来源于肾上腺髓质素原的不同肽段对大鼠主动脉一氧化氮生成的影响

目的 :观察肾上腺髓质素 (ADM)对大鼠主动脉一氧化氮 (NO)生成的作用 ,以及肾上腺髓质素原N端 2 0肽 (PAMP)和肾上腺升压素 (ADT)对ADM这一作用的影响。方法 :ADM ,PAMP和ADT孵育离体大鼠主动脉 2h后 ,测定孵育液中亚硝酸盐的含量和所孵育组织中一氧化氮合酶 (NOS)的活性 ,其中亚硝酸盐的含量反映NO的生成量。结果 :ADM(10 -9～ 10 -7mol·L-1)浓度依赖地刺激大鼠主动脉组织亚硝酸盐的生成和NOS的活性。 10 -8mol·L-1的ADM孵育血管后 ,每毫克蛋白亚硝酸盐的生成量为 (0 .2 82± 0 .0 4 6) μmol,NOS活性为 (0 .3 2 3± 0 .0 5 6)pmol·min-1,显著高于对照组 [每毫克蛋白 (0 .173± 0 .0 2 6) μmol和 (0 .110± 0 .0 2 8)pmol·min-1,P <0 .0 1]。此浓度的ADM与相同浓度的PAMP或ADT共同孵育血管后 ,每毫克蛋白亚硝酸盐的生成量为 (0 .2 0 4± 0 .0 4 9)或(0 .15 0± 0 .0 3 6) μmol,NOS活性为 (0 .178± 0 .0 2 3 )或 (0 .12 3± 0 .0 3 1) pmol·min-1;ADM ,PAMP和ADT三者共同孵育 ,每毫克蛋白亚硝酸盐的生成量为 (0 .162± 0 .0 2 9) μmol,NOS的活性为 (0 .110± 0 .0 2 4 ) pmol·min-1,均显著低于ADM (10 -8mol·L-1)单独孵育组 (P <0 .0 1)。无论PAMP还是ADT单独孵育血管组织均不影响其亚硝酸盐     

肾上腺髓质素和肾上腺髓质素原N端20肽对大鼠离体灌流心脏功能的影响

目的 :研究肾上腺髓质素原 (proadrenomedullin ,proADM)的不同肽段 ,肾上腺髓质素 (adrenomedullin ,ADM )和肾上腺髓质素原N端 2 0肽 (proadrenomedullinN terminal 2 0 peptide ,PAMP)的心脏效应及可能机制。方法 :Langendorff装置灌流离体大鼠心脏 ,通过心室内的乳胶水囊经换能器连于PowerLab多导生理记录仪 ,观察不同浓度的ADM和PAMP对左心室内压 (leftventricularpressure ,LVP)、左室内压变化速率 (leftventricularpressure(dp/dtmax)、冠状动脉 (冠脉 )流量 (coronaryfluid ,CF)和心率 (heartrate,HR)的影响 ,并检测灌流后心肌组织cAMP含量。结果 :ADM (1 0 -1 1 ～ 1 0 -8mol·L-1 )灌流呈浓度依赖地降低心脏LVP和±dp/dtmax ;PAMP也以浓度依赖的方式降低上述心功能的指标 ,且较相同浓度的ADM作用强。PAMP与ADM依次以不同浓度梯度联合应用 ,较各药单用对上述心功能指标的影响表现为低浓度 (1 0 -1 1 ～ 1 0 -1 0 mol·L-1 )时增强 ,而高浓度 (1 0 -9～ 1 0 -8mol·L-1 )削弱其心功能抑制效应。ADM和PAMP单独或联合应用时 ,冠脉流量均高于对照组水平。灌流液含有NO合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)抑制剂L NAME(Nω nitro L argininemethylester)时 ,ADM、PAMP或ADM联合PAMP灌流 ,其对LVP、±dp     

