APP17肽对卵巢去势大鼠学习,记忆功能和海马神经NT—3,NF？…

目的 探讨ＡＰＰ１７肽是否能提高支卵巢大鼠学习、记忆功能及作用机制。方法 雌性大鼠分三组：①正常组,②去卵巢组,③用ＡＰＰ１７肽保护去卵巢组。通过炎迷宫测试,观察行为学的改变。而后灌注固定,取在 组织冰冻切片,做ＮＴ－３、ＮＦ免疫组化染色。结果 （１）行为学检查：给予ＡＰＰ１７肽的卵巢去势大鼠完全程的时间及错误反应次数均较未给予ＡＰＰ１７肽的卵巢云势大鼠少（Ｐ〈０．０５）。（２）用ＡＰＰ１７肽保护     

APP17肽对糖尿病小鼠记忆功能和海马NT—3,胆碱乙酰化酶神 …

目的 观察糖尿病小鼠学习记忆功能入脑海马内营养因子ＮＴ－３、胆碱乙酰化酶神经元表达的变化，并观察ＡＰＰ１７肽（ＡＰＰ３１９￣３３５）对上述指标的影响。方法 用链脲佐菌素（Ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ ＳＴＺ）诱发糖尿病小鼠模型，并皮下注射ＡＰＰ１７肽，４周后行水迷宫试验；其后对小鼠进行灌注固定，取小鼠脑海马冰冻切片组化染色。结果 （１）糖尿病小鼠与给予ＡＰＰ１７肽的糖尿病小鼠的血糖差异无显著性，分     

糖尿病大鼠海马神经元存活和凋亡相关蛋白的表达及APP17肽的作用

目的　探讨糖尿病 (DM )大鼠海马神经元存活和凋亡相关蛋白神经生长因子α(NGF)、I抗磷脂酰肌醇 3激酶 (PI 3K)、有丝分裂原活化蛋白激酶 (MAPK)、凋亡诱导因子 (AIF)、细胞色素C和磷酸化 MAPK的表达以及APP17肽的作用。　方法　用链脲佐菌素腹腔注射诱发DM模型 ,并皮下注射APP17肽对DM大鼠进行治疗。 12周后 ,6只大鼠取脑组织行NGF、PI 3K、MAPK和AIF、细胞色素C抗体的免疫组化染色 ;6只取新鲜海马组织匀浆 ,以免疫沉淀并Western印迹方法检测PI 3K及磷酸化MAPK抗体的表达。　结果　DM组大鼠海马CA1区NGF、PI 3K、MAPK表达减少(P <0 0 1) ,AIF、细胞色素C阳性神经细胞增多 (P <0 0 1) ;APP17肽治疗 (DP)组与DM组比较 ,AIF(P <0 0 5 ) ,NGF、PI 3K、MAPK和细胞色素C的表达差异有显著意义 (P <0 0 1) ,接近正常对照(NC)组。Western印迹法显示DM组PI 3K比NC组降低 ,p MAPK的表达 3组无明显区别 ;DP组与DM组比较PI3 K表达增高。　结论　DM大鼠海马神经细胞存在功能异常 ,神经存活和凋亡蛋白的异常改变可能参与DM脑病的发生发展 ;APP17肽具有改善这一病理过程的作用     

β淀粉样肽前体蛋白N端319～335肽段APP17肽 对糖尿病大鼠外周神经损伤的防治作用

目的　研究β淀粉样肽前体蛋白中的319～335肽段(APP17肽)对糖尿病大鼠神经病变的保护作用。方法　链脲佐菌素诱发大鼠糖尿病,皮下注射APP17肽4周,测定痛阈及大鼠坐骨神经肌电图,并取脊髓组织冰冻切片做NT3和NF免疫组化染色。结果　用APP17肽的糖尿病大鼠组的潜伏期及传导速度较糖尿病组显著加快,其痛阈较糖尿病组有提高(P<0.05)。免疫组化染色脊髓前角区大多角细胞神经元NT3和NF表达接近正常大鼠,阳性细胞计数及色素数值(反应染色强度)与糖尿病组比较P<0.05。结论　糖尿病大鼠坐骨神经的传导速度减慢,潜伏期延长,痛阈降低,其脊髓前角区运动神经元NT3与NF的表达明显减少。而给予APP17肽的大鼠组,在所观察的指标均接近正常组,提示APP17肽具有防治糖尿病神经元病变的功效。     

