冷冻复温后低温保护剂和精子激活剂对精子功能影响的研究

本文对冷冻复温后精子的功能进行了研究观察，发现精液保护剂（甘油－卵黄－枸橼酸钠）对冷冻复温后精子的存活有明显的保护作用，而单纯应用卵黄或甘油溶液却对精子功能存在不利的影响。体外处理精子时应用ＡＴＰ、肌苷对精子的功能无任何的改善。两种浓度的苯甲酸钠咖啡因（１２ｍＭ和４ｍＭ）对冷冻复温后精子在不同时间内的存活和ＣＭ穿透力均有明显的提高作用     

冷冻复温后处理对精子功能影响的研究：I.不同介质处理的影响

本文对冷冻复温后精子在不同介质中进行了离心孵育处理，结果显示：精子营养液可使低温冷冻保存后复温的精子在较长时间内保持良好的活动率；细胞培养液１６４０能显著提高复温后精子的人宫颈粘液的穿透力（Ｐ〈０．０５）。细胞培养液Ｍ１９９、Ｈａｍ’ｓＦ１０和正常精浆对复温后精子功能无明显改善作用。离心处理（２０００ｒ／ｍｉｎ）对复温后精子功能无损害作用。     

冷冻复温后处理对精子功能影响的研究Ⅰ．不同介质处理的影响

本文对冷冻复温后精子在不同介质中进行了离心孵育处理，结果显示∶精子营养液可使低温冷冻保存后复温的精子在较长时间内保持良好的活动率；细胞培养液１６４０能显著提高复温后精子的人宫颈粘液的穿透力（Ｐ＜０．０５）。细胞培养液Ｍ１９９、Ｈａｍ＇ｓＦ１０和正常精浆对复温后精子功能无明显改善作用。离心处理（２０００ｒ／ｍｉｎ）对复温后精子功能无损害作用。     

改良精子冷冻贮存复温法

人类精子库供精为不可治愈的男性不育症夫妇的人工授精提供了有利条件。因精子库具有长期保存精子的优点临床上可广泛应用。但精子在冷冻复温过程中如果条件不得当将会影响精子的活动率、运动速度。为寻求保证冷冻复温后精子功能正常的可行方法，提高人工受精的成功率，我们对３８例精液进行了冷冻自然复温与快速复温，及冷冻精子保护剂每１分钟加入１滴与２分钟加入１滴的对比实验观察，结果报告如下：材料与方法一、材料来源１９９７年８月至１９９８年６月，在我院不育门诊中选择３８例男性不育精液进行研究。不育年限２～１０年，年龄２…     

冷冻保存的人类精子超微结构变化

利用塑料细管法对９例在生育力供精者的精液进行冷冻保存，复温后在透射电镜下观察，发现精子的超微结构发生程度不同的损伤性变化，表现为精子外膜变薄、扭曲变形或破损，顶体肿胀，线粒体透亮度增加，嵴内间隙增宽，但顶体内膜和顶体中纬段仍保持完整。本文指出：冷冻复温导致精子外膜和顶体膜的通透性增加或破损，引起精子内容物漏失和线粒体功能障碍，精子能量代谢降低或停止，因而精子的活动率和运动速度在复温后低于新鲜精子。     

速冻和缓慢冷冻法对精子运动特征的影响

目的了解冷冻方法对人精子运动特征的影响。方法精液标本进行速冻和缓慢冷冻保存,应用计算机精液分析仪进行精子运动特征分析。结果冷冻复温后精子运动能力与冷冻前精子运动能力比较明显下降(P<0.001,P<0.05);速冻与缓慢冷冻方法保存的精子运动参数相比较差异均无显著性(P>0.05)。结论冷冻保存易导致精子运动能力下降,速冻与缓慢冷冻方法对精子运动参数影响无明显差异。     

两种冷冻方法对形态正常精子百分率的影响

目前人类精液冷冻方法主要分为速冻和缓慢冷冻法两大类。精液冷冻保存过程中，精子经历了降温冷却、冻结、解冻复温，其中冰晶形成对精子结构不可避免造成损伤。精子形态是决定精子能否受精的重要因素。低温是否对精子形态产生影响，本研究比较了两种冷冻方法对人精子形态影响，现报告如下。     

冷冻保存的人类精子超微结构变化

利用塑料细管法对9例有生育力供精者的精液进行冷冻保存,复温后在透射电镜下观察,发现精子的超微结构发生程度不同的损伤性变化。表现为精子外膜变薄、扭曲变形或破损,顶体肿胀,线粒体透亮度增加,嵴内间隙增宽,但顶体内膜和顶体中纬段仍保持完整。本文指出:冷冻复温导致精子外膜和顶体膜的通透性增加或破损,引起精子内容物漏失和线粒体功能障碍,精子能量代谢降低或停止,因而精子的活动率和运动速度在复温后低于新鲜精子。但冷冻复温并不影响精子对宫颈粘液和卵子透明带的穿透能力。     

