朱砂、雄黄对感染性脑损伤大鼠乳酸脱氢酶及其同工酶的影响

背景：要提高含重金属和砷化物矿物药(如朱砂、雄黄)中药制剂的用药安全和排除该类药物的出口障碍，有必要对朱砂、雄黄进行有效性和安全性评价。目前，对复方中朱砂、雄黄的药效作用机制尚不清楚。目的：研究生理、病理状态下安宫牛黄丸中的朱砂、雄黄对机体作用的差异，探讨其药理作用机制。设计：随机对照研究。单位：一所大学的临床药理研究所。材料：实验于2003—01在广州中医药大学临床药理研究所完成。选用第一军医大学实验动物中心提供的体质量为250～300gSD雄性大鼠51只。方法：SD大鼠随机分成6组(8～10只／组)：正常组，正常+安宫牛黄散(下简称整方)组(278mg／kg)；正常+除去朱砂、雄黄的安宫牛黄散(下简称拆方)组(222．7mg／kg)；脑水肿模型组(一侧大鼠颈总动脉注射百日咳杆菌250亿／kg)；模型+整方组(造模前1h给药278mg／kg)；模型+拆方组(造模前1h给药222．7mg／kg)。一次给药后5h(模型组注菌后4h)采血、制备脑匀浆。主要观察指标：脑组织、血清中乳酸脱氢酶(LDH)总活力，血清中乳酸脱氢酶同工酶LDH1—5百分酶活力。结果：与正常组比较，正常+整方组、正常+拆方组LDH总活力显著升高32．4％～38．4％(P&;lt;0．05)，LDH1.2百分酶活力均显著升高(P&;lt;0．01)，LDH4.5百分酶活力下降(P&;lt;0．01)，但除LDH5外，两组同工酶酶活间无显著差异。与模型组比较，模型+整方组、模型+拆方组LDH总活力显著下降23．4％～38．5％(P&;lt;0．01)，LDH5百分酶活力显著升高(P&;lt;0．01)，但两组间无显著差异；模型+整方组LDH2.3，百分酶活力显著下降(P&;lt;0．01)，LDH1.4百分酶活力无显著变化；模型+拆方组LDH1.4百分酶活力显著下降(P&;lt;0．05，0．01)，而LDH2.3百分酶活力变化不显著。结论：正常生理状态下服用安宫牛黄散，对心肌、肾等有一定的损伤作用。感染性脑水肿病理状态下，整方和拆方均可抑制被过度激活的LDH酶，两者之间无显著差异；复方中的朱砂、雄黄对LDH同工酶水平有不同程度的影响。     

安宫牛黄丸对脑梗死大鼠血清乳酸脱氢酶同工酶的影响

背景安宫牛黄丸因含有汞、砷成分,其安全性受到关注,有必要进行有效性和安全性评价研究.目的研究生理、病理状态下安宫牛黄丸对机体作用的差异.设计以实验动物为研究对象的随机对照实验.单位一所大学的临床药理研究所.材料实验于2001-03/04在广州中医药大学临床药理研究所完成,广东省医学实验动物中心提供体质量250～300 g SD雄性大鼠24只.方法SD大鼠随机分成4组正常组;正常+安宫牛黄丸组;脑梗死模型组(光化学诱导大鼠大脑中动脉闭塞);脑梗死模型+安宫牛黄丸组.每组6只.给药方法每天胃饲1次,0.13 g/kg,共7 d.主要观察指标血清乳酸脱氢酶同工酶LDH1～5含量.结果正常+安宫牛黄丸组大鼠血清LDH1～3含量比正常组显著升高(P＜0.01),其中正常+安宫牛黄丸组LDH1,LDH2,LDH3的值分别为(17.02±0.46),(14.70±0.18),(15.47±0.13)%,正常组则为(11.25±0.70),(8.26±0.90),(12.86±0.90)%;模型+安宫牛黄丸组大鼠血清LDH3(15.51±2.60,%)比模型组(10.93±2.10,%)显著升高(P＜0.01),LDH4含量显著降低,其值分别为(22.62±3.00)%,(28.18±0.80)%(P＜0.01).结论在局灶性脑梗死病理状态下安宫牛黄丸对机体的损伤作用比在正常生理状态下小,提示安宫牛黄丸在生理、病理状态下,对机体的作用方式存在差异.     

