虫草肾茶颗粒对单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化模型CTGFmRNA的影响

目的观察虫草肾茶颗粒对单侧输尿管结扎致肾间质纤维化模型大鼠肾组织CTGFmRNA的影响。方法将60只雄性wistar大鼠随机分为五组,分别为假手术组、模型组、中药对照组、西药对照组、治疗组,每组12只。采用单侧输尿管结扎法制作肾间质纤维化模型,治疗组给予虫草肾茶为4ml.d-1.只-1;西药对照组给予福辛普利为1.5ml.d-1.只-1的水溶液;中药对照组给予肾衰宁胶囊4ml.d-1.只-1,1次/d给药;假手术组及模型组给予相同体积的生理盐水灌胃,1次/d。实验期间每周称一次体重,并观察大鼠生存状况。于第6周末处死大鼠,留取肾组织,应用realtime-PCR检测各组肾组织CTGFmRNA的表达。结果治疗组大鼠肾组织CTGFmRNA的表达与模型组相比明显下调。结论虫草肾茶颗粒可以部分抑制CTGF在单侧输尿管结扎大鼠肾组织的表达。     

抗纤灵对5/6肾切除大鼠肾组织α-SMA和Ⅰ型胶原的影响

目的采用5/6肾切除方法建立慢性肾衰竭动物模型,观察抗纤灵对5/6肾切除大鼠肾组织α-SMA和Ⅰ型胶原的影响。方法将SD大鼠随机分为假手术组和造模组,造模组以5/6肾切除方法建立慢性肾衰竭动物模型,1周后按血肌酐水平将造模大鼠分为模型组、福辛普利组和抗纤灵组。福辛普利组给予3.3mg.kg-1.d-1福辛普利灌胃,抗纤灵组给予23g.kg-1.d-1抗纤灵灌胃,模型组和假手术组给予等量生理盐水灌胃,8周后采用免疫组化、实时荧光定量PCR(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Westernblot)测定各组大鼠肾组织α-SMA和Ⅰ型胶原基因和蛋白的表达。结果模型组大鼠肾组织中肾小管及间质区Ⅰ型胶原及α-SMA表达较假手术组明显升高(P<0.01),抗纤灵组与模型组比较均明显下降(P<0.01);模型组大鼠表达α-SMAmRNA和Ⅰ型胶原mRNA水平较假手术组明显升高(P<0.001),抗纤灵组与模型组比较均明显下降(P<0.01或P<0.05);模型组大鼠表达α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白水平较假手术组明显升高(P<0.001),抗纤灵组与模型组比较均显著下降(P<0.001)。结论抗纤灵可降低肾间质成纤维细胞α-SMA的表达,减少肌成纤维细胞的活化与形成,继而使细胞外基质Ⅰ型胶原生成减少,从而延缓慢性肾衰竭大鼠肾纤维化进程,保护残肾功能。     

川芎嗪对5/6肾切除大鼠肾组织PPAR-γ表达的影响

近几年多篇报道认为川芎嗪可以调节慢性肾病病人血脂,保护肾功能[1,2].但对其机制目前仍在探讨中.过氧化脂质体增殖激活受体-γ(PPAR-γ)是配体激活的转录子,具有参与调节细胞生长、炎症反应、脂代谢及胰岛素敏感性等作用[3].本文研究川芎嗪对PPAR-γ的影响来探讨川芎嗪降血脂、保护肾功能的机制.     

