苯酚显色法测定血清中转肽酶的实验报告

γ-GTP 国内常用α-萘胺重氮盐显色法,由于反应时间长,基质空白受游离的α-萘胺影响,显色不稳.近年来,采用γ-谷氨酰对硝基苯胺测定法,但直接测定时释放出的对硝基苯胺含量低,色浅.吸光度低,     

稳定单一重氮试剂显色法测定GGT

γ－L-谷氨酰转肽酶（GGT）测定主要有γ-谷氨酰-α-萘胺法与γ－L-谷氨酰对硝基苯胺法两大类。前者应用比较普遍、历史悠久，但是，反应产物α萘胺的显色剂需临用新鲜配制，本文介绍一种改进的稳定单一重氮显色试剂，不必每次配制；简便实用。并调查了参考值及初步临床价值，将GGT列为肝功常规提供条件。1材料和方法1．1试剂1.1.1基质准：取0．15mol／L（1．829／dl）三羟甲基氨基甲烷及0．06mol／L（0．792g／dl）双甘肽溶液90ml。称取γ－L-谷氨酰-α-萘胺（无水，Mr272．3）217mg，加1mol／L盐酸4ml，使溶解后，与Tris-双甘肽溶液…     

γ-GT 基质液简易干燥法

γ-GT 基质液配制后,保存期短,且在4℃下保存易析出结晶.我们对它的保存方法作了如下改进,秤取γ-谷氨酰-α-萘胺81.3mg,加pH9.0硼酸缓冲液30ml,加热助溶,并迅速冷至室温.将此液分     

γ-谷氨酰转肽酶的病理生理基础和新的临床应用

血清γ-谷氨酰转肤酶(GGT)的测定是低廉的、敏感的实验室指标,它是反应肝功能异常和过量酒精摄入的传统标志.近来研究表明,GGT是氧化应激反应的标志,是独立的风险因子,在一些麦病的发生、病死率方面的预警优于肝脏麦病,如心血管疾病、代谢综合征、肾病等.GGT的重要生物学功能是参与细胞内外γ-谷氨酰循环,是决定细胞内外谷胱甘肽(γ-谷氨酰-L-半胱氨酸-L-甘氨酸)(GSH)水解的酶类,是参与细胞抗氧化的重要因子.在抗氧化/抗毒素方面起到防御的作用,并且平衡细胞的增殖和凋亡.同时,GGT引起的持久性器官污染进而引发肿瘤的发生已越来越受到重视.另外大量实验证实在动脉粥样斑块中检测到GGT,GGT在斑块内部稳定性方面起着相关的作用:如细胞成分的损害性凋亡,斑决的侵蚀和破裂,血小板聚集的增强和血栓形成等.该文正是通过GGT的病理生理基础理论,阐明这些疾病与GGT相关的发病机制.最后,简单表述GGT的检测,有蛋白层面酶活力的测定,组织、细胞中GGT含量的测定和GGT基因检测等.     

肝癌患者GGT、AFU和AFP联合检测的临床意义

2003-03～2004-06以来，我院开展了γ-谷氨酰转移酶(GGT)和α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、血清甲胎蛋白(AFP)的联合检测．以期探讨三对诊断原发性肝癌(PHC)的临床价值及其相互关系。     

羊水酶活性测定用于产前诊断研究的进展

近20年来,羊水酶活性的测定已成为产前诊断的有效措施,并取得了肯定的成果,受到遗传学、优生学、产科学和儿科学界的普遍重视。γ-谷氨酰转移酶(Ec 2.3.2.1,γ-GT)γ-GT 属转移酶类,是一种膜结合酶,其化学本质为一种糖蛋白,催化γ-谷氨酰肽的谷氨酰基转移到受体肽或L-氨基酸分子上的反应,与小肠对氨基酸的吸收、肾小管对氨基酸的重吸收以及与谷胱甘肽的代谢关系密切。它广泛分布于人体各组织(尤其是具     

血清GGT的测定现状与临床诊断价值

γ-谷氨酰转肽酶(EC,2,322).又称γ—谷氨酰转移酶(γ-Glutamyle transferaseGGT),1950年由Hanes 等首先发现,它催化转谷氨酰基的反应。该酶属膜结合酶,分子量9～30万道尔登,最适pH8.9。GGT 是目前临床诊断酶中在体外活性最稳定的,这对该酶的实验室测定和质控血清制作都带来了方便。GGT 在人体组织中存在广泛,以肾含量最高。     