安宫牛黄丸对脑梗死大鼠血清乳酸脱氢酶同工酶的影响

背景：安宫牛黄丸因含有汞、砷成分，其安全性受到关注，有必要进行有效性和安全性评价研究。目的：研究生理、病理状态下安宫牛黄丸对机体作用的差异。设计：以实验动物为研究对象的随机对照实验。单位：一所大学的临床药理研究所。材料：实验于2001-03/04在广州中医药大学临床药理研究所完成，广东省医学实验动物中心提供体质量250～300g SD雄性大鼠24只。方法：SD大鼠随机分成4组：正常组；正常+安宫牛黄丸组；脑梗死模型组(光化学诱导大鼠大脑中动脉闭塞)；脑梗死模型+安宫牛黄丸组。每组6只。给药方法：每天胃饲1次，0．13g／kg，共7d。主要观察指标：血清乳酸脱氢酶同工酶LDH1-5含量。结果：正常+安宫牛黄丸组大鼠血清LDH1-3含量比正常组显著升高(P&;lt;0．01)，其中正常+安宫牛黄丸组LDH1，LDH2，LDH3的值分别为(17．02&;#177;0．46)，(14．70&;#177;0．18)，(15．47&;#177;013)％，正常组则为(11．25&;#177;0．70)，(8．26&;#177;0．90)，(12．86&;#177;0．90)％；模型+安宫牛黄丸组大鼠血清LDH，(15．51&;#177;2．60，％)比模型组(10．93&;#177;2．10，％)显著升高(P&;lt;0．01)，LDH4含量显著降低，其值分别为(22．62&;#177;3．00)％，(28．18&;#177;0．80)％(P&;lt;0．01)。结论：在局灶性脑梗死病理状态下安宫牛黄丸对机体的损伤作用比在正常生理状态下小，提示安宫牛黄丸在生理、病理状态下，对机体的作用方式存在差异。     

气动管道系统传送标本对血液生化检验的影响

目的 探讨气动管道系统(pneumatictubesystem,PTS)传送标本对血液生化检测项目结果的影响.方法 44例病人各抽双份静脉血,一份用PTS传送,另一份用人工运送,配对比较两者之间24项生化检测项目的 差异;对差异显著的项目,分别用30对标本进一步分析PTS传输距离和传输桶内塞满程度的影响.结果 PTS传输组的乳酸脱氢酶(LDH)和钾(K+)结果显著高于人工运送组,差异有统计学意义(P＜0.01),其余22个生化检测项目的 差异无统计学显著性意义(P＞0.05);PTS传输100m组的LDH比传输20m组显著升高(P＜0.01);传输桶内半塞满组LDH和K+与全塞满组相比显著升高,差异有统计学显著性意义(P＜0.01).结论 PTS可导致LDH和K+结果发生偏差,这种偏差与传输距离有关,并可因传输桶内未塞满而显著加剧.     

川芎提取物对神经小胶质细胞缺氧损伤的影响及机制

目的分析川芎提取物对神经小胶质细胞缺氧损伤的影响及机制。方法采用无糖低氧方法构建神经小胶质细胞缺氧损伤模型,并用蛋白免疫印迹法验证,将神经小胶质细胞随机分为空白对照组、阴性对照组、模型组及干预组。空白对照组于正常环境下用DMEM培养基中进行细胞培养,阴性对照组将川芎提取物(200μg/ml)置于正常培养基中进行处理,模型组于缺氧损伤状态下用DMEM培养基进行细胞培养,干预组将川芎提取物(200μg/ml)置于正常培养基后进行缺氧处理。根据CCK-8法对缺氧细胞活力进行观察,并用酶联免疫吸附试验法对乳酸脱氢酶(LDH)释放情况进行检测,根据蛋白免疫印迹法对低氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达水平进行检测,采用流式细胞分析仪对细胞增殖周期进行检测。结果随着缺氧时间的增加,各组神经小胶质细胞中HIF-1α的表达增多;相比空白对照组,模型组在缺氧48 h后细胞增殖能力显著降低(P 0. 05),而干预组细胞增殖能力显著高于模型组(P 0. 05)。相比空白对照组,模型组在缺氧48 h后神经小胶质细胞LDH释放量明显增多(P 0. 05);而空白对照组与阴性对照组LDH释放量的比较,并无显著差异(P 0. 05);干预组神经小胶质细胞LDH释放量明显少于模型组(P 0. 05)。经流式细胞仪检测(以相对细胞粒子数进行比较)结果发现,模型组神经小胶质细胞在缺氧48 h后G2+S期比率较空白对照组明显下降,而干预组神经小胶质细胞G2+S期比率较模型组明显升高(P 0. 05)。结论川芎提取物具有阻滞缺氧神经小胶质细胞LDH释放的作用,可提高缺氧神经小胶质细胞G2+S期比率,提示其可能具有保护神经小胶质细胞缺氧损伤的作用。     

胰岛素对内毒素所致的急性肺损伤保护作用的研究

目的 观察胰岛素(Insulin)对脂多糖(LPS)引起的兔急性肺损伤(ALI)的预防与治疗作用,并初步探讨其作用机制.方法 将新西兰兔随机分为生理盐水(NS)对照组,LPS组,Insulin + LPS组及LPS + Insulin组,气管内滴注LPS建立兔急性肺损伤模型.采用微量注射泵经兔耳缘静脉注射液体,NS组和LPS组注射生理盐水,持续4 h;Insulin+LPS组注射胰岛素混合液,0.5 h后再于气管内滴注LPS、胰岛素混合液持续4 h;LPS+Insulin组先经气管内滴注LPS, 0.5 h后再注射胰岛素混合液,持续4 h.4.5 h后处死实验动物,取肺组织观察形态学改变、测定肺湿/干质量比值(W/D),肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量,肺组织匀浆中TNF-α、IL-6、LDH和MPO的含量.结果 形态学观察表明LPS组肺组织水肿,点、片状出血,大量炎性细胞浸润,肺泡间隔显著增厚,肺泡腔变窄,结构消失.Insulin+LPS组及LPS+Insulin组肺损伤明显减轻,肺组织结构均趋于正常;肺泡腔及支气管腔炎性细胞及渗出物明显减少.LPS组肺W/D与NS组相比明显增加(P＜0.05),BALF中蛋白含量显著增加(P＜0.05),肺组织匀浆中TNF-α、IL-6、LDH和MPO的含量显著增加(P＜0.05);而给予胰岛素预防及治疗后,肺W/D、BALF中蛋白含量、肺组织匀浆中TNF-α、IL-6、LDH和MPO的含量与LPS组相比均明显减少(P＜0.05).结论 Insulin能够防治LPS导致的兔急性肺损伤,这种保护作用可能与其抑制肺组织中炎症介质的作用有关.     