抗纤灵对5/6肾切除诱导慢性肾脏纤维化小鼠模型细胞外基质的影响

目的探讨抗纤灵对5/6肾切除诱导的慢性肾脏纤维化小鼠模型肾组织细胞外基质(ECM)的影响。方法C57BL/6J雄性小鼠,采用5/6肾切除制备慢性肾脏纤维化模型,2周后根据肌酐水平把手术组小鼠分为模型组,雷帕霉素和抗纤灵组,同时设立假手术组,每组10只,雷帕霉素,抗纤灵组分别给予雷帕霉素(0.00 016 g/kg),抗纤灵(0.4 g/(kg·d)灌胃治疗,模型组和假手术组等量蒸馏水,连续用药4周后处死小鼠,免疫荧光法测定肾组织I型胶原(ColⅠ),Ⅲ型胶原(Col Ⅲ),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)纤维化面积;RT-PCR法检测肾组中,Co Ⅰ,Col Ⅲ,α-SMAmRNA的表达。结果与假手组比较,模型组Co Ⅰ,Col Ⅲ,α-SMA胶原纤维化面积比值明显增加,Co Ⅰ,Col Ⅲ,α-SMAmRNA显著增高(P < 0.01),与模型组比较,雷帕霉素,抗纤灵组胶原纤维面积比值,mRNA表达水平均有所降低(P < 0.01)。雷帕霉素与抗纤灵组比较,两者之间无显著性差异。结论抗纤灵具有雷帕霉素类似的作用,能够通过抑制小鼠肾组织Co Ⅰ,Col Ⅲ,α-SMAmRNA的表达,减少Co Ⅰ,Col Ⅲ,α-SMA纤维化面积,对肾纤维化有一定的改善作用。     

延肾口服液对肾间质纤维化大鼠肾组织转化生长因子-β和α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的 探讨延肾口服液对肾间质纤维化(RIF)大鼠的影响及可能的作用机制.方法 将75只SD雄性大鼠按随机数字表法分为假手术组和模型组,采用单侧输尿管梗阻(UUO)复制RIF模型,成模大鼠再随机分为模型组、贝那普利组及延肾口服液高、低剂量组,每组15只.术前1 d治疗组开始灌胃贝那普利3.5 ml/d及延肾口服液2.8 ml/d、1.4 ml/d;假手术组、模型组给予等量生理盐水.术后8周留取血、尿标本,行血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)及尿肌酐(UCr)、尿尿素氮(UUN)和24 h尿蛋白定量测定;处死大鼠取肾组织,苏木素-伊红(HE)染色观察各组RIF程度;用免疫组化二步法和半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定转化生长因子-β(TGF-β)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白和mRNA表达.结果 ①光镜下观察,模型组肾小管上皮细胞呈现不同程度的萎缩、变性及坏死,小管周围肾间质间隙增宽;贝那普利组和延肾口服液高、低剂量组部分肾小管轻度扩张,病变程度轻于模型组.②与假手术组比较,模型组UUN、UCr、BUN及TGF-β、α-SMA的蛋白和mRNA表达均明显升高(均P＜0.01);与模型组比较,贝那普利组及延肾口服液高、低剂量组TGF-β、α-SMA蛋白和mRNA[吸光度(A)值]表达均显著减少,以延肾口服液高剂量组减少更显著(TGF-β蛋白:0.72±0.24比1.78±0.33,α-SMA蛋白:0.87±0.55比1.59±0.44;TGF-β mRNA:1.68±0.53比3.14±0.44,α-SMA mRNA:1.66±0.14比3.41±0.10,均P＜0.01);贝那普利组和延肾口服液高、低剂量组UUN(mmol/L)、UCr(μmol/L)、BUN(mmol/L)均明显降低(P＜0.05或P＜0.01),以延肾口服液高剂量组降低更显著(UUN:0.56±0.19比1.34±0.22,UCr:2788.00±178.98比3652.75±188.26,BUN:7.25±0.47比16.30±0.47,均P＜0.01),延肾口服液高剂量组与贝那普利组相比差异无统计学意义(均P＞0.05),SCr及24 h尿蛋白定量在各组间比较差异均无统计学意义 (均P＞0.05).结论 延肾口服液延缓UUO 模型大鼠RIF的作用与其抑制TGF-β和α-SMA表达有关,其疗效与贝那普利组相似,并表现出明显的量效关系.     

整合素连接激酶和α-平滑肌肌动蛋白在肾间质纤维化动物模型中的表达及意义

摘要] 目的：探讨整合素连接激酶(ILK)和α-平滑肌肌动蛋白(α- SMA)在肾间质纤维化中的作用及意义。方法： 通过结扎单侧输尿管建立大鼠肾间质纤维化模型，随机分为假手术组、模型组和对照组，术后1、3、7、14d处死各组大鼠，取梗阻侧肾做HE、PAS及Masson染色，并用免疫组化方法检测ILK和α- SMA的表达；RT-PCR检测ILK的mRNA表达。结果：ILK主要表达于病变肾小管上皮细胞和一些肾间质细胞胞浆,并且随间质病变的加重,表达量增加,范围增大。 在正常组织中，α－SMA仅表达于血管壁。但在损害间质中，可见它表达于损害的肾小管上皮细胞和间质细胞,且随着损害程度的加重而增加。ILK、α- SMA 与间质纤维化程度呈正相关，其在间质中的表达量也成正相关。结论: 随着间质病变程度的加重, ILK、α－SMA的表达量明显增加，说明与肾间质纤维化的形成有密切关系。     

