ELISA结合微粒子酶免疫测定法检测低水平HBsAg结果分析

目的探讨ELISA结合微粒子酶免疫测定法(MEIA)对低水平HBsAg检测的结果影响,以指导临床工作。方法对2004年5—7月门诊体检及非因乙型肝炎住院的患者,采用ELISA检测,HBsAg浓度小于5μg/L(2.10≤S/N<9.39)的弱阳性血清标本共238例,采用MEIA法及中和确认试验进行检测。结果ELISA检测弱阳性标本238例中,MEIA检测结果有6例被判为阴性(S/N<2.00),16例被判为<1μg/L的阳性(2.00≤S/N<21.6),其余216例均被判为≥1μg/L的阳性(S/N≥21.6)。被MEIA判为阴性的6例血清标本经MEIA中和确认试验检测这6例仍为阴性(平均中和率35.85%)。被MEIA判为小于1μg/L阳性的16例血清标本经MEIA中和确认试验有15例确认为阳性,1例为阴性(平均中和率45.02%)。结论用ELISA结合MEIA及其中和确认试验检测低水平HBsAg不失为一种经济有效的好办法,对提高血清HBsAg检测的灵敏度,提高乙型肝炎的确诊率与治愈率,具有重要的临床及流行病学意义。     

核酸检测与酶联免疫吸附试验对献血者血液筛查的诊断价值

目的:探讨核酸检测(NAT)与酶联免疫吸附试验(ELISA)应用于献血者血液筛查的诊断价值。方法:选取2016年9月至2018年8月期间惠州市中心血站采集到的65806份无偿献血者的血液标本作为主要观察对象。开展NAT与ELISA检测,比较分析检测数据。结果:ELISA检测阳性513份,阳性率0.78 %;ELISA检测结果阴性标本,核酸检测阳性59例,阳性率0.09 %。ELISA双试剂阳性标本与核酸检测结果的符合率为66.10 %,单试剂阳性标本与核酸检测结果的符合率为2.28 %,灰区阳性标本与NAT检测结果符合率为0。ELISA检测阴性标本NAT检测阳性数为59例,全为乙型肝炎病毒(HBV)DNA阳性,经电化学发光检测乙肝两对半结果为52例是隐匿性乙型肝炎感染,7例检测结果为阴性。结论:NAT检测同ELISA检测相比,假阳性率略低,ELISA检测漏检多为隐匿性乙型肝炎感染。在献血者血液筛查中,NAT检测优于ELISA检测。     

ELISA法检测梅毒螺旋体抗体前带现象1例分析

目前,国内检测梅毒螺旋体抗体绝大多数采用ELISA方法中的双抗原夹心一步法,而应用此种方法检测梅毒螺旋体抗体时,若样本血清中抗体浓度过高,易造成前带现象(钩状效应)引起假阴性.倘若在临床血液检测中出现此种现象,一旦漏检后果严重.2010年2月本院免疫室检出1例TRUST和TPPA试验均阳性、ELISA 试验阴性的梅毒血清标本.在分析原因时考虑到ELISA双抗原夹心一步法可能存在的前带现象,故进一步对该血清标本进行实验室检测.现将有关分析结果报道如下.     

时间分辨免疫荧光与ELISA法检测乙型肝炎病毒血清标志物结果的比较与分析

目的：探讨时间分辨免疫荧光技术（TRFIA）定量检测乙型肝炎病毒标志物（HBV-M）在临床中的应用情况,并进行TRFIA的方法学研究.方法：实验用TRFIA法与ELISA法分别对200例血清标本进行HBsAg检测,对另200例血清样本进行＂乙肝两对半＂检测,同时检测20份HBsAg低值（弱阳性）标准品血清,并对TRFIA法与ELISA法进行结果比较与分析.结果：TRFIA法HBsAg灵敏度（0.2ng/ml）高于ELISA法,TRFIA法HBsAg线性检测范围在0.2-200ng/ml,且TRFIA法的特异性优于ELISA法,ELISA法在检测0.5-1ng/ml时易出现假阴性;且ELISA法易出现HBsAg、HBeAg或HBeAb假阴性,HBcAb假阳性,导致其他模式增多.结论：TRFIA法具有测量范围宽,灵敏度高、特异性强等优点,在临床检测HBV中具有广泛的应用前景.     

