应用组织芯片研究肺癌及癌前病变组织中FHIT的表达及其意义

背景与目的 脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)是候选抑癌基因,在多种与环境致癌物有关的恶性肿瘤中常有FHIT的改变.本研究利用组织芯片技术检测FHIT在不同进展阶段肺癌中的表达,探讨其在肺癌发生、发展中的作用和意义.方法 应用免疫组织化学SP法检测270点组织芯片中FHIT蛋白的表达,其中原发肺癌89例、淋巴结转移性肺癌12例以及肺癌癌前病变12例,并结合肺癌的临床病理特征进行分析.结果 FHIT蛋白阳性产物主要定位于胞浆.在原发性肺癌、癌前病变组织和淋巴结转移癌组织中FHIT表达缺失率分别为46.1%、41.7%和50.0%,而在10例正常肺组织中FHIT均有表达.原发性肺癌组、癌前病变组和转移癌组FHIT蛋白的表达缺失率均高于正常组(P＜0.05);原发癌与转移癌、原发癌与癌前病变、癌前病变与转移癌之间FHIT表达差别无统计学意义(P＞0.05),且FHIT表达缺失与肺癌组织学类型、分化程度以及患者的吸烟史相关且有统计学意义(P＜0.05),而与性别、年龄、临床分期、是否伴有淋巴结转移以及肉眼类型无关(P＞0.05).结论 FHIT在肺癌和癌前病变中表达下降,尤其在鳞癌、低分化组和吸烟病例中表达缺失率高,FHIT表达缺失可能与肺癌早期发生、发展及吸烟致癌过程有密切的关系.     

组织芯片研究直肠癌中肿瘤相关基因的表达

目的 探讨人直肠癌和相应癌旁正常直肠黏膜组织中肿瘤相关基因的表达及其临床意义。方法 取54例直肠癌、40例癌旁直肠黏膜组织制成54点和130点两块组织芯片,采用免疫组织化学法检测直肠组织芯片中p53、cyclinD1、bcl-2、β-catenin、c-myc、COX-2以及nm23-h1的表达。结果 p53、cyclinD1、bcl-2、β-catenin、c-myc、COX-2以及nm23-h1在直肠癌和正常直肠黏膜组织中的表达差异有统计学意义（P<0.05）, 其中p53与bcl-2表达之间呈正相关（r=0.332,P=0.001）, β-catenin与c-myc的表达呈正相关(r=0.447,P=0.000)。在直肠癌组织中,β-catenin与年龄有关,＞60岁患者中β-catenin表达率高于＜60岁患者（P=0.032）。β-catenin和bcl-2虽与组织学有关,但却表现为分化程度高组织表达率高（P=0.001,P=0.006）。cyclinD1的表达与临床分期有关（P=0.039）,与其他病理资料无关。nm23-h1的表达与组织分化程度、远处转移以及Duke分期有关（P=0.003,P=0.022,P=0.002）,与其他临床病理资料无关。p53 、c-myc、COX-2的表达与临床病理资料无关。结论 p53、cyclinD1、bcl-2、β-catenin、c-myc、COX-2以及nm23-h1的异常表达与直肠癌的发生可能有关,尤其是p53、cyclinD1、bcl-2的高表达可能有助于直肠癌的早期诊断。cyclinD1的表达可能还参与了直肠癌的临床进展,nm23-h1与肿瘤的转移相关,该基因的低表达预示肿瘤的较强侵袭潜能。     

应用组织芯片技术研究上皮性卵巢癌组织中VEGF的表达及意义

目的:检测人上皮性卵巢癌组织及卵巢良性肿瘤组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)的表达,探讨二者在卵巢癌演进和异质化过程中的特点及它们之间的关系及意义。方法:应用组织芯片技术和免疫组织化学染色方法对87例石蜡包埋的人上皮性卵巢癌组织和42例卵巢良性肿瘤组织进行VEGF蛋白检测。结果:在卵巢癌组织中VEGF的高表达率为73.6%,而在卵巢良性肿瘤组织中其高表达率为33.3%,两者差异有显著性统计学意义(P<0.01);有淋巴结转移者VEGF的高表达率为86.2%,无淋巴结转移者的高表达率为65.5%,两者VEGF的表达差异有统计学意义(P<0.01);在有淋巴结转移的肿瘤中MVD明显高于无转移组肿瘤MVD(P<0.01)。结论:VEGF高表达与上皮性卵巢癌的发生及其病理特征和生物学行为有密切的关系。VEGF可能是影响上皮性卵巢癌中血管生成的重要因素之一。     