清肾颗粒对5/6肾切除大鼠肾组织线粒体自噬及肾小管上皮-间质细胞转化的影响

目的：探讨清肾颗粒对5/6肾切除大鼠肾组织线粒体自噬及肾小管上皮细胞转分化（Epithelial-mesenchymal,EMT）的影响。方法：雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组、模型组、清肾颗粒组,每组各10只。除假手术组外,其余20只大鼠均制作5/6肾切除模型。清肾颗粒各组分别给予相应剂量清肾颗粒水溶液;假手术组、模型组以生理盐水灌胃。连续给药8周后,无菌采取腹主动脉血,代谢笼留取24h尿液,摘取左侧肾脏。检测血、尿肌酐浓度,并计算内生肌酐清除率;Western blot法检测肾组织中Pink1、Parkin、LC3-Ⅱ、α-SMA;免疫荧光法检测肾组织中LC3-Ⅱ和线粒体膜蛋白VDAC1共定位表达;HE和Masson染色光镜观察大鼠肾脏病理改变;透射电镜检测肾小管上皮细胞中线粒体的超微结构。结果：与假手术组比较,模型组大鼠的线粒体自噬相关蛋白Pink1、Parkin、LC3Ⅱ表达量均显著下降,肾小管EMT标志蛋白α-SMA显著升高（P<0.05）。与模型组比较,清肾颗粒组大鼠的Pink1、LC3Ⅱ蛋白表达量显著升高,α-SMA表达量显著降低（P<0.05）,Park...     

虫草肾茶颗粒对单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠肾脏影响的研究

目的观察虫草肾茶颗粒对单侧输尿管结扎致肾间质纤维化模型大鼠的肾脏保护作用,并探讨其机制。方法将60只雄性wistar大鼠随机分为五组,分别为假手术组、模型组、中药对照组、西药对照组、治疗组,每组12只。采用单侧输尿管结扎法制作肾间质纤维化模型,治疗组给予虫草肾茶为4ml·d-1·只-1;西药对照组给予福辛普利为1.5mg·d-1·只-1(浓度为0.375mg/ml)的水溶液;中药对照组给予肾衰宁胶囊4ml·d-1·只-1(相当于生药0.9g·ml·只-1),每日1次给药;假手术组及模型组给予相同体积的生理盐水灌胃,每日1次。实验期间每周称一次体重,并观察大鼠生存状况。分别于第2周、4周、6周采血,进行血肌酐(Scr)、尿素氯(BUN)检测。于第6周末处死大鼠,观察肾脏组织形态学变化,通过免疫组织化学方法检测各组大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)、核因子-κB(NF-κB)的表达。结果 (1)治疗组大鼠生存质量优于模型组;(2)治疗组大鼠各时间点BUN、Scr水平低于模型组,与中药对照组、西药对照组相比也有所降低;(3)治疗组大鼠肾组织CTGF、NF-κB的表达与模型组相比明显下调。结论虫草肾茶颗粒可通过减少CTGF、NF-κB在单侧输尿管结扎大鼠肾组织的表达,部分抑制肾间质纤维化的发生,保护肾脏,并能明显改善单侧输尿管结扎大鼠的生存质量,总体疗效优于肾衰宁及福辛普利。     

洛汀新对5/6肾切除大鼠肾脏保护作用及对转化生长因子-β1表达的影响

肾间质纤维化是各种慢性肾脏病进展至终末期肾衰的共同病变过程,研究如何减缓其进展对保护肾功能具有重大的临床意义.5/6肾切除大鼠模型造模是研究肾小管间质损害的理想模型[1].血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作为一种血管活性物质可引起肾脏血流动力学异常,但近年来人们更加关注它引起的肾脏疾病进展的非血流动力学机制,目前认为AngⅡ是一种促生长因子,在肾小球硬化及肾小管间质纤维化过程中起十分重要的作用.     

