胆囊癌的分子生物学研究现状和进展

分子生物学的发展,使我们的认识从解剖学的整体水平,扩展到以细胞生物学、免疫学、遗传学为基础的细胞水平、核酸和蛋白质水平上来阐明胆囊癌的发生、发展和转归,并为基因治疗提供理论基础．近几年来国内外学者对多种胆囊癌相关的分子生物学标记物作了研究,环绕这些分子标记物的结构、功能和彼此间的相互关系阐明胆囊癌的发生、发展和转归．１　癌基因和抑癌基因１．１　Ｋｒａｓ基因和Ｐ２１蛋白　自２０世纪８０年代人们发现ｒａｓ癌基因后的１０ａ来在所有的人类恶性肿瘤中都有ｒａｓ癌基因的突变．用一般的方法检测胆囊癌ｒａｓ癌…     

急性髓系白血病H—ras表达和点突变—流式细胞术和聚合酶链反 …

目的：了解髓系白血病细胞Ｈ－ｒａｓ Ｐ＾２１表达与点突变的相关性，以及免疫组化法的临床实用价值。方法：用流式细胞术（ＦＣＭ）分析６７例初治急性髓系白血病（ＡＭＬ）Ｈ－ｒａｓ Ｐ＾２１表达；对所有Ｐ＾２１阳性和部分Ｐ＾２１阴性者作聚合酶链反应（ＰＣＲ），观察Ｈ－ｒａｓ１５位密码子点突变。结果：６７例ＡＭＬ ＦＣＭ Ｐ＾２１阳性者４５例（６７．２％），Ｐ＾２１阴性者２２例（３２．８％）。Ｐ＾２１阳性４     

大肠癌相关基因的研究进展

癌基因正常情况下是以其前身原癌基因的形式存在于每个细胞基因正常的成份中 ,当这些原癌基因以某种方式被激活将会发生细胞的癌变 ,而此癌的发生与多个癌基因有关肿瘤ｒａｓ基因突变发生在第 12、13或 6 1位密码子 ,其点突变影响产物Ｐ2 1水解ＧＴＰ的能力 ,而导致细胞癌变。ｒａｓ基因突变见于 5 0 %的大肠腺癌和 5 8% >1ｃｍ肿瘤中 ,Ｋ ｒａｓ突变约占大肠癌中的 88% ,仅少部分见于Ｎ ｒａｓ突变 ,Ｄａｖｉｄ等从病人的粪便中提取ＤＮＡ发现含有变异的ｒａｓ基因 ,其变异基因与在肿瘤中检测的变异基因相同 ,而这些位点是在 12和 13密码位…     

原发性肝细胞癌组织中c-myc和p53基因的表达及意义

ｃｍｙｃ是常见的激活癌基因,它有导致细胞的恶性转化作用．ｐ５３基因是重要的抑癌基因,其突变失活在肿瘤的发生过程中起重要作用［１］．我们应用免疫组织化学技术检测了７９例原发性肝细胞癌和６３例癌旁肝细胞中ｃｍｙｃ和Ｐ５３蛋白的分布与表达,对Ｃｍｙｃ...     

食管腺癌与鳞癌中H-ras12位点突变与P53 Exon 4杂合缺失探讨

应用ＰＣＲ／ＲＦＬＰ、ＰＣＲ／ＳＳＣＰ方法对２２例食管癌及癌旁组织（８例腺癌、１４例鳞癌）Ｈ－ｒａｓ１２位点突变、Ｐ５３Ｅｘｏｎ４杂合缺失规律进行了探讨。结果发现，２２例食管癌组织中发生Ｈ－ｒａｓ１２位点突变６例（６／２２、２７．２％）、Ｐ５３Ｅｘｏｎ４杂合缺失５例（５／２２、２２．７％），与癌旁组织比有显著差异（Ｐ＜０．０１）。８例腺癌与１４例鳞癌中两种基因变化无差异。两种基因改变在食管癌标本中散在分布，无标本同时具有两种基因变化。Ｈ－ｒａｓ改变与Ｐ５３缺失相比无明显优势表现，反之亦然。研究表明，二种基因的改变可能在食管癌的的致病过程中起协同作用，也可能受不同致病因子影响而有不同表现。Ｈ－ｒａｓ基因突变、Ｐ５３基因杂合缺失可能是食管癌癌变机理之一。     

