金葡菌肠毒素B对哮喘豚鼠高迁移率族蛋白B1表达的影响及意义

目的：探讨金葡菌肠毒素B（staphylococcal enterotoxin B,SEB）对支气管哮喘豚鼠模型支气管肺泡液高迁移率族蛋白B1（high mobility group protein B1,HMGB1）及Th1／Th2细胞因子水平的影响。方法：18只豚鼠随机分为对照组6只、支气管哮喘豚鼠模型组6只和SEB组6只,模型组用卵白蛋白（ovalbumin,OVA）建立豚鼠哮喘模型,SEB组在OVA致敏前10d于腹腔注射SEB1 ml（10mg／L）,对照组注射等量生理盐水。支气管哮喘诱发后2d,收集支气管肺泡灌洗液进行自细胞和嗜酸性粒细胞计数,WB法测定HMGB1水平,ELISA法检测细胞因子IFN-γ和IL-4水平。结果：模型组肺泡灌洗液白细胞数、嗜酸性粒细胞数及比例、HMGB1水平和IL-4浓度显著升高,IFN-γ浓度显著降低。SEB组白细胞数、嗜酸性粒细胞数量及比例、HMGB1水平和IL-4浓度屁著低于模型组,IFN-γ浓度高于模型组。结论：SEB能减少哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液中HMGB1水平及嗜酸性粒细胞数量及比例,其机制可能与Th1／Th2细胞因子比值调节有关。     

核因子NF-κB对气道平滑肌细胞增殖的影响

目的：研究核因子-κB（NF-κB）对大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）增殖活性的影响。方法：体外培养ASMCs，采用EMSA法直接检测ASMC中NF-κB的活性，MTT法、细胞周期检测及细胞核增殖抗原（PCNA）的免疫细胞化学染色法观察细胞增殖情况。结果：血小板活化因子刺激后ASMC中NF-κB明显活化，各细胞增殖指标均显著增高（P〈0．05），NAC可显著抑制上述效应（P〈0．05）。结论：NF-κB的活化能直接参与ASMC的增殖。     

烫伤大鼠高迁移率族蛋白B1的变化及其对脾淋巴细胞免疫反应的影响

目的观察高迁移率族蛋白B1（HMGB1）在大鼠烫伤延迟复苏模型中的变化规律及其对淋巴细胞免疫功能的影响。方法96只大鼠随机分为假伤组（n=32）、烫伤组（n=32）和丙酮酸乙酯（EP）治疗组（n=32）,分别于伤后1、3、5、7天活杀动物。应用Western blot方法检测血浆中HMGB1含量,采用噻唑蓝法和ELISA检测脾淋巴细胞增殖能力及培养上清中白介素-4（IL-4）和干扰素-γ（IFN-γ）浓度。结果与假伤组相比,烫伤后1、3、5天大鼠血浆HMGB1含量显著升高（P〈0．05或P〈0．01）。同时,脾淋巴细胞对丝裂原刺激的增殖反应在伤后1～7天明显受抑制（P〈0．05）;伤后1、3天脾淋巴细胞培养上清中IL-4水平明显增加（P〈0．05）,而伤后7天IFN-γ含量显著降低（P〈0．05）。给予丙酮酸乙酯（EP）治疗组1、3、5天血浆HMGB1含量均明显下降（P〈0．05）,并明显减轻伤后1～7天脾淋巴细胞的增殖抑制状态,同时提高IFN-γ水平（P〈0．05）,而IL4水平在伤后1、3天显著降低（P〈0．05）。结论HMGB1对烫伤大鼠脾淋巴细胞免疫功能具有显著影响,它参与了烫伤延迟复苏后机体细胞免疫功能紊乱的发病过程。     