地高辛的应用对心肌酶类的影响

目的探讨地高辛的应用对心肌酶类的影响.方法用化学发光酶免疫法测定血清地高辛浓度,用连续监测法测定心肌酶类,对地高辛使用组与未使用组进行分组比较及相关性分析.结果地高辛使用组与对照组间心肌酶类存在明显的统计学差异(P＜0.01),且各酶类活力随SDCs的升高而上升,与SDCs的相关系数在0.2328～0.5837之间.结论地高辛的应用可使心肌酶类活力增高.     

儿童急性白血病血清乳酸脱氢酶测定的临床意义

目的 探讨乳酸脱氢酶在儿童急性白血病的诊治及预后判断中的临床价值.方法 以酶速率法检测42例初治急性白血病患儿化疗前、缓解后、复发后,同期病毒性心肌炎患儿50例(病毒性心肌炎组),同期健康体检儿童50例(正常对照组)比较血清乳酸脱氢酶水平的变化,测定初诊时骨髓原始 幼稚细胞比例和外周血白细胞计数.结果 儿童急性白血病初治时血清乳酸脱氢酶水平显著高于心肌炎患儿(P＜0.001)及健康对照组(P＜0.001),且与骨髓原始 幼稚细胞比例和外周血白细胞总数呈正相关(P＜0.05);完全缓解后乳酸脱氢酶水平显著低于初治时水平(P＜0.05),复发后乳酸脱氢酶水平显著高于缓解时水平(P＜0.05).结论 血清乳酸脱氢酶可鉴别儿童急性白血病良恶性、病情监测、疗效和预后判断.     

姜黄素对氧化应激条件下心肌细胞线粒体的保护作用

目的探讨姜黄素对氧化应激条件下心肌细胞线粒体的保护作用。方法体外培养H9c2心肌细胞,分为正常对照组、过氧化氢(H_2O_2)组、姜黄素组(姜黄素预处理)。除对照组外,其余各组用H_2O_2处理6 h,建立心肌细胞氧化应激损伤模型。姜黄素组建模前30 min加入相应浓度的姜黄素。6 h后MTT观察H9c2心肌细胞存活率;分光光度计检测细胞培养液中培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性和线粒体中丙二醛(MDA)水平以及超氧化物歧化酶(SOD)活性;流式细胞仪检测线粒体膜电位;酶标仪检测细胞内三磷酸腺苷(ATP)含量及ATP酶;激光共聚焦观察细胞内活性氧(ROS)和活性氮簇(RNS)的产生;透射电镜观察线粒体的形态结构。结果姜黄素可以显著提高氧化应激条件下H9c2心肌细胞存活率。与对照组相比,H_2O_2组线粒体及线粒体嵴水肿增加,密度降低,呈空泡化,LDH和CK-MB水平显著升高(P0.05),ROS、RNS和线粒体内MDA水平显著升高(P0.05),SOD、ATP、线粒体钠钾ATP酶(Na+k+-ATPase)和钙镁ATP酶(Ca~(2+)Mg~(2+)-ATPase)活性水平及线粒体膜电位显著降低(P0.05)。与H_2O_2组相比,姜黄素组线粒体及线粒体嵴水肿减轻,密度增加,空泡化程度减轻,LDH和CK-MB水平显著降低(P0.05),ROS、RNS和线粒体内MDA水平显著降低(P0.05),SOD、ATP、线粒体Na+k+-ATPase和Ca~(2+)Mg~(2+)-ATPase活性水平及线粒体膜电位显著增加(P0.05)。结论姜黄素可以减轻氧化应激条件下H9c2心肌细胞的线粒体损伤,其机制可能与清除细胞内氧化应激产物,增强线粒体内抗氧化酶活性有关。     