MNNG诱导人胃粘膜上皮细胞的损伤作用

目的探讨甲基硝基亚硝基胍（ＭＮＮＧ）对胃粘膜上皮细胞的损伤作用．方法对ＭＮＮＧ在诱发体外培养的人胎胃粘膜上皮细胞的非程序ＤＮＡ合成、脂质过氧化和ｒａｓＰ２１蛋白进行观察．结果ＭＮＮＧ处理组各时相胃粘膜上皮细胞的增殖速率，非程序ＤＮＡ合成水平（１８３８ｃｐｍ±２０５ｃｐｍｖｓ７０５ｃｐｍ±１２５ｃｐｍ，Ｐ＜００１），质脂过氧化物（第２０天，７．４２ｎｍｏｌ／ｍｇ±０．６８ｎｍｄ／ｍｇｖｓ３．６２ｎｍｏｌ／ｍｇ±０．５４ｎｍｏｌ／ｍｇ蛋白Ｐ＜０．０１）和ｒａｓＰ２１蛋白含量（第４０天，１２１Ａ±０１２Ａｖｓ０５１Ａ±００７Ａ，Ｐ＜００１）．结论ＭＮＮＧ可诱发胃粘膜上皮细胞恶性转化，其作用机制可能是通过损伤细胞ＤＮＡ，诱发质脂过氧化或导致ｒａｓＰ２１异常表达所致．     

食管癌中幽门螺杆菌感染与P53表达

众多研究表明，幽门螺杆菌（Ｈｐ）与人类慢性胃炎、消化性溃疡和某些胃的恶性肿瘤发生密切相关［１－３］，但有关Ｈｐ在食管中感染情况以及其致病作用的报道甚少，又由于肿瘤的发生与癌基因的激活和抑癌基因的失活密切相关［４－６］．故我们应用免疫组化方法检测了食管病变组织Ｈｐ感染与Ｐ５３蛋白表达情况，以探讨Ｈｐ感染与Ｐ５３蛋白表达在食管癌发生的意义１　材料和方法１．１　材料　随机选用我科１９９４年以来食管癌标本６０例，不典型增生２２例，慢性炎症１８例以及正常食管粘膜１６例．兔抗Ｈｐ抗体和Ｐ５３单克隆抗体ＤＯ＿…     

慢性糜烂性胃炎与胃癌的免疫组织化学比较研究——P^21ras,P^53,P…

本研究对３１例慢性糜烂性胃炎粘膜活检组织及１４例手术切除的胃癌组织的Ｐ＾２１ｒａｓ、Ｐ＾５３蛋白、细胞核增殖抗原（ＰＣＮＡ）、癌胚抗原（ＣＥＡ）的表达采用ＬＳＡＢ免疫组织化学标记。结果发现Ｐ２１ｒａｓ在慢性糜烂性胃炎粘膜上皮和胃癌肿瘤细胞中表达阳性率分别为６７．７％和６５．０％（Ｐ〉０．０５）；Ｐ＾５３表达阳性率分别为０和２１．４％（０．０１〈Ｐ〈０．０５）；ＰＣＮＡ表达阳性率分别为６７．７％和９     

大鼠肝癌发生过程中癌基因和抑癌基因的表达

目的 探讨癌基因ｒａｓ和抑制基因Ｐ５３蛋白在实验性肝癌中的表达与内在联系。方法 应用原位杂交和免疫组织化学（ＳＡＢＣ０法,在３８例化学致癌剂二乙基亚硝胺（ＤＥＮＡ）诱发大鼠原发性肝细胞癌及癌前增殖结节中。Ｐ５３蛋白和ｒａｓ家族基因蛋白表达。结果 化学诱癌生成为６８．４２％,癌前增生性病例为３１．５８％,在癌与增生性病变中ｒａｓ基因收搞表达分别为８８．４６％和７５％,两组无显著差异,但与癌的恶笥分化     

