来源于肾上腺髓质素原的不同肽段对大鼠主动脉一氧化氮生成的影响

目的 :观察肾上腺髓质素 (ADM)对大鼠主动脉一氧化氮 (NO)生成的作用 ,以及肾上腺髓质素原N端 2 0肽 (PAMP)和肾上腺升压素 (ADT)对ADM这一作用的影响。方法 :ADM ,PAMP和ADT孵育离体大鼠主动脉 2h后 ,测定孵育液中亚硝酸盐的含量和所孵育组织中一氧化氮合酶 (NOS)的活性 ,其中亚硝酸盐的含量反映NO的生成量。结果 :ADM(10 -9～ 10 -7mol·L-1)浓度依赖地刺激大鼠主动脉组织亚硝酸盐的生成和NOS的活性。 10 -8mol·L-1的ADM孵育血管后 ,每毫克蛋白亚硝酸盐的生成量为 (0 .2 82± 0 .0 4 6) μmol,NOS活性为 (0 .3 2 3± 0 .0 5 6)pmol·min-1,显著高于对照组 [每毫克蛋白 (0 .173± 0 .0 2 6) μmol和 (0 .110± 0 .0 2 8)pmol·min-1,P <0 .0 1]。此浓度的ADM与相同浓度的PAMP或ADT共同孵育血管后 ,每毫克蛋白亚硝酸盐的生成量为 (0 .2 0 4± 0 .0 4 9)或(0 .15 0± 0 .0 3 6) μmol,NOS活性为 (0 .178± 0 .0 2 3 )或 (0 .12 3± 0 .0 3 1) pmol·min-1;ADM ,PAMP和ADT三者共同孵育 ,每毫克蛋白亚硝酸盐的生成量为 (0 .162± 0 .0 2 9) μmol,NOS的活性为 (0 .110± 0 .0 2 4 ) pmol·min-1,均显著低于ADM (10 -8mol·L-1)单独孵育组 (P <0 .0 1)。无论PAMP还是ADT单独孵育血管组织均不影响其亚硝酸盐     

肾上腺髓质素对离体肺动脉缺氧性收缩作用机制的研究

目的　探讨肾上腺髓质素 (ADM)在缺氧性肺血管收缩发生中的作用及其与内源性一氧化氮 (NO)的关系。方法　取日本长耳白兔制备内皮完整的离体肺动脉环 18个 ,随机分为对照组、ADM组和ADM +Nω-硝基 -L -精氨酸 (L -NNA)组。利用离体血管环张力测定技术 ,观察去甲肾上腺素(NA)预收缩肺动脉环在急性缺氧介质中的收缩反应 ,并观察ADM和ADM +L -NNA孵育对缺氧收缩反应的影响。结果　在常氧条件下 ,经ADM孵育的肺动脉环NA预收缩反应张力较对照组降低 2 4 .9% (P<0 .0 1) ,而ADM +L -NNA共同孵育的肺动脉环NA预收缩反应张力明显高于ADM组 (P <0 .0 1) ,但与对照组比较无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;NA预收缩的肺动脉环在急性缺氧介质中立即出现明显的缺氧收缩峰 ,而经ADM孵育的肺动脉环NA预收缩后缺氧收缩峰的幅度较单纯NA预收缩的肺动脉环降低了 36 .4 % (P <0 .0 5 ) ;而ADM +L -NNA共同孵育肺动脉环NA预收缩后的缺氧收缩张力与对照组比较差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。结论　ADM可抑制缺氧性肺动脉收缩 ,其作用可能是由NO介导的。     