ADM和PAMP在高肺血流肺动脉高压形成中的变化及作用途径研究

目的 探讨来自同一前体的肾上腺髓质素(ADM)及肾上腺髓质素N末端20肽(PAMP)在高肺血流肺动脉高压形成中的变化及作用途径.方法 健康雄性Wistar大鼠21只,随机分为2组.将实验组(n=9)大鼠的左侧颈总动脉与颈外静脉用套管进行连接,对照组大鼠仅切开颈部皮肤分别分离颈总动脉和颈外静脉后缝合皮肤,不进行血管连接术.术后12周,经右心导管测取大鼠肺动脉平均压(mPAP)、右心室/(室间隔+左心室)(RV/(LV+SP))重量比、中等肺动脉壁厚度所占管径百分比(MT%).免疫组化法和Western blotting测定ADM、PAMP在大鼠肺组织中的分布及其相对含量变化.RT-PCR法检测大鼠肺组织中ADM、应力活化蛋白激酶(SAPK)、细胞外信号调节激酶(ERK1)基因表达量.结果 实验组大鼠术后mPAP与对照组比较明显升高(P<0.001);RV/(LV+SP)和MT%比例明显增加(P<0.001和P<0.01).免疫组化结果显示ADM和PAMP棕色颗粒主要分布于血管平滑肌层;累积光密度(OD)及Western blotting结果显示实验组大鼠肺内ADM及PAMP蛋白表达量增加.RT-PCR结果显示实验组大鼠肺组织ADM、SAPK、ERK1 mRNA与对照组比较表达增强(P<0.01,P<0.001).结论 高肺血流肺动脉高压形成中存在来自同一前体的ADM与PAMP之间的分子内调控现象;丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路可能参与了高肺血流肺动脉高压形成过程.     

肾上腺髓质素原N端20肽对血管紧张素刺激心肌成纤维细胞生成NO的影响

目的探讨肾上腺髓质素原N端20肽(PAMP)对血管紧张素II刺激心肌成纤维细胞(CFs)生成NO的影响及意义。方法采用胰酶消化、差速贴壁法培养新生SD大鼠CFs,以硝酸还原法测定细胞培养液中NO的浓度,分别观察不同浓度AngII、PAMP、及AngII PAMP对CFs生成NO的影响。结果(1)10-9、10-8、10-7、10-6μmol/LAngII组细胞培养液中的浓度是:(73.88±2.23)、(64.34±3.02)、(54.12±2.82)、(40.21±1.45)μmol/L,各组之间有显著性差异(P<0.01)。(2)10-9、10-8、10-7、10-6μmol/LPAMP组细胞培养液中NO的浓度分别为(74.40±3.42)、(74.91±2.66)、(75.77±3.31)、(74.23±2.43)μmol/L,而空白组为(74.57±2.49)μmol/L。各组之间无显著性差异(P>0.05)。(3)10-7μmol/LAngII (10-9、10-8、10-7、10-6μmol/L)PAMP组培养液中NO合成浓度分别为(66.15±2.95)、(80.58±3.77)、(88.67±1.46)、(96.22±2.96)μmol/L,各组间有显著性差异(P<0.01)。结论随AngⅡ浓度增加可显著抑制CFs分泌NO,而PAMP对CFS合成NO无明显影响,但PAMP与AngII共同培养时,随PMAP浓度增加,NO的合成呈依从性增多。     

心力衰竭患者肾上腺髓质素和前体N端20肽的改变

目的探讨肾上腺髓质素(ADM)和肾上腺髓质素前体N端20肽(PAMP)在心力衰竭发生发展病理过程中的变化和临床意义.方法应用特异性放射免疫法检测了45例不同程度的充血性心力衰竭(CHF)患者和7名正常人ADM和PAMP的血浆浓度.结果CHF病人血浆ADM浓度在心功能Ⅱ级者为(51.46±4.52)pg/ml、Ⅲ级者为(70.39±3.22)pg/ml,与正常组[(24.12±1.59)pg/ml]比较有显著性差异(P＜0.05);PAMP血浆浓度在心功能Ⅱ级者为(6.24±1.71)pg/ml、Ⅲ级者为(738±1.28)pg/ml,与正常组[(8.56±2.44)pg/ml]比较无显著性差异(P＞0.05).在心功能Ⅳ级者,ADM和PAMP血浆浓度分别为(36.33±2.17)pg/ml、(2.79±0.89)pg/ml,较心功能Ⅱ级和Ⅲ级者显著下降,其中ADM高于对照组,PAMP低于对照组(P＜0.05).结论ADM和PAMP在心力衰竭不同阶段的变化表明肾上腺髓质素功能片段扩血管活性肽分子内调节紊乱;ADM在心衰的进展过程中可能发挥更重要的作用.     