肝细胞癌患者HCV感染及其致癌机理研究

目的：揭示肝细胞癌患者的ＨＣＶ感染情况及其致癌机理。方法：应用免疫组织化学ＳＰ法对４６例肝细胞癌癌组织及其３８例癌旁肝组织中丙型肝炎病毒核心抗原作了定位研究，并进一步检测其中癌基因ｒａｓ、ｃｍｙｃ和抑癌基因ｐ５３的蛋白表达。结果：核心抗原的检出率分别为２１７％和３６８％，４６例肝癌患者中１６例存在丙型肝炎病毒感染；ｐ２１、ｃｍｙｃ和ｐ５３蛋白在癌组织中的检出率分别为５８７％、６７４％和３０４％；丙型肝炎病毒感染的阳性与阴性组患者之间的ｐ２１、ｃｍｙｃ和ｐ５３蛋白的表达无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；两组患者癌旁肝硬化的阳性率分别为８７５％和８６７％（Ｐ＞００５）。结论：上述结果提示丙型肝炎病毒致肝细胞癌的机理可能与ｒａｓ、ｃｍｙｃ和ｐ５３基因的激活或失活无关，其机理尚待进一步探索     

原发性肝癌转移与ras p53基因及其蛋白表达的关系

目的了解ｒａｓ，ｐ５３基因及其蛋白表达与原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）转移的关系．方法应用免疫组化、狭缝杂交分别对１４例ＨＣＣ有转移者和１６例无转移者癌组织中ｒａｓ，ｐ５３基因蛋白和ＲＮＡ表达进行了研究．结果经微波修复抗原后，在１４例有转移ＨＣＣ组织中，Ｐ２１和Ｐ５３蛋白的阳性例数分别为１１例和１２例，在１６例无转移ＨＣＣ组织中，其阳性例数分别为５例和７例，两组间具有极显著性差异（Ｐ值分别为００１４和００２６）．ＨＣＣ有转移组ＮｒａｓＲＮＡ为无转移组的３～５倍，而两组间Ｐ５３ＲＮＡ量则几乎相等．结论经微波修复抗原后，Ｐ２１和Ｐ５３蛋白的免疫组化染色可作为衡量ＨＣＣ转移潜能的指标．     

胰腺癌患者胰液中K-ras基因突变的检测及其意义

目的 通过对经逆行胰胆管造影（ＥＲＣＰ）所获胰液的Ｋ－ｒａｓ基因突变检测,以探索胰腺癌诊断的新方法。方法 应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）－限制性片段长度多态性的方法检测胰腺良、恶性疾病组织物、胰液上清和细胞的Ｋ－ｒａｓ突变。结果 胰腺癌和胰腺良性疾病标本分别有７１％（１５／２１）,而胰腺良性疾病无一例有Ｋ－ｒａｓ的突变。用胰液细胞有４％ＰＣＲ未能获得成功,胰腺癌胰液细胞Ｋ－ｒａｓ的突变率为６５％（１１     

P21^ras在胆囊癌前病变和胆囊癌细胞表达的定量研究

应用流式细胞术和细胞免疫荧光染色技术，对胆囊癌前病变和胆囊癌细胞ｒａｓＰ２１的表达量进行了定量研究，并分析Ｐ２１＾ｒａｓ的表达量与ＤＮＡ倍体和细胞增殖指数的关系。结果表明，胆囊癌细胞Ｐ２１＾ｒａｓ表达量（荧光指数ＦＩ）明显高于胆囊癌前病变的表达量，并发现Ｐ２１＾ｒａｓ表达的荧光指数随组织学分级增高而升高。ＤＮＡ倍体与Ｐ２１＾ｒａｓ表达量有密切关系。     

用PCR和直接测序方法分析胰腺的c-Ki-ras基因点突变

用ＰＣＲ和直接测序方法分析胰腺的ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ基因点突变徐永泉，刘述信，夏玉亭人类肿瘤中最常见的与转化活性有关的基因ｒａｓ家族癌基因（Ｎ－ｒａｓ，Ｋｉ－ｒａｓ，Ｈａ－ｒａｓ）。ｒａｓ基因的激活在肿瘤发生中起重要作用。ｒａｓ基因激活的主要方式是点突变...     