肾上腺髓质素和肾上腺髓质素原N端20肽对大鼠离体灌流心脏功能的影响

目的 :研究肾上腺髓质素原 (proadrenomedullin ,proADM)的不同肽段 ,肾上腺髓质素 (adrenomedullin ,ADM )和肾上腺髓质素原N端 2 0肽 (proadrenomedullinN terminal 2 0 peptide ,PAMP)的心脏效应及可能机制。方法 :Langendorff装置灌流离体大鼠心脏 ,通过心室内的乳胶水囊经换能器连于PowerLab多导生理记录仪 ,观察不同浓度的ADM和PAMP对左心室内压 (leftventricularpressure ,LVP)、左室内压变化速率 (leftventricularpressure(dp/dtmax)、冠状动脉 (冠脉 )流量 (coronaryfluid ,CF)和心率 (heartrate,HR)的影响 ,并检测灌流后心肌组织cAMP含量。结果 :ADM (1 0 -1 1 ～ 1 0 -8mol·L-1 )灌流呈浓度依赖地降低心脏LVP和±dp/dtmax ;PAMP也以浓度依赖的方式降低上述心功能的指标 ,且较相同浓度的ADM作用强。PAMP与ADM依次以不同浓度梯度联合应用 ,较各药单用对上述心功能指标的影响表现为低浓度 (1 0 -1 1 ～ 1 0 -1 0 mol·L-1 )时增强 ,而高浓度 (1 0 -9～ 1 0 -8mol·L-1 )削弱其心功能抑制效应。ADM和PAMP单独或联合应用时 ,冠脉流量均高于对照组水平。灌流液含有NO合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)抑制剂L NAME(Nω nitro L argininemethylester)时 ,ADM、PAMP或ADM联合PAMP灌流 ,其对LVP、±dp     

内源性NO介导肾上腺髓质素对家兔离体缺氧性肺动脉的舒张作用

目的探讨肾上腺髓质素在缺氧性肺血管收缩中的作用及其与内源性NO的关系。方法将制备的离体兔肺动脉环分为单纯缺氧对照组、ADM孵育组、ADM L～NNA孵育组。用离体血管环技术观察肺动脉环收缩张力的变化。结果在常氧条件下 ,经ADM孵育30min后肺动脉环对NA的预收缩反应张力较正常对照组降低21.9 % ;ADM L～NNA共同孵育后的肺动脉环对NA的预收缩张力 (3.07±0.65克·张力/毫克·湿重 )明显高于ADM孵育组 (P<0 01) ,但与正常对照组比较 ,差异无显著性意义 (P>0 05)。NA预收缩的肺动脉环在急性缺氧介质中立即出现明显的缺氧性收缩峰 ,其收缩张力变化为0.44±0.11克·张力 /毫克·湿重 ;经ADM孵育30min的肺动脉环NA预收缩后缺氧性收缩峰的幅度较单纯NA预收缩的肺动脉环降低了36.4 % (P<0 05) ;而ADM L～NNA共同孵育30min的肺动脉环NA预收缩后的缺氧性收缩张力与单纯缺氧组比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论在离体条件下 ,ADM可致NA预收缩的肺动脉环缺氧性收缩反应降低 ,L～NNA可逆转ADM降低肺动脉缺氧性收缩反应的作用 ,这种作用可部分是由NO介导的。     

黄芪甲甙对大鼠离体肠系膜动脉血管舒缩功能的影响

目的：观察黄芪甲甙对大鼠离体肠系膜动脉舒缩功能的影响，并探讨其可能机制。方法：分离肠系膜动脉1—2级分支制备离体肠系膜血管环固定于微血管张力测定仪，观察黄芪甲武对血管环舒缩功能的影响。结果：①不同浓度的黄芪甲甙（30mg／L和100mg／L）孵育后，苯肾上腺素引起的血管收缩较对照组明显下降（尸〈0．05或P〈0．01）。②累积浓度的黄芪甲甙对苯肾上腺素（2×10^-6mol／L）预收缩的内皮完整或去内皮肠系膜动脉血管环均产生浓度依赖性的舒张作用，中高浓度的黄芪甲甙（10mg／L、30mg／L和100mg／L）对内皮完整组的舒张作用明显强于去内皮组（P〈0．05或P〈0．01）。③累积浓度的黄芪甲甙对KCl预收缩的肠系膜动脉血管环张力无明显影响（P〉0．05）。④L-NAME（10^-4mol／L）预处理能显著减弱黄芪甲甙的舒血管作用（P〈0．05或P〈0．01）。结论：黄芪甲甙具有一定的内皮依赖性舒张血管作用，且主要通过NO途径发挥作用。     