肾上腺髓质素对大鼠离体血管平滑肌张力作用的影响

目的 研究肾上腺髓质素(Adrenomedullin，Adm)对大鼠离体血管平滑肌的影响及其作用机制。方法 大鼠离体胸主动脉血管环张力记录法。结果 Adml—50和降钙素基因相关肽(CGRP)呈浓度依赖的方式抑制苯肾上腺素(Phe)所致的血管环收缩。血管环预先用β1受体抑制剂atenolol(10^-6mol/L)或β2受体抑制剂ICI—118，551(10^-7mol／L)处理后，Adml—50仍能增强血管环对异丙肾上腺素(Iso)所致的舒张反应。此外，Adml—50对磷酸二酯酶抑制剂(rolip-ram)所致的血管舒张反应亦有增强作用，但这种作用在腺苷环化酶激动剂(forskolin)存在的条件下被抑制。结论 Adml—50是一种强血管舒张因子。其舒张血管平滑肌的机制与活化腺苷环化酶，增加细胞内cAMP，进而激活β受体有关。     

内源性NO介导肾上腺髓质素对家兔离体缺氧性肺动脉的舒张作用

目的探讨肾上腺髓质素在缺氧性肺血管收缩中的作用及其与内源性NO的关系。方法将制备的离体兔肺动脉环分为单纯缺氧对照组、ADM孵育组、ADM L～NNA孵育组。用离体血管环技术观察肺动脉环收缩张力的变化。结果在常氧条件下 ,经ADM孵育30min后肺动脉环对NA的预收缩反应张力较正常对照组降低21.9 % ;ADM L～NNA共同孵育后的肺动脉环对NA的预收缩张力 (3.07±0.65克·张力/毫克·湿重 )明显高于ADM孵育组 (P<0 01) ,但与正常对照组比较 ,差异无显著性意义 (P>0 05)。NA预收缩的肺动脉环在急性缺氧介质中立即出现明显的缺氧性收缩峰 ,其收缩张力变化为0.44±0.11克·张力 /毫克·湿重 ;经ADM孵育30min的肺动脉环NA预收缩后缺氧性收缩峰的幅度较单纯NA预收缩的肺动脉环降低了36.4 % (P<0 05) ;而ADM L～NNA共同孵育30min的肺动脉环NA预收缩后的缺氧性收缩张力与单纯缺氧组比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论在离体条件下 ,ADM可致NA预收缩的肺动脉环缺氧性收缩反应降低 ,L～NNA可逆转ADM降低肺动脉缺氧性收缩反应的作用 ,这种作用可部分是由NO介导的。     

原发性高血压与肾实质性高血压患者肾上腺髓质素前体N端20肽水平的临床观察

目的观察原发性高血压(EH)与肾实质性高血压(RH)患者肾上腺髓质素前体N端20肽(PAMP)水平的变化,探讨PAMP的降压机制.方法用放免法测定EH与RH患者的血浆PAMP,用高压液相(HPLC)法测定去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)的水平.结果 EH及RH患者PAMP、NE、E均较正常人明显增高,PAMP、MAP与NE、E有明显相关性.结论 EH及RH患者PAMP增高可能是机体维持自稳态的一种保护性代偿机制,EH与RH代偿程度有所不同.PAMP降压作用与拮抗NE、E有关.     

心力衰竭患者血浆肾上腺髓质素前体N端20肽的变化

肾上腺髓质素前体N端 2 0肽 (PAMP)是近年来发现的一种具有强大扩血管、降压、抑制血管紧张素II刺激的醛固酮分泌等作用的血管活性肽。本研究旨在探讨慢性充血性心力衰竭 (CHF)患者PAMP血浆含量变化及其临床意义。一、对象与方法1 慢性CHF患者 45例 ,男 30例 ,女 15例 ,年龄 30～ 80岁 (平均 6 4岁 )。按纽约心脏协会 (NYHA)心功能分级标准分为 3组 :( 1)Ⅱ级组 10例 ,男 5例 ,女 5例 ,平均年龄 6 8岁 ;②Ⅲ级组 15例 ,男 9例 ,女 6例 ,平均年龄 6 9岁 ;( 3)Ⅳ级组2 0例 ,男 15例 ,女 5例 ,平均年龄 6 2岁。排除急性心肌梗死、肿瘤…     