APP17肽对糖尿病大鼠脑枕叶视区皮层神经元退行性变的影响

目的 探讨APP17肽对糖尿病(DM)大鼠脑内视觉传导通路枕叶视区皮层神经元退行性变的影响。方法 用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱发DM模型，10周后取脑组织行免疫组化染色观察神经元内凋亡因子Bax、Bcl-2、Cyto C的表达。同时取枕叶视区皮层处脑组织作电镜观察。结果 DM组枕叶视区皮层17区内Bax、CytoC阳性反应神经元数目多、染色深，Bcl-2较正常组神经元数目少，APP17肽组Bax、Bcl-2、CytoC的表达均接近正常组。DM组大鼠枕叶视区皮层神经元超微结构出现明显损害，给予APPl7肽后病变有改善。结论 APP17肽可改善DM大鼠枕叶视区皮层神经元的退行性改变。     

APP17肽对高糖引起神经毒作用的影响

目的 通过观察ＡＰＰ１７肽和高糖环境对人神经母细胞瘤株ＳＹ５Ｙ生长的影响,从细胞水平证实此肽有促进神经细胞生长的作用,并初步观察其对高糖引起神经元毒性作用的保护效应。方法 将细胞计数、ＭＴＴ代谢率及ＬＤＨ漏出率作为观察指标。     

β淀粉样肽产体蛋白N端319—335肽段APP17肽对糖尿病大鼠外周神经损伤的防治作用

目的 研究β淀粉样肽前体蛋白中的319－355肽段（APP17肽）对糖尿病大鼠神经病变的保护作用。方法 链脲佐菌素诱发大鼠糖尿病,皮下注射APP17肽4周,测定痛阈及大鼠坐骨神经肌电图,并取脊髓组织冰冻切片做NT3和NF免疫组化染色。结果 用APP17肽的糖尿病大鼠组的潜伏期及传导速度较糖尿病组显著加快,其痛阈较糖尿病组有提高（P＜0．05）。免疫组化染色脊髓前角区大多角细胞神经元NT3和NF表达接近正常大鼠,阳性细胞计数及色素数值（反应染色强度）与糖尿病组比较P＜0．05。结论 糖尿病大鼠坐骨神经的传导速度减慢,潜伏期延长,痛阈降低,其脊髓前角区运动神经元NT3与NF的表达明显减少。而给予APP17肽的大鼠组,在所观察的指标均接近正常组,提示APP17肽具有防治糖尿病神经元病变的功效。     

APP17肽对DM大鼠海马神经元胰岛素和凋亡信号传导通路相关蛋白的影响

目的 观察糖尿病大鼠海马脑区胰岛素和凋亡信号传导通路中某些相关蛋白的表达及APP17肽对其表达的影响。方法 链脲佐菌素诱发大鼠糖尿病模型，并用APP17肽治疗。用免疫沉淀和Western-blot法分析海马中信号传导及部分凋亡相关蛋白；电镜观察大鼠脑组织超微结构。结果 DM大鼠IGF－IRα、Akt/PKB、CREB表明明显降低，APP17肽治疗后明显上调（P＜0．05），GSK－3β、PP－1及凋亡相关蛋白Bax、AIF表达增加，治疗后则明显降低（P＜0．05）；超微结构表明APP17肽治疗后兴奋性突触小泡明显减少。结论 糖尿病大鼠海马脑区胰岛素和凋亡信号传导通路中某些重要蛋白表达异常，APP17肽部分纠正这些蛋白的异常表达，这可能是其保护DM大鼠海马神经元的机制。     

