加温联合六亚甲基二乙酰胺对MEC—1细胞的作用

目的：研究加温联合六亚甲基二乙酰胺（ＨＭＢＡ）对人粘液表皮样癌ＭＥＣ－１细胞的作用。方法：采用ＭＴＴ法及软琼脂克隆形成法观察加温联合ＨＭＢＡ对ＭＥＣ－１细胞的作用；并用免疫组化法检测加温及联合ＨＭＢＡ对多药耐药（ＭＤＲ）表达蛋白（Ｐ－ｇｐ）的影响。结果：加温联合ＨＭＢＡ对ＭＥＣ－１细胞有协同抑制作用。免疫组化染色显示，对照组及单用药组细胞Ｐ－ｇｐ中度表达；加温组细胞Ｐ－ｇｐ不表达；联合组为低度表达。结论：加温联合ＨＭＢＡ对粘液表皮样癌的治疗可能有一定价值。     

人粘液表皮样癌MEC—1细胞HMBA诱导分化的研究

粘液表皮样癌是最多发的涎腺恶性肿瘤。本实验以六亚甲基二乙酰胺（Ｈｅｘａｍｅｔｈｙｌｅｎｅｂｉｓａｃｅｔａｍｉｄｅ，ＨＭＢＡ）作分化诱导剂，对人粘液表皮样癌细胞系ＭＥＣ－１细胞进行诱导。经对细胞生长动力学、细胞形态学、ＤＮＡ含量等指标观察，结果显示，在ＨＭＢＡ作用下ＭＥＣ－１细胞有向成熟细胞分化的趋势，表明ＨＭＢＡ具有体外诱导ＭＥＣ－１细胞分化的作用。     

六亚甲基二乙酰胺对MEC-1细胞体外粘附、移动和侵袭的影响

目的 研究分化诱导剂六亚基二乙酰胺（ＨＭＢＡ）对人粘液表皮样癌细胞系ＭＥＣ－１体外粘附、移动和侵袭的影响。方法 用２ｍｍｏｌ／Ｌ ＨＭＢＡ体外诱导培养ＭＥＣ－１细胞,用ＭＴＴ（ｔｈｉａｚａｌｙｌ ｂｌｕｅ,噻唑蓝）比色法测定细胞在重构基底膜Ｍａｔｒｉｇｅｌ上的粘附,用Ｍｉｌｌｉｃｅｌｌ－ＰＣＦ培养系统测定细胞的移动性和侵袭性。结果 ＨＭＢＡ诱导的ＭＥＣ－１细胞在３０ｍｉｎ和９０ｍｉｎ粘附实验中的粘     

8—甲氧基补骨脂素对MEC—1细胞癌基因／抑癌基因表达的影响

目的：研究８－甲氧基补骨脂素对ＭＥＣ－１细胞部分基因表达的影响。方法：细胞贴壁后用３０％细胞生长抑制浓度的药物处理１２０ｈ，常规制备标本，ＡＢＣ法免疫组织化学染色。结果；药物处理后细胞Ｐ１６和ｎｍ２３－Ｈ１蛋白表达强度增强，而ＣＤＫ４和Ｈ－ｒａｓ蛋白表达强度减弱。结论：８－ＭＯＰ可以调节ＭＥＣ－１细胞部分基因的表达，从而可能影响细胞相关的生物学特性。     

六亚甲基二乙酰胺联合γ—射线对MEC—1细胞超微结构的影响

目的：探讨六亚甲基二乙酰胺（ＨＭＢＡ）联合辐射对人粘液表皮样癌ＭＥＣ－１细胞超微结构的作用特点。方法：实验分４组，对照组细胞未经药物及射线处理；ＨＭＢＡ组细胞经１ｍｍｏｌ／Ｌ的ＨＭＢＡ诱导作用９６ｈ；γ－射线组细胞在乏氧状态下接受７Ｇｙ的６０Ｃｏγ－射线照射；联合应用组细胞按上述方法先经ＨＭＢＡ处理再接受辐射，用扫描电镜和透射电镜观察各组细胞的形态变化。结果：ＨＭＢＡ组细胞表面微绒毛减少，胞浆线粒体增多；γ－射线组细胞微绒毛凝聚，线粒体肿胀、空化；联合应用组细胞损伤明显，微绒毛凝聚、崩解，线粒体粘连、缺嵴、空化和紊乱。结论：ＨＭＢＡ能增强γ－射线对ＭＥＣ－１细胞超微结构的破坏作用。     