肝癌γ-谷氨酰转肽酶同工酶糖链结构的特点

γ-谷氨酰转酶(γ-Glutamyl transpeptidaseγ-GTP,EC2.3.2.2)活性检测,近年已成为肝胆疾病的常规检验项目Fiala等用3’-甲基-4-2甲氨基偶氮苯诱发大鼠肝癌,癌前肝结节期血清γ-GTP     

γ-谷氨酰转肽酶在临床诊断上的应用

γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）是一种转移酶，主要催化γ-谷氨酰基转换反应。人体内肝、肾、胰、脾、肠、脑和心肌内均含此酶，血清中的主要来自于肝脏，在肝内主要存在于肝细胞质微粒体，肝细胞膜的胆汁分泌侧和细小的胆管上皮中，主要的功能能够催化谷胱甘肽或其他含的谷氨酰基多肽上的谷氨酰基因转移到其他合适的受体上去，对完成体内含寡肽的较小分子化合物的代谢起重要催化作用，转移出去的谷氨酰基被受体接受后参与物质的生物合成。对于γ-GT的测定问题，最早利用谷胱甘肽作为测定此酶的底物，但由于特异性不高，     

用国产Glucana测定GGT活性的中止比色法

本文介绍用国产γ-L-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺(Glucana)作底物测定GGT 活性的中止比色法.以国外文献推荐的连续监测常规法为基础,但改为37℃反应10分钟用1mol/L 盐酸中止反应,410nm 比色,以3-羧基-4-硝基苯胺(Cana)为标准,按U/L 计算结果.Glucana 的Km=0.64mmol/L,最适pH=7.9,10分钟内成零级反应,300U/L 内成线性,批内CV0.26%,天间CV1.9%,平均回收率98.5%,参考范围10～36U/L。用国产底物和进口试剂,用本法和动力学法进行对比试验。实验结果证明:国产Glucana 性能良好;本法快速、简便、精密度及准确度符合临床要求,可在无自动生化分析仪或基层实验室推广。     

血清γ—GT速率测定法的实验条件探讨

本文以γ-谷氨酰对硝基苯胺为底物终浓度为5.0mmol/L。用Tris-甘氨酰甘氨酸(双甘肽)缓冲液(pH8.2),其中双甘肽作γ-谷氨酰基的受体,终浓度为100mmol/L,生成的对硝基苯胺为黄色,在410nm波长处     

应用新合成的试剂作基质测定人血浆凝血酶、凝血酶原和抗凝血酶Ⅱ的一种敏感的比色法

测定血浆凝血酶原、凝血酶及抗凝血酶Ⅲ的方法(如免疫法和血凝固试验等)已有不少报导。最近报导用三肽作底物测定血浆凝血酶及抗凝血酶Ⅲ。所用三肽是H-D苯丙氨酰-L-哌可酰-L-精氨酸或Boc-L-缬氨酰-L-脯氨酰-L-精氨酸的衍生物对硝酰替苯胺(P-nitroanilide)或氨甲基香豆素酰胺(Aminomethylcoumarinamide)。作者曾报导,L-脯氨酰-L-苯丙氨酰-L-精氨酸-α-萘酯对激肽释放酶是一种高灵敏度的基质,并用对甲苯磺酰-赖氨酸萘酯(Tos-Lys-NE)作基质制备了血纤维蛋白溶酶原的酶谱。本文介绍了用苯甲酰-L-亮氨酰-L-丙氨酰-L-精氨酸-α-萘酯(Bz-Leu-Ala-Arg-NE)作基质测定血浆凝血酶原和抗凝血酶Ⅲ,并且制备了血浆凝血酶原和凝血酶的酶谱。     

血清r-谷氨酰转肽酶测定基质液配制方法改进

我科参照《新编临床检验法》(叶应妩,等。上册,第一版)中介绍的方法配制r-GT 测定的基质时,发现易浑浊,且不稳定。我们改进了配制方法,避免了上述弊湍。配制方法如下:称三羟甲基氨基甲烷2.42g,双甘肽660mg,加蒸馏水至100ml。另取一烧杯,称r-谷氨酰-α-萘胺54.3mg,加1.0mol/L 的盐酸3.2ml,溶解后加入     

尿液γ-谷氨酰转移酶测定及其临床应用

尿液γ－谷氨酰转移酶测定及其临床应用宋志强霍萍李丽王蕊王春华曲月英黄丽霞血清γ－谷氨酰转移酶（γ－ＧＴ）增高，通常对于肝、胆、胰的恶性疾患的诊断有一定意义。目前国内应用连续监测法直接测定正常人尿液γ－ＧＴ和在肾脏疾病及其他有关疾病时尿液γ－ＧＴ变化的...     