应用组织芯片技术研究上皮性卵巢癌组织中VEGF的表达及意义

目的：检测人上皮性卵巢癌组织及卵巢良性肿瘤组织中血管内皮生长因子（vascular endothelial growthfactor,VEGF）的表达,探讨二者在卵巢癌演进和异质化过程中的特点及它们之间的关系及意义。方法：应用组织芯片技术和免疫组织化学染色方法对87例石蜡包埋的人上皮性卵巢癌组织和42例卵巢良性肿瘤组织进行VEGF蛋白检测。结果：在卵巢癌组织中VEGF的高表达率为73.6%,而在卵巢良性肿瘤组织中其高表达率为33.3%,两者差异有显著性统计学意义（P〈0.01）;有淋巴结转移者VEGF的高表达率为86.2%,无淋巴结转移者的高表达率为65.5%,两者VEGF的表达差异有统计学意义（P〈0.01）;在有淋巴结转移的肿瘤中MVD明显高于无转移组肿瘤MVD（P〈0.01）。结论：VEGF高表达与上皮性卵巢癌的发生及其病理特征和生物学行为有密切的关系。VEGF可能是影响上皮性卵巢癌中血管生成的重要因素之一。     

应用组织芯片技术研究肺癌组织中VEGF表达及其意义

目的：检测VEGF在人肺癌组织中的表达并与肺癌生物学特点及预后的关系进行研究。方法：采用回顾性队列研究，选取肺癌病例126例，运用组织芯片技术制成肺癌组织芯片，免疫组化法对标本中VEGF表达进行检测，同时对所选病例进行回访及随访。结果：126例肺癌在研究结束时仍存活40例，死亡76例，失访10例，中位生存时间34．2月。VEGF在各种组织类型中均有表达，阳性98例（77．8％）；其表达与年龄、性别、肿瘤病理分类、肿瘤M分期的P〉0．05；与肿瘤T分期及临床分期间具有相关性（P〈0．05）；COX比例风险回归模型分析示：T2、N1、N2、M1的P〈0．05。VEGF阳性表达与N分期间关系无统计学意义（P〉0．05）。结论：VEGF在人肺癌组织中有高表达，且能作为患者生存时间预测的单因素影响因子，是手术切除后肺癌病例预后较差的标志。     

利用组织芯片技术研究胃癌及其癌前病变中Bax、p53、Survivin表达的关系及意义

目的：探讨细胞凋亡相关基因Bax、Smwivin、p53编码蛋白异常表达在胃癌发生发展过程中的作用及相关分子病理学机制。方法：构建胃癌及其癌前病变组织芯片，采用Envisien免疫组化方法检测凋亡相关基因编码蛋白表达。结果：Bax在胃癌组织中的表达率（17．7％，17／96）显著低于正常胃粘膜、肠上皮化生、不典型增生组织中的表达（51．0％、69．2％、75．0％），P〈0．01；Smwivin编码蛋白在胃癌组织中的表达率（80．6％，89／98）显著高于正常胃粘膜、肠上皮化生、不典型增生组织中的表达（阳性率分别为3．9％、91.4％、100％），P〈0．01；胃癌转移组Smwivin蛋白表达率（淋巴结转移86.2％；肝脏转移组100％：卵巢转移组100％）显著高于无转移组（64．3％），P〈0．05。胃癌组织中Bax与Smwivin蛋白表达呈负相关P〈0．05，而与mp53蛋白表达无关，P〉0.05；Smwivin与mp53蛋白表达呈正相关，P〈0．05。结论：p53基因突变导致凋亡异常可能与其对Smwivin表达调控失识关系更为密切，Bax表达下调与Smwivin表达上调可能共同在胃粘膜癌变和癌变后的恶性演进过程中起重要作用．二者．联合检测有望作为预警胃癌发生和转移的病理生物学标志．     

组织芯片技术检测大肠癌组织中Ki-67的表达

[目的]研究大肠癌组织中Ki—67的表达及其意义。[方法]采用组织芯片技术制作80例大肠癌组织芯片，同时用SP免疫组织化学方法检测大肠癌组织芯片中Ki—67的表达。[结果]80例大肠癌中管状腺癌、黏液腺癌和乳头状腺癌的Ki—67高表达率分别为61.3％、46．1％和40．0％；黏膜及黏膜下层、肌层、浆膜层、浆膜外的Ki—67高表达率分别为0％、32．1％、72．2％和91．7％；淋巴结转移阳性组和阴性组的Ki—67高表达率分别为79．2％和14．8％。[结论]Ki—67的表达与大肠癌组织学类型无关，与大肠癌淋巴结转移状况密切相关，与大肠癌的浸润进展程度有一定关系。应用组织芯片大规模检测临床组织样本，具有快速、方便、经济、准确的特点。     