非洛地平对5/6肾大部分切除大鼠心肌细胞L型钙电流的影响

目的 探讨非洛地平对5／6肾大部分切除大鼠心肌细胞L型钙电流的影响。方法 5／6肾大部分切除手术制作肾功能衰竭大鼠模型，使用膜片钳全细胞记录技术记录心肌细胞L型钙电流。结果 5／6肾切除大鼠心肌细胞L型钙电流明显增大，稳态失活曲线左移。非洛地平能够逆转L型钙电流的增大，但未能逆转通道失活性质的改变。结论慢性肾衰竭可能引起心肌细胞钙操纵的改变，非洛地平可以逆转这种改变，还能促进L型钙离子通道的电压依赖性失活。     

骨髓间充质干细胞移植急性放射性肝损伤大鼠α-平滑肌肌动蛋白的表达

背景:放射性肝损伤极大限制了放射治疗的临床应用.研究发现,肘损伤环境是骨髓间充质干细胞适宜的分化环境,提示通过骨髓间充质干细胞移植治疗放射性肝损伤成为可能.目的:验证骨髓间充质干细胞移植对大鼠急性放射性肝损伤中α-平滑肌肌动蛋白表达水平的影响.方法:分离培养雄性大鼠的骨髓间充质干细胞,取P3代细胞作为移植细胞.建立雌性SD大鼠急性放射性肝损伤模型.随机分成两组,在放疗结束后4 h内,干预组经尾静脉输注骨髓间充质干细胞悬液,对照组输注等量生理盐水.采用免疫组织化学技术检测肝脏组织中的α-平滑肌肌动蛋白的阳性表达水平;采用原位杂交技术检测肝脏组织中性别决定基因Y(SrY)的存在;光镜观察肝脏组织的病理形态学变化.结果与结论:干预组大鼠肝右叶中α-SMA的平均阳性表达率低于对照组(P<0.05).干预组大鼠肝右叶检测到携带SrY的阳性细胞多于肝脏左叶(P<0.05),对照组中未检测到携带SrY的阳性细胞.干预组大鼠肝右叶的损伤程度比对照组轻.结果证实,急性放射性肝损伤可以诱导雄性大鼠的骨髓间充质干细胞的"归巢",骨髓间充质干细胞对大鼠急性放射性肝损伤中α-平滑肌肌动蛋白表达水平有下调作用.     

银杏达莫注射液对糖尿病大鼠唾液腺组织脂质过氧化作用的影响

目的研究银杏达莫注射液对实验性2型糖尿病大鼠腮腺和颌下腺组织脂质过氧化作用。方法 Wistar大鼠喂以高糖高脂饲料加链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病大鼠模型。将Wistar大鼠随机分为健康对照组、糖尿病模型组、银杏达莫注射液组。8周后摘取大鼠腮腺及颌下腺组织,应用比色法测定两种组织中丙二醛(MDA)含量,总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力及总抗氧化能力(T-AOC)。结果在腮腺中,糖尿病组MDA较对照组降低(P<0.05),治疗组与糖尿病组差异无统计学意义;T-SOD活力各组间差异无统计学意义;T-AOC能力糖尿病组比对照组升高,治疗组比糖尿病组T-AOC能力升高。在颌下腺中,糖尿病组MDA较对照组升高(P<0.05),治疗后MDA水平没有改变;T-SOD活力各组间差异无统计学意义;治疗组T-AOC能力与糖尿病组差异无统计学意义。结论实验性2型糖尿病大鼠,在腮腺和颌下腺引起不同的脂质过氧化反应;银杏达莫注射液可提高腮腺的抗氧化能力,而颌下腺则无明显变化。     

5/6肾切除大鼠残肾细胞凋亡及凋亡相关基因的表达

目的：观察5／6肾切除大鼠肾脏细胞凋亡及凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Fas和Fas-L的表达变化及其意义。方法：SD大鼠行5／6肾切除,术后6周、12周采集标本,除常规光镜、电镜观察外,利用TUNEL及流式细胞术,观察肾脏细胞凋亡及凋亡相关基因表达的变化,并结合肾功能变化分析肾脏细胞凋亡及凋亡相关基因表达与肾小球、肾小管及间质病变的关系。结果：5／6肾切除大鼠肾脏细胞凋亡增加,凋亡相关基因表达增强,这些变化与肾脏形态和功能变化相平行。结论：肾脏细胞凋亡及凋亡相关基因表达的变化可能参与肾小球硬化、肾小管萎缩及间质纤维化的病理过程。     

