白藜芦醇在诱导人胃癌HGC27细胞凋亡中的机制研究

目的探讨白藜芦醇(Res)干预人胃癌HGC27细胞后,PTEN与p-Akt信号通路中,VEGF、MMP-9表达差异并探讨其相互关系。方法应用体外HGC27细胞培养技术,采用CCK-8实验测定Res对HGC27细胞生长抑制率的影响;采用流式细胞术分析细胞周期;采用Western blotting检测Res对HGC27细胞中凋亡相关基因PTEN和p-Akt的影响;采用ELISA法检测Res干预前后HGC27细胞的VEGF和MMP-9蛋白分泌水平的变化。结果 Res对HGC27细胞的生长抑制率存在浓度和时间依赖性(P<0.05);Res干预HGC27后48 h,细胞周期分析显示DNA合成期(S期)细胞比例明显减少,并呈现剂量相关性(r=-0.930,P=0.007);PTEN相对表达量与Res干预浓度呈正相关(r=0.951,P=0.04);p-Akt、VEGF和MMP-9相对表达量均与Res干预浓度呈负相关(r=-0.969,P=0.03;r=-0.894,P=0.02;r=-0.881,P=0.01)。结论 Res能够抑制人胃癌HGC27细胞的增殖,并且诱导其凋亡,其机制可能与上调PTEN的表达和抑制Akt的磷...     

Psammaplin A对人结肠肠癌LS174-T细胞增殖和凋亡影响的研究

目的 探讨作用人结肠癌LS174-T细胞后,PTEN与p-Akt信号通路中,VEGF、MMP-9表达差异并探讨其相互关系.方法 应用体外细胞培养技术,采用MTT实验测定Psammaplin A对LS174-T细胞增殖的影响;用流式细胞仪分析细胞周期;通过免疫印记法检测Psammaplin A对LS174-T细胞中凋亡相关基因PTEN和p-Akt的影响;采用ELISA法检测Psammaplin A干预前后LS174-T细胞的VEGF、MMP-9蛋白分泌水平的变化.结论 Psammaplin A能够抑制大肠癌LS174-T细胞的增殖,并且促进其凋亡,其机制可能与上调PTEN的表达和抑制Akt的磷酸化有关,并通过调控VEGF、MMP-9的分泌实现LS174-T的增殖抑制及凋亡.     

北冬虫夏草水提物对人肺腺癌细胞A549的作用

目的探讨北冬虫夏草水提物(CME)对人肺腺癌细胞A549的作用。方法以不同质量浓度的CME处理A549细胞24、48、72 h,CCK8法检测细胞生长抑制率。以0.5 mg/mL CME处理A549细胞(干预组)12、24和48 h,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率,Western blotting检测A549细胞增殖相关蛋白(p-ERK和p-Akt)和凋亡相关蛋白(caspase-3)的表达;以未予CME处理的A549细胞作为对照组。结果 A549细胞生长抑制率随CME质量浓度的升高和处理时间的延长而上升,呈明显的浓度-时间依赖性(P<0.01)。与对照组比较,干预组G2/M期细胞比例明显增加(P<0.01);干预组细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.01),且与CME处理时间呈显著正相关(r=0.995,P<0.01);干预组p-ERK和p-Akt表达明显低于对照组,且与CME处理时间呈显著负相关(r=-0.881,P<0.01;r=-0.932,P<0.01);干预组caspase-3表达显著高于对照组(P<0.05),且与CME处理时间呈显著正相关(r=0.681,P<0.01)。结论 CME对A54...     

SPARC对胃癌细胞系HGC27体内侵袭能力及MMP-2表达的影响

目的:探讨短发夹shRNA干扰抑制富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)表达对胃癌细胞体内侵袭能力的影响及其部分机制.方法:利用稳定转染SPARC shRNA的人类胃癌细胞系HGC 27、转染空白载体对照和来转染的HGC 27细胞分别接种在裸鼠皮下生成皮下种植瘤来观察胃癌细胞在体内的侵袭能力的变化.对获得的裸鼠种植瘸标本通过Western b1ot进行SPARC、基质金属蛋白酶MMP-2表达的检测及相关性分析.结果:与空载转染对照组和HGC 27细胞组比较,SPARC shRNA转染组的生长减慢,肿瘤缩小,并且侵袭的范围也明显减少(P＜0.05).同时,转染了SPARC shRNA的HGC 27细胞组的肿瘤SPARC表达水平降低(P＜0.05);转染了SPARC shRNA的HGC 27细胞组的肿瘤MMP-2表达水平降低(P＜0.05),且SPARC和MMP-2表达差异之间具有显著相关性(r=0.878,P＜0.01).结论:RNA干扰抑制SPARC可以降低胃癌细胞的体内生长和侵袭能力,其部分机制可能是抑制SPARC可以下调MMP-2的表达.     