模拟失重对大鼠肺组织NF-κB表达的影响

目的研究模拟失重条件下健康大鼠肺组织中核因子-κB（NF-κB）的表达变化及其意义。方法采用尾悬吊模拟失重大鼠模型,分为悬吊7天、21天组及相应对照组,每组10只健康雄性Wistar大鼠。免疫组织化学法检测肺组织中NF-κB的表达水平。结果悬吊7天及21天组大鼠肺组织NF-κB表达水平与相应对照组比较均显著升高（P〈0．01,P〈0．05）。悬吊21天组大鼠肺组织中NF-κB表达水平较悬吊7天组减弱（P〈0．05）。结论尾悬吊模拟失重大鼠肺组织NF-κB表达水平明显上调,考虑与肺组织损伤有关。     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者血中IL - 2和IFN - γ检测的临床意义

目的：探讨拉米夫定治疗期间慢性乙型肝炎患者血清中IL-2和IFN-γ的水平变化及其临床意义。方法：选择50例服用拉米夫定（100mg／d）的慢性乙型肝炎患者，采集服药前、服药12、24、36及48周时的外周血，利用双抗体夹心ELISA法对IL-2和IFN-γ的水平进行检测。选取10名健康献血员作对照。将两种细胞因子检测结果以平均值为界分成高水平组和低水平组。结果：慢性乙型肝炎患者血清中IL-2和IFN-γ的水平明显高于健康对照组（P〈0．05）；IL-2、IFN-γ两种细胞因子的高水平组的完全应答率均明显高于低水平组（P〈0．05），无应答率明显低于低水平组（P〈0．05）；拉米夫定治疗期间患者血清中IL-2和IFN-γ水平大多数较治疗前上升。高水平组血清中IL-2、IFN-γ水平显著上升，上升幅度较大，以后逐渐下降。结论：IL-2和IFN-γ水平变化与应答状况有一定的相关性，治疗前高水平IL-2、IFN-γ及治疗后患者血清中IL-2和IFN-γ上升水平较高者，应答效果就好。     

核因子-κB与腹部开放伤合并海水浸泡大鼠全身炎症反应综合征的关系

目的探讨腹部开放伤合并海水浸泡大鼠全身炎症反应综合征（SIRS）发生时核因子-κB（NF-κB）的活性与SIRS的关系。方法采用腹部开放伤合并海水浸泡大鼠致伤模型并诱发SIRS。酶联免疫吸附（ELISA）法检测血肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）水平,免疫组化技术检测NF—κB在外周血淋巴细胞（PBL）和小肠组织中的活性。结果腹部开放伤后海水浸泡1小时,大鼠出现SIRS;血TNF—α、IL-6水平升高;免疫组化显示大鼠PBL和小肠组织中NF-κB表达的阳性率显著升高,与对照组比较有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论腹部开放伤合并海水浸泡可致大鼠SIRS,NF-κB和细胞因子参与了SIRS的发生、发展。NF-κB的激活介导了TNF—α、IL-6等细胞因子的释放,在SIRS中可能处于中心环节。     

腹腔注射干扰素对小鼠哮喘模型GATA-3及Th2细胞因子表达的影响

目的研究腹腔注射IFN-γ对支气管哮喘的防治作用及机制。方法36只BALB/c小鼠随机分为3组,正常对照组(A组,12只)、哮喘模型组(B组,12只)、腹腔注射IFN-γ组(C组,12只),B、C组采用卵蛋白(OVA)、氢氧化铝建立哮喘模型,并分别于第23~30天激发前腹腔注射0·25mlPBS液和IFN-γ5μg,1次/天。31天时取肺泡灌洗液(BALF)测定细胞成分、IL-4和IL-5的浓度,取血测定血浆IgE水平,观察肺组织病理学变化及GATA-3的表达。结果C组BALF中的嗜酸性粒细胞(EOS)为0·3±0·2,明显低于B组(21·1±6·7,P<0·01)。C组BALF中的IL-4(3·0±2·5)和IL-5(11·4±3·2)的水平明显低于B组的IL-4(90·5±22·4)和IL-5(55·6±10·7),差异有显著性(P<0·01)。C组血浆中总IgE(24·3±7·6)和OVA特异性IgE(12·3±3·6)水平显著低于B组的IgE(67·2±9·7)和OVA特异性IgE(34·6±7·8),差异有显著性(P<0·01)。HE染色示B组支气管平滑肌肥厚,黏膜充血、水肿,黏膜层增厚,并有EOS为主的炎性细胞浸润,管腔内可见黏液栓,支气管壁周围有EOS为主的炎性细胞浸润,而C组小鼠的上述炎症性改变则明显减轻。免疫组化显示B组肺组织中GATA-3的表达明显增加,而C组GATA-3的表达明显减少,B组与A组及C组GATA-3阳性表达细胞数差异显著(P<0·01)。结论腹腔注射IFN-γ可以抑制哮喘鼠IL-4、IL-5的合成,抑制EOS在气道内的炎性浸润及血浆中总IgE和OVA特异性的IgE水平,其机制可能与IFN-γ阻断GATA-3的表达,从而继发抑制Th2型反应有关。     

