补肾法、疏肝法对超促排卵小鼠卵母细胞数量及GDF-9表达的影响

目的 观察补肾法、疏肝法对超促排卵小鼠卵母细胞数量及质量的影响.方法 将90只雌性昆明小鼠随机分为对照组、正常组、补肾高剂量组、补肾低剂量组、疏肝高剂量组、疏肝低剂量组各15只,补肾高、低剂量组分别给予补肾调经方精制口服液5.4、2.7 g/ml,疏肝高、低剂量组分别给予逍遥丸混悬液0.6、0.3 g/ml,对照组和正常组用蒸馏水灌胃,各组小鼠按均1 ml/1009体重灌胃,连续10d.第11日除正常组外其余各组小鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素,48h后腹腔注射人绒毛膜促性腺激素,16h后测定各组小鼠血清中雌二醇(E2)、促黄体生成激素(LH)和促卵泡生成激素(FSH)的水平,比较各组排卵数、优质卵泡数,检测卵母细胞中生长分化因子-9(GDF-9)蛋白和GDF-9 mRNA的表达. 结果 各给药组FSH、LH、E2表达和GDF-9蛋白及其mRNA显著高于对照组(P＜0.05);并且补肾高剂量组和疏肝高剂量组均显著高于补肾低剂量组和疏肝低剂量组(P＜0.05).各给药组优质卵泡数均高于对照组(P＜0.05).对照组及各给药组排卵数较正常组显著增加(P＜0.05). 结论 补肾法、疏肝法可增加小鼠卵母细胞数量、提高优质卵泡率、促进卵子排出,其作用机制可能与调控卵母细胞GDF-9表达相关.     

补肾助孕方、逍遥丸对超促排卵小鼠围着床期妊娠结局和子宫内膜容受性的影响

目的研究补肾助孕方、逍遥丸对超促排卵小鼠妊娠结局和子宫内膜容受性的影响及可能作用机制。方法将240只动情周期正常的昆明系雌性小鼠随机分为正常组、模型组、补肾组、疏肝组,每组各60只。除正常组,其余各组小鼠建立控制性超促排卵模型。造模第1天始补肾组、疏肝组分别给予补肾助孕方混悬液(浓度1.5 g/mL)和逍遥丸混悬液(浓度0. 09 g/mL),均0.4 mL/(30 g·d)灌胃,模型组及正常组给予同等剂量蒸馏水灌胃,连续11天。比较各组小鼠围着床期血清雌二醇(E_2)、孕酮(P)、NO含量及子宫内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、血管内皮生长因子(VEGF)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白及其mRNA表达,测量子宫内膜厚度,观察小鼠内膜胞饮突表达,统计各组小鼠妊娠数、胚胎着床数。结果与正常组比较,模型组小鼠妊娠数、胚胎着床数减少(P0.05),同时模型组血清E_2、P降低,子宫内膜ER、PR蛋白,VEGF、eNOS蛋白及其mRNA表达,子宫组织匀浆内NO含量均降低(P0.05),子宫内膜厚度变薄,胞饮突发育不良;与模型组比较,补肾组、疏肝组小鼠妊娠数及胚胎着床数增加,血清E_2、P含量及子宫内膜ER、PR蛋白,VEGF、eNOS蛋白及其mRNA表达,子宫组织匀浆内NO含量均升高(P0.05),子宫内膜厚度增加,胞饮突发育接近正常组。结论补肾法、疏肝法均能够增加超促排卵小鼠妊娠率及胚胎着床数,其作用机制可能与调节雌、孕激素水平及其受体,影响VEGF、eNOS表达,调控NO释放,改善小鼠子宫内膜组织形态及血管通透性有关。     

补肾调经方药对人着床期子宫内膜血管生成因子及其受体的影响

目的 :研究补肾调经中药对着床期子宫内膜反应性中血管生成因子和血管生成因子受体的影响。方法 :采用自身对照方法对服用中药前后的人着床期子宫内膜组织的VEGF、VEGFR、bFGF FGF、PDGFR α、EGFR进行免疫组织化学的对比分析。结果 :服用中药后 5种因子的表达强度和阳性细胞率均明显增加 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ,提示中药具有整体促进血管生成的作用。结论 :服用补肾调经中药后血管生成因子和血管生成因子受体的增强为妊娠的建立提供了基础和保障     

