依达拉奉对新生鼠高氧肺损伤的影响

【摘要】目的探讨自由基清除剂依达拉奉 (edaravone)对新生鼠高氧肺损伤的治疗作用,为临床防治新生儿高氧肺损伤提供理论依据。方法96只新生鼠随机分组后分别进行高浓度氧(氧 体积分数>0.90,简称高氧)、高氧＋依达拉奉处理,并设相应对照。于实验3d、7d后检测各组新生鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(SOD)活性、TNF α及肺核因子 κB(NF κB)水平的变化,,并观察肺组织病理改变 。结果高氧3d后BALF中MDA、TNF α含量明显高于正常对照组(P均<0.01),SOD活性下降(P<0.01),肺组织NF κB活性上升(P<0.01),病理切片 见明显炎性表现;高氧7d后,上述改变进一步加重。依达拉奉干预高氧损伤3d、7d时BALF中MDA、TNF α含量和肺NF κB染色强度均显著降低 (P均<0.05),SOD活性上升(P<0.05),肺组织炎性表现较轻。结论高氧可导致新生鼠的急性肺损伤,其机制可能与机体氧化/抗氧化失衡和炎症 反应有关。依达拉奉对新生鼠高氧肺损伤发挥积极的保护作用。     

姜黄素对新生鼠高氧急性肺损伤作用的研究

目的 探讨姜黄素对新生大鼠高氧急性肺损伤的作用.方法 95％氧气3d制备新生大鼠高氧急性肺损伤模型,建模后将40只新生大鼠随机分为实验组[姜黄素灌胃,剂量为100 mg/(kg·d)]和对照组,每组20只.以20只正常新生大鼠作为空白组.在灌胃4d、7d后各组分别处死10只大鼠,取肺脏切片,检测肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白细胞介素(interleukin,IL)-Iβ及髓过氧化物酶( myeloperoxidase,MPO)含量.结果 实验组大鼠病理切片损伤均较对照组减轻.实验组大鼠4d及7d后TNF-α、IL-1β及MPO水平均明显低于对照组(P＜0.05);对照组大鼠4d、7d后TNF-α、IL-1β及MPO水平均高于空白组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 姜黄素对新生鼠高氧急性肺损伤可起保护作用.     

维甲酸对新生大鼠高氧肺损伤的保护作用

新生儿支气管肺发育不良 (bronchopumonarydysplasia ,BPD)是与早产、感染及长期吸入高浓氧有关的严重慢性肺疾病。目前临床多采用地塞米松预防和治疗BPD ,该药虽有助于患儿早日脱离气管插管 ,但由于其可引起血压升高、消化道出血、脑及肺发育受阻等副作用 ,而限制了其在临床的应用[1 ] 。近年研究发现 ,极低出生体重儿BPD的病理改变以肺发育受阻为主 ,表现为肺泡隔形成受阻和肺泡化降低[2 ] 。维甲酸 (retinoicacid ,RA)可降低维生素A缺乏的早产儿BPD的发病率 ,显著提高新生大鼠由于使用地塞米松而降低了的肺泡化水平[3] 。本实验通…     

前列腺素E1对高氧诱导新生大鼠脑损伤的保护作用

目的 探讨前列腺素E1（PGE-1）对高氧诱导新生大鼠脑损伤的保护作用,并观察糖调节蛋白78（GRP78）、CHOP蛋白表达的变化,为临床应用PGE-1治疗高氧引起的新生儿脑损伤提供理论依据。方法 将60只新生Wistar大鼠随机分成空气对照组、高氧脑损伤模型组和高氧脑损伤+PGE-1组。除空气对照组外均制备高氧脑损伤模型,从造模第1天起,高氧脑损伤+PGE-1组腹腔注射PGE-1,剂量为每日2 μg/kg,连续7 d,其他两组以生理盐水替代。检测各组大鼠脑组织含水量,苏木精-伊红染色观察脑组织病理变化,核染色结合TUNEL染色观察脑细胞凋亡情况,Western blot法检测脑组织GRP78、CHOP蛋白水平。结果 高氧脑损伤模型组脑组织含水量高于高氧脑损伤+PGE-1组及空气对照组（P < 0.05）;高氧脑损伤+PGE-1组脑组织含水量高于空气对照组（P < 0.05）。脑组织病理切片结果显示：高氧脑损伤模型组大鼠脑实质可见炎症细胞浸润增多,轻度脑血管水肿;高氧脑损伤+PGE-1组大鼠脑实质周围炎症及水肿较高氧脑损伤模型组减轻。高氧脑损伤模型组脑组织细胞凋亡指数高于高氧脑损伤+PGE-1组及空气对照组（P < 0.05）;高氧脑损伤+PGE-1组脑组织细胞凋亡指数高于空气对照组（P < 0.05）。高氧脑损伤模型组脑组织GRP78、CHOP蛋白的相对表达高于高氧脑损伤+PGE-1组和空气对照组（P < 0.05）;高氧脑损伤+PGE-1组GRP78、CHOP蛋白的相对表达高于空气对照组（P < 0.05）。结论 PGE-1对高氧诱导脑损伤新生大鼠具有保护作用,其机制可能为通过下调GRP78、CHOP蛋白表达,从而抑制细胞凋亡。     