温脾汤对5/6肾切除大鼠残余肾脏的保护作用

摘要背景:肾纤维化是几乎所有肾脏疾病进展到终末期肾衰的共同通路,大多数抗肾纤维化的治疗尚处于实验阶段。研究表明中药具有良好的抗肾纤维化应用前景,温脾汤是临床上治疗慢性肾衰、保护肾功能的有效方剂。目的:探讨温脾汤对5/6肾切除大鼠残余肾脏功能和形态学的影响。设计:随机对照的实验研究。地点、材料和干预:本实验在北京中医药大学细胞与生化实验室完成。实验选用雄性Wistar大鼠44只,质量(200±20)g。实验动物于术前按质量随机分组,其中36只大鼠接受5/6肾切除术(分别为温脾汤组、尿毒清组),8只留作假手术组。采用5/6肾切除大鼠模型,动态观察温脾汤对病理大鼠质量、血清肌酐、尿素氮以及24h尿蛋白的影响。并对肾组织六铵银染色(PAM)结果进行光镜观察和图像分析,观察大鼠组织形态学变化。主要观察指标:假手术组大鼠与其他3组肾切除术前,术后4,8,12,16周血清肌酐、尿素氮、24h尿蛋白、体质量比较。结果:温脾汤组术后12,16周时血清肌酐犤(9.4±1.0),(12.8±2.2)mg/L犦显著低于模型组犤(11.7±1.7),(16.1±1.7)mg/L犦,差异有显著性意义(t=4.052,P<0.01)。温脾汤组大鼠血清尿素氮在术后呈缓慢上升趋势,但在术后12,16周时仍明显低于模型组(t=6.504～15.498,P<0.05)。温脾汤和尿毒清组大鼠24h尿蛋白呈缓     

己酮可可碱抗肝纤维化及对I型胶原表达影响的实验研究

目的 研究己酮可可碱对胆管阻塞性肝纤维化大鼠Ⅰ型胶原基因表达的影响和抗纤维化的作用.方法 雄性SD大鼠60只,分为假手术组、肝纤维化模型组、己酮可可碱组.6周后比较各组肝组织学评分,并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)mRNA表达水平,分析其对胶原合成的影响.结果 已酮可可碱能够降低纤维化的组织学评分,降低Col-Ⅰ mRNA表达水平.结论 己酮可可碱在大鼠胆管阻塞性肝纤维化模型中具有一定的抗纤维化作用.     

刺五加注射液对脑缺氧大鼠学习记忆能力和海马组织中纤维状肌动蛋白的影响

目的探讨刺五加注射液(ASI)对脑缺氧大鼠学习记忆的影响。 方法将36只SD雄性大鼠进行编号,采用随机数字表法分为3组,剔除不适应环境的大鼠后余24只大鼠,模型组(颈动脉注射栓塞液,n＝8)和治疗组(颈动脉注射栓塞液,n＝8),正常对照组(颈动脉注射等剂量生理盐水,n＝8)。模型组和治疗组通过颈外动脉逆行穿刺插管注入栓塞液,使其进入颅内,制作大鼠脑缺氧模型;3 d后,治疗组腹腔注射90 mg/(kg·d)刺五加注射液,每日1次,连续7 d,正常对照组和模型组每日腹腔注射等剂量生理盐水。结束后利用水迷宫实验,通过比较各组大鼠4 d的潜伏期和游泳距离,测试大鼠的学习记忆能力,随后检测海马组织中纤维状肌动蛋白(f-actin)的表达情况。潜伏期、游泳距离及f-actin光密度值采用单因素方差分析进行组间比较,两两比较采用LSD法。 结果大鼠第1～4天潜伏期,正常对照组大鼠分别为(48.31±17.13)s、(30.25±16.02)s、(24.25±14.87)s和(14.09±9.06)s,模型组大鼠分别为(54.94±13.09)s、(48.85±17.21)s、(38.41±21.01)s和(26.13±15.82)s,治疗组大鼠分别为(52.28±14.95)s、(36.66±16.90)s、(28.38±15.83)s和(17.03±12.14)s,3组比较均差异有统计学意义(F＝10.29,48.19,156.64,168.74;均P<0.05)。第1～4天游泳距离,正常对照组大鼠分别为(925.54±98.69)cm、(594.47±117.33)cm、(382.38±71.17)cm和(226.58±23.82)cm,模型组大鼠分别为(1 033.61±125.20)cm、(902.09±145.52)cm、(698.86±121.05)cm和(467.27±107.18)cm,治疗组大鼠分别为(930.36±124.51)cm、(662.17±145.40)cm、(412.42±73.98)cm和(233.36±32.48)cm,3组比较均差异有统计学意义(F＝27.30,10.21,5.58,7.88;均P<0.05)。海马组织中f-actin蛋白免疫组化阳性表达,正常对照组、模型组、治疗组大鼠海马组织中f-actin蛋白光密度值分别为0.14±0.01、0.09±0.01、0.11±0.01,3组比较差异有统计学意义(F＝104.37,P<0.05)。 结论刺五加注射液能够减轻脑缺氧大鼠的症状,改善大鼠学习记忆能力。     

