探讨宫颈细胞中端粒酶hTERC基因的扩增和感染人乳头瘤病毒（HPV）的型别关系,为预测宫颈病变发展,和宫颈癌（SCC）的早期诊断提供新的临床思路。方法：收集2010年12月至2012年7月我院和广西医科大学附属肿瘤医院门诊病理诊断为宫颈炎、宫颈内瘤样变（CIN）及SCC患者的宫颈脱落细胞标本,采用Fish技术进行端粒酶hTERC基因检测和采用RCR-反向点杂交法进行HPV定性检测并加以分型。结果：宫颈炎、CINI、CINⅡ、CINⅢ患者宫颈脱落细胞hTERC基因阳性的表达率分别为4%、16.66%、28.57%、57.14%。,在hTERC基因阳性表达中,宫颈炎、CINI、CINⅡ中无HPV16,18感染,CINⅢ中HPV16,18的感染率为18.75%。SCC患者宫颈脱落细胞hTERC基因阳性的表达率为81.81%,在hTERC基因阳性的表达中HPV16,18的感染率为77.77%。SCC患者与宫颈炎、CIN患者TERC基因阳性表达率差异有统计学意义（P〈0.001）,SCC患者感染HPV16,18这两种型别与CIN患者有统计学差异（P〈0.001）。结论：宫颈癌中感染HPV16,18与hTERC基因扩增有密切的关系,两者均为阳性可作宫颈癌的预测指标之一。     

FISH技术检测宫颈上皮细胞中hTERC基因扩增的临床研究

目的：应用荧光原位杂交技术（FISH）检测人类染色体末端酶hTERC在宫颈上皮脱落细胞中的扩增,研究hTERC基因在不同程度宫颈病变的表达及临床意义。方法：采用TCT低渗制片法,FISH检测15例宫颈良性病变、27例宫颈上皮内瘤变（CINⅠ14例、CINⅡ8例、CINⅢ5例）、37例浸润性子宫颈鳞癌（SC）、4例子宫颈腺癌以及13例人乳头瘤病毒（HPV）阳性妇女的宫颈脱落细胞中hTERC基因的表达。结果：FISH检测宫颈上皮脱落细胞hTERC基因异常扩增率43.62%（41/94）;在宫颈良性病变、宫颈上皮内瘤变、SC、宫颈腺癌以及HPV阳性各组中发生hTERC基因异常扩增的百分比例分别为6.67%、11.11%、83.78%、100%、15.38%;CIN组hTERC基因异常中CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ（包括原位癌）分别占7.69%、12.5%、20.0%,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：hTERC基因扩增随宫颈疾病程度加重递增,CIN组中随级别增高其阳性表达率亦明显增加;FISH检测hTERC基因异常扩增可能有助于早期宫颈疾病的筛查,并有望对宫颈病变的进展及评估预后等提供新方法。     

宫颈上皮内瘤变石蜡标本 hTERC 基因检测与高危型人乳头瘤病毒分型测定的临床意义

目的：探讨宫颈上皮内瘤变石蜡标本中人染色体端粒酶基因（ hTERC）表达情况及其与高危型人乳头瘤病毒测定的临床意义。方法收集2009年10月至2012年10月湖北民族学院附属民大医院及暨南大学附属第一医院148例宫颈石蜡组织标本,其中对照组20例（正常宫颈）,研究组128例（ CINⅠ级30例,CINⅡ级53例,CINⅢ级45例）。应用荧光原位杂交（ FISH）技术检测其hTERC基因的表达并采用凯普HPV－DNA分型测定上述受试者高危型人乳头瘤病毒感染情况。结果（1）随着宫颈病变级别增高,hTERC基因阳性表达率增加。不同级别宫颈上皮内瘤变hTERC基因扩增率与正常对照组比较,差异有显著统计学意义（χ^2＝63．707,P ＜0．05）; CINⅡ级及以上病变的hTERC基因扩增率明显高于CINⅠ级,差异有显著统计学意义（χ^2＝36．973,P＜0．05）。（2）受试者中高危型HPV感染阳性率为74．3％（110／148）,高危型HPV感染阳性组hTERC基因扩增率和阴性组相比较,差异具有统计学意义（χ^2＝26．9,P＜0．05）。结论宫颈上皮内瘤变组织中hTERC基因扩增与HPV感染具有一定相关性。     