硝普钢地冷冻复温人精子顶体反应的影响

本文目的是研究复温温度和硝普钠（SNP）对冷冻精子复温后成活率和顶体反应的影响和机制,结果表明：对冷冻精子37℃水浴复温效果优于41℃,高浓度SNP可减少精子成活率和顶体反应率,低浓度(0.2nmol/L)可促进精子成活率和顶体反应率,低浓度SNP可使Na^ -K^ -ATP酶活性增加,而对丙二醛（MDA）无影响。     

冷冻精子受精能力的综合评价

目的：观察不同冷冻期冷冻精子的受精能力。方法：应用精液常规分析（ＳＦＡ）、精子尾部低渗肿胀试验（ＨＯＳ）、去透明带地鼠卵穿透试验（ＨＯＰ）及冷冻精液人工授精（ＡＩＤ）对冷冻前后及不同冻存期的精液标本进行综合性检测。结果：１０份正常精液标本的冷冻精子活动率、ＨＯＳ值、ＨＯＰ值均明显低于冷冻前（Ｐ＜０．００１），而不同冻存期的精液行ＡＩＤ术后的总妊娠率与新鲜精液ＡＩＤ术的总妊娠率比较，则基本相同。结论：精子细胞膜虽在冷冻复温过程中受到一定的损伤，使精子活动率和受精能力下降。但是，精液的长期冻存及精子细胞膜部分改变并不完全影响精子的受精能力。     

硝普钠对冷冻复温人精子顶体反应的影响

本文目的是研究复温温度和硝普钠(SNP)对冷冻精子复温后成活率和顶体反应的影响和机制，结果表明：对冻融精子37℃水浴复温效果优于41℃，高浓度SNP可减少精子成活率和顶体反应率，低浓度(0.2nmol/L)可促进精子成活率和顶体反应率，低浓度SNP可使Na+-K+-ATP酶活性增加，而对丙二醛(MDA)无影响     

精子低温保存与精子功能

自５０年代美国和日本相继用低温保存的精液复温后作人工受精,并获得成功以来［１～３］,目前精液低温保存在不育症的治疗、生殖保险、计划生育和优生等领域得到广泛开展。精子功能是影响人工受精成功率的关键因素之一,而低温冻存及复温过程中均会对精子的功能造成一定...     

二硫苏糖醇对冷冻复温的人类精子保护作用的研究

在精子冷冻保存液中加入二硫苏糖醇(DTT),观察复温后精子复苏率、运动速度、测定精子内ATP和精浆内GOT含量。发现DTT能够显著提高精子的复苏率和运动速度,提高精子内ATP含量,降低GOT的释放。本文指出冷冻复温的损伤使精子的细胞膜和顶体膜通透性增加或破损,代谢酶逸漏及能量代谢降低。DTT通过与自由基作用,防止脂质过氧化或修复过氧化物,保护了细胞和顶体膜,提高精子能量代谢,使精子复苏率增高和运动速度加快。     

精子DNA冷冻损伤易感性与精子活动力相关性

目的研究不同活动力精子其核DNA对冷冻损伤的易感性。方法选取来本中心行精液常规分析,精子浓度5×106/ml、精子正常形态率4%者63例为研究对象。精子冷冻前后均采用染色质扩散(SCD)实验分析核DNA完整性,分别比较高活力组(d级30%,n=28)及低活力组(d级≥30%,n=35)精子在冷冻前后DNA完整性的差异。结果精液标本(n=63)经冷冻后,精子DNA碎片指数(SDF)较冷冻前显著升高[(23.1±12.5)%vs.(19.9±11.6)%,P0.05],其中代表精子DNA完整性较好的大晕轮精子比例显著降低[(71.9±13.3)%vs.(75.8±12.2)%,P0.05],而小晕轮精子比例则显著升高[(10.2±5.7)%vs.(8.2±3.9)%,P0.05]。在低活力组,精子SDF及大晕轮、小晕轮精子比例在冷冻前后亦差异显著(P0.05);而在高活力组,冷冻后仅小晕轮精子比例较冷冻前显著升高[(8.3±3.4)%vs.(6.8±3.0)%,P0.05],SDF及大晕轮、中晕轮、无晕轮的精子比例在冷冻前后均无显著差异(P0.05)。结论相比高活力组精子,低活力组精子核DNA冷冻耐受力较差,更易受损。     

不同精浆浓度对精子冷冻复苏后活动能力的影响

为了评价冷冻保护剂中不同的精浆浓度是否影响精子冷冻复苏后的活动能力，作者对已育和不育男子的精液标本分别以含精浆浓度为０％，２５％，５０％，７５％和１００％的冷冻保护剂处理，并对复苏后精子的活动能力和存活时间进行比较。结果显示：健康组中含５０％和７５％精浆保护剂的解冻精子活动率显著高于其他组，不育组中７５％精浆保护剂高于其他组；结果提示：一定的精浆浓度对精子的冷冻复苏有帮助；对某些不育患者的异常精液作冷冻处理时，利用供者精浆置换原精液的精浆可能收到相对较好的复苏效果。     