应用组织芯片技术研究人类胰腺癌中PSCA的表达

目的检测PSCA在胰腺癌中的表达情况,探讨PSCA在胰腺癌发病中所起的作用。方法用组织芯片技术构建包含78例导管腺癌,12例慢性胰腺炎病人,10例正常胰腺组织的100点阵的石蜡组织芯片。用免疫组化SP法检测该芯片中PSCA的表达,分析其与胰腺癌临床病理因素的关系。结果78例胰腺癌病人中,PSCA阳性表达率为79．5％（62／78）,与正常组比较PSCA表达与胰腺癌显著相关（χ^2=15．81,P〈0．005）,与慢性胰腺炎比较PSCA亦与胰腺癌显著相关（χ^2=11．33,P〈0．005）;PSCA表达与年龄、性别、组织分化程度及TNM分期无明显相关性。结论PSCA阳性表达与胰腺癌相关,可能与胰腺癌的发生发展有着密切关系,但与胰腺癌的临床病理特型无关。     

应用组织芯片技术分析宫颈癌组织中Bit 1基因的表达

目的：对比研究Bitl基因在正常宫颈组织和不同分化程度的宫颈癌组织中的表达情况。方法：应用组织芯片技术，通过免疫组织化学方法检测84例宫颈癌标本和74例正常宫颈组织标本中Bitl基因的表达情况。结果：Bitl基因在宫颈癌和正常宫颈组织中的表达阳性率分别为66．7％和83．8％，有显著统计学差异（P〈0．05）；Bitl基因在不同分化程度的宫颈癌组织中的阳性率分别为：低分化鳞状细胞癌，52．9％；中分化鳞状细胞癌，78．6％；高分化鳞状细胞癌，87．5％。统计学分析发现，Bitl基因在不同分化程度的的宫颈癌组织中的表达存在显著的统计学差异（P=0．028）。结论：Bitl基因在正常宫颈组织中的表达明显高于宫颈癌组织，而且宫颈癌组织中Bitl基因的表达与分化程度密切相关。     

组织芯片技术应用于石蜡包埋鼻咽癌组织的研究

组织芯片技术(tissuechip)又称组织微阵列(tissuemicroarray,TMA)是由Kononen[1] 等在1998年首次提出这一概念的,TMA是将数十个至数百个小的组织片整齐的排在某一载体上(通常是载玻片)而成的微缩组织切片。在肿瘤研究领域中,TMA对于肿瘤易感因素判断、病因学及发病机制、诊断和鉴别诊断、治疗及预后评估等方面均有重要作用。TMA分机器和手工两种制作方法,在本研究中我成功的建立了手工TMA技术并将其应用于石蜡包埋鼻咽癌组织的免疫组化研究,现介绍如下。1　材料与方法1.1　材料　为制作组织芯片,从湖南省肿瘤医院病理科的存档蜡块中…     

肝细胞癌中Lumican和Parkin的表达及意义

目的探讨肝细胞癌组织中Lumican蛋白及Parkin蛋白的表达及意义,并分析两者的相关性。方法应用免疫组织化学S-P法检测62例肝癌患者癌组织及62例癌旁组织中Lumican及Parkin蛋白的表达并分析其与临床病理因素之间的关系。结果 (1)肝癌组织中Lumican、Parkin的阳性表达率分别为35.5%、32.3%,与癌旁组织的阳性表达率比较(66.1%、72.6%),差异具有统计学意义(P<0.05);(2)Lumican蛋白的表达与Edmondson分级及是否伴有门静脉癌栓相关(P<0.05),而与性别、肿瘤大小、HBsAg、肝硬化和AFP无关(P>0.05);(3)Parkin蛋白的表达与患者肝癌Edmondson分级、AFP水平、是否伴有门静脉癌栓相关(P<0.05),而与性别、肿瘤大小、HBsAg和肝硬化无关(P>0.05);(4)Lumican与Parkin呈正相关(r=0.450;P<0.05)。结论 Lumican与Parkin蛋白在肝细胞癌组织中表达率均较低,可能与肝癌的发生、发展有关,联合检测两者对肝癌的诊断和预后有着重要意义,有望成为肝癌治疗的新靶点。     