HMBA联合辐射对人粘液表皮样癌MEC—1细胞的抑制作用

用集落形成试验探讨ＨＭＢＡ对ＭＥＣ－１细胞辐射生物效应的影响。结果显示，１或２ｍｍｏｌ／Ｌ的ＨＭＢＡ能增强ＭＥＣ－１细胞系管氧细胞的辐射敏感性，增敏比分别为１．２８和１．１４表明小剂量ＨＭＢＡ与辐射联合应用对ＭＥＣ－１细胞具有协同抑制作用。     

分化诱导剂HMBA与丝裂霉素或顺铂联合应用对耐药MEC—1细胞的作用

研究发现分化诱导剂ＨＭＢＡ与抗癌药丝裂霉素（ＭＭＣ）或顺铂（ＣＤＤＰ）联合应用有可能提高耐药肿瘤细胞对抗癌药的敏感性。联合使用的效果与抗癌药的选择、给药方案及药物浓度有关。ＨＭＢＡ与ＭＭＣ合用可有效地增强ＭＭＣ对原来耐药的ＭＥＣ—１细胞抑制生长效果．ＨＭＢＡ与ＣＤＤＰ联合应用的效果则较差。若以很低浓度ＭＭＣ（０．０１μｇ／ｍｌ）先处理细胞５ｈ再加用Ｚｍｍｏｌ／ＬＨＭＢＡ，抑制细胞生长的效应为６６％，如将１ｍｍｏｌ／ＬＨＭＢＡ与１０μｇ／ｍｌＭＭＣ、或２ｍｍｏｌ／ＬＨＭＢＡ与１μｇ／ｍｌＭＭＣ同时应用，抑制细胞生长效应可达８０％。     

分化诱导剂HMBA联合5—FU治疗粘液表皮样癌的实验研究

用人涎腺粘液表皮样癌ＭＥＣ—１细胞在体内外研究了５—氟脲嘧啶（５—ＦＵ）与分化诱导剂六亚甲基双乙酰胺（ＨＭＢＡ）的联合抗癌作用。体外ＭＴＴ法检测结果表明短时间、低剂量应用５—ＦＵ，随后应用ＨＭＢＡ可显著加强５—ＦＵ对ＭＥＣ—１细胞的毒性作用，同时５—ＦＵ亦加强ＨＭＢＡ对ＭＥＣ—１细胞的生长抑制作用，二者表现为协同作用。裸鼠体内抑癌实验亦证实了体外实验结果，联合用药的抑瘤率、生命延长率均高于单独用药组。结果提示ＨＭＢＡ联合５—ＦＵ对粘液表皮样癌的临床治疗可能具有一定应用价值。     

六亚甲基双乙酰胺对MEC－1细胞裸鼠移植瘤的诱导分化作用

为探讨涎腺粘液表皮样癌治疗的新途径，作者以粘液表皮样癌ＭＥＣ－１细胞裸鼠移植瘤为模型研究了六亚甲基双乙酰胺（ＨＭＢＡ）的诱导分化作用。通过抑瘤率、荷瘤后生命延长率、肿瘤细胞形态学改变及嗜银颗粒（ＡｇＮＯＲ）计数等指标判定了ＨＭＢＡ的效果，结果：抑瘤率为７１．７％，生命延长率２９．６％，ＨＭＢＡ治疗组裸鼠肿瘤细胞形态有向良性方向分化的趋势；嗜银颗粒染色结果也证实治疗组裸鼠肿瘤恶性程度降低。提示ＨＭＢＡ对人粘液表皮样癌ＭＥＣ－１细胞裸鼠移植瘤有一定诱导分化作用，有望进入临床实验化疗     