川芎嗪对大鼠肝星状细胞胶原合成及瘦素表达的影响

目的：观察川芎嗪对肝星状细胞（HSC）增殖的影响,并观察瘦素及Ⅰ型胶原表达的变化。研究川芎嗪抗肝纤维化作用及机制。方法：培养的大鼠HSC加不同浓度的川芎嗪50、100、200mg／L分组培养。MTT法检测其吸光度,ELISA法检测其上清液瘦素Ⅰ型和胶原水平。结果：4组在培养24h的平均吸光度分别为0．208±0．014、0．192±0．018、0.177±0.016、0．169±0．011。培养48h的平均吸光度分别为：0．411±0．013、0．399±0．016、0．381±0．016、0．365±0．04。其Ⅰ型胶原和瘦素浓度分别为：109．85±18．72、101．84±14．99、91．16±10．80、85．99±10．44（μg／L）和3．488±0．523、2．822±0．529、2．242±0．733、1．534±0．534（μg／L）。川芎嗪抑制HSC增殖,并抑制Ⅰ型胶原表达和瘦素的表达。结论：川芎嗪抑制HSCⅠ型胶原表达。川芎嗪有可能通过抑制HSC增殖和抑制瘦素的分泌发挥抗纤维化作用。     

虫草肾茶胶囊对肾小球硬化早期模型大鼠细胞外基质积聚的影响

目的观察虫草肾茶胶囊对肾小球硬化早期模型大鼠细胞外基质积聚的影响,探讨虫草肾茶胶囊的作用机制。方法将72只大鼠随机分为假手术组(12只)、模型组(20只)、治疗组(20只)、对照组(20只),采用单侧肾切除并阿霉素尾静脉注射法建立肾小球硬化早期大鼠模型。治疗组给予虫草肾茶胶囊(0.47 g.kg-1.d-1)灌胃,对照组给予福辛普利(7.5 mg.kg-1.d-1)灌胃,假手术组与模型组给予等量的蒸馏水灌胃,均为1次/d。分别于造模前与造模后6、8、10、12周观察大鼠24 h尿蛋白定量,于造模前与造模后8、12周观察大鼠血清BUN、Scr的变化。连续给药12周后处死大鼠,在光镜下观察肾脏组织形态学改变,用免疫组织化学方法检测肾组织CTGF、FN、Col-IV的表达。结果虫草肾茶治疗组大鼠的24 h尿蛋白定量在第8、10、12周时低于模型组(P<0.01),治疗组大鼠的BUN、Scr水平在第8、12周时低于模型组(P<0.01),在12周时低于福辛普利对照组(P<0.05或P<0.01)。模型组大鼠在12周末约50%的肾小球有不同程度的硬化,呈局灶节段性分布,间质可见明显纤维化和局灶性炎细胞浸润。与模型组比较,治疗组与对照组的肾小球硬化程度明显减轻。治疗组CTGF、FN、Col-IV在肾小球的表达低于模型组(P<0.05),治疗组CTGF在肾小管-间质的表达低于对照组(P<0.05)。结论虫草肾茶胶囊可以通过减少蛋白尿,降低BUN、Scr,减少细胞外基质主要成分FN、Col-IV的表达,减少致纤维化因子CTGF的表达,起到延缓肾小球硬化早期进展的作用。     