清热化瘀法对子宫内膜异位症患者血管生成机制的影响

目的:比较以清热化瘀法为主的中药与西药醋酸曲普瑞林(注射用GnRHa)治疗腹腔镜术后子宫内膜异位症(EMs)患者的临床疗效差异,探讨外周血中血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子-受体1(VEGF-R_1)、血管内皮生长因子-受体2(VEGF-R_2)、前列腺素E2(PGE_2)和环氧化酶2(COX_2)与EMs发病的相关性,为本病的中医药防治提供依据。方法:选择90例EMs患者及输卵管炎性疾病患者,分为中药组、西药组和对照组,每组30例。中药组术后口服清热化瘀中药汤剂,连续治疗3个月经周期;西药组于术后第1次月经来潮第1～5天内皮下注射醋酸曲普瑞林(GnRHa),每4周1次,连用3月;对照组为输卵管炎性疾病患者,术后不使用药物。ELISA法测定患者外周静脉血中VEGF、VEGF-R_1、VEGF-R_2、PGE2和COX_2的浓度,探讨EMs的发病机理。结果:外周静脉血中VEGF、VEGF-R_1、VEGF-R_2浓度中药组、西药组均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);PGE_2和COX_2浓度中药组、西药组与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05);外周静脉血中VEGF、VEGF-R_1、VEGF-R_2、PGE_2、COX_2浓度治疗前后3组组内比较差异有统计学意义(P0.05);治疗后中药组、西药组与对照组比较,差异也有统计学意义(P0.05);治疗后中药组与西药组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:外周静脉血中VEGF、VEGF-R_1和VEGF-R_2的含量在一定程度上能够反映EMs的发生及发展进程,清热化瘀法可能是通过降低血管内皮生长因子及其受体的含量,达到治疗内异症的目的。     

补肾疏肝化瘀法治疗子宫内膜异位症60例

近年来,笔者运用自拟补肾疏肝化瘀的消异汤治疗子宫内膜异位症６０例,疗效满意,报道如下。１ 临床资料１．１ 一般资料 本组共６０例,全部已婚;年龄２７－４５岁;病程２－７年,平均４２年;有剖腹产史者６例,有人流史者４５例,有放环史者１７例,卵巢巧克力囊肿术后复发者７例,曾用激素治疗８例。１．２ 症状与体征 痛经 ５８例,其中继发性痛经 ５２例。周期性直肠刺激症状４５例,性交痛２０例,非经期下腹或盆腔疼痛６例,不孕１４例,其中１２例为继发性不孕,卵巢巧克力囊肿２１例,盆腔结节４０例,子宫增大１６例,月经不…     

补肾活血方对肾虚血瘀型大鼠着床期子宫内膜血供相关因子的调控

目的:子宫内膜的血液供应状态与胚胎着床息息相关,血管内皮生长因子(VEGF)通过与血管内皮生长因子受体(VEGFR-2)结合,可促进子宫内膜螺旋小动脉生成、发育及成熟,改善子宫组织的血液供应。本研究旨在观察模型大鼠着床期血液流变学、血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR-2)的表达,探究补肾活血方改善肾虚血瘀模型大鼠着床期子宫内膜血液供应机制的研究。方法:统一处于动情前期的雌性SD大鼠50只,随机分为空白组、模型组、补肾活血方高剂量组(14.6 g·kg~(-1))、低剂量组(7.3 g·kg~(-1))、五子衍宗丸组(1.68 g·kg~(-1)),除空白组外,各组通过羟基脲灌胃(450 mg·kg~(-1))及尾静脉快速推注高分子右旋糖酐(5 m L·kg~(-1))造成肾虚血瘀模型。与此同时,空白组和模型组给予蒸馏水灌肠,其余各组给予不同剂量中药灌肠,动情期合笼,至妊娠第4天。末次给药1 h后股动脉取血,进行血液流变学检测。后迅速脱颈处死大鼠,取出子宫称重并固定,计算大鼠子宫指数,运用免疫组化法检测子宫内膜组织中VEGF、VEGFR-2的含量及螺旋动脉血管数量。结果:与空白组相比,模型组大鼠子宫指数降低,血液流变学各指标显著升高,子宫内膜VEGF、VEGFR-2含量及螺旋动脉血管数量明显减少。与模型组相比,补肾活血方低、高剂量组大鼠子宫指数增加,血液流变学各指标显著下降,子宫内膜VEGF、VEGFR-2含量及螺旋动脉血管数量明显升高。结论:补肾活血方可通过上调着床期VEGF及其受体VEGFR-2在子宫内膜中的表达,促进子宫螺旋动脉血管生成,同时可改善肾虚血瘀模型大鼠着床期血液流变学,促进内膜组织的血液灌注,促进胚胎着床。     