hTERC基因在宫颈病变中的表达及临床意义初步探讨

目的初步探讨hTERC基因异常扩增在宫颈病变中的表达及临床意义。方法应用FISH技术检测炎症组25例、CINI36例、CINⅡ／／Ⅲ22例、宫颈癌（SCC）23例宫颈脱落细胞中hTERC基因。结果hTERC基因在炎症组、CINⅠ组、CINⅡ／Ⅲ组、SCC组表达阳性率分别为1／25（4％）、7／36（19．4％）、17／22（77．3％）、23／23（100％）。炎症组与CINI组比较阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）。炎症组、CINI与CINⅡ／Ⅲ和SCC组间阳性表达率存在显著性差异（P〈0．01）。结论hTERC基因异常扩增程度随着宫颈脱落细胞病变的进展而增加,可能对早期宫颈病变进展有一定的预测意义。     

hTERC基因与宫颈癌发生、发展相关性

目的 探讨分析人染色体端粒酶基因（hTERC）与宫颈癌发生、发展相关性。方法 选取笔者医院妇科收治的经阴道镜宫颈活检结果异常的患者173例,再选择同期行宫颈检查无异常的40例作为正常对照,采用荧光原位杂交技术（FISH）检测受试者宫颈脱落细胞标本hTERC基因的表达情况,并分析HPV感染与hTERC阳性率之间的关系。结果 正常对照组hTERC阳性率7.50%、CINⅠ患者hTERC阳性率15.79%、CINⅡ患者hTERC阳性率46.15%、CINⅢ患者hTERC阳性率68.63%、宫颈癌患者hTERC阳性率91.11%,随着宫颈脱落细胞病变的进程,hTERC阳性率显著递增（P<0.05）;高危型HPV感染合并hTERC阳性患者其癌前病变及癌比例为100.00%,显著高于高危型HPV感染的hTERC阳性患者以及无高危型HPV感染患者（P<0.05）。结论 hTERC基因扩增参与到了宫颈癌的发生、发展过程当中,随着宫颈病变分级的增加而呈上升趋势,hTERC基因阳性表达对宫颈癌的早期诊断具有一定的临床价值。     

宫颈病变中人类染色体端粒酶基因与高危型人乳头瘤病毒感染相关性研究

目的 应用荧光原位杂交技术(FISH)探讨宫颈病变中人类染色体端粒酶(hTERC)基因的异常扩增情况及其与人乳头瘤病毒(HPV)感染在宫颈病变中的关系.方法 对115例宫颈疾病患者,以病理检查为"金标准",根据宫颈活检病理诊断结果将其分为4组:对照组(包括宫颈组织正常及宫颈炎症)、宫颈上皮内瘤样变(CIN)Ⅰ组、CINⅡ~Ⅲ组和宫颈浸润癌组,对患者宫颈分泌物分别进行HPV杂交捕获Ⅱ代(HPV-HC2)检测、FISH检测.结果 (1)hTERC基因在对照组、CINⅠ组、CINⅡ~Ⅲ组和宫颈浸润癌中组的扩增率分别为21.1%、86.7%、93.8%和100.0%.宫颈浸润癌组、CINⅠ组和CINⅡ~Ⅲ组hTERC基因扩增率与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).(2)83例HPV阳性患者中,hTERC基因扩增率为91.6% (76/83),32例HPV阴性患者中,hTERC基因扩增率为43.7% (14/32),差异有统计学意义(P＜0.05).(3)hTERC基因扩增与HPV阳性率的相关系数为0.520,两种检测方法有很好的一致性,hTERC基因检测总体评价高于HPV-HC2的检测.结论 hTERC基因的扩增与宫颈病变程度及HPV感染呈正相关,其扩增提示CIN有恶性进展潜能,其扩增情况可作为CIN病情进展的预测指标.     