肝细胞癌中ras,P53基因突变的研究

为了探讨原癌基因ｒａｓ和肿瘤抑制基因Ｐ５３在肝癌中的变化，我们利用免疫组化技术检测了福尔马林固定，石蜡包埋肝癌组织内ｒａｓＰ２１，Ｐ５３蛋白的过量表达，利用聚合酶链式反应－单链构象多态性分析技术分析了ｒａｓ和Ｐ５３基因部分外显子的单链构象多态性。     

大肠肿瘤癌基因蛋白产物同步检测的对比分析

对大肠肿瘤连续切片组织同步进行了Ｃ－ｍｙｃ．Ｐａｎ－ｒａｓ和Ｐ５３三种癌基因蛋白产物的检测，结果显示：癌基因ｍｙｃ，ｒａｓ和Ｐ５３阳性表达率在结肠腺瘤分别为６１、１％（４４／７２）、３７．５％（２７／７２和５．６％（４／７２），大肠泉癌分别为７２．９％（５１／７０）、５１．４％（３６／７０）和４０．０％（２８／７０），而正常粘膜则分别为２８．０％（７／２５）、４．０％（１／２５）和０。印戒细胞仅有     

K—ras基因与肺腺癌

Ｋ－ｒａｓ基因突变主要发生在肺腺癌，吸烟是促发Ｋ－ｒａｓ基因突变的重要因素。Ｋ－ｒａｓ基因突变是肺腺癌估计复发、判断预后的良好指标。在肿瘤发生时，细胞中原癌基因被激活成为癌基因，从而使细胞正常生长、增殖、分化及调控紊乱，继而发展成肿瘤细胞。近年来Ｋｉｒｓｔｅｎ－ｒａｓ（Ｋ－ｒａｓ）基因与肺癌，特别是与肺腺癌的关系日益受关注。本拟对近年来Ｋ－ｒａｓ基因点突变与肺腺癌的关系予以综述。     

萎缩性胃炎及异型增生ras p21的表达

萎缩性胃炎及异型增生ｒａｓｐ２１的表达倪桂宝我们应用ＡＢＣ免疫组化法进行了ｒａｓ癌基因产物ｐ２１单克隆抗体检测，旨在探讨ｒａｓ癌基因在胃癌前状态中的表达及其与胃癌发生的关系。一、材料和方法材料选自本院１９８８～１９９３年间胃镜活检标本，其中慢性萎缩性...     

肺癌K－ras基因突变的检测及临床应用

为探讨基因检测在肺癌中的应用价值，应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法检测１０２例肺癌患者手术标本中Ｋ－ｒａｓ基因第１２密码子突变的状况。并将肺腺癌按临床病理特征分组进行对比分析。结果显示，肺癌中总突变率为２４％，腺癌中为４９％，鳞癌为１５％，而小细胞癌中无一例突变。吸烟是促发Ｋ－ｒａｓ基因突变的重要因素（Ｐ＜０．０５），肺腺癌突变组淋巴结转移早、部位远，其一年复发率达８５％，明显高于未突变组（Ｐ＜０．０１）。Ｋ－ｒａｓ基因突变的检测具有重要的临床意义和应用价值。     

多药耐药相关蛋白在大肠癌中的表达及其临床意义

多药耐药（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ,ＭＤＲ）的产生是大肠癌化疗失败的重要原因．已有研究表明ｍｄｒ１基因编码的Ｐｇｐ表达是大肠癌ＭＤＲ的机制之一［１］．最近发现的另一个ＭＤＲ相关蛋白－多药耐药相关蛋白（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ,ＭＲＰ）,成为肿瘤耐药和逆转耐药的热点［２］．我们的初步研究显示,ＭＲＰ在胃肠癌组织中过度表达［３］,但目前国内未见其他有关大肠癌ＭＲＰ表达的报道．我们应用免疫组化方法研究ＭＲＰ在大肠癌中的表达情况,并进一步…