两种乙型肝炎表面抗原检测方法的结果比较

目的：探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）和胶体金免疫层析（GIA）法检测HBsAg的优缺点。方法：采用GIA法和ELISA法对155份血清标本进行HBsAg平行检测并比较两法的测定结果。结果：ELISA法检测出HBsAg阳性69份,阴性86份。GIA法检测出HBsAg阳性63份,阴性92份;有6份ELISA法阳性结果标本胶体金法没有检出,两法结果总符合率96．1％。若以ELISA法结果作为真值,则G1A法的敏感性为92．0％,特异性为100％,准确率为96．1％。结论：ELISA法具有高度的敏感性和特异性,但操作程序繁琐,耗时长;GIA法既可单份操作,也可大批量检测,特异性高,出结果快,但敏感性低于ELISA法。两法测定HBsAg各具有优点及不足,应根据具体情况浒行选择．     

胶体金法与ELISA法测HBsAg结果分析

目的：比较胶体金法和ELISA法检测乙肝表面抗原（HBsAg）的性能，为在今后工作中科学合理地选择检测方法提供依据。方法：用胶体金法和ELISA法对323例体检标本同步进行HBsAg检测，以ELISA法为标准，对检测结果进行分析比较。同时观察两组方法的检测时间。结果：323例标本中，ELISA法与胶体金法检测出HBsAg阳性分别为17例和16例；两法均法阳性16例，均阴性306例，两法符合率为99．7％。胶体金法漏检1例，漏检率为0．3％；胶体金法单个样本的检测时间为30分钟，较ELISA法的1小时快。结论：胶体金法测HBsAg简便快速，但存在一定的漏检率，适合急诊或健康体检筛查，用于临床诊治则以ELISA法为优。     

微孔板保存标本的结果分析

按照《血站管理办法》的要求,血站所采集血液的相关原始记录必须保存10年,血液检测的全血标本保存期应在全血有效期内,血清或血浆标本的保存期应在全血有效期满后半年[1]。随着输血引发的医疗纠纷越来越多,血液检测标本的保存显得越来越重要,本站按卫生部的要求,一直保存的血液标本为血袋小辫,从2006年起,增加了保存试管标本的方法,使用全自动加样仪留取标本保存在96孔微板上,现将标本用微孔板保存后的结果分析如下:1材料与方法1.1标本来源:本站2006年12月至2007年5月的无偿献血者的血液标本。1.2试剂:HBsAg用ELISA法,试剂盒由英科新创…     

HBV血清标志物与DNA联合检测对提高输血安全价值

目的：提高输血安全性,评估乙型肝炎血清标志物与核酸联合检测的价值。方法：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和荧光定量聚合酶链反应（PCR）技术,分别对医院患者和献血员的标本进行乙型肝炎病毒标志物和DNA含量检测。结果：经ELISA法检测,346例医院患者中乙型肝炎病毒标志物阴性62份,其中呈HBV—DNA阳性1例（1．5％）;在300份初筛合格的献血员标本中,6例呈HBV—DNA阳性（2％）,其中78份HBsAg阴性三项抗体分别阳性的标本检出HBVDNA阳性4例（5．1％）,222份ELISA法全阴性的标本检出HBVDNA阳性2例（0．9％）。结论：本地区人群存在HBsAg阴性的HBV感染;乙型肝炎病毒DNA和血清标志物的联合检测,对提高输血安全性有重要意义。     

化学发光免疫分析法与酶联免疫吸附法乙肝表面抗原的结果对比

目的:比较化学发光免疫分析法(Chemiluminescence Immunoassay,ECLIA)与酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay,ELISA)检测乙肝表面抗原(Hepatitis B Surface Antigen,HBsAg)的灵敏度与特异性。方法:选取2018年9月-2019年8月本院传染科收治的150例疑似乙型肝炎患者,采集所有入选者血液样本,对其进行ECLIA法和ELISA法检测。结果:ECLIA法的阳性检出率为高达93.3%(140/150),ELISA法阳性率仅仅为74.7%(112/150),ECLIA法阳性率明显高于ELISA法,与ELISA法比较差异有统计学意义(P 0.05);故ECLIA法灵敏度明显高于ELISA法(P 0.05)。结论:与ELISA法相比,ECLIA法对HBsAg检测在阳性率,灵敏度等许多方面都有比较显著的优势,故建议将ECLIA法作为临床检测HBsAg的首先方法而推广应用。     

乙肝表面抗原携带者与弓形体感染相关的探讨

调查中发现,HBsAg阳性人群中,弓形体抗体同时阳性者占22.78%,而HBsAg阴性人群中弓形体抗体阳性仅为5.92%。为此笔者分别对弓形体抗体阳性和阴性人群进行了HBsAg测定,HBsAg阳性者分别为37.88%和12.14%。结果分析表明HBsAg与弓形体抗体阳性成正相关。在人群体上存在着HBV和弓形体的双重感染。1　材料与方法[1]1.1　材料:1标本为静脉血血清;2诊断试剂为HB-sAg诊断血球(卫生部北京生研所生产);弓形体诊断血球(中国农科院兰州兽医研究所生产),均在有效期内使用。1.2　试验方法1.2.1　检测对象:1弓形体检测组,经R-PHA法筛选HBsAg阳性…     