低频经颅磁刺激对缺血缺氧脑损伤大鼠学习记忆及体外培养缺血缺氧神经元谷氨酸释放的影响

摘要 目的：观察低频经颅磁刺激（TMS）对缺血缺氧脑损伤（HIBI）大鼠学习记忆能力的影响,同时探讨低频TMS对体外培养的缺血缺氧（HI）大鼠神经元谷氨酸释放的影响。 方法：选用成年SD大鼠,制作缺血缺氧模型,将模型大鼠分为如下三组：HIBI组,TMS+HIBI组以及正常对照组。采用水迷宫来评估大鼠的学习记忆能力。与此同时,我们还体外培养大鼠海马区神经元,同样将其分为HI组、TMS+HI组以及正常对照组。采用氧气葡萄糖剥夺法制作细胞缺血缺氧模型,测定细胞外液谷氨酸及乳酸脱氢酶（LDH）浓度（与神经元损伤呈正相关）,同时观察细胞存活率。 结果：①HIBI后,WM结果显示大鼠的学习记忆能力受损,与正常对照组相比较,有显著差异（P＜0.05）。②经过TMS刺激14d后,TMS+HIBI组大鼠的学习记忆能力高于HIBI组（P＜0.05）。③HI刺激后,体外培养的神经元细胞外液谷氨酸及LDH浓度升高,显著高于正常对照组（P＜0.05）,而神经元存活率则显著下降,低于正常对照组（P＜0.05）。④TMS+HI组神经元细胞外液谷氨酸和LDH浓度低于HI组（P＜0.05）,神经元存活率也显著上升,高于HI组（P＜0.05）。 结论：①HIBI后,大鼠学习记忆能力显著下降,而低频TMS 可以显著改善HIBI大鼠的认知功能;②HI诱导体外培养的神经元损伤,谷氨酸释放增加,细胞存活率降低,而低频TMS可以抑制HI诱导的神经元损伤以及谷氨酸释放,减轻谷氨酸毒性作用,同时增加神经元存活率。这可能与低频TMS改善学习记忆能力有关,这为缺血缺氧脑损伤的治疗提供了新的思路。     

醒脑静注射液与安宫牛黄丸对脑梗死急性期患者神经功能缺损程度的影响

背景临床实际中,发现以醒脑开窍并益气养阴为治则,标本兼治可明显改善脑梗死急性期患者的神经功能恢复情况.目的观察醒脑静注射液与安宫牛黄丸对脑梗死急性期患者神经功能障碍的影响.设计以患者为观察对象,随机对照.单位中国人民武装警察部队广东总队医院.对象研究对象为武警广东总队医院神经内科1998-09/2003-09住院的脑梗死患者.方法将脑梗死急性期患者120例随机分为醒脑静注射液组和安宫牛黄丸组及丹参粉组,各40例,治疗14 d后分别观察患者的疗效、神经功能改善情况.主要观察指标各组患者神经功能改善情况比较.结果醒脑静注射液组、安宫牛黄丸组、丹参粉组总有效率分别为95%,90%,65%,醒脑静注射液组、安宫牛黄丸组肢体瘫痪的恢复明显优于对照组,醒脑静注射液组疗效显著.结论醒脑静注射液与安宫牛黄丸对脑梗死急性期有较好的治疗作用,而且前者对神经功能缺损的恢复效果更为明显.     

枸杞多糖及其复方对链脲佐菌素所致糖尿病大鼠胰岛功能的保护效应

背景:目前,西药治疗糖尿病主要着眼于刺激已受损的胰岛β细胞加强分泌胰岛素,在保护受损的β细胞这方面,中药治疗尤为重要。目的:观察枸杞多糖及其养阴活血复方对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠胰岛功能的保护作用。设计:随机对照动物实验。单位:河南科技大学第一附属医院,医学院。材料:Wistar雄性大鼠70只,6周龄,体质量200g左右。方法:实验于自2001-10/2002-04在河南科技大学动物房进行。70只大鼠分为两组,第1组10只,为正常对照组,第2组60只,为造模组,造模成功共30只,数字表法随机分为3组:链脲佐菌素模型组和复方治疗组、枸杞多糖治疗组各10只;每天9:00复方治疗组灌胃自拟益气养阴活血中药复方(黄芪、山药、葛根各30g,枸杞子、丹参、花粉、地骨皮各15g,当归、知母各12g,丹皮、五味子各10g,水蛭5g,山萸肉20g,等,中药由河南科技大学第一附属医院药房提供,按常规煎后浓缩至相当于生药3.0kg/L)60g/kg,枸杞多糖治疗组灌胃枸杞多糖(由本室从宁夏枸杞子中分离、纯化得到)0.5g/kg,链脲佐菌素模型组和正常组灌胃相当体积的生理盐水,共3周。测定各组在实验3周前后的空腹血糖和胰岛素,并计算胰岛β细胞功能指数;取胰脏检测超氧化物歧化酶、一氧化氮合酶活性和一氧化氮、丙二醛浓度。主要观察指标:正常组、链脲佐菌素组、复方组和枸杞多糖组治疗3周前后的空腹血糖、空腹胰岛素和胰岛β细胞功能指数;各组治疗后胰脏超氧化物歧化酶、一氧化氮合酶活性和一氧化氮、丙二醛浓度。结果:实验大鼠正常组10只,模型组入选造模成功者30只,最终进入结果分析40只。①实验初,与正常对照组比较,各模型组空腹血糖均明显升高(t=16.51～10.07,P<0.01),而空腹胰岛素水平和β细胞功能指数明显下降(t=13.64～100.99,P<0.01).②实验3周后,复方治疗组、枸杞多糖组与链脲佐菌素模型组比较,空腹血糖、一氧化氮、丙二醛浓度、一氧化氮合酶活性明显下降(t=8.08～72.68,P<0.01),而空腹胰岛素水平和β细胞功能指数、超氧化物歧化酶活性明显上升(t=4.39～17.87,P<0.05～0.01)。③复方治疗组的空腹血糖、丙二醛浓度、一氧化氮合酶活性、一氧化氮浓度下降,空腹胰岛素及β细胞功能指数上升均显著优于枸杞多糖治疗组(P<0.01)。结论:枸杞多糖及益气养阴活血复方能使链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠空腹胰岛素及β细胞功能指数升高,血糖下降,改善胰岛β细胞功能,可能与提高胰岛超氧化物歧化酶活性、降低一氧化氮合酶活性有关。     