大肠癌组织Lumican基因及蛋白的表达及临床意义

目的：检测人大肠癌组织中Lumican基因及蛋白的表达,探讨其与大肠癌患者临床病理指标及预后之间的关系。方法：收集外科手术切除并经病理证实的27例新鲜大肠癌组织标本,以同一患者远离肿瘤的正常大肠组织为对照,采用实时荧光定量PCR法检测Lumican基因表达,剩余组织采用石蜡包埋用于免疫组化检测Lumican蛋白。另从我院病理科收集同期37例大肠癌组织蜡块,采用免疫组化SP法共检测64例大肠癌组织、27例正常大肠黏膜组织中Lumican蛋白表达。结果：27例新鲜大肠癌组织及对应正常大肠组织中Lumican的表达有显著差异性（ P〈0.001）,Lumican mRNA在大肠癌组织表达明显增高[以正常组织为1,癌组织Lumican基因表达上调（5.35±0.66）倍]。64例大肠癌组织Lumican蛋白阳性表达率为73.44%（47/64）,显著高于远离肿瘤的正常组织表达率0%（0/27）（P〈0.05）。Lumican表达与肿瘤的病理分级、Dukes分期、淋巴结是否转移有关（P〈0.001）,而与患者性别、年龄、病变部位无关（P〉0.05）。27例大肠癌标本Lu-mican蛋白量与mRNA相对表达量呈正相关（r=0.123）,但无统计学意义（P〉0.05）。结论：人大肠癌组织Lumican mRNA及蛋白均表达升高,Lumican高表达与大肠癌的临床病理特征及侵袭、转移特性密切相关,在大肠癌发生、发展过程可能起着重要作用。Lumican可作为判断大肠癌生物学行为的重要指标之一。     

基膜聚糖基因在侵袭转移子宫内膜癌组织中的表达

目的探讨不同侵袭、转移性的子宫内膜癌组织中基膜聚糖基因(Lumican)的表达差异性。方法选取48例子宫内膜癌以及正常内膜组织,采用半定量RT-PCR及Western blot分别检测LumicanmRNA及蛋白表达水平,SPSS 13.0软件包统计分析Lumican在不同侵袭、转移性的子宫内膜癌组织中的表达差异性。结果 Lumican mRNA及蛋白在内膜癌组织中表达明显低于正常内膜组织[(0.54±0.042)vs.(0.87±0.035);(0.42±0.026)vs.(0.83±0.037)],且表达水平间的差异有统计学意义(P<0.05)。48例子宫内膜癌组织中,子宫浅肌层侵犯组(22例)、子宫深肌层侵犯组(11例)或宫颈及宫旁侵犯组(11例)、淋巴结转移组(4例)四组之间组织中Lumican mRNA及蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05);子宫深肌层侵犯与宫颈及宫旁侵犯组之间Lumican表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Lumican在子宫内膜癌组织中表达水平下调;Lumican的表达与子宫内膜癌组织侵袭、转移性负相关。Lumican的低表达可能参与子宫内膜癌的侵袭、转移恶性生物学行为过程。     

Expression of ABCG2 and its Significance in Colorectal Cancer

The expression of ABCG2 in colorectal cancer and its relationship with invasion and metastasis is still not clear. In our study, immunohistochemical staining of ABCG2 was therefore performed for 60 cases of primary colorectal cancer. ABCG2 positive cancer cells were found to be mainly positioned in the front of carcinomatous tissue or between carcinomatous and non-carcinomatous margin tissues. In carcinomatous tissues and non-carcinomatous margin tissues, high expression rates forABCG2 were 36.7% (22/60) and 3.3% (2/60) respectively, with significant difference (χ2=5773.3, P<0.001). The rates of high expression of ABCG2 were 30% (9/30) and 6.7% (2/30) in 30 cases with and without positive lymph nodes, respectively. (χ2=5.45, P<0.025). From the present results expression of ABCG2 may be important in the progression and metastasis of colorectal cancer.     

Lumican在肿瘤中表达及作用的相关研究进展

Lumican属于富含亮氨酸重复序列的小分子蛋白聚糖家族（small leucine-rich repeat proteoglycans,SLRPs）。近年来许多研究表明Lumican参与调节细胞稳态以及细胞功能。且Lumican基因的表达也与多种恶性肿瘤有关,但Lumican在肿瘤中的表达及其作用仍不是很明确。本文简述Lumican的结构、功能,重点描述Lumican在不同肿瘤中的表达情况、作用及作用机制,并对Lumican的诊断意义和深层研究进行了展望。     

大肠癌组织中α-catenin的表达及临床意义

目的 :研究α catenin的表达与大肠癌浸润、转移的相关性。方法 :应用免疫组化方法检测 4 4例大肠癌标本中α catenin的表达。结果 :正常大肠黏膜强烈表达α catenin ,而原发灶中α catenin表达明显减少 ,其表达减少与大肠癌的生长方式、分化程度、浸润等明显相关。结论 :α catenin的表达减少与大肠癌的浸润、转移明显相关     