APP11肽对糖尿病大鼠神经病变的治疗作用

重组人神经生长因子 (ｒｈＮＧＦ)治疗糖尿病外周神经病变 (ＤＰＮ)在西方国家已进入第三期临床试验 ,初步结果正如人们所期望的那样 ,ｒｈＮＧＦ能特异性地改善小纤维外周神经元的功能〔1〕。我们几年来的研究表明ＳＴＺ糖尿病鼠不仅存在ＤＰＮ ,而且脑和脊髓神经元也存在明显的神经退行性病变。特别在海马神经元尤为明显。但这种神经退行性病变可被皮下注射ＡＰＰ (β ａｍｙｌｏｉｄｐｒｅｃｕｒｓｏｒ ｐｒｏｔｅｉｎ) 17肽(ＡＰＰ6 95中 319～ 335肽段 )而获明显改善〔2 4〕。最近 ,我们在ＡＰＰ分子的Ｎ端发现了一个新的多肽片段 ,定…     

APP17肽对链佐星-大鼠海马胰岛素信号转导相关蛋白表达的影响

目的　通过免疫组化的方法 ,研究APP1 7肽对链佐星 (STZ)诱发的糖尿病大鼠海马神经元Akt PKB ,CREB ,GSK 3β以及Bax ,Bcl 2等蛋白表达的影响。方法　用STZ腹腔注射诱发糖尿病模型 ,并皮下注射APP1 7肽对糖尿病组进行治疗。 1 0周后行通道水迷宫测定 ,取脑组织进行Akt PKB ,GSK 3β以及Bax ,CREB ,Bcl 2的免疫组化染色。结果　糖尿病组海马内Akt PKB ,CREB的阳性反应神经元数目减少 ,染色淡。GSK 3β,Bax阳性神经元较对照组明显增多 (P <0 .0 1 )。Bcl 2阳性神经元数目 3组间相比无明显差异。糖尿病APP1 7肽治疗组与对照组相近。结论　糖尿病脑病大鼠海马存在胰岛素信号转导途径相关和凋亡级联反应相关蛋白的表达异常 ;APP1 7肽能改善这些蛋白表达 ,使之接近正常     

PI3K特异性抑制剂Wortmannin和APP17肽对SY5Y细胞胰岛素信号转导通路的作用

目的利用PI3K的特异性抑制剂Wortmannin阻断体外培养的人神经母细胞瘤株SY5Y细胞的存活信号转导通路，观察β淀粉样肽前体蛋白（APP）17肽对SY5Y细胞生长的影响及其作用机制。方法体外培养SY5Y细胞，分为对照组、Wortmannin组、APP17肽组、APP17肽＋Wortmannin组、葡萄糖组、葡萄糖＋APP17肽组、葡萄糖＋Wortmannin＋APP17肽组，观察各组细胞的噻唑蓝（MTT）代谢率、乳酸脱氢酶（LDH）漏出率、细胞轴突长度、胞体面积。结果（1）APP17肽可促进SY5Y细胞MTT代谢率升高、LDH漏出率降低、细胞轴突长度和胞体面积增加，但经Wortmannin作用后，其作用减弱。（2）APP17肽对高糖环境下的SY5Y细胞也有上述作用，且经Wortmannin作用后其作用减弱。结论APP17肽能通过激活胰岛素的PI3K信号转导通路发挥其神经保护作用。     