甲状旁腺激素对人牙乳头间充质细胞DNA合成、细胞周期和超微结构的影响

目的：观察和分析体外培养的人牙乳头间充质细胞经甲状旁腺激素（ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄ ｈｏｒｍｏｎｅ,ＰＴＨ） 作用后,ＤＮＡ合成、细胞周期和超微结构的变化情况,探讨ＰＴＨ 对人牙乳头间充质细胞生长和分化的生物学特性的影响。方法：流式细胞仪（ＦＣＭ） 分析、３Ｈ－ ＴｄＲ 掺入试验和透射电镜（ＴＥＭ） 观察。结果：ＰＴＨ 不影响体外培养的人牙乳头间充质细胞ＤＮＡ合成和细胞增殖;ＰＴＨ 能促进人牙乳头间充质细胞向分化成熟、功能活跃的方向发展,且有浓度依赖性。结论：ＰＴＨ 可能不影响体外培养的人牙乳头间充质细胞增殖,而仅促进细胞的分化和功能活跃。     

六亚甲基双乙酰胺联合5-FU对涎腺粘液表皮样癌的分化诱导作用

目的研究平面极性分化诱导剂六亚甲基双乙酰胺（ＨＭＢＡ）联合５ＦＵ对涎腺粘液表皮样癌的分化诱导作用。方法采用“５ＦＵ→ＨＭＢＡ”用药方案联合用药。结果ＨＭＢＡ对涎腺粘液表皮样癌有较强的分化诱导作用，当联合用药时ＨＭＢＡ的分化诱导作用被增强，另一方面，ＨＭＢＡ也明显增强了５ＦＵ的抗癌作用，两者显示出协同抗癌作用。结论将５ＦＵ与ＨＭＢＡ合用，对涎腺粘液表皮样癌的治疗可能具有一定应用价值     

六亚甲基二乙酰胺对粘液表皮样癌细胞p21、PCNA、CyclinD_1表达的影响

目的　探讨分化诱导剂六亚甲基二乙酰胺 (HMBA)诱导人粘液表皮样癌细胞后 ,p2 1、增殖细胞核抗原 (PCNA)和CyclinD1 表达的变化。方法　用 2mmol/LHMBA对培养的粘液表皮样癌细胞进行体外诱导 72h后 ,分别采用免疫组织化学、图像分析等方法对处理与未处理细胞的p2 1、PCNA和CyclinD1 表达变化进行定量分析。结果　HMBA处理的粘液表皮样癌细胞p2 1表达明显高于对照组 (P <0 .0 1 ) ;PCNA和CyclinD1 表达明显低于对照组(P <0 .0 1 )。结论　HMBA通过影响p2 1、PCNA和CyclinD1 的表达而发挥对粘液表皮样癌细胞的抑制增殖作用     

口腔鳞癌中抑癌基因的失活

目的：探讨同一口腔鳞标本中３种抑癌基因失活情况。方法：２７例口腔鳞癌标本行ＡＢＣ免疫组织化学染色,一抗分别为鼠抗人ｎｍ２３,Ｐ５３单克隆抗体及Ｐ１６多克隆抗体。以癌细胞着色３０％为判断高低表达煌界值。结果：ｐ１６基因失活率最高,为６６．７％;２种以上基因同时失活为５１．９％,其中ｐ１６和ｎｍ２３占６４．２％（９／１４）。结论：ｐ１６基因失活是口腔鳞癌中发生频率最高的分子事件;口腔鳞癌中抑癌基因的失活为非单一基因失活,其意义值得探讨;同时提示,研究口腔鳞癌其基因表达及意义时,应注意抑癌基因的活的复杂性。     

分化诱导剂对粘液表皮样癌增殖和凋亡相关基因表达的影响

目的 探讨分化诱导剂六亚甲基二乙酰胺(hexamethylene bisacetamide,HBMA)对人粘液表皮样癌细胞系MEC-1细胞增殖和凋亡相关基因表达的影响。方法 用0．002mol/L HMBA对培养的MEC－1细胞进行体外诱导72h后，分别采用光镜、免疫组化、原位杂交、图像分析等方法进行增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear,PCNA)，bax,bcl-2蛋白及mRNA表达水平的检测。结果 经HMBA诱导的MEC－1细胞中PCNA的表达较对照组明显下降（P＜0．01），同时MEC－1细胞的凋亡相关基因bax,bcl-2蛋白及mRNA表达均明显上升（P＜0．01）。结论 HMBA对MEC－1细胞的增殖基因PCNA有明显的负调控作用，从而可抑制其增殖；并且它能够特异性地上调bax和bcl-2基因的表达，发挥了促进凋亡的作用。     