黄芪辅助治疗儿童缓解期哮喘疗效观察

目的研究黄芪辅助治疗儿童缓解期哮喘的疗效。方法选择60例哮喘缓解期儿童,分为激素治疗组（对照组）和黄芪加激素治疗组（治疗组）。临床上观察治疗前后PEFR值的变化及1年随访中哮喘的复发次数,并于治疗前后用ELISA法检测外周血清IFN-γ、IL-4的含量。结果治疗组总有效率（93.3%）高于对照组（73.3%）,有统计学意义（χ2=4.706,P〈0.05）。两组治疗前后各指标比较,PEFR%、IFN-γ含量有明显的升高（P〈0.05）,IL-4含量有明显的降低（P〈0.05）;治疗前两组PEFR%、IFN-γ含量、IL-4含量比较无统计学意义（P〉0.05）,治疗后两组各指标比较有统计学意义（P〈0.05）。结论黄芪有预防哮喘复发的作用,黄芪与激素合用,效果更佳。     

咳嗽变异性哮喘病人血中细胞因子表达的临床观察

目的：观察咳嗽变异性哮喘与典型哮喘病人血白细胞介素12（IL-12）、白细胞介素13（IL-13）水平和肺功能的变化。方法：采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），分别检测咳嗽变异性哮喘30例（变异组）、典型哮喘30例（典型组）和15名健康自愿者（对照组）血清中IL-12、IL-13水平，同时测定呼吸阻抗值。结果：IL-12水平：变异组较典型组为高，但差异不显著（P〉0．05），伴呼吸阻抗R5减低（P〈0．05）；两组IL-12与对照组比较均显著下降（P〈0．01），伴R5升高（P〈0．01）。IL-13水平：变异组较典型组为低，但差异不显著（P〉0．05），伴R5减低（P〈0．05）；两组与对照组比较均差异显著增加，伴R5增加（P〈0．01）。相关分析表明，血清中IL—12与呼吸阻抗R5呈负相关，IL-13与呼吸阻抗R5呈正相关；IL-12与IL-13水平呈显著负相关。结论；咳嗽变异性哮喘与典型哮喘病人外周血细胞因子表达相近：IL-13过度产生，IL-12产生不足，咳嗽变异性哮喘可能与典型哮喘的发病机制相同。     

血清和诱导痰中白介素-6在高原地区慢性肺心病发病中的作用和临床意义

目的：探讨白介素-6（IL-6）在高原慢性肺心病发病机制中的作用和意义。方法：高原慢性肺心病急性加重期患者50例（A组）、缓解期患者47例（B组）,健康对照组40例（C组）,分别测血清和诱导痰中IL-6、肺功能和血气。结果：A、B组血清和诱导痰中IL-6、PaCO2水平显著高于C组（P均〈0．01）,FEV,％、FEV1／FVC、PaO2水平显著低于C组（P均〈0．01）;A、B组之间比较差异有显著性（P均〈0．01）;A、B组诱导痰中IL-6水平均显著高于血清（P均〈0．01）。A、B组血清和诱导痰中IL-6与FEVl％、FEVl／FVC、PaO2呈显著负相关（P均〈0．01）,与PaCO2呈显著正相关（P均〈0．01）。结论：IL-6参与了高原慢性肺心病的气道炎症反应。     