FISH技术检测宫颈病变中hTERC基因的表达及意义

目的:检测宫颈癌和宫颈上皮内瘤变中的hTERC基因的扩增情况。方法:采用双色荧光原位杂交技术(FISH)检测100例宫颈病变脱落细胞中的hTERC基因表达。结果:良性细胞学病变、不典型鳞状细胞(ASC)、低度鳞状上皮内瘤变(LSIL)、高度鳞状上皮内瘤变(HSIL)脱落细胞hTERC基因阳性表达率分别为9.09%、25.00%、54.29%、91.67%。慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈癌脱落细胞hTERC基因阳性表达率分别为6.67%、14.29%、64.71%、75.00%、90.24%。结论:慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ到宫颈癌的hTERC基因阳性表达率逐渐增高,宫颈低度病变与高度病变hTERC基因检测可成为临床检查宫颈癌的新手段。     

宫颈脱落细胞中hTERC基因表达与宫颈病变及HPV感染的关系

目的 探讨宫颈脱落细胞中人类染色体端粒酶mRNA基因(hTERC)扩增与宫颈病变程度及不同亚型人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法 宫颈上皮内瘤样变(CIN)患者34例,其中CINⅠ 8例,CINⅡ 9例,CIN Ⅲ(包括宫颈原位鳞癌)17例;浸润型宫颈鳞癌(ISCC) 36例;慢性宫颈炎患者20例。对上述患者液基薄层细胞学检测(TCT)剩余样本应用荧光原位杂交技术(FISH)检测hTERC基因,快速导流杂交基因芯片技术检测HPV感染亚型,分析hTERC扩增与宫颈病变程度、HPV感染的关系。结果 慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、ISCC中hTERC扩增率分别为0.00%(0/20)、50.00%(4/8)、77.78%(7/9)、82.35%(14/17)和9722%(35/36),随着宫颈病变程度的增加,hTERC扩增率增高,组间两两比较差异均有统计学意义 (P＜0.05);慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、ISCC中HPV感染率分别为10.00%(2/20)、37.50%(3/8)、66.67%(6/9)、88.24%(15/17)、9167%(33/36);HPV16型阳性、其他高危型阳性、阴性/低危型阳性组中hTERC扩增率分别为90.38%(47/52)、66.67%(4/6)、28.13%(9/32),组间比较差异具有统计学意义(P＜0.01)。 结论 hTERC扩增与宫颈病变的进展和HPV感染密切相关;HPV16型感染可能是导致高级别宫颈病变的主要原因,HPV58、33、52型在CIN及ISCC病变中也有一定优势作用。     

端粒酶基因在宫颈脱落细胞中的表达及其临床意义

[目的]探讨人类染色体端粒酶(hTERC)基因在宫颈脱落细胞中的表达及其临床意义。[方法]收集2008年3月~2009年3月就诊于大连医科大学附属第一医院妇产科患者的宫颈脱落细胞标本,选取细胞学及组织学均正常的20例标本建立阈值,并选取100例细胞学异常或组织学异常标本,共120例宫颈脱落细胞标本参与实验,荧光原位杂交(FISH)方法检测脱落细胞hTERC基因。[结果]CINⅡ/Ⅲ及宫颈癌组与正常组及CINⅠ组比较,hTERC基因阳性表达率均明显增高(P<0.05),且宫颈癌组表达率高于CINⅡ/Ⅲ组(P<0.05)。细胞学分级AS-CUS及以上各组与正常组比较,hTERC基因阳性表达率均增高(P<0.05),且HSIL组及宫颈癌组表达率均较AS-CUS组及LSIL组增高(P<0.05)。组织学分级中,CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌的基因扩增异常细胞数目均高于正常组(P<0.05)。CINⅡ及以上级别病变基因扩增异常细胞数目约为(27±17)%,其单侧95%可信区间为μ>23.6%。hTERC基因对ASCUS样本的高级别病变阳性预测值为91%,阴性预测值为94%。[结论]hTERC基因在CINⅡ/Ⅲ和宫颈癌中表达异常,且随病变程度增加阳性表达率增加。hTERC基因扩增异常细胞数≥24%可能成为检测CINⅡ及以上高级别病变的独立生物学指标并对ASCUS分流有一定的指导意义。     