Kh DIC小鼠海马神经细胞线粒体自由基水平的变化及APP17肽的影响

目的 观察Kh DIC（KM hn／IDL JIMP CAMS）小鼠海马神经细胞线粒体自由基水平的变化及APP17肽（β-amyloid precursor protein，APP，319-335肽段）的影响。方法 2．5月龄的Kh DIC小鼠随机分为模型组和APP17肽治疗组，正常对照组采用月龄和性别相匹配的正常昆明（KM）小鼠。APP17肽治疗组给予皮下注射APP17肽，每只每次0．34g-g，每周3次；模型组和正常对照给予等量的生理盐水；25W后成模。应用水迷宫试验观察小鼠学习、记忆功能的变化，应用羟胺法和硫代巴比妥酸（TBA）比色法分别检测了海马神经细胞线粒体抗氧化酶活性及自由基水平。结果 ①水迷宫结果显示，模型组小鼠存在明显的学习和记忆功能障碍，其游完全程的时间和错误反应次数均较正常对照组增多（P〈0．05）；APP17肽治疗组小鼠的行为学障碍明显轻于模型组，其上述的水迷宫检测结果与正常对照组比较无显著性差异。②与正常对照组比较，模型组小鼠海马神经细胞线粒体超氧化物歧化酶（SOD）活性明显降低（P〈0．01），丙二醛（MDA）含量显著升高（P〈0．01）；APP17肽治疗组检测结果与正常对照组接近，SOD活性高于模型组（P〈0．01），而MDA含量低于模型组（P〈0．01）。结论 ①Kh DIC小鼠存在学习和记忆功能障碍；而且其海马神经细胞线粒体氧化应激反应明显加剧。②APP17肽具有清除自由摹和抑制氧化应激反应的作用，从而提高脑组织的抗氧化能力，保护学习、记忆功能。     

小剂量17β雌二醇对去卵巢大鼠松质骨的作用

10月龄SD大鼠200只分为3组：去卵巢大鼠；去卵巢大鼠17β雌二醇干预组；假手术组。发现小剂量17β雌二醇对卵巢切除所致的松质骨丢失有防治作用。     

APP17肽对糖尿病KK小鼠肾脏的保护作用

目的：观察App17肽对2型糖尿病小鼠尿白蛋白、总蛋白排泄量和肾脏超微结构的影响。方法：KKAy小鼠，根据血糖水平分为：血糖正常组（C组），糖尿病组（D组）和17肽治疗组（D＋17P组），17肽治疗组给予APP17肽皮下注射。12周后将3组小鼠处死。处死前1d，用代谢笼收集小鼠24h尿量，测总蛋白、白蛋白值；处死时心脏取血测血糖及血胰岛素水平；取肾皮质送电镜检查。结果：（1）D组小鼠肾小球基底膜明显增厚，近曲小管出现大量空泡和退变钙化的线粒体，而线和D＿17P组小鼠无此改变。（2）三组小鼠尿总蛋白和尿白蛋白排泄量由低到高依次为C≤D＋17P≤D（P＜0．05）。（3）D组和D＋17P组小鼠的血糖、糖化血红蛋白、胰岛素水平比C组明显升高（P＜0．05），D组和D＋17P组之间差异无显著性（P＞0．05）。结论：App17肽对KKAy糖尿病小鼠肾脏病变具有保护作用，但不是通过影响血胰岛素和血糖水平实现的。     

小剂量17β-雌二醇对去卵巢大鼠骨密度、体脂及血脂的作用

目的　评价小剂量 17β 雌二醇对去卵巢大鼠骨密度 (BMD)、体脂和血脂的作用。 方法　 10月龄SD大鼠 2 0 8只 ,实验开始时取 8只大鼠处死作为基础 ,其余 2 0 0只随机分成去卵巢组 (OVX组 )、17β 雌二醇替代组 (EST组 )和对照组 (SHAM组 )三组 ,每组在 3周、6周、9周、12周、15周、18周及 2 1周时处死 ,处死前应用双能X线骨密度仪测定全身BMD、体重、脂肪含量及脂肪含量百分比 ,分离血清测定甘油三酯、胆固醇、高密度脂蛋白及低密度脂蛋白。结果　大鼠去卵巢后 3周时体重和血清低密度脂蛋白升高 ,15周时全身BMD下降 ;9周和 18周时低密度脂蛋白水平升高 ;2 1周时 ,血清甘油三酯和胆固醇水平增加 ,高密度脂蛋白水平降低 ,脂肪含量及脂肪含量百分比增加。补充 17β 雌二醇 6周后 ,EST组BMD、甘油三酯和胆固醇高于OVX组 ;在 9周前 ,EST组体重低于OVX组 ;9周后EST组高密度脂蛋白高于OVX组和SHAM组。结论　早期应用小剂量 17β 雌二醇有助于提高BMD ,抑制去卵巢后体重增加 ,同时亦增加甘油三酯、胆固醇和高密度脂蛋白水平