4种精子冷冻液的比较

目的　通过对不同精子冷冻液 (CPM)的比较 ,选择最佳的精子冷冻液。方法　选择商品冷冻液、蛋黄 甘油 丙酮酸钠冷冻液、蛋黄 甘油 柠檬酸钠冷冻液、自配Earle’s 甘油冷冻液。对冷冻精子活力进行比较。测定 4种冷冻液的渗透压和pH值并进行镜检。结果　精子活率从高到低依次为自配冷冻液 (6 8.32± 4 .82 ) %、商品冷冻液 (6 0 .15± 6 .4 7) %、蛋白 甘油 柠檬酸钠冷冻液 (4 8.4 6± 5 .78) %、蛋黄 甘油 丙酮酸钠冷冻液 (4 1.5 6± 6 .32 ) %。经方差分析比较有显著性差异 (P <0 .0 1)。镜检结果显示含卵黄的精子冷冻液复温后形成了大量的颗粒和碎片 ,临床用于人工授精治疗 6 4个周期 ,以CPM4的妊娠率最高 (2 7.8% )。结论　不同CPM影响精子活率和渗透压。自配冷冻液与商品冷冻液均可获得较高精子活率和妊娠率。     

精子冷冻技术及其对精子蛋白的影响

精子低温冷冻是保持精子无限期存活的一项技术,能够帮助保存男性生育力。然而,冷冻和复苏会对精子产生损伤并影响其功能。损伤的机制涉及物理和化学方面,比如冰晶形成、渗透压改变、DNA破坏和氧化应激等。在这些机制的研究中,很多都涉及精子蛋白的变化,本文就精子冷冻技术的发展及冷冻对精子蛋白的影响作一综述。     

冷冻保存对人精子运动特征的影响

目的研究冷冻保存前后供精者精子运动特征的变化,了解冷冻保存对人精子受精潜能的影响。方法供精者精液标本68例,按照世界卫生组织推荐的方法和仪器行精液常规分析和计算机辅助精子分析(CASA)。入选精液加入甘油-卵黄-柠檬酸钠精子冷冻保护剂,行液氮蒸汽冷冻,1个月后复温,再次行CASA。结果冷冻后精子运动学参数中精子头侧摆幅度(ALH)和鞭打频率(BCF)升高,其它所有运动学参数均降低。精子动动学参数中除中速动动(Medium)、慢速运动(Slow)、平均路径速度(VAP)、直线运动速度(VSL)、ALH外,人精子冷冻前和解冻后各个参数都有显著的正相关(P<0.05)。除Medium、Slow、(曲线速度)VCL、ALH外,供精者精子各项参数冷冻前和解冻后比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。冷冻复温后VCL>25μm/s、VSL>25μm/s。结论冷冻保存后人精子运动能力降低,但仍具有受精潜能。CASA用于冷冻精液的评估有一定的临床应用价值。     

精子冻融技术及其研究进展

精子冻融是辅助生殖技术的基础,冻融可能造成精子结构损伤和活力功能丧失,因此优化冻融方法十分必要。提高冷冻前精液质量、进行精子优选、添加合适的冷冻保护剂、选择适宜的冷冻复苏方法等均可有效地减少冻融损伤,有利于保存男性生育力。本文对精子冻融的基本原理、方法改良、针对特殊质量精液的冷冻方法及冷冻后精子质量评估进行了综述。     

不同季节对北京地区捐精志愿者精子冷冻复苏率的影响

目的 比较不同季节之间精液冷冻前、复苏后参数以及精子冷冻复苏率是否有差异，探究季节因素是否是影响精液冷冻前后参数以及冷冻复苏率的因素。方法 应用回顾性研究方法，收集2017年1月到2022年4月来北京大学第三医院人类精子库捐精人群的精液冷冻前后参数以及精子冷冻复苏率数据。按照气象划分法对捐精时间进行不同季节分组。结果 一共分析了13 774份精液冷冻前后的常规数据。冷冻前精子浓度和冻前精子总活力，春季明显高于其他季节(P<0.05);复苏后精子浓度和复苏后精子总活力，春季高于其他季节(P<0.05)。精子冷冻复苏率，春、夏、秋、冬季分别为83.1(73.3～90.2)%、79.4 (68.7～87.3)%、81.8(72.5～88.2)%、82.7(74.4～88.9)%,春季高于其他季节(P<0.05)。多元线性回归分析发现季节是影响精子冷冻复苏率的主要因素。春季的精子冷冻复苏率比夏季约高3.7%(CI=3.0%～4.3%,P<0.001),春季的精子冷冻复苏率比秋季约高1.0%(CI=0.4%～1.8%,P=0.001)。结论 春季可作为精液冷冻保存的首选季...