hTERC基因检测与HC2、SPR技术检测HPV在宫颈病变中的诊断价值

目的研究在不同宫颈组织中hTERC基因的表达情况及其与高危型HPV阳性的相关性,探讨其在宫颈病变中的诊断价值。方法选取昆明医科大学第二附属医院就诊的1 200例宫颈癌筛查患者,分别用HC2、SPR法和FISH技术获取HPV感染和hTERC基因扩增情况,任何具有阳性结果的患者均通过组织活检作为确诊金标准。根据病理活检结果进行分组:正常组32例,CINI38例,CNII-CINIII66例,宫颈癌14例。结果hTERC基因在各宫颈病变分组中的表达率分别为12.5%、34.21%、53.03%、85.71%,hTERC基因表达率在各病理级别间的差异有统计学意义（χ2=28.90,P=0.000）;随着宫颈病变的进展,HC2、SPR技术检测HPV感染率逐渐升高,hTERC基因表达也随着增长,且与二者呈正相关（r1=0.538, P1=0.000;r2=0.796,P2=0.000）。结论hTERC基因异常扩增和HPV感染率随组织病变升级而升高,二者联合检测对判断早期宫颈病变有指示作用。     

端粒酶和人乳头病毒16/18在宫颈癌中的表达及其临床意义

目的:探讨端粒酶(hTERC)和人乳头病毒(HPV)16/18在宫颈癌中的表达及其临床诊断意义。方法:随机选择2009年3月～2012年3月,我院妇产科收治的宫颈癌确诊病例40例作为观察组。同时,随机选择在本院门诊就诊的宫颈诊断正常40例病理标本作为对照组。分别采用聚合酶链反应(PCR)技术和重复片段扩增方法银染定性法(TRAP-PCR),对所有样本宫颈组织中hTERC和HPVl6/18的感染和表达情况进行检测。利用SPSS17.0软件运用Logistic分析各组HPVl6/18和hTERC的感染和表达与宫颈病变的关联性。结果:宫颈癌组hTERC阳性率为60.0%,显著高于正常宫颈组的2.5%(P<0.01);HPV-16/18阳性率达到92.50%,显著高于正常宫颈组阳性率7.50%(P<0.01);宫颈癌易感性与hTERC、HPV16和HPV18阳性率关联关联系数分别为3.94、4.022和4.73,均达到显著水平(P<0.05)。结论:hTERC基因表达和HPV16/18感染与宫颈癌宫颈组织病变有密切的关联性,在宫颈癌发生发展中起重要作用,两者可以作为宫颈癌早期诊断的临床指标之一。     

Van-Clear和二甲苯在荧光原位杂交技术检测#br# 宫颈hTERC基因中的应用

目的：观察Van-clear(环保透明脱蜡液)替代二甲苯(传统透明脱蜡液)在荧光原位杂交技术检测宫颈组织中人端粒酶核糖核酸组分(human telomerase RNA component,hTERC)基因扩增中的结果,探讨其替代二甲苯的可行性。方法：收集2005年1月至2月于中山市博爱医院妇科住院部送检的278例宫颈组织标本。包括正常组81例,宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)1级组68例,CIN2级组57例,CIN3级／原位癌组42例,宫颈浸润癌组30例。同一病变部位取材2块,分两组,一组采用二甲苯透明制作切片278张;另一组采用Van-clear透明制作切片278张。采用荧光原位杂交技术检测两组宫颈活检标本中hTERC基因的扩增变化情况。结果：两组间对应的各级宫颈病变中,hTERC基因阳性表达率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论：用Van-Clear替代二甲苯对荧光原位杂交技术检测宫颈组织hTERC基因阳性表达率无明显影响,Van-clear作为环保产品,在荧光原位杂交技术检测宫颈hTERC基因中有一定的推广应用价值。     

Clinical significance of combined detection of human papilloma virus infection and human telomerase RNA component gene amplification in patients with squamous cell carcinoma of the esophagus in northern China

Background

The aim of the study was to test for human papilloma virus (HPV) infection and human telomerase RNA component (hTERC) gene amplification in tissues derived from esophageal cancer, in esophagus displaying atypical hyperplasia and in normal tissue, and to analyze the relationship between them and discuss whether HPV infection and hTERC gene amplification play a role in the duration of survival of esophageal cancer patients.