PTEN基因对胶质瘤细胞增殖及侵袭性影响的体外研究

目的探讨PTEN基因转染人胶质瘤U251细胞后对其增殖及侵袭性的影响。方法应用脂质体转染技术,将含PTEN基因重组表达质粒转染U251细胞系,Western blot鉴定其蛋白表达;应用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法观察对细胞株生长的影响;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡;应用免疫组化检测转染PTEN的U251细胞基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)和金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1、TIMP-2)的表达变化。结果 PTEN质粒成功转染U251细胞并有PTEN蛋白的表达。与对照组、空载体组相比,转染组细胞生长抑制率下降达52.46%;细胞周期改变,细胞从G1期到S期发生阻滞;转染组MMP-2、MMP-9表达显著下降,而TIMP-1、TIMP-2表达显著上升,两者呈负相关(r=-0.506,P<0.05)。结论 PTEN转染人胶质瘤细胞系U251后,可抑制其增殖、促进凋亡;并可能通过抑制MMPs和促进TIMPs来抑制细胞侵袭性。     

牛磺酸通过线粒体凋亡途径诱导胃癌细胞凋亡

目的:探讨牛磺酸对人胃癌细胞系HGC27细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法:体外培养的HGC27细胞,用不同浓度牛磺酸处理24、48、72 h,MTT法测定其对HGC27细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察细胞的形态学变化;牛磺酸(浓度分别为20、40、80 mmol/L)处理HGC27细胞48 h后,分别采用流式细胞仪检测细胞凋亡,Rh123探针染色流式细胞仪检测线粒体膜电位变化,western blot法检Bcl-2、Bax、细胞色素C(cyt-c)、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达情况。结果:牛磺酸(浓度10~160 mmol/L)能抑制HGC27细胞的增殖,呈剂量和时间依赖性;倒置显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态;牛磺酸(浓度分别为20、40、80 mmol/L)作用HGC27细胞48 h后,细胞凋亡率分别为15.2%、23.3%、35.4%,而对照组凋亡率仅为3.4%;线粒体膜电位降低,Bax、细胞色素C表达上调,而Bcl-2表达下调,Casepase-3、Caspase-9酶原均有活化,可见裂解后片段,呈剂量依赖性。结论:牛磺酸能抑制HGC27细胞的增殖并可能是通过线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡。     

白藜芦醇对人宫颈癌C33A,SiHa和HeLa细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨白藜芦醇(Res)对宫颈癌C33A,SiHa和HeLa细胞增殖与凋亡的影响.方法:MTT法检测不同浓度Res对C33A,SiHa和HeLa细胞的抑制率.流式细胞仪检测细胞的凋亡率及细胞周期.荧光显微镜观测凋亡细胞.结果:Res在一定浓度范围内,以浓度和时间依赖的方式抑制官颈癌C33A,SiHa和HeLa细胞的生长(P＜0.01).荧光显微镜下细胞呈现典型的凋亡性改变.Res对细胞周期无明显影响.结论:Res通过诱导细胞凋亡以时间依赖和浓度依赖的方式抑制宫颈癌C33A,SiHa和HeIJa细胞的生长.     

AEG-1与ICAM-1、MMP-2、MMP-9在胃癌组织中的表达及意义

目的 探讨星形细胞上调基因-1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)、细胞间黏附因子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)和基质金属蛋白酶(MMPs)在胃癌组织中的表达及意义.方法 对胃癌和癌旁组织标本45例进行免疫组织化学染色,检测AEG-1与ICAM-1、MMP-2、MMP-9在2种组织中的表达.结果 胃癌组织中AEG-1、ICAM-1、MMP-2、MMP-9阳性表达率分别为77.8%、62 2%、73.3%、71.1%,癌旁组织中分别为26.7%、77.8%、35.6%、37.8%,AEG-1、MMP-2、MMP-9在胃癌组织中阳性表达均比癌旁组织高(P＜0.01);而ICAM-1在胃癌组织中阳性表达率表达低于癌旁组织(P＜0.05).相关分析显示,AEG-1与MMP-2、MMP-9表达呈正相关(r=0.379 2、0.485 3,P＜0.05);ICAM-1与MMP-2表达呈负相关(r=-0.297 6,P＜0.05).结论 AEG-1在胃癌组织中过表达,其可能通过调节MMP-2、MMP-9表达而增强胃癌细胞的侵袭黏附能力,促进胃癌的侵袭进展.     

二乙酰去水卫矛醇对胃癌细胞系HGC27生长和凋亡的影响

目的:探讨二乙酰去水卫矛醇(DADAG)对胃癌细胞系HGC27生长的影响.方法:在培养的人胃癌细胞系HGC27中,加入DADAG作用24、48、72、96 h后,用MTT法检测细胞生长情况,用BECKMAN COULTER流式细胞分析仪检测细胞的凋亡百分率.结果:DADAG对胃癌细胞系HGC27的半数抑制浓度(IC50)为6.29 mg/L.加入浓度为8.0 mg/L 的DADAG,24、48、72、96 h时HGC27细胞的生长抑制率分别为31.58%、43.04%、49.51%和63.91%;凋亡率分别为22.553%、29.331%、33.237%、35.117%.结论:DADAG在体外具有明显的抑制胃癌细胞系HGC27生长的作用.     

丙戊酸对人卵巢A2780细胞增殖及血管生成和转移相关因子表达的影响

目的 研究丙戊酸(VPA)对人卵巢癌A2780细胞生长、血管生成和转移相关因子表达的影响.方法 用不同浓度的VPA处理体外培养的人卵巢癌A2780细胞,采用MTT比色法、流式细胞仪和免疫组织化学检测细胞生长和凋亡、血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白的表达变化.结果 经VPA处理后,A2780细胞的细胞形态发生明显变化,细胞生长能力降低,并呈现浓度和时间依赖性,VEGF和MMP-9蛋白表达均降低.结论 VPA可以抑制卵巢癌A2780细胞生长,并诱导人卵巢癌细胞凋亡,下调VEGF和MMP-9蛋白表达.VEGF和MMP-9蛋白表达下调提示VPA可能有抑制肿瘤血管生成和转移作用.