转化生长因子β细胞内信号转导负调控蛋白Smad6，7在肾间质纤维化大鼠肾脏表达与益气活血法的影响

目的:观察肾间质纤维化大鼠肾组织中转化生长因子β细胞内信号转导负调控蛋白Smad6,7表达变化与益气活血法中药制剂的影响。方法:实验于2006-12/2007-06在首都医科大学解剖与组织胚胎学系实验室完成。①实验动物:Wistar雄性大鼠30只,采用随机数字法随机分为模型组、中药大剂量组、中药中剂量组、中药小剂量组、西药蒙诺组、假手术组,每组5只。益气活血法中药提取液(生黄芪15g,当归10g,赤白芍10g,丹参30g,黄芩10g,车前草15g,牛膝15g等)经水提醇沉得4.4kg/L生药提取液。实验过程中对动物处置符合动物伦理学要求。②实验方法:其中前5组行单侧输尿管梗阻致肾小管间质纤维化模型手术。假手术组打开大鼠腹腔后分离左侧输尿管,并不结扎即关闭腹腔。中药大剂量组、中药中剂量组、中药小剂量组、西药蒙诺组,于手术前2d给予灌胃给药0.072mL/(kg·d),0.036mL/(kg·d),0.018mL/(kg·d),10mg/(kg·d),1次/d,连续2周。模型组及假手术组用相同体积的生理盐水灌胃。③实验评估:6组大鼠于术后14d麻醉后处死,观察梗阻肾组织病理改变,用免疫组化方法检测肾组织Smad6,7蛋白表达,通过医学病理图像分析系统对Smad6,7蛋白的积分光密度进行统计学分析。结果:30只大鼠全部进入结果分析。苏木精-伊红染色显示模型组肾小管上皮细胞萎缩,大部分肾小管管腔扩张,间质纤维组织增生,大量炎性细胞浸润,肾小球数目明显减少。中药大剂量组、中剂量组、西药蒙诺组较模型组肾间质炎性细胞浸润、纤维组织增生、肾小管扩张情况明显减轻。Smad6,7蛋白主要在肾皮质肾小管上皮细胞内表达,在模型组它们的表达较假手术组明显减弱且分布面积减少,两组间积分光密度差异具有统计学意义(P<0.05);中药中剂量组、大剂量组、西药蒙诺组Smad6,7蛋白的表达较模型组明显增强、面积增加,积分光密度差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:益气活血法可以通过诱导肾组织Smad6,7蛋白表达而抑制肾间质纤维化。     

冬虫夏草对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞ILK表达的影响

[目的]观察糖尿病大鼠肾小管上皮细胞整合素连接激酶(ILK)的表达及冬虫夏草对其表达的影响.[方法]雄性Wistar大鼠随机分为3组:正常对照组(N组,n=12)、糖尿病模型组(D组,n=12)、糖尿病冬虫夏草干预组[C组,n=12,冬虫夏草1000 mg/(kg·d)灌胃].成模后第8周末及16周末各组分别处死6只大鼠,测定24 h尿蛋白排泄量、血肌酐;HE及MASSON染色法观察肾脏病理改变;免疫组织化学法检测ILK、E钙粘蛋白(E-cad)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及转化生长因子β1(TGF-β1)的表达.[结果]①与N组比较,D组大鼠肾小管间质损伤指数、肾间质胶原面积明显增加(P<0.01).②D组大鼠肾小管上皮细胞E-cad阳性表达显著低于N组,TGF-β1、ILK和α-SMA阳性表达均显著高于N组;E-cad表达和TGF-β1表达呈负相关(rs=-0.60,P<0.05);ILK、α-SMA表达和TGF-β1表达呈正相关(rs=0.88,P<0.01;rs=0.91,P<0.05).③C组大鼠肾小管间质损伤指数、肾闻质胶原面积较D组明显减弱,其肾小管上皮细胞的E-cad的表达较D组明显增加,TGF-β1、ILK和α-SMA表达较D组均明显减弱(P<0.01).[结论]冬虫夏草能通过下调ILK表达发挥肾脏保护作用.