不同类型的心绞痛患者冠状动脉循环血浆中肾上腺髓质素前体N端20肽的变化

目的 研究冠心病患者稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛以及心肌梗死患者血浆肾上腺髓质素前体N端20肽(PAMP)浓度在冠脉循环中的变化.方法 用放免方法分别测定不同类型心绞痛的冠心痛患者与对照组外周、冠状静脉窦与主动脉根部血浆中PAMP浓度,利用冠状静脉窦-主动脉根部差值求出经冠脉循环后心脏局部分泌并释放的PAMP浓度.结果 不同类型心绞痛患者外周血浆中PAMP浓度较对照组明显增高,差异均有显著性(P<0.01),冠心病组冠状静脉窦PAMP浓度较主动脉根部及外周血PAMP浓度明显增高,差异均有显著性(P<0.01);冠心病组心脏局部PAMP浓度较对照组明显增高,差异均有显著性(P<0.01).结论 冠心痛患者血浆PAMP浓度明显增高,经冠脉循环后心脏局部有PAMP产生.提示PAMP参与了冠心病的病理生理过程.可能是机体对维持内环境稳态的一种自我保护机制,在冠心病的病程发展过程中有可能是一种较为重要的血管活性物质.     

烟草烟雾对离体大鼠胸主动脉舒缩功能的影响

目的 观察烟草烟雾对大鼠离体胸主动脉环张力的影响,并探讨其作用机制.方法 建立大鼠吸烟模型,采用离体胸主动脉环灌流装置,观察短期大量吸烟(SS)、中期大量吸烟(MS)及长期大量吸烟(LS)对氯化钾(KCl)、苯肾上腺素(PE)诱导血管收缩的作用,以及对乙酰胆碱(Ach)舒张血管环的影响,同时观察N-硝基-L-精氨酸甲酯...     

虎杖苷对ADMA作用的正常兔主动脉血管条内皮功能的影响

目的 研究虎杖苷(PD)与非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对正常兔主动脉血管条内皮功能的影响及PD与ADMA之间的相互作用。方法 通过绘制主动脉条在ADMA与PD分别作用和共同作用时对苯肾上腺素(PE)的收缩量一效曲线，计算并比较Emax和Kd值。结果正常主动脉条对ADMA无反应，PD或ADMA预处理后亦不影响其对PE的收缩反应。但PD使受ADMA预处理的主动脉条对PE的收缩反应呈剂量依赖性减弱,并引起Kd值增大、Emax减小。结论 ADMA或PD单独作用并不影响正常主动脉条的收缩功能及PE对α-受体的亲和力和Emax；但在ADMA存在时,PD能非竞争性拮抗主动脉条对PE的收缩反应。     

华蟾素对大鼠胸主动脉的缩血管作用及其机制

目的:研究中成药华蟾素对大鼠离体胸主动脉环的作用及其机制。方法:采用大鼠离体胸主动脉灌流模型,观察华蟾素对血管张力的影响。结果:华蟾素(2.5、5.0、7.5、10.0 g/L)浓度依赖性地收缩去内皮的大鼠胸主动脉环,收缩幅度分别为(16.3±3.39)%、(52.5±7.70)%、(60.9±8.84)%、(69.2±11.34)%,显著高于内皮完整的大鼠胸主动脉环收缩幅度[(6.2±2.07)%、(14.7±4.91)%、(17.6±5.86)%、(20.3±6.78)%](P<0.01);在无Ca2 液中,10.0 g/L华蟾素对去内皮主动脉环的收缩幅度[(7.1±0.79)%]显著低于有Ca2 液中的收缩幅度[(78.1±4.32)%](P<0.01);维拉帕米(1-0 7m o l/L,V er)预处理可消除10.0 g/L华蟾素的缩血管作用(P<0.01);一氧化氮合酶抑制剂L-NAM E(1-0 4m o l/L)预处理内皮完整的主动脉环,可增强10.0 g/L华蟾素的缩血管作用(P<0.01)。结论:华蟾素对大鼠离体胸主动脉有收缩作用,其缩血管机制与其促使细胞外Ca2 经电压依赖性钙通道内流进入血管平滑肌细胞有关;同时,华蟾素作用于血管内皮细胞,引起血管舒张因子一氧化氮的释放,部分抵消其缩血管效应。     