口腔黏膜组织结构及DNA损伤修复功能的增龄性变化

目的　研究口腔黏膜组织结构及DNA损伤修复功能 (以P5 3蛋白表达为指标 )的增龄性变化 ,探讨老年人好发口腔鳞状细胞癌的可能机制。方法　以不同年龄健康人 的正常口腔黏膜组织作为实验对象 ,分别采用常规HE染色法和免疫组织化学技术 (SP法 ) ,研究各组口腔黏膜组织结构特征及P5 3蛋白表达情况 ,并用半定量法对SP染色结果进行判定。结果 　①随年龄的增长 ,口腔黏膜组织结构发生系列变化 ;②随年龄增长 ,口腔黏膜组织中P5 3阳性表达率增高 ,染色分值也呈上升趋势 (P <0 0 5 )。结论　口腔黏膜组织结构及DNA损伤修复功能 的增龄性变化可能是老年人口腔上皮易发生癌变的原因之一。     

多药耐药基因在口腔癌组织中的表达与分析研究

目的:研究多药耐药基因mdr1在口腔癌中的表达。方法:26例未接受任何药物化疗的口腔癌患者标本, Tca8113,Tca8113PV100和Tca8113PV200细胞系(分别耐药100 nmol和200 nmol),提取总RNA,以pchp-1作探针进行斑点杂交,根据标准条计算出每个样本的mdr1拷贝数。结果:26例口腔癌mdr1拷贝数范围为每微克013@105~ 5@105总mRNA。其中9例为不耐药,14例为中等耐药,3例高度耐药,耐药表达为65%,与肿瘤大小及病理分级无关。结论:口腔癌表达mdr1较高,临床要注意选择化疗方案。     

六亚甲基二乙酰胺对MEC—1细胞凋亡及bcl—2基因表达的影响

目的：研究分化诱导剂六亚甲基二乙酰胺（hexamethylene bisacetamide,HMBA)诱导人粘液表皮样癌细胞系MEC－1细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2表达的影响。方法：用2mmol/LHMBA和1mg/L5-FU对培养的MEC－1细胞进行体外诱导72h后,分别采用光镜。TUNEL染色、免疫组化,原位杂交、图像分析等方法进行凋亡指数、bcl-2蛋白及mRNA表达水平的检测。结果：HMBA诱导的MEC－1细胞凋亡指数为68．5％,明显高于对照组和5－FU组（P＜0．01）;bcl-2蛋白及mRNA的表 度均显著高于其它组（P＜0．01）。结论：HMBA对人粘液表皮样癌MEC－1细胞具有明显的诱导凋亡作用,其作用机制可能与减弱了凋亡相关基因bcl-2的负调控作用有关。     

CDK4蛋白在口腔粘膜癌变过程中表达的研究

探讨ＣＤＫ４蛋白在口 粘膜癌变过程中表达的变化规律,方法采用菌素－生物素免疫组织化学染色法,对正常口腔粘膜,癌前 在,口腔鳞状细胞癌等共计８０例标本中ＣＤＫ４蛋白的表达进行检测,并与同批标本的Ｐ１６蛋白的免疫组织化学染色结果进行相关性分析。     

转化生长因子β亚型在口腔鳞癌中的表达和意义

目的:探讨TGF-B与口腔鳞癌发生和发展的关系。方法:采用SABC免疫组化法检测了40例口腔鳞癌术后标本和20例正常口腔粘膜中TGF-B的表达。结果:口腔鳞癌和正常口腔粘膜中均表达TGF-B1、TGF-B2、TGF-B3,但程度不同。TGF-B1、TGF-B2在口腔鳞癌中呈过表达。口腔鳞癌临床分期、有无颈淋巴结转移及病理分级与TGF-B1、 TGF-B2过表达有关,与TGF-B3的表达无关。结论:TGF-B1和TGF-B2可能参与了口腔鳞癌的发生发展及颈淋巴结转移过程,是口腔鳞癌发生发展及预后的一个指标。