不同剂量辛伐他汀对急性冠状动脉综合征患者NF-κB及IL-6的作用

目的观察不同剂量辛伐他汀对急性冠状动脉综合征患者外周血NF-κB及IL-6水平的影响。方法 40例急性冠状动脉综合征患者随机分为2组：10 mg辛伐他汀组（辛伐他汀10 mg/d＋常规用药）和20 mg辛伐他汀组（辛伐他汀20 mg/d＋常规用药）。分别测定治疗前后外周血NF-κB及IL-6的浓度。同期选取40例健康人作对照。结果急性冠状动脉综合征患者外周血NF-κB及IL-6水平测定值均高于对照组（P〈0.01）;两组治疗后NF-κB及IL-6的测定值均低于治疗前水平（P〈0.05）,20 mg辛伐他汀组与10 mg辛伐他汀组相比,降低外周血NF-κB及IL-6水平效果更加明显,二者差异有统计学意义（P〈0.05）。结论辛伐他汀可明显降低急性冠状动脉综合征患者外周血NF-κB及IL-6水平,且随着剂量加大,效果更加明显。     

大蒜素对慢性气道炎症大鼠上皮细胞中NRF2与γ-GCS表达的影响

目的研究大蒜素对慢性气道炎症大鼠上皮细胞中NRF2与γ-GCS表达的影响。方法将30只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和大蒜素治疗组,每组10只。模型组及大蒜素治疗组用两次气管内滴入脂多糖和每日熏香烟法制成大鼠慢性气道炎症模型,大蒜素治疗组在模型制作成功后腹腔注射大蒜素注射液。通过肺组织HE观察气道炎症改变,支气管肺泡灌洗（BALF）细胞记数并分类,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测NRF2mRNA及γ-GCSmRNA表达,检测肺组织GSH、ROS、T-AOC含量。结果大蒜素治疗组气道炎症浸润较模型组明显减轻,大蒜素治疗组BALF中中性粒细胞数目较模型组降低（P〈0.05）;模型组的γ-GCSmRNA及NRF2mRNA表达高于大蒜素治疗组（P〈0.01）;大蒜素治疗组中GSH含量较模型组减少,ROS含量降低,T-AOC上升（P〈0.01）。结论大蒜素可抑制被动吸烟大鼠肺部炎症。     

益肺活血复方对模拟潜艇环境下家兔NO和ET-1的影响

目的模拟潜艇环境,观察益肺活血复方对家兔血清和肺组织匀浆中一氧化氮（NO）及血管内皮素-1（ET-1）含量的影响。方法选用HOPE-MED 8050系列动式染毒系统模拟潜艇环境。家兔随机分为空白组、模型组、益肺活血复方低、高剂量（0．2、0．7g·kg-1·d-1）组、地塞米松（0．2ml·kg-1·d-1）组,每组15只,按照潜艇气体环境造模染毒,每天染毒4h,同时每天肌肉注射给药1次,连续14d后取家兔静脉血清及肺组织匀浆观察NO及ET一1水平变化。结果模型组较空白组血清及肺组织匀浆中NO含量显著升高（P〈0．05）,ET-1水平显著降低（P〈0．05）。益肺活血复方高剂量组及地塞米松组与模型组相比较,血清、肺组织匀浆中NO含量均提高,ET-1水平降低,且均有统计学意义（P〈0．05）。益肺活血复方高剂量较地塞米松提高NO含量效果更加明显（P〈0．05）。益肺活血复方高剂量效果明显优于低剂量（P〈0．05）。结论潜艇环境中部分有害气体长期作用会降低家兔肺组织及血液NO的含量,同时提高ET一1水平,益肺活血复方可以改善这两项指标,对家兔肺组织及血管起到一定的保护作用。     