Methods

To test for HPV infection, surface plasma resonance was used after extracting and subjecting the DNA to PCR amplification. Measurement of hTERC gene amplification was performed by the fluorescence in situ hybridization technique.

Results

The rates of HPV infection in the normal group, the atypical esophageal hyperplasia group and the cancer group were 0% (0/40), 10.00% (1/10) and 20.65% (19/92), respectively, with a statistically significant difference of P < 0.01. The hTERC gene amplification rate in normal tissue, grade I atypical hyperplastic tissue, grade II/III atypical hyperplastic tissue and esophageal cancer tissue were 0% (0/89), 15.38% (4/26), 47.06% (8/17) and 89.13% (82/92), respectively, with a statistically significant difference of P < 0.01. On follow-up of 92 patients, survival curves of the HPV-positive and HPV-negative groups were not significantly different (P > 0.05). Survival curves of the hTERC gene amplification-positive and hTERC gene amplification-negative groups were statistically significant (P < 0.05). A matching chi-square test showed that there was no correlation between HPV infection and hTERC gene amplification (P > 0.05).

Conclusion

HPV infection may be one of many factors contributing to the development of esophageal cancer, but it does not influence prognosis. Amplification of the hTERC gene appears to influence certain features associated with postoperative survival in esophageal carcinoma patients.     

宫颈病变患者人乳头瘤病毒16亚型E2基因多态性检测

目的分析宫颈病变中人乳头瘤病毒（HPV）16亚型E2基因的多态与宫颈病变的关系,了解E2基因变异情况及其与宫颈
病变的相关性。方法应用PCR和高分辨率熔解曲线方法针对379例HPV高危亚型阳性宫颈脱落细胞样本进行HPV16感染
情况及HPV16亚型E2基因68位点和133位点多态分布情况进行检测。结果379例HPV高危亚型阳性宫颈标本共检出78例
HPV16亚型阳性,其在宫颈癌、CINⅡ~Ⅲ、CINⅠ、炎症患者中的检出率分别为44.8%、31.5%、24.1%和9.6%;HPV16E2基因
68C和133G的频率在中重度宫颈内瘤样病变和宫颈癌中明显高于轻度上皮内瘤样病变和炎症患者（P<0.05）。结论HPV16是
导致宫颈恶性病变的重要致病因素;随着病理类型的进展,HPV16感染率也逐渐增加;同时基因位点改变说明HPV16E2基因
单核苷酸变异可能使致癌能力发生改变。
     

hTERC基因检测在青海地区藏族妇女宫颈病变诊断中的临床意义

目的：探讨应用FISH技术检测人端粒酶基因（human telomerase gene,hTERC）异常扩增在青海地区藏族妇女宫颈病变筛查中的临床意义。方法：选择400例门诊高危藏族妇女患者为研究对象,分别进行液基细胞学检查（LCT）、人乳头状瘤病毒（HC-Ⅱ HPV-DNA）检测,同时进行hTERC基因FISH检测。对上述结果有一项阳性者行阴道镜活组织病理检查。并与病理结果金标准相对比。结果：400例患者中LCT正常细胞学患者320例,非典型细胞（ASC）17例,低度病变（LSIL）43例,高度病变（HSIL）18例,宫颈癌2例。HC-Ⅱ HPV-DNA检测阳性者133例。hTERC基因异常扩增在正常组织学中12例,LSIL中13例,HSIL中19例,宫颈癌中2例,阳性率分别为3.61%、28.26%、95.00%、100.00%。其阳性率在正常组与LSIL和HSIL及宫颈癌组比较,hTERC基因异常扩增阳性率随着病变程度增加而增加,各组间差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：hTERC基因的异常扩增随病变加重而增加,其检出率也提高。在宫颈癌发生、发展中起重要作用,对预测早期病变进展有预测意义。联合应用LCT和HPV-DNA检测可显著提高宫颈癌的早期检出水平。     