L—精氨酸对内皮完整和去内皮大鼠主动脉的松弛作用

目的 :探讨 L-精氨酸对离体大鼠主动脉的松弛作用。方法 :将内皮完整和去内皮的大鼠主动脉环悬挂于器官浴槽中 ,测定离体血管的收缩张力变化。所有的实验在浴液中都加入吲哚美辛 ( 1× 10 - 5mol/L)和普萘洛尔 ( 3× 10 - 6mol/L)。标本在生理盐溶液中经不同时间孵育后 ,以去甲肾上腺素使其收缩 ,加入不同浓度的 L-精氨酸 ,观察血管松弛反应。结果 :标本孵育时间 >2 h时 ,L-精氨酸使内皮完整和去内皮的动脉环产生浓度和时间依赖性松弛效应 ,而甲烯蓝及左旋硝基精氨酸使其松弛效应减弱。结论 :内皮细胞和血管平滑肌细胞均具有与血管舒张有关的 L-精氨酸 -EDRF( NO)系统 ,它对血管张力的调节起重要作用     

外源性精胺对大鼠离体胸主动脉环的收缩作用

目的 观察外源性精胺对大鼠胸主动脉环张力的影响并初步探讨其可能机制.方法 采用离体血管环灌流方法,分别观察不同浓度外源性精胺对正常孵育以及无Ca2 、去内皮、去甲肾上腺素(NA)或60mmol/L KCl预处理、存在维拉帕米、加入咖啡因等条件下血管张力的影响.结果 内皮完整含Ca2 液中,精胺(50 μmol/L～5 mmol/L)对NA和高钾预处理的血管环,既元舒张作用,也不进一步引起收缩;内皮完整含Ca2 液中,外源性精胺在一定浓度范围内(50～200 μmol/L)呈浓度依赖性使血管收缩;在无Ca2 Krebs液中,精胺(200μmol/L)无缩血管作用;含Ca2 去内皮条件下,精胺(200μmol/L)对正常血管有收缩作用,但明显弱于内皮完整者;含Ca2 Krebs液预先加入维拉帕米,精胺(200μmol/L)对正常血管无作用;加入咖啡因引起血管短暂而快速收缩后,加入200μmol/L精胺缩血管效应降低;内皮完整含钙液加入200μmol/L精胺后,再加入30mmol/L咖啡因后,不进一步引起血管收缩.结论 外源性精胺在一定的浓度范围内呈浓度依赖性收缩血管平滑肌,其作用机制可能主要是与L-型钙通道开放来促进血管平滑肌外钙内流,并进一步诱导内钙释放有关.     

哌替啶的舒血管作用及其机制

目的:探讨哌替啶扩张血管导致低血压的机制.方法:制备大鼠离体主动脉环,记录血管环张力,观察哌替啶对高钾和苯肾上腺素(PhE)预收缩血管的作用.结果:哌替啶不影响血管的静止张力,但可对高钾和PhE诱导的收缩产生非内皮依赖的舒张作用,并呈剂量-反应关系.哌替啶既不影响咖啡因诱导的血管收缩,也不改变钌红作用后对高钾诱导收缩的抑制作用.在无钙条件下,哌替啶仍能抑制PhE的收缩,也抑制后续加入钙后引发的收缩.结论:哌替啶对高钾和PhE诱导的血管收缩有舒张作用,机制可能与其阻断细胞膜钙通道和抑制IP3敏感钙池的钙释放有关.     

金鸡菊提取物对血管环舒张作用的探讨

目的:观察金鸡菊提取物对大鼠胸主动脉血管环效应并探讨其作用机制.方法:采用大鼠离体胸主动脉环灌流,记录张力变化.结果:金鸡菊提取物剂量依赖性地舒张由苯肾上腺素(PE)或KCl预收缩的大鼠胸主动脉环,其舒张血管作用不依赖内皮;在无钙灌流液中,用KCl(60mmol·L-1)去极化去除内皮的血管环后,逐步加入Ca2+,使血...     