反复心理应激大鼠下丘脑及脑海马氨基酸含量变化及调肝方、健脾方、补肾方、人参总皂苷作用的比较

背景人体处于应激状态时,脑内的一些氨基酸作为神经递质对脑功能和心理行为具有重要的调节作用,传统中药治疗能够调整人体的应激状态.目的通过观察反复心理应激大鼠下丘脑和海马的谷氨酸、天冬氨酸、γ-氨基丁酸、牛磺氨酸的含量变化,探讨调肝方、健脾方、补肾方及人参总皂苷对其影响.设计随机分组,对照观察实验.单位广州中医药大学基础医学院中医基础理论教研室.材料实验于2002-03/2003-01在广州中医药大学实验动物中心完成.选取Wistar大鼠60只,随机分为6组正常组,模型组,调肝组,补肾组,健脾组,人参总皂苷组,10只/组.调肝方药组成及剂量柴胡5 g,山栀5 g,白芍15 g,枸杞子15 g,枳壳6 g,干地黄18 g,石决明30 g.肾气丸组成及剂量干地黄30 g,山药15 g,山茱萸15 g,泽泻10 g,茯苓10 g,丹皮10 g,桂枝4 g,附子4 g.四君子汤组成及剂量党参20 g,白术15 g,茯苓15 g,炙甘草6 g.方法①常规煎煮取汁后调肝方药浓缩至含生药1.69g/mL,肾气丸浓缩至含生药1.76 g/mL,四君子汤浓缩至含生药1.01 g/mL,人参总皂苷配制成水溶液7 g/L.正常组及模型组灌服9.0 g/L氯化钠注射液2 mL,调肝组、补肾组、健脾组及人参总皂苷组均于限制制动刺激前1 h相应给予调肝方药、肾气丸煎剂、四君子汤煎剂及人参总皂苷溶液各2 mL灌胃.②除正常组外,其余各组均进行心理应激反应模型的复制.将大鼠置于限制制动筒内,通过移动插片而逐步缩小大鼠的活动空间,调节到其不产生强烈反抗的紧张程度,每天限制制动1次,每天限制制动时间不同,第1天为4 h,其后每次增加30～60 min,连续14 d.③将各组大鼠断头取全脑,采用OPA高效液相色谱分析法进行下丘脑和海马中谷氨酸、天冬氨酸、γ-氨基丁酸、谷氨酸含量的检测.主要观察指标各组大鼠下丘脑与海马中谷氨酸、天冬氨酸、γ-氨基丁酸、牛磺氨酸含量的变化.结果实验纳入大鼠60只,全部进入结果分析.①各组大鼠下丘脑与海马中谷氨酸含量的变化与正常组比较,调肝组、健脾组、补肾组、人参总皂苷组下丘脑中含量均明显下降[(21.85±8.19),(15.76±1.80),(14.68±7.91),(21.46±5.45),(13.43±7.68)μmoL/g];与模型组比较,调肝组、健脾组、补肾组、人参总皂苷组海马中含量均明显升高[(11.04±3.65),(11.78±2.17),(18.67±2.98),(20.91±3.96),(17.71±1.83)μmoL/g,P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05].②各组大鼠下丘脑与海马中天冬氨酸含量的变化与模型组比较,健脾组和人参总皂苷组下丘脑中含量均明显下降[(8.65±1.18),(5.72±1.32),(4.67±1.88)μmoL/g,P＜0.01,P＜0.01],而健脾组、补肾组、人参总皂苷组海马中含量均明显升高[(2.58±0.87),(3.93±0.49),(4.52±0.98),(3.83±0.41)μmoL/g,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05].③各组大鼠下丘脑与海马中γ-氨基丁酸含量的变化与模型组比较,调肝组、健脾组、补肾组、人参总皂苷组下丘脑中含量均明显下降[(20.92±4.96),(15.87±2.90),(13.84±2.63),(14.94±3.98),(10.94±3.68)μmoL/g,P＜0.05,P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01],而海马中含量均明显升高[(4.12±1.66),(4.18±1.04),(6.67±1.29),(6.11±0.99),(6.37±0.78)μmoL/g,P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.01].④各组大鼠下丘脑与海马中牛磺氨酸含量的变化与模型组比较,调肝组、健脾组、人参总皂苷组下丘脑中含量均明显下降[(10.24±1.72),(7.82±1.14),(8.00±2.05),(6.42±3.17)μmoL/g,P＜0.05,P＜0.05,P＜0.01],而健脾组和人参总皂苷组海马中含量均明显升高[(12.61±3.51),(17.03±2.74),(18.04±2.14)μmoL/g,P＜0.01,P＜0.01].结论调肝方药的中枢作用部位可能主要在下丘脑,可能与下调氨基酸水平有关;而健脾、补肾方药及人参总皂苷的中枢作用部位可能包括海马和下丘脑,主要与上调氨基酸水平有关,通过增强海马对应激的整合作用,从而达到抗应激损伤的目的.     