hTERC基因在宫颈病变脱落细胞中的表达及临床意义

目的:探讨人端粒酶RNA(hTERC)基因在宫颈病变脱落细胞中的表达及临床意义。方法:收集100例妇女宫颈脱落细胞标本,经病理学检查确诊,正常宫颈20例,CINI 11例,CINⅡ11例,CINⅢ8例,鳞癌30例,腺癌20例。应用荧光原位杂交(FISH)技术检测脱落细胞中hTERC基因的表达,比较其在不同病变细胞中的表达差异情况。结果:hTERC基因在正常宫颈脱落细胞、CINI、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌中的阳性表达率分别为0.00、18.18%、63.63%、100.00%、100.00%,CINⅡ组显著高于CINI组,CINⅢ、宫颈癌组显著高于CINI、CINⅡ组,差异有统计学意义(P<0.05)。随宫颈病变级别增高,hTERC基因扩增的阳性率显著增高,且异常细胞数和异常核型的复杂性均显著增多。结论:hTERC基因扩增表达水平随着宫颈病变级别增高而增加,能很好地预测宫颈病变的发展趋势,有望成为宫颈癌筛查、治疗及评估预后的重要指标之一。     

宫颈疾病3 328例临床分析

目的探讨宫颈疾病发病情况及特点，为宫颈癌早诊早治提供依据。方法对2002年1月-2004年12月就诊的3328例宫颈疾病病人的临床资料进行回顾性分析。结果宫颈炎性病变占88％，宫颈上皮内瘤样变占7％，宫颈浸润癌占0．3％。HPV感染阳性632例，其中宫颈上皮内瘤样变HPV感染率为64％。宫颈浸润癌HPV感染率为90％。宫颈良性病变中HPV的阳性率明显低于宫颈上皮内瘤样变及宫颈癌患者（P〈0．01）。HPV感染的高峰年龄为18．28岁，宫颈癌及癌前病变的高峰年龄为30．48岁。高危HPV持续感染、多性伴、性传播疾病者是发病的高危因素。蛄论认真对待宫颈炎性病变，对HPV阳性者进行积极的跟踪、筛查是宫颈癌早期预防、诊治的重点。30—48岁是城市医院宫颈疾病诊治、宫颈癌防治的重点人群。     

Expression and significance of SHP-2 in human papillomavirus infected cervical cancer

This study investigated the expression and prognostic value of SHP-2 in cervical cancer caused by human papillomavirus (HPV) infection. Forty-five specimens from patients with cervical can-cer (stageⅠ-Ⅲ), 32 specimens from patients with cervical intraepithelial neoplasia (CIN) (Ⅰ, Ⅱ) and 20 normal cervical samples from patients with hysteromyoma were collected in Department of Pathol-ogy for comparison. The expression levels of SHP-2 and IFN-β proteins were detected by using immu-nohistochemistry. The mRNA expression level of SHP-2 was detected by using quantitative real-time polymerase chain reaction (PCR). HPVs were detected by HPV GenoArray Test. The Spearman corre-lation was used to compare the expression level of SHP-2 in HPV infected cervical cancer vs non-HPV infected normal cervix. The level of SHP-2 protein expression in the cancer tissues (88.8%) was sig-nificantly higher than in CIN tissues (62.5%) and normal cervixes (45%) (P<0.05 and P<0.05, respec-tively). The SHP-2 mRNA levels in the cancer tissues were upregulated as compared with those in the normal cervixes (P<0.05). Twenty-one (46.7%) cervical cancers, 25 (78.1%) CINs and 17 (85%) normal cervixes showed IFN-β positive staining in cytoplasm. There was statistically significant difference in the expression rate of IFN-β between cervical cancer and normal cervix (χ2=8.378, P<0.05) as well as between cervical cancer and CIN (χ2=7.695, P<0.05). HPV16/18 infections could be found in normal cervixs (15%), CINs (68.7%) and cervical cancers (84.4%). There was a correlation between HPV in-fection and SHP-2 expression in cervical cancer (rs=0.653, P<0.05). SHP-2 may be a useful prognostic and diagnostic indicator for HPV infected cervical cancer. In cervical cancers, SHP-2 mRNA and pro-tein overexpression was associated with IFN-β lower-expression.