用欧蔓陀罗凝集素分离纯化人肝癌组织中强结合的γ-谷氨酰转移酶

目的用欧蔓陀罗凝集素分离纯化人肝癌组织中强结合的γ-谷氨酰转移酶(γGT),为进一步制备其抗血清提供抗原,以期对肝癌早期诊断进行研究。方法人肝癌组织经匀浆、溶解、盐析、透析、层析等步骤进行分离纯化;纯化过程中用IFCC推荐方法测定洗脱物的γGT催化活性,用紫外法监测蛋白出峰图谱,用Lowry法测定蛋白含量。结果经过粗提、DEAE阴离子交换层析、凝胶过滤层析及凝集素亲和层析等纯化步骤得到电泳纯的γGT,其比活为10.56U/mg蛋白,纯化倍数为84.9,得率为1.60%。结论该分离纯化方法能够较好地分离纯化人肝癌组织中欧蔓陀罗凝集素强结合的γGT。     

八种γ—GT速率法试剂盒质量的评估

血清γ-谷氨酰基转移酶(γ-GT)测定是诊断肝胆疾病最常用项目之一,具有较高的临床价值。以往国内多采用比色法测定,近年来均普遍采用速率法测定,随之出现了许多商品试剂盒。为了保证检验质量,我们对所收集的八种试剂盒进行了各种性能的评估。一、八种γ-GT速率法试剂上海长征医学科     

γ-谷氨酰转移酶

γ-谷氨酰转移酶(γ-Glutamyltransfe-rase,γ-GT,EC2.3.2.2)又称γ-谷氨酰转肽酶(γ-Glutamyltranspeptidase,γ-GTP),是一种分布广泛的质膜结合糖蛋白。自1950年Hanes发现γ-GT以来,人们对其进行了广泛研究。60年代,不少学者报告肝胆疾病患者血清γ-GT活性增高,引起了     

肾病患者γ—谷氨酰转移酶测定的意义初探

γ-谷氨酰转移酶 ( GGT)在肾脏中含量最高 ,通常肾脏疾病中血液 GGT增高不明显 ,尿液 GGT排出增加 [1] ,作者对部分肾脏疾病患者 GGT进行检测 ,以了解其临床应用价值。现报道如下。材料和方法一、材料 :Beckman- Coulter CX7Delta全自动生化分析仪及配套试剂。二、方法 :GGT测定采用连续监测法 ,即在GGT催化作用下 ,γ-谷氨酰对硝基苯胺上的谷氨酰基转移到双甘肽上 ,生成对硝基苯胺 (黄色 )和谷氨酰双甘肽 ,40 5nm连续监测对硝基苯胺生成速率(吸光度变化 ) ,吸光率增高与 GGT活性成正比。三、检测对象 :正常对照组 30例 ,均为体…     

代谢组学对急性心力衰竭患者诊断价值的研究

目的通过代谢组学方法分析急性心力衰竭(acute heart failure,AHF)患者与对照组代谢组学差异,寻找新的代谢标志物,并对其诊断的价值进行验证。方法本研究为单中心病例对照研究。纳入人群为2018年01月至2019年06月河南省人民医院急诊入院的89例AHF患者,对照组为年龄、性别进行匹配的80例同期无心衰和舒张功能障碍人群。收集研究对象空腹股动脉血样本,进行定性定量处理,建立正交偏最小二乘方-判别分析模型,进行代谢物的诊断分析。结果与对照组相比,AHF组更多伴有冠心病、高血压、糖尿病、房颤、吸烟史,肌酐、尿素、脑利钠肽(B-type Natriuretic Peptide,BNP)、心率水平偏高,左室射血分数、血钠、白蛋白水平偏低。对AHF和对照组进行代谢物分析,发现两组代谢差异显著,其中腺嘌呤、N乙酰-L-谷氨酸、假尿苷、γ-谷氨酰半胱氨酸对AHF的诊断具有一定的价值,诊断AHF的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.995、0.932、0.920、0.900,BNP诊断AHF的AUC值为0.978。结论AHF组和对照组代谢存在显著差异,差异代谢物涉及多种物质;与BNP相比,腺嘌呤、N乙酰-L-谷氨酸、假尿苷、γ-谷氨酰半胱氨酸对AHF具有相似的诊断价值。     

尿液γ-GT检测及其临床意义

血清γ-谷氨酰转移（γ-GT）增高，通常对于肝胆胰的恶性疾患的诊断有一定意义。目前国内应用连续监测法直接测定正常人尿液γ-GT和在肾脏疾病及其有关疾病时尿液γ-GT变化的报道还很少，我们报告尿液（γ-GT）的正常含量和肾脏有关疾病尿液γ-GT的变化，对肾脏疾病的诊断方面有一定的参考价值。