滨蒿内酯对大鼠哮喘模型气道平滑肌增殖及PKC-α蛋白表达的影响

目的观察滨蒿内酯对哮喘大鼠气道壁平滑肌增殖及PKC-α（protein kinase C-α,蛋白激酶C-α）表达的影响,探讨滨蒿内酯治疗哮喘的作用机制。方法40只雄性大鼠随机分成4组：正常对照组（N组）、哮喘组（A组）、地塞米松治疗组（D组）及滨蒿内酯治疗组（S组）,以卵清蛋白致敏和激发方法建立哮喘大鼠动物模型并给予相应治疗。测定各组肺功能,检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞总数及嗜酸粒细胞（EOS）计数;用免疫组化法检测PKC-α蛋白表达水平、光镜下测定平滑肌层厚度及内外径。结果大鼠致敏2周及诱发哮喘4周后,肺功能测定表现为呼气时间延长,呼气峰压明显增大;A组BALF中的白细胞总数及Eos计数均较N组明显升高。哮喘模型组气道壁PKC-α蛋白含量和平滑肌层厚度较正常组均显著增加（均为P〈0.001）,气道内外径比值较正常组减小（P〈0.001）。气道壁平滑肌层厚度与PKC-α蛋白表达呈正相关（rs=0.771,P〈0.01）。结论滨蒿内酯能减轻哮喘大鼠气道壁平滑肌层的增厚并抑制PKC-α的表达。     

过氧化氢酶对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜内细胞因子表达和NF-κB激活的影响

目的 观察过氧化氢酶（CAT）对大鼠溃疡性结肠炎（UC）的预防作用。方法 用5％葡聚糖硫酸钠（DSS）制备大鼠UC模型;CAT灌肠,观察UC的症状和组织学变化;采用RT-PCR技术检测UC大鼠肠黏膜内TNF-α、IL-1β、IL-8的表达水平;应用免疫电泳迁移率改变分析（EMSA）法检测UC大鼠肠黏膜细胞NF-κB的激活情况。结果 CAT预防组UC的症状、组织损害均较CAT治疗组、模型组明显减轻,同时TNF-α、IL-1β、IL-8的表达较CAT治疗组、模型组降低（P〈0．05）,NF-κB的核结合活性也降低,但较正常对照组仍明显升高。结论 CAT对UC的发生有预防作用。     

肝移植术后外周血中核因子-κB和肿瘤坏死因子α水平观察

目的：观察肝移植术后外周血中核因子-κB（BF-κB）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。方法：采用实时荧光定量逆转录PCR技术和双抗体夹心酶联免疫吸附法测定肝硬化晚期20例（观察组）接受肝移植术前1h,术后1h、12h、24h、36h及72h外周血中NF-κB、TNF-α水平,并与健康成年人10例（对照组）外周血中NF-κB和TNF-α水平比较。结果：观察组外周血中NF-κB和TNF-α水平均高于移植术前1h和对照组,两组比较差异非常显著（P〈0.01）;术后24h内NF-κB和TNF-α水平呈上升趋势,24h后呈下降趋势,72hNF-κB和TNF-α水平仍显著高于术后1h（P〈0.05）。术后NF-κB和TNF-α水平呈显著正相关（P〈0.05）。结论：外周血中NF-κB和TNF-α水平在肝移植术后呈现升高,24h后呈下降的趋势。     