桡动脉体外药物敏感模型的建立

 [摘要] 目的: 利用组织浴槽的方法体外模拟在体桡动脉,摸索建立体外桥血管药物敏感模型,研究单一因素改变对血管舒缩状态的影响。方法: 取成年男性桡动脉,4℃ Krebs- Ringer保存液中切割成3－4mm宽,内膜完好的血管环,两端分别牵引并水浴至10ml麦式组织浴槽中并连接至换能器、生理记录仪和适度的前负荷上,待血管环状态稳定后记录初长度及静息张力。分别用终浓度为0.06M的K+、20μM的乙酰胆碱评估内膜组织的完整性和证实血管环舒张、收缩活性。其中内膜完整并且舒缩活性良好的血管环作为一组,分别用不同终浓度的苯肾上腺素作为刺激因素,观测血管环的收缩程度的变化。绘制在不同半对数克分子浓度苯肾上腺素下,血管环收缩静息张力变化曲线。结果: 所有血管环在水浴槽中均能很快达到稳定状态。对KCl和乙酰胆碱的反应敏感提示血管环内膜完整及收缩舒张功能良好。苯肾上腺素对数克分子浓度与血管环静息张力呈正相关。结论: 利用组织浴槽建立药物敏感模型在方法上是可行的。血管环可以很好的模拟桥血管在体内的状态,确定采用实验所得苯肾上腺素浓度-静息张力曲线中的E50浓度作为后续实验中刺激血管收缩的标准浓度。     

阿魏酸钠对大鼠胸主动脉的非内皮依赖性血管舒张作用

目的研究阿魏酸钠对离体大鼠胸主动脉的影响。方法以等长张力的形式记录鼠主动脉及去内皮鼠主动脉对去氧肾上腺素和高钾的反应,以及阿魏酸钠对鼠主动脉及去内皮鼠主动脉的舒张作用。结果阿魏酸钠(0.1～30 mmol/L)能使预先用浓度为(2.73±0.02)的去氧肾上腺素和浓度为(2.57±0.06)的高钾预收缩的离体主动脉环舒张(P<0.05);机械去除内皮后,阿魏酸钠对主动脉环的舒张效应没有明显改变。结论阿魏酸钠是一种非内皮依赖性的血管平滑肌细胞松弛剂。     

Changes of plasma adrenomedullin and proadrenomedullin N-terminal 20 peptide concentrations in patients with heart failure.

OBJECTIVE: To study the changes in plasma adrenomedullin (ADM) and proadrenomedullin N-terminal 20 peptide (PAMP) concentrations and their clinical significance in the pathological process of congestive heart failure (CHF). METHODS: Plasma ADM and PAMP concentrations in 45 patients with CHF (according to the functional classification of New York Heart Association, NYHA) and 20 control subjects were measured by specific radioimmunoassay. RESULTS: Plasma ADM concentrations were 51.464+/-.52 pg/ml and 70.39+/-3.22 pg/ml respectively in patients of NYHA class II and class III, which were significantly higher than those in control subjects (24.12+/-1.59 pg/ml, P<0.05 for both comparisons), while significant differences in plasma PAMP concentrations were not identified in the 2 groups of patients (6.24+/-1.71 pg/ml and 7.38+/-1.28 pg/ml, respectively) in comparison with the control level(8.56+/-2.44 pg/ml, P>0.05 for both comparisons). Patients of NYHA class IV, when compared with the 2 groups of patients mentioned above, had significantly decreased plasma ADM and PAMP concentrations (36.33+/-2.17 pg/ml and 2.79+/-0.89 pg/ml respectively, P<0.05 in both cases), but had higher plasma ADM and lower PAMP concentrations when compared with the control subjects, (P<0.05 respectively). CONCLUSION: The changes of plasma ADM and PAMP concentrations at different stages of CHF indicate intramolecular regulation disturbances of vasodilator peptides of proadrenomedullin, and ADM may play a more important role in the development of CHF.     

刺五加水提取物对大鼠离体动脉血管的舒张作用

[目的]探讨刺五加水提取物舒张血管的作用.[方法]采用大鼠离体胸主动脉环灌流模型,记录苯肾上腺素预收缩的大鼠离体胸主动脉环张力的变化,观察刺五加水提取物的舒张血管作用.[结果]刺五加水提取物对苯肾上腺素预收缩的大鼠胸主动脉环具有浓度依赖性舒张作用.用一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯和鸟苷酸环化酶抑制剂亚甲蓝预处理后,刺五加的舒张血管作用无明显变化.在无钙营养液(含EGTA)环境下,刺五加水提取物对苯肾上腺素收缩有明显的抑制作用.[结论]刺五加水提取物具有浓度依赖性血管舒张作用,此作用与内皮源性的舒张因子一氧化氮无关,可能与抑制血管平滑肌细胞内质网储存钙的释放有关.     