大肠癌组织c-met与VEGF的表达及意义

[目的]研究肝细胞生长因子（HGF）受体c-met与血管内皮生长因子（VEGF）在大肠癌组织中的表达,探讨两者与肿瘤微血管生成及临床病理特征间的关系。[方法]采用免疫组化法检测56例（其中41例癌旁正常黏膜）大肠癌组织中c-met、VEGF表达以及MVD参数。[结果]c-met、VEGF在大肠癌组织中的阳性表达率分别为67.8%和53.6%;在癌旁正常黏膜组织中的阳性率分别为12.2%和14.6%（P〈0.001）。c-met、VEGF的阳性标本MVD值与其阴性标本之间有显著性差异（P〈0.05）。VEGF表达与肿瘤浸润深度、Dukes’分期及淋巴结转移情况有关（P〈0.05）,而与分化程度、年龄、性别无关（P〉0.05）。c-met表达与肿瘤分化程度、Dukes’分期、浸润深度及淋巴结转移情况有关（P〈0.05）,而与性别、年龄无关（P〉0.05）。c-met表达与VEGF表达趋于一致。[结论]c-met、VEGF在大肠癌组织中的表达显著高于癌旁黏膜组织。c-met与VEGF相互作用共同促进肿瘤血管生成。     

C-myc在结直肠癌和息肉中的表达及其意义

[目的]探讨c-myc在结直肠癌发生、发展中的作用及其与临床病理特征的相关性。[方法]采用免疫组织化学SP法检测60例结直肠癌组织、60例结直肠息肉组织、30例结直肠癌旁组织中c-myc蛋白表达。[结果]结直肠癌、结直肠腺瘤性息肉组织中c-myc蛋白表达阳性率明显高于结直肠增生性息肉及癌旁黏膜组织。c-myc蛋白高表达与结肠癌发病部位、肿瘤分化程度、Dukes分期、淋巴结转移有关（P均〈0.05）。c-myc蛋白高表达与结直肠腺瘤性息肉大小以及息肉有蒂或无蒂相关（P〈0.05）。[结论]c-myc表达与结直肠癌发生、发展有关。主题词：结直肠息肉;结直肠肿瘤;c-myc;免疫组织化学     

结直肠癌肝转移的TACE治疗进展

目的：总结经肝动脉化疗栓塞术及联合多种方法治疗结直肠癌肝转移的疗效,并对目前治疗现状进行分析。方法：以＂结直肠癌/肝转移/经肝动脉化疗栓塞术/分析＂为关键词,检索PubM ed、CHKD期刊全文数据库及近5年有关TACE对结直肠癌肝转移治疗方面的文献并进行分析。结果：以TACE为主的综合治疗对延长患者生存期有益,是治疗结直肠癌肝转移的有效方法。结论：对于结直肠癌肝转移采取包括TACE在内的多学科综合治疗提高了不可切除结直肠癌肝转移患者的总体疗效,但仍需要随机大样本循证医学证据。     

Expression of BMP6 is Associated with its Methylation Status in Colorectal Cancer Tissue but Lacks Prognostic Significance

Background: The study aimed to evaluate the incidence of CpG island promoter methylation of BMP6, a member of the transforming growth factor beta family, in tissue samples from colorectal cancers (CRC) and look for its association with BMP6 expression and clinicopathological correlation. Materials and Methods: Methylation specific PCR for the BMP6 promoter region was performed with 85 frozen tissue samples of CRC and 45 of normal colon. Methylation status of MLH1 was also determined by the same method. Expression of BMP6 was evaluated by immunohistochemistry (IHC), using Allred’s scoring system. The methylation status was analyzed against clinical and pathological parameters in CRC. Results: The study revealed BMP6 hypermethylation in 34 of 85 tumor specimens (40%), and 15 out of 45 normal tissue samples from CRC (33%). The incidence ofhypermethylation was inversely correlated with IHC score. Allred’s scores of 7 or more were correlated with lower frequency of BMP6 hypermethylation (29% compared to 50% in the remaining, p-value 0.049). However, there was no association between hypermethylation status and any clinicopathological parameters. The methylation status of BMP6 was not correlated with that of MLH1, a key methylation determinant in CRC. On survival analysis, there was no significant difference in progress-free survival (PFS) between the cases with and without hypermethylation (2-year PFS 74% and 76%, respectively). Conclusions: CpG island methylation of BMP6 is found in high frequency in CRC and this epigenetic event is associated with suppressed protein expression in the tumor tissue. However, the marker is not associated with tumor progression of the disease.