补肾化瘀方合宫瘤消胶囊治疗子宫内膜异位症疗效及对MMPs、促血管生成因子水平的影响

目的:研究补肾化瘀方联合宫瘤消胶囊治疗子宫内膜异位症(Endometriosis,EMS)的疗效及对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的影响。方法:EMS患者130例,用随机数表法分为对照组和观察组,每组各65例,对照组患者给予宫瘤消胶囊口服,观察组患者在对照组的基础上加用补肾化瘀方。比较两组患者的临床疗效、痛经VAS评分和血清性激素、MMP-9、VEGF等水平。结果:观察组患者痊愈28例(43.08%),显效19例(29.23%),有效14例(21.54%),总有效率为93.85%,高于对照组80.00%的总有效率(P0.05)。治疗前两组患者的血清性激素水平相近(P0.05),治疗后患者的性激素水平明显下降,观察组的E_2、LH和FSH水平更低(P0.05)。治疗前两组患者的CA125、MMP-9、VEGF和TNF-α水平相近(P0.05),治疗后两组患者的以上指标均明显下降,观察组患者的CA125、MMP-9、VEGF和TNF-α水平明显低于对照组(P0.05)。治疗前两组患者的痛经VAS评分相近(P0.05),治疗后患者的痛经VAS评分明显下降,观察组的痛经VAS评分更低(P0.05)。结论:补肾化瘀方联合宫瘤消胶囊可以明显提高子宫内膜异位症患者的临床疗效,降低患者的血清性激素和促血管生成因子水平,改善痛经情况,值得在临床推广应用。     

补肾调经和补肾生血中药促进子宫组织血管生成的形态学观察

以老年雌性金黄地鼠（符合老年生理性肾虚症状）为实验动物进行两种中药的形态药理学研究，发现子宫组织血管生成作用明显增强。本文提出：中药具有的促进血管生成作用有重要意义     

通过调控VEGF信号通路探讨补肾通络方对子宫内膜损伤后HUVECs促增殖、血管生成和迁移作用

目的 探析补肾通络方对子宫内膜损伤后人脐静脉内皮细胞模型(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)促增殖、血管生成和迁移作用,及对调控血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)信号通路的影响。方法 选择2020年1月—2021年12月,购自武汉大学典型培养物保藏中心的12份HUVECs,给予50 ng/mL VEGF处理后,分别实施20%、10%、5%补肾通络方含药血清和无补肾通络方含药血清干预处理。比较补肾通络方对子宫内膜损伤后,VEGF信号通路的影响及对HUVECs增殖、迁移、血管生成的影响。结果 比较20%、10%、5%补肾通络方含药血清和无补肾通络方含药血清干预后24 h的HUVECs活性和24 h细胞生长检测所得OD值,差异无统计学意义(P>0.05);20%补肾通络方含药血清组48 h、72 h的HUVECs活性、细胞生长检测所得OD值及VEGF表达量、HUVECs细胞迁移数均高于10%、5%补肾通络方含药血清组和无补肾通络方血清组,差异有统计学意义(P&l...     

补肾疏肝法治疗更年期综合症40例

目的探讨中药补肾疏肝法治疗女性更年期患者的治疗效果。方法采用补肾疏肝法治疗更年期40例(治疗组),口服替勃龙治疗妇女更年期40例(对照组)进行对照,观察治疗前后主要临床症状的变化评价疗效。结果疗程结束后,患者潮热汗出、眩晕耳鸣,心悸失眠,烦躁易怒,纳呆,便溏,情志不宁等症状得到改善;总有效率92.5%;对照组总有效率87.5%;治疗组疗效与对照组相当,无统计学差异(P0.05),但治疗组副作用小。结论补肾疏肝法治疗妇女更年期综合征具有经济、安全、副作用小等优势,提高了患者的生活质量,值得推广。     

司国民运用补肾活血疏肝法治疗男科疾病经验

总结司国民教授治疗男科疾病的经验。司国民教授认为不良的生活方式及情志失常是男科疾病的主要病因,基本病机为肾虚、血瘀、肝郁。治疗主要以补肾活血疏肝为法,即在补肾为本的基础上,配合活血通络、疏肝之法,使肾精充盛,肝木疏达,血脉畅通,气血调和,则病情可解。附临床验案1则。     