雷公藤甲素对内毒血症大鼠血管低反应性的影响

目的 探讨雷公藤甲素（triptolide,TP）对内毒血症大鼠模型血液流变性及血管张力的影响。方法 将雄性SD大鼠随机分成6组：正常组（NC组）、内毒血症模型组（LPS组）、TP低浓度干预组（LPS+TP- L组）、TP中浓度干预组（LPS+TP- M组）、TP高浓度干预组（LPS+TP- H组）和多黏菌素B组（LPS+PMX- B组）。用LPS 10 mg/kg腹腔注射处理6 h复制内毒血症大鼠模型。TP干预组在大鼠腹腔注射LPS前15 min进行预处理。各组行颈总动脉插管测量血流动力学指标,取胸主动脉环测定其张力变化。结果 与NC组比较,LPS组大鼠血流动力学指标心率（heart rate,HR）、平均动脉压（mean arterial blood pressure,MABP）、左室舒张压（left ventricular diastolic pressure,LVDP）、左心室内压最大上升/下降速率（maximal rate of the increase/decrease of left ventricular pressure,±dp/dt max）］均显著下降（P<0.05）;LPS组主动脉环对10-8～10-5 mol/L去氧肾上腺素（phenylephrine,Phe）的收缩率明显降低,对乙酰胆碱的舒张率亦明显降低（P<0.05）;与LPS组比较,TP干预组各项指标均明显改善（P<0.05）;而TP干预去内皮血管环组对10-8～10-5 mol/L Phe引起的收缩率变化无统计学意义（P>0.05）;经非选择性一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯或腺苷酸环化酶抑制剂亚甲蓝预处理后,各组内皮完整血管环对Phe的收缩率均明显改善（P<0.05）。结论 TP改善内毒血症大鼠血管低反应性与其改善内皮功能有关。     

Relaxant Effects of Matrine on Aortic Smooth Muscles of Guinea Pigs

Objective To determine whether matrine, a kind of traditional Chinese medicinal alkaloid, can relax the aortic smooth muscles isolated from guinea pigs and to investigate the mechanism of its relaxant effects. Methods Phenylephrine or potassium chloride concentration-dependent relaxation response of aortic smooth muscles to matrine was studied in the precontracted guinea pigs. Results Matrine （1×10^-4 mol/L -3.3×10^-3 mol/L） relaxed the endothelium-denuded aortic rings pre-contracted sub-maximally with phenylephrine, in a concentration-dependent manner, and its pre-incubation （3.3× 10^- 3 mol/L） produced a significant rightward shift in the phenylephrine dose-response curve, but had no effects on the potassium chloride-induced contraction. The anti-contractile effect of matrine was not reduced by the highly selective ATP-dependent K^＋ channel blocker glibenclamide （10.5 mol/L）, either by the non-selective K^＋channel blocker tetraethylammonium （10^-3 mol/L）, or by the β-antagonist propranolol （10^-5 mol/L）. In either ＂normal＂ or ＂Ca^2＋-free＂ bathing medium, the phenylephrine-induced contraction was attenuated by matrine （3.3×10^-3 mol/L）, indicating that the vasorelaxation was due to inhibition of intracellular and extracellular Ca^2＋ mobilization. Conclusion Matrine inhibits phenylephrine-induced contractions by inhibiting activation of α-adrenoceptor and interfering with the release of intracellular Ca^2＋ and the influx of extracellular Ca^2＋.     