三七总皂甙对大鼠海马神经细胞凋亡的影响

目的:以原代培养的大鼠海马神经细胞缺氧/缺糖再给氧为模型,观察三七总皂甙对神经细胞凋亡的抑制作用。方法:流式细胞术检测凋亡细胞百分率,激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内Ca2 浓度,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死细胞百分率,同时,测定细胞LDH的释放。结果:神经细胞缺氧/缺糖5h后再给氧3h时,细胞凋亡百分率明显增高,为19.06%(P<0.01),细胞坏死百分率为6.83%(P<0.01),细胞内Ca2 浓度为169.32nmol/LCa2 浓度(P<0.01),LDH的释放率为27.63%(P<0.01);神经细胞缺氧/缺糖5h后再给氧24h时,细胞凋亡百分率为49.85%(P<0.01),细胞坏死百分率为11.49%(P<0.01),细胞内Ca2 浓度为298.11nmol/L(P<0.01),LDH的释放率为60.35%(P<0.01)。三七总皂甙(25,50mg/L)能降低神经细胞凋亡及坏死的百分率,降低细胞内Ca2 浓度,减少LDH的释放,三七总皂甙的作用随剂量增加而作用增加。结论:三七总皂甙对缺血再灌注损伤后海马神经元的凋亡过程具有抑制作用,这种作用可能与其能降低细胞内Ca2 浓度有关。     

糖尿病骨质疏松大鼠骨代谢改变及双黄益骨方的干预作用

背景目前公认防治绝经期妇女骨质疏松症的有效方法是雌二醇,其副作用及其可能存在的风险制约了人们对药物的依从性;中医药以其药物天然、注重整体调节、多靶点效应等特点受到医学界关注.目的采用卵巢摘除术+链脲佐菌素复合方法建立绝经后糖尿病骨质疏松症大鼠模型,从骨代谢学角度探讨双黄益骨方对去卵巢糖尿病大鼠骨质疏松的治疗作用以及是否具有量效关系.设计完全随机设计,对照实验,多组间比较用方差分析,两两比较用t检验.单位广州中医药大学附属第一医院糖尿病专科.材料实验于2002-06/12在广州中医药大学中医疑难病重点实验室完成.选用6月龄清洁级雌性SD大鼠150只.将大鼠随机分为5组假手术组,模型组,双黄益骨方23.00,5.75g/kg组及尼尔雌醇组,每组30只.方法①去卵巢大鼠模型将大鼠麻醉后,沿背部正中线向下做纵行切口,结扎并切断子宫角,摘除卵巢.假手术组不切除卵巢,余处理同去卵巢造模大鼠.②去卵巢糖尿病大鼠模型去卵巢大鼠模型复制l周后,禁食12 h,按45 mg/kg腹腔内注射链脲佐菌素,分别于24和72 h剪尾采血,用美国雅培公司快速微量血糖仪测血糖,血糖高于11.1mmol/L者.③去卵巢糖尿病骨质疏松症大鼠模型去卵巢糖尿病大鼠成模后,饲养10周,测尿脱氧砒啶啉、生物力学指标,显著低于正常组即确定造模成功.④分组干预双黄益骨方23.00,5.75 g/kg组及尼尔雌醇组分别给相应药物23.00g/kg,5.75g/kg,0.33 mg/kg,于去卵巢糖尿病骨质疏松症成模后给药.中药组加蒸馏水配制成1 kg/L药液灌胃,早晚各1次;尼尔雌醇组加蒸馏水配制成0.15 g/L药液每4周灌胃1次.实验全程24周.⑤于实验结束时称量各组大鼠体质量,取大鼠尿及眼眶静脉窦血液,采用标准法检测空腹尿钙与尿肌酐;采有高效液相色谱法测定尿脱氧砒啶啉;采用免疫凝集法测定糖化血红蛋白;采用放射免疫法测定雌二醇、降钙素、骨钙素及骨碱性磷酸酶.⑥统计学分析多组间比较用方差分析,两两比较用t检验.主要观察指标各组大鼠在实验结束时骨代谢和血尿生化指标及体质量比较.结果实验过程中由于未造模成功及死亡脱失98只,最终进入结果分析52只.①实验结束时,模型组、双黄益骨方23.00g/kg,5.75g/kg组和尼尔雌醇组体质量、血雌二醇水平均明显低于假手术组(P＜0.01);血糖化血红蛋白及骨碱性磷酸酶则显著高于假手术组(P＜0.01).②模型组尿脱氧砒啶啉/尿肌酐、尿钙/尿肌酐明显高于假手术组(P＜0.01),降钙素明显低于假手术组(P＜0.05);假手术组、双黄益骨方23.00g/kg,5.75 g/kg组和尼尔雌醇组尿脱氧砒啶啉/尿肌酐、尿钙/尿肌酐明显低于模型组(P＜0.05～0.01),组间差异不明显.③尼尔雌醇组雌二醇水平明显高于双黄益骨方23.00 g/kg,5.75 g/kg组和模型组(P＜0.01);双黄益骨方23.00g/kg,5.75g/kg组降钙素明显高于模型组、尼尔雌醇组(P＜0.05),双黄益骨方5.75g/kg组更为明显(P＜0.01).④模型组的骨钙素与假手术组相近(P＞0.05),双黄益骨方23.00 g/kg,5.75g/kg组和尼尔雌醇组血骨钙素水平明显高于假手术组和模型组(P＜0.05～0.01),且双黄益骨方23.00 g/kg组升高更明显(P＜0.01).结论双黄益骨方通过减少尿脱氧砒啶啉/尿肌酐、尿钙/尿肌酐排泄、提高降钙素、骨钙素水平而达到抑制骨吸收、促进骨形成作用,较尼尔雌醇组更为显著,无明显量效关系.     