低水平乙型肝炎表面抗原的检测及其临床价值分析

目的：探讨低水平乙型肝炎表面抗原的4种检测方法的灵敏度及检出率。方法：对102例我院门诊及住院患者的HB—sAg浓度介于（0～5）μg／L之间的血清标本以及定值质控血清分别运用微粒子酶免疫分析法（MEIA）、酶联免疫吸附法（ELISA）、时间分辨荧光分析法（TRFIA）以及胶体金免疫层析法（GICA）进行HBsAg浓度的检测。结果：检测灵敏度方面,ME1A、TRFIA、ELISA及GICA四种方法的灵敏度分别为0．125μg／L、0．25μg／L、0．5μg／L和2．5μg／L。5μg／L浓度以下的血清标本HBsAg阳性检出率方面,MEIA为75．5％,TRFIA为69．6％,ELISA为62．7％,GICA为21．6％。结论：对于低水平乙型肝炎表面抗原的检测方面不同方法之间的灵敏度差异较大,5μg／L浓度以下的血清标本HBsAg阳性检出率高低依次为MEIA、TRIFA、ELISA、GICA。     

HIV-1/2抗体口腔快速检测仪临床效果观察

目的:评价HIV-1/2抗体口腔快速检测仪检测艾滋病病毒Ⅰ/Ⅱ型(HIV-1/2)抗体的敏感性和特异性,及其与血液HIV-1/2抗体检测试剂的一致性。方法:使用HIV-1/2抗体口腔快速检测仪采集并检测已知HIV感染者37例及我院性病门诊就诊患者391例口腔外牙龈黏膜渗出液(OMT)标本,同时使用ELISA检测上述人群的血清标本HIV-1/2抗体。结果:37例已知感染者口腔外牙龈黏膜渗出液及血液标本检测均为阳性;391例就诊患者中血液样本呈阳性2例,口腔外牙龈黏膜渗出液呈阳性1例。结果不同的病例1例,后经WesternBlot试验确认为阴性。该HIV-1/2抗体口腔快速检测仪的敏感性为100%,特异性为100%,与ELISA检测的一致性为99.77%。结论:HIV-1/2抗体口腔快速检测仪检测HIV-1/2抗体结果与现行的血液ELISA检测相近。其特有的无创安全、简捷易用的特点适用于不愿或不宜采血人群、艾滋病自愿咨询检测(VCT)门诊和自行检测等,也适用于医疗机构,可有效降低艾滋病职业暴露的风险。     

HBsAg和RBC污染医疗器械的调查研究

目的 对HBsAg和RBC两项指标进行检测研究,为制定预防病毒性肝炎和艾滋病传播的措施,提供科学依据.方法 随机抽样检查综合医院1所,根据其科室设置情况,分类进行抽样检测.HBsAg用RPHA法检测,RBC检测采用联苯胺法作潜血试验.每批实验均设阳性和阴性（空白）对照.结果 牙科钳HBsAg阳性率最高,其次是采血针和采血吸管.直接接触血液的器械,阳性率明显高于非直接接触血液的器械,潜血试验最高的也是牙科钳、采血针和采血吸管,其阳性率显著高于其他种类的器械.结论 HBsAg阳性和RBC污染基本是一致的,检出HBsAg的标本,潜血试验阳性率高,潜血试验阳性的标本,HBsAg检出率高,两者呈正相关关系.直接接触血液的器械阳性检出率明显高于非直接接触血液的器械.故消毒工作的重点是首先要抓好医疗机械直接接触血液的器械.     

DIGFA与FQ-PCR法联合检测患儿肺炎支原体

目的探索一种检测患儿肺炎支原体(MP)的测定方法。方法采用ELISA法、斑点金免疫渗滤法(DIGFA)和实时荧光定量PCR(FQ-PCR)技术分别测定患儿的MP。结果在71例培养或补体结合试验(CFT)阳性的标本中FQ-PCR阳性率为92%(65/71),DIGFA法MP-IgM阳性率为72%(51/71),ELISA法MP-IgM阳性率为70%(50/71)。FQ-PCR阳性率与ELISA和DIGFA二法比较有显著性差异(P均<0.01);DIGFA法阳性率和ELISA法比较无显著性差异(P>0.05)。培养或CFT阴性的43例咳嗽发热患者MP均为阴性。结论DIGFA联合FQ-PCR检测肺炎支原体具有快速、方便、准确的特点,可以满足临床的需要。     