绞股蓝总皂苷对血管性痴呆大鼠海马一氧化氮合酶及核酸的保护作用

目的 观察绞股蓝总皂苷(GP)对血管性痴呆(VD)大鼠海马神经元型一氧化氮合酶(nNOS)及核酸的保护作用。方法 采用改良的Pulsinelli 4-血管阻断(4-VO)方法建立大鼠VD模型，用免疫组化法研究GP对大鼠海马nNOS的表达的影响，并用吖啶橙染色法进行GP对VD大鼠海马的DNA和RNA保护作用的研究。结果 与正常对照组比较，VD大鼠海马CA1区和CA3区nNOS阳性神经元数目明显减少，而DNA和RNA吖啶橙染色后的荧光强度(反映DNA和RNA含量)明显减弱，GP 200 mg／kg ig给药组海马各亚区的nNOS阳性神经元神经细胞数比VD模型组明显增多。DNA和RNA吖啶橙染色后的荧光强度强于VD模型组，与正常对照组相似。结论 GP可明显增强VD大鼠海马nNOS阳性神经元的表达，并对DNA和RNA有保护作用。     

磷酸二酯酶在鼠胸主动脉中的表达及其对血管张力的调节作用

目的观察磷酸二酯酶（PDE）1和PDE3亚型在大鼠胸主动脉中的表达及其对血管张力的调节作用。方法采用RT-PCR检测PDE1和PDE3亚型mRNA的表达。将大鼠胸主动脉制备成2—3mm的血管环,苯肾上腺素（PE）诱导血管环收缩后,分别用特异性PDE1抑制剂IC86340和PDE3抑制剂milrinone处理去除内皮组和保留内皮组的血管环,测定两组舒张血管的作用。结果①PDE1A、PDE1B、PDE1C、PDE3A和PDE3B亚型mRNA在大鼠胸主动脉均有表达。②在保留内皮组和去除内皮组,IC86340均舒张PE诱发的血管收缩（P〈0．01）;并且对去除内皮组的舒张作用小于保留内皮组（P〈0．01）。③在保留内皮和去除内皮组,milrinone均可舒张PE诱发的血管收缩（P〈0．01）;但milrinone在低浓度时（1&#215;10^-6.5～1&#215;10^-6mol／L）,去除内皮组舒张血管的作用大于保留内皮组（P〈0．05）,而高浓度（1&#215;10^-5.5 ～1&#215;10^-5mol／L）时两组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论PDE1和PDE3亚型mRNA在大鼠胸主动脉表达并参与血管张力的调节。PDE1部分通过血管内皮依赖的机制调节血管张力,PDE3则通过内皮非依赖的途径调节血管张力。     

不同浓度硝酸甘油对大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的作用

目的:探讨不同浓度硝酸甘油(nitroglycerin,GTN)对大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的作用。方法:采用离体大鼠心脏Langendorff灌流方法,结扎冠状动脉左前降支30 min和再灌注120 min复制局部缺血/再灌注损伤模型,测定各项心室动力学指标、冠状动脉流出液中乳酸脱氢酶(lactatede hydrogenase,LDH)含量及心肌梗死面积。结果:与单纯缺血/再灌注组相比,GTN高浓度组(2×10-6mol/L)抑制了再灌注后心功能的恢复(P<0.05~P<0.01),增大了心肌梗死面积(P<0.01),再灌注时冠状动脉流出液中LDH释放增加(P<0.05);GTN中浓度组(1×10-7mol/L)与单纯缺血/再灌注组相比,对心功能的恢复、心肌梗死面积和LDH含量改变不明显;GTN低浓度组(1×10-8mol/L)明显促进了再灌注后心功能的恢复,减小了心肌梗死面积,冠状动脉流出液中LDH释放减少(P<0.05~P<0.01)。结论:高浓度GTN加重心肌缺血/再灌注损伤,中浓度GTN对缺血/再灌注心肌作用不明显,低浓度GTN可保护缺血/再灌注心肌。     

脂多糖对离体培养大鼠血管平滑肌细胞收缩的影响

观察脂多糖（ＬＰＳ）,Ｎｗ－Ｎｉｔｒｏ－Ｌ－Ａｒｇｉｎｉｎｅ（Ｌ－ＮＮＡ）和Ｌ－精氨酸对氯化钾引起的血管平滑肌细胞收缩的影响,并分析一氧化氮在其中的可能作用。方法：离体培养ＳＤ大鼠ＶＳＭＣｓ,采用微网法测量细胞收缩。结论ＬＰＳ对ＶＳＭＣｓ的收缩具有抑制作用,这种抑制作用的可能与ＬＰＳ诱导ＶＳＭＣｓ产生的ＮＯ有关。