补肾疏肝化痰法治疗肥胖型多囊卵巢综合征性不孕症35例

目的:观察补肾疏肝化痰法治疗肥胖型多囊卵巢综合征性不孕症的临床疗效.方法:选择肥胖型PCOS性不孕症患者70例,随机分为对照组和观察组,每组35例.对照组给予克罗米芬治疗,观察组在对照组治疗的基础上加用补肾疏肝化痰法治疗.结果:观察组有效率为91.4％,对照组有效率为71.4％,观察组优于对照组(P＜0.05);观察组妊娠率82.8％,对照组妊娠率54.2％,观察组妊娠率率明显高于对照组(P＜0.05).结论:补肾疏肝化痰法治疗肥胖型多囊卵巢综合征性不孕症临床疗效确切.     

补肾疏肝法在月经病中的应用

月经病是妇科的常见病,中医临证讲究治病求本,审因论治。肝肾对月经的调节起着至关重要的作用,肾为元阴元阳之所处,而女子更以血为本,肝为先天,故在治疗月经病时多从肝肾论治,只有肾精充盛,肝气调达,方能血海充盈,经候如期。故该文针对补肾疏肝法在月经病中的应用做了进一步的阐述。     

补肾方与调肝方对月经模型小鼠子宫内膜增殖期、分泌期影响的比较研究

目的:探讨补肾方与调肝方对小鼠月经模型子宫内膜增殖期和分泌期的影响。方法:采用激素序贯法复制雌性C57BL/6J小鼠月经模型。检测血清雌、孕激素(E2、P)含量、子宫系数、免疫组化法检测子宫角ER-α、PR以及VEGF的表达。结果:与假手术组比较,模型组子宫系数、E2、P的含量,ER-α、PR与VEGF蛋白表达显著增强(P0.05);与模型组比较,给药各组血清激素均呈不显著性增加(P0.05);给药组子宫系数均增加(P0.05);ER(ER-α)、PR与VEGF的表达在T1点调理肝肾组、补肾组高于调肝组(P0.05),在T2点调理肝肾组高于补肾组与调肝组(P0.05)。结论:调理肝肾按月经周期用药较单一补肾或调肝更能有效调整子宫内膜增值期和分泌期的状态和功能,其作用机制不是增加血清中E2、P的含量,而是与上调ER-α、PR以及VEGF的表达有关。     

补肾方剂对胎鼠肝组织己糖激酶、谷氨酸脱氢酶活性的影响

目的:通过胚胎期给药,探讨补肾方对胎儿宫内发育迟缓(IUGR)模型胎鼠己糖激酶(HK)、谷氨酸脱氢酶(GDH)活性的影响。方法:模型组用酒精给孕鼠灌胃导致IUGR模型,各补肾组分别在造模同时予补肾方灌胃,其他组予补气方、补血方、气血双补方灌胃,检测各组胎鼠肝组织HK、GDH活性。结果:IUGR胎鼠HK、GDH活性明显降低(P0.05);补肾阴方、补血方对IUGR胎鼠HK活性降低均有明显恢复作用(P0.05);补肾方、补血方、气血双补方均能不同程度恢复IUGR胎鼠GDH活性(P0.01,P0.01,P0.05,P0.05)。结论:改善IUGR胎鼠肝组织HK、GDH活性可能是补肾方治疗IUGR机理之一,可作为中医"肾主生殖发育、肾为先天之本"和"补母益子"论的依据。     

疏肝益肾法治疗女性抑郁症30例临床研究

目的：研究运用疏肝解郁、益肾宁神的原则治疗女性抑郁症后，性激素水平、汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评分、中医临床症状评分等相关因素的变化情况。方法：按年龄、病情等因素运用分层随机分组法将60例女性抑郁症患者随机分为妇人解郁方治疗组30例和帕罗西汀对照组30例，记录治疗前后各组HAMD评分和中医症状评分并进行比较，同时测定抑郁患者与健康者的血清雌二醇（E2）、孕酮（P）和催乳素（PRL）水平。结果：生殖内分泌激素水平与HAMD评分及HAMD4因子具有相关性，经疏肝益肾法治疗后，患者血清E2显著升高（P〈0．01），PRL显著下降（P〈0．01）。治疗效果与帕罗西汀相当，但减轻了帕罗西汀的食欲不振、恶心呕吐等副作用。结论：生殖内分泌激素水平与抑郁症的病情严重程度具有相关性，疏肝益肾法可以调节女性抑郁症患者的性激素水平，其治疗效果显著安全。     