传染性标志物检测结果阶段性回顾

目的：明确血源性传染性标志物检测在医疗损伤性感染防护和规避医疗纠纷的重要意义,探讨其流行趋势及意义。方法：对在潜江市中心医院采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测的血液传染性标记物（乙肝表面抗原（HBsAg）、丙肝抗体（抗-HCV）、艾滋病病毒1/2抗体（抗-HIV1/2）,梅毒螺旋体特异性抗体）相关资料进行阶段性回顾。结果：在88 669份血清标本中,HBsAg阳性血清为12 857例,阳性率为14.5%,明显高于正常人群平均水平;丙肝抗体阳性率为0.42%;艾滋病病毒抗体1/2初筛阳性率为0.06%,梅毒螺旋体抗体（TP-Ab）阳性率为1.08%。结论：潜江地区病原体感染以HBV为主,但有逐年下降的趋势;HCV、HIV和TP感染形势严峻。     

乙肝血清标志物检测结果的核查

乙肝血清标志物如"两对半"已成为门诊或住院患者的一项常用检查项目,尤其是体检.在基层医院,每日的检测数量可达数十及至数百个样本.在基层临床实验室,此试验多为ELISA手工操作,实际工作中诸多原因可能会出现检测结果的差异[1],常致医患纠纷[2].报告前的核查作为质量控制的重要环节,有必要有恰当措施.笔者通过对ELISA检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)呈卫星性反应性的标本,即刻采用金标试纸复核HBsAg的办法,可有效地防止由于诸多原因出现检测结果差异导致的医患纠纷.现报道如下.     

献血人员应用核酸检测技术进行血液筛查的效果研究

目的:研究并分析献血人员应用核酸检测技术进行血液筛查的效果。方法:随机选择2016年1月~2016年12本血站献血者的血液标本347456例为研究对象,采用酶联免疫吸附法完成检测,收集并分析检测结果。结果:经检测标本合格率为97.4%(338422/347456);不合格检测样本主要为HBV/HCV/HIV-1阳性标本、NAT阳性且ELISA阴性、HBV-DNA阳性、HIV-1 RNA阳性等。结论:核酸检测技术应用于献血人员血液筛查,可有效降低献血者感染窗口期及隐匿感染献血者造成的疾病传播,提高医院输血的安全性及可靠性。因此,献血人员应用核酸检测技术进行血液筛查具有显著效果,值得推广。     

HBV—DNA荧光定量与血清标志物和GPT检测的相关性探讨

目的 探讨本地区PCR检测HBV—DNA与乙型肝炎病毒血清标志物佩对半）和谷丙转氨酶检测的相关性。方法用ELISA方法检测HBV感染者乙肝免疫学检测,用PCR方法检测HBV—DNA,并对结果进行分析。结果大三阳组标本,HBV—DNA阳性率达到97．7％,与文献报道有些出入[1];小三阳组标本,HBV—DNA阳性率为69．4％,与文献报道基本一致[2];HBsAg（＋）、HBeAg（＋）组标本,HBV—DNA阳性率为90．6％;HBsAg（＋）、HBcAb（＋）组标本,HBv—DNA阳性率为71．4％;HB—sag（-）、HBeAg（-）,HBV—DNA阳性率为4．5％,与文献报道基本一致[3]。HBV—DNA阳性患者中,转氨酶异常者占65．5％,HBV—DNA阴性患者中,谷丙转氨酶异常者占26．1％。结论HBV—DNA荧光定量PCR检测在临床上对乙型肝炎基因诊断,特别是进行抗病毒治疗和治疗监测方面均优于HBV血清学标志物。     

鸡骨草对HepG2.2.15细胞HBeAg和HBsAg的抑制作用

目的观察鸡骨草(JGC)体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用。方法采用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测鸡骨草对HepG2.2.15细胞的半数毒性浓度(TC50)和最大无毒浓度(TC0);在TC0基础上观察不同浓度药物作用于HepG2.2.15细胞,分别在第72小时和144小时收集细胞培养上清液,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定上清液HBsAg和HBeAg的滴度。结果 TC50为41.85 g/L,TC0为8.93 g/L,鸡骨草可有效地抑制细胞HBsAg和HBeAg的分泌;在作用144 h、浓度为8 g/L时对HBsAg、HBeAg抑制作用最为明显,抑制率分别为29.8%和32.4%。结论鸡骨草在体外有一定的抗HBV的作用,且毒性较低。     

加样方式对竞争法ELISA的影响及其对策

竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)是临床实验室检测免疫学指标的常用手段之一,但在实际操作过程中,待测样品和酶结合物是以先后顺序加入的,这就导致待测样品与酶结合物在竞争结合包被于固相上的抗原或抗体时存在“不公平”的竞争现象。本文以竞争法ELISA检测抗-HBc总抗体为例,对加样顺序在竞争法ELISA中的影响因素进行了实验评价,并提出了相应的对策。1实验资料1·1材料收集日常工作中ELISA检测乙肝标志物(HBV-M)血清标本共232份,其中常见阳性模式组(HBsAg/HBeAg/抗-HBc,HBsAg/抗-HBe/抗-HBc,抗-HBs/抗-HBe/抗-HBc总抗体)62份,单项抗-HBc阳性