干扰素-γ增强内毒素对血管内皮细胞核因子-κB的活化及其机制

目的 探讨干扰素（IFN）-γ对内皮细胞上Toll样受体4（toll like receptor-4，TLR4）和髓样分化蛋白-2（myeloid differentiation protein-2，MD-2）表达的影响以及在内毒素（LPS）对内皮细胞激活中的影响。方法 分离、培养人脐静脉内皮细胞，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和Westernblot方法检测IFN-γ刺激后内皮细胞TLR4、MD-2表达的变化；TransAM法检测核因子（NF）-κB活性，酶联免疫吸附分析（ELISA）法检测IL-8水平。结果 IFN-γ能明显上调内皮细胞TLR4、MD-2的表达，并且TLR4、MD-2表达的增加与IFN-γ呈一定的剂量依赖关系；IFN-γ对内皮细胞NF-γB的活性无明显影响，但用IFN-γ孵育后的内皮细胞却对LPS的反应明显增强，NF-κB活性明显增高，白细胞介素（IL）-8分泌明显增加，且与IFN-γy呈剂量依赖关系。结论 IFN-γ通过上调内皮细胞上的LPS受体-TLR4、MD-2而促进LPS对内皮细胞的活化。     

哮喘模型小鼠脾脏和肺脏CD8~+T细胞的作用机制研究

目的建立哮喘小鼠模型,探讨CD8+T细胞在哮喘中的作用。方法将32只BALB/c小鼠随机均分为对照组和哮喘组,哮喘组小鼠建立哮喘模型。测定两组小鼠的气道反应性,对肺泡灌洗液(BALF)行细胞学分类和计数,观察肺组织的病理变化。用免疫磁珠纯化柱纯化两组小鼠脾、肺组织的CD8+T细胞,加入卵蛋白(OVA)刺激,用ELISA法检测培养96h后CD8+T细胞上清中IL-4、IL-10及IFN-γ的水平。结果哮喘组小鼠存在气道高反应性,证明模型构建成功。哮喘组BALF中的细胞总数和中性粒细胞、嗜酸性粒细胞的比例均较对照组明显增加(P<0.05),巨噬细胞比例明显降低(P<0.05)。哮喘组肺间质中有大量炎性细胞浸润,气道上皮损伤,杯状细胞肥大增生,有大量黏液分泌,黏膜下胶原纤维沉积。对照组无明显的炎症改变。哮喘组肺CD8+T细胞分泌的IL-4(203.20±16.59pg/ml)较对照组(3.29±1.61pg/ml)明显增加(P<0.05),IL-4在两组脾CD8+T细胞培养上清中均未检出。哮喘组脾CD8+T细胞分泌IFN-γ水平(4997.05±189.07pg/ml)较对照组(4509.73±378.10pg/m...     

黄体酮对鼠脑外伤后脑组织炎性信号因子表达的干预作用

目的观察黄体酮对脑外伤后脑组织内炎症反应信号转导因子核因子-κB（NF-κB）、炎症细胞因子子如瘤坏死因子（TNF-α）和白介素-1β（IL—1β）水平的影响，探讨其对创伤性脑外伤（TBI）继发性脑损伤的保护作用及可能的作用机制。方法采用Freeney法造成大鼠脑挫裂伤模型，在伤后1、3、5、7天不同时相点用ELISA法、免疫组化法分别检测4组大鼠脑组织中NF-κB、TNF-α、IL-1β水平的变化。结果伤后注射黄体酮治疗组脑组织NF—κB、TNF—α、IL-1β3种炎性因子水平均比脑创伤组低（P〈0.05）。结论注射黄体酮能降低脑外伤后炎性信号因子表达，减轻脑外伤后脑组织的炎症反应，对脑组织起一定的保护作用。     

患者呼出气一氧化氮监测对支气管哮喘治疗评估中的临床意义

目的：探讨支气管哮喘患者呼出气一氧化氮（ FENO）监测对支气管哮喘治疗中的临床价值。方法随机选择60例支气管哮喘急性发作患者（观察组）,并选择60例同期健康体检人员（对照组）。比较治疗前后两组FENO水平。结果治疗前,观察组FeNO水平明显高于对照组（ P＜0．05）;治疗1个月后,观察组FeNO水平明显高于对照组（ P＜0．05）;治疗4个月后,观察组FeNO水平与对照组比较差异无统计学意义（ P ＞0．05）。结论 FeNO可作为反映气道炎症的重要指标,另外它还能够评估治疗效果,可作为停药或降低用药剂量的参考指标。