利拉鲁肽对缺氧/复氧诱导的乳鼠心肌细胞损伤的影响

[目的]观察新型降糖药物利拉鲁肽对缺氧/复氧(H/R)诱导的乳鼠心肌细胞损伤的影响.[方法]将体外培养Wistar大鼠乳鼠心肌细胞进行分组:单纯H/R组(A组)、利拉鲁肽组+H/R组(B组)、正常对照组(C组),将A,B两组细胞同时进行H/R损伤,复氧后分别检测3组的乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛含量(MDA)、超氧化酶歧化酶(SOD)活性及各组心肌细胞凋亡率.[结果]A组与C组比较,其细胞培养液中LDH、MDA含量、细胞凋亡率均增加,SOD活性降低,且差异有显著性(P＜0.01).与A组相比,B组LDH、MDA含量、细胞凋亡率则明显降低(P＜0.01),但仍高于C组,且差异有显著性(P＜0.01);SOD活性较A组增高,差异亦有显著性(P＜0.01).[结论]H/R可以造成心肌细胞的损伤,增加细胞的凋亡;利拉鲁肽作为胰高血糖素样肽-1类似物,其直接作用于心肌细胞,可减轻H/R造成的心肌细胞损伤,抑制心肌细胞的凋亡,具有潜在的心脏保护作用.     

实验性动脉粥样硬化家兔主动脉鞘磷脂酶活性与神经酰胺含量变化和大黄素的干预作用

背景神经酰胺信号转导途径可能在致血管内皮细胞凋亡、进而引起泡沫细胞的形成,与平滑肌细胞增殖等动脉粥样硬化发生、发展过程中起重要作用.目的观察家兔实验性动脉粥样硬化发生时主动脉鞘磷脂酶活性、神经酰胺含量的变化以及大黄素的干预作用,并与阳性药物非诺贝特进行对照.设计完全随机对照设计.单位中山大学药学院药理毒理实验室.材料实验于2003-07/12在中山大学药学院药理毒理实验室完成,选择新西兰雄性家兔48只,用高胆固醇饮食复制动脉粥样硬化模型40只,另设8只为正常对照组,模型动物随机分为模型组、大黄素5 mg/kg组、大黄素10 mg/kg组、大黄素20 mg/kg组、非诺贝特25 mg/kg组,每组8只.方法各组在模型复制的第7周起开始用药.大黄素各组每日分别灌胃5 mg/kg,10 mg/kg,20 mg/kg大黄素;非诺贝特25 mg/kg组每日灌胃25 mg/kg非诺贝特,各药用2 mL生理盐水制成混悬剂,1次/d,正常对照组及模型组灌胃等剂量生理盐水,共4周.每只家兔给予喂养食物限制在135～150g/d,动物分笼饲养.主要观察指标[1]各组家兔主动脉内膜脂质斑块面积.[2]各组家兔血清总胆固醇、三酰甘油含量.[3]各组家兔血浆超氧化物歧化酶活性与丙二醛含量.[4]各组家兔主动脉壁鞘磷脂酶活性和神经酰胺含量.结果48只家免均进入实验分析.[1]主动脉内膜脂质斑块面积百分率模型组血管内膜脂质斑块面积(48.87±15.5)%,大黄素各组均小于模型组(P＜0.05或0.01),以大黄素10 mg/kg组作用明显(22.19±12.9)%.非诺贝特25 mg/kg组与模型组基本一致(P＞0.05).[2]血清总胆固醇及三酰甘油含量正常对照组家兔主动脉内膜光滑;大黄素各组血清总胆固醇及三酰甘油含量与模型组基本一致(P＞0.05).非诺贝特25 mg/kg组显著低于模型组(P＜0.05).[3]血浆超氧化物歧化酶活性与丙二醛含量大黄素各组家兔血超氧化物歧化酶活性显著高于模型组(P＜0.05,P＜0.01),丙二醛含量大黄素10 mg/kg,20 mg/kg组均显著低于模型组(P＜0.05).非诺贝特25 mg/kg组与模型组基本一致(P＞0.05).[4]主动脉鞘磷脂酶活性与神经酰胺含量模型组明显高于正常对照组,大黄素5,10,20 mg/kg组明显低于模型组.非诺贝特25 mg/kg组与模型组基本一致(P＞0.05).[5]相关性分析主动脉鞘磷脂酶活性与血胆固醇含量呈正相关(r=0.542,P＜0.01)、与血丙二醛水平呈正相关(r=0.789,P＜0.01),与血超氧化物歧化酶活性呈负相关(r=-0.936,P＜0.01);神经酰胺含量与血胆固醇含量呈正相关(r=0.433,P＜0.05),与血丙二醛水平呈正相关(r=0.673,P＜0.01),与血超氧化物歧化酶活性呈负相关(r=-0.876,P＜0.01).结论大黄素降低总胆固醇、三酰甘油含量的作用不明显,但通过抗氧化、抑制神经酰胺通路的激活、降低鞘磷脂酶活性与神经酰胺的含量,保护了血管内皮细胞,动脉内膜脂质斑块面积明显减少,提示大黄素抗实验性动脉粥样硬化作用与调节神经胺信号转导途径密切相关.     