双氢青蒿素对原发性肝癌大鼠的治疗作用及机制

目的： 研究不同剂量双氢青蒿素（dihydroarteannuin,DHA）在二乙基亚硝胺（DEN）诱发肝细胞癌大鼠体内的抗癌作用及机制。 方法： 120只SD大鼠随机分成DEN造模组100只和正常组20只,造模组用DEN溶液诱发大鼠肝癌模型后分DHA高（60 mg·kg^-1）、中（30 mg·kg^-1）、低（15 mg·kg^-1）剂量组、恩度组（5 mg·kg^-1,ip,每天1次,2周为1个疗程,停药1周后再继续用药）及模型组各20只,按相应药物剂量灌胃给药6周;免疫组化法检测大鼠肿瘤组织血管内皮生长因子（VEGF）表达;ELISA法检测大鼠血清VEGF、血管内皮生长因子受体-2（VEGFR-2）、甲胎蛋白（AFP）表达;全自动生化分析仪检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBIL）;实验结束后记录剩余各组大鼠的总生存时间,计算生命延长率。 结果： 与模型组比较,DHA中、高剂量组的大鼠肿瘤组织VEGF表达明显降低;血清的VEGF,VEGFR-2,AFP表达也明显降低;剩余大鼠生存时间明显延长,生命延长率分别达到19.25%和12.81%。 结论： DHA在30,60 mg·kg^-12个剂量上对原发性肝癌大鼠具有治疗和延长生存时间作用,其机制可能是通过抑制VEGF及其受体表达,抑制肝癌血管生成和转移,从而延缓肿瘤扩散进程,改善肝脏功能。     

张国骏教授补肾疏肝治疗不孕症随诊体会

近年来不孕不育呈增长趋势,中医治疗不孕症具有一定优势和较好疗效。张国骏教授运用补肾疏肝法治疗不孕症疗效显著。笔者仅就其中1例简谈个人体会。     

补肾活血外治法对肾虚血瘀型大鼠种植窗期子宫内膜组织形态学的影响

目的：探讨补肾活血外治法对肾虚血瘀模型大鼠子宫内膜组织形态学的影响。方法：采用阴道涂片法选取处于动情前期普通级健康未交配雌性SD大鼠50只,随机分为空白组、模型组、补肾活血方高、低剂量组、五子组。除空白组外,其余各组采用羟基脲灌胃建造肾虚模型,与此同时,空白组、模型组给予蒸馏水灌肠,高、低剂量组分别给予高、低剂量补肾活血方药灌肠,五子组给予五子衍宗丸灌胃。妊娠第4天,各组大鼠均于末次给药后1 h,尾静脉快速推注10%的高分子右旋糖苷造成血瘀模型后处死,取子宫组织切片苏木精-伊红（HE）染色观察。结果：①模型组子宫内膜被覆上皮厚度低于空白组（P<0.05）;补肾活血方药高、低剂量组和五子组子宫内膜被覆上皮厚度与模型组相比有显著性差异（P<0.01）。②模型组腺体数、腺体面积总和及最大直径/最小直径明显低于空白组（P<0.05或P<0.01）;形状因子最接近“1”,与空白组相比有显著性差异（P<0.01）。补肾活血方高、低剂量组腺体数及腺腔面积总和较模型组有不同程度的增多（P<0.05或P<0.01）。五子组腺体数、腺腔面积总和、形状因子及最大直径/最小直径与模型组相比有显著性差异（P<0.05或P<0.01）。③模型组间质细胞核面积总和、间质细胞核积分光密度及间质血管数均低于空白组（P<0.01）;补肾活血方高、低剂量组间质细胞核面积总和、间质细胞核积分光密度和间质血管数较模型组均明显增高（P<0.05或P<0.01）;五子组间质细胞核面积总和及间质细胞核积分光密度明显高于模型组（P<0.01）。结论：外用补肾活血法能够有效改善肾虚血瘀模型大鼠子宫内膜组织形态,促使子宫内膜腺体与间质同步发育,从而发挥改善子宫内膜容受性的作用。