肾上腺髓质素原N端20肽对血管紧张素刺激心肌成纤维细胞生成NO的影响

目的探讨肾上腺髓质素原N端20肽(PAMP)对血管紧张素II刺激心肌成纤维细胞(CFs)生成NO的影响及意义。方法采用胰酶消化、差速贴壁法培养新生SD大鼠CFs,以硝酸还原法测定细胞培养液中NO的浓度,分别观察不同浓度AngII、PAMP、及AngII PAMP对CFs生成NO的影响。结果(1)10-9、10-8、10-7、10-6μmol/LAngII组细胞培养液中的浓度是:(73.88±2.23)、(64.34±3.02)、(54.12±2.82)、(40.21±1.45)μmol/L,各组之间有显著性差异(P<0.01)。(2)10-9、10-8、10-7、10-6μmol/LPAMP组细胞培养液中NO的浓度分别为(74.40±3.42)、(74.91±2.66)、(75.77±3.31)、(74.23±2.43)μmol/L,而空白组为(74.57±2.49)μmol/L。各组之间无显著性差异(P>0.05)。(3)10-7μmol/LAngII (10-9、10-8、10-7、10-6μmol/L)PAMP组培养液中NO合成浓度分别为(66.15±2.95)、(80.58±3.77)、(88.67±1.46)、(96.22±2.96)μmol/L,各组间有显著性差异(P<0.01)。结论随AngⅡ浓度增加可显著抑制CFs分泌NO,而PAMP对CFS合成NO无明显影响,但PAMP与AngII共同培养时,随PMAP浓度增加,NO的合成呈依从性增多。     

Vasoactive effects of adrenotensin and its interactions with adrenomedullin

Ｐｒｏａｄｒｅｎｏｍｅｄｕｌｌｉｎ (Ｐｒｏ ＡＤＭ)ｉｓａｐｒｅｃｕｒｓｏｒｅｎｃｏｄｅｄｂｙｔｈｅａｄｒｅｎｏｍｅｄｕｌｌｉｎｇｅｎｅ Ｔｈｅｒｅａｒｅｔｙｐｉｃａｌｌｙｔｈｒｅｅｐａｉｒｅｄｂａｓｉｃａｍｉｎｏａｃｉｄｓ ,ｗｈｉｃｈｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓｉｔｅｓｆｏｒｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｓｉｇｎａｌｉｎＰｒｏ ＡＤＭ ＰｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃｃｌｅａｖａｇｅｓｏｆＰｒｏ ＡＤＭａｔｔｈｒｅｅｓｉｔｅｓｒｅｌｅａｓｅｆｏｕｒｐｅｐｔｉｄｅｓ :Ｐｒｏ ＡＤＭ2 2 4 1(ｐｒｏｄｅｐｉｎｏ…     

ADM和PAMP在高肺血流肺动脉高压形成中的变化及作用途径研究

目的 探讨来自同一前体的肾上腺髓质素(ADM)及肾上腺髓质素N末端20肽(PAMP)在高肺血流肺动脉高压形成中的变化及作用途径.方法 健康雄性Wistar大鼠21只,随机分为2组.将实验组(n=9)大鼠的左侧颈总动脉与颈外静脉用套管进行连接,对照组大鼠仅切开颈部皮肤分别分离颈总动脉和颈外静脉后缝合皮肤,不进行血管连接术.术后12周,经右心导管测取大鼠肺动脉平均压(mPAP)、右心室/(室间隔+左心室)(RV/(LV+SP))重量比、中等肺动脉壁厚度所占管径百分比(MT%).免疫组化法和Western blotting测定ADM、PAMP在大鼠肺组织中的分布及其相对含量变化.RT-PCR法检测大鼠肺组织中ADM、应力活化蛋白激酶(SAPK)、细胞外信号调节激酶(ERK1)基因表达量.结果 实验组大鼠术后mPAP与对照组比较明显升高(P<0.001);RV/(LV+SP)和MT%比例明显增加(P<0.001和P<0.01).免疫组化结果显示ADM和PAMP棕色颗粒主要分布于血管平滑肌层;累积光密度(OD)及Western blotting结果显示实验组大鼠肺内ADM及PAMP蛋白表达量增加.RT-PCR结果显示实验组大鼠肺组织ADM、SAPK、ERK1 mRNA与对照组比较表达增强(P<0.01,P<0.001).结论 高肺血流肺动脉高压形成中存在来自同一前体的ADM与PAMP之间的分子内调控现象;丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路可能参与了高肺血流肺动脉高压形成过程.