病毒性脑炎血清心肌酶的变化及其临床意义

目的研究病毒性脑炎时血清心肌酶的变化及其临床意义。方法收集病毒性脑炎（病脑组）48例,另有体检正常者40例为对照组。采用东芝全自动生化分析仪,以酶速率法测定所有患者的血清天冬氨酸转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶心肌型同工酶（CK-MB）、a-羟丁酸脱氢酶（a-HBDH）水平。结果62．5％（30／48）病脑组血清心肌酶出现异常,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）;病脑组患者血清中AST、LDH、CK水平明显高于对照组（P〈0．05或〈0．01）,病脑组CK-MB、a-HBDH水平与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论病毒性脑炎常伴随心肌细胞损伤,血清心肌酶水平升高,对该类患者应常规行血清心肌酶测定。     

参麻益智胶囊对血管性痴呆大鼠体内过氧化状态的影响

背景血管性痴呆的发生和发展与氧自由基代谢的异常关系密切,在痴呆病的药效学实验中常以氧自由基的代谢作为主要指标.目的建立多发性脑梗死动物模型,测定大鼠血液与脑组织内的脂质过氧化物含量、超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶的活性,从而分析参麻益智胶囊对血管性痴呆大鼠体内过氧化状态的影响.设计随机对照单一样本实验.单位辽宁省基础医学研究所药理研究室.材料实验于1997-07/1998-11在辽宁省基础医学研究所药理研究室完成.选取健康Wistar大鼠96只,随机分为6组,即正常对照组、模型对照组、阳性药对照组、参麻益智胶囊高剂量组、参麻益智胶囊中剂量组、参麻益智胶囊低剂量组,16只/组.参麻益智胶囊由人参、天麻等中药总提取物组成,每克药粉含生药2.7 g,由中国中医研究院西苑医院提供.方法除正常对照组外,其余各组均建立多发性脑梗死动物模型.正常对照组及模型对照组均灌胃给予生理盐水0.5 mL;参麻益智胶囊高、中、低剂量组分别灌胃给药3.2,1.6,0.8g/kg;阳性药对照组灌胃给予双氢麦角碱1 mg/Kg.各组于栓塞后1周开始给药,1次/d,连续6周.脂质过氧化物含量按荧光法测定,超氧化物歧化酶活性应用邻苯三酚自氧化法测定,谷胱甘肽过氧化物酶活性按Hafenam方法测定.主要观察指标各组大鼠血浆与脑组织中脂质过氧化物含量、谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性的测定.结果实验纳入96只大鼠全部进入结果分析.①各组大鼠血浆中各项生化指标测定结果脂质过氧化物含量模型对照组及阳性药对照组明显高于正常对照组[(16.0±1.6),(16.0±1.7),(13.4±1.0)μmol/L,t=4.20～10.58,P均＜0.01],参麻益智高、中、低剂量组显著高于模型对照组[(13.1±1.5),(13.3±0.8),(13.9±1.0),(16.0±1.6)μmol/L,t=4.39～11.69,P均＜0.01];与正常对照组谷胱甘肽过氧化物酶活性比较,模型对照组、参麻益智高、中、低剂量组均明显降低[(5.0±1.6),(3.6±0.8),(3.6±1.1),(3.6±0.8),(3.7±0.9)μmol/(g·s),P＜0.05,P＜0.05,P＜0.05,P＜0.01];与正常对照组超氧化物歧化酶活性比较,阳性药对照组明显升高[(31.7±6.7),(38.4±8.4)μmol/(g·s),t=2.57～3.64,P＜0.05].②各组大鼠脑组织中各项生化指标测定结果脂质过氧化物含量模型对照组、阳性药对照组及参麻益智低剂量组均明显低于正常对照组[(140.0±20.0),(130.0±20.0),(102.0±12.0),(83.0±21.0)μmol/L,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05],参麻益智高、中、低剂量组显著高于模型对照组[(95.0±13.0),(96.0±32.0),(102.0±12.0),(140.0±20.0)μmol/L,t=4.28～11.87,P均＜0.01];与正常对照组谷胱甘肽过氧化物酶活性比较,模型对照组及阳性药对照组均明显降低[(0.5±0.1),(0.3±0.1),(0.4±0.1)μmol/(g·s),P＜0.01,P＜0.05],参麻益智中、低剂量组显著高于模型对照组[(0.5±0.2),(0.5±0.1),(0.3±0.1)μmol/(g·s),t=4.28～11.87,P均＜0.01];与正常对照组超氧化物歧化酶活性比较,模型对照组及阳性药对照组明显降低[(23.4±3.3),(16.7±3.3)(16.7±3.3)μmol/(g·s),t=4.45～10.69,P均＜0.01],与模型对照组比较,参麻益智高、中、低剂量组均显著升高[(16.7±3.3),(23.4±3.3),(21.7±6.7),(21.7±3.3)μmol/(g·s),t=4.28～11.87,P均＜0.01].结论血管性痴呆大鼠超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶抗过氧化活性降低,体内过氧化反应增强.参麻益智胶囊通过提高超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性而改善过氧化状态,对血管性痴呆具有治疗作用.