高氧致新生鼠肺损伤时肾组织一氧化氮及氧自由基的变化

目的　观察持续吸入高氧致新生大鼠肺损伤时肾组织自由基的变化,以探讨高氧对肾脏的损伤。 方法　采用高氧致新生鼠肺损伤的模型,将足月新生鼠生后分别在90%±5%氧气(n=140)和正常空气(n=88) 中持续暴露,于1,3,7,14,21d各处死8只,用分光光度计比色法动态测定肺和肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)活 性、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量的变化。结果　高氧暴露3d肺组织SOD的活性开始增高,7d时明显高 于对照组(214±19KNU/gvs186±19KNU/g,P<0.01),并逐渐增高持续至14d(220±15KNU/gvs197±21 KNU/g,P<0.05)和21d(251±15KNU/gvs195±8KNU/g,P<0.01);MDA含量于高氧暴露3d开始增高并高 于对照组(28.1±2.0μmol/gvs21.1±1.3μmol/g,P<0.05),7d最高(30.8±4.2μmol/gvs19.9±2.2μmol/g, P<0.01),14d虽有下降但仍高于对照组(26.3±3.8μmol/gvs22.6±2.3μmol/g,P<0.05);NO水平则于7d 时有所增高并高于对照组(99±8μmol/gvs89±8μmol/g,P<0.05),14d(128±34μmol/gvs93±17μmol/g,P <0.05)和21d(171±34μmol/gvs106±25μmol/g,P<0.01)仍高于对照组。而高氧组肾组织SOD活性的改变 与对照比较无差异,MDA和NO含量改变较肺晚,于吸高氧14d时高于对照(分别为24.1±5.0μmol/gvs16.0± 1.9     

高氧致新生大鼠肺损伤肺组织中MMP-8和TIMP-2表达的动态变化和意义

目的探讨高氧致新生大鼠肺损伤肺组织基质金属蛋白酶-8（MMP-8）和基质金属蛋白酶抑制物-2（TIMP-2）表达的动态变化及其对慢性肺疾病（CLD）纤维化形成的作用。方法足月新生大鼠，于生后12h内分别持续吸入0．90～0．95的高氧和空气，于1、3、7、14、21d，取肺组织行Masson染色，图像定量分析，计算胶原纤维阳性面积百分比，以评估胶原纤维沉积程度；应用RT-PCR和免疫组化技术检测肺组织中MMP-8、TIMP-2mRNA和蛋白表达的动态变化。结果高氧暴露7d开始高氧组的胶原纤维在肺间质沉积，胶原纤维阳性面积高于空气组。高氧组MMp-8mRNA和蛋白表达在7d后低于空气组，两组TIMP-2的表达在各时间点上无差异。结论随着高氧暴露时间的延长，新生大鼠肺组织中MMP-8表达降低，而TIMP-2表达不变，MMP-8／TIMP-2的平衡状态遭到破坏，胶原降解减少，从而促进了胶原在肺间质的沉积。     

多西环素对新生鼠高氧肺损伤影响的体视学研究

目的 探讨非特异性金属基质蛋白酶抑制剂多西环素(Doxycycline)对高氧肺损伤肺形态学的影响.方法 新生SD大鼠生后12 h内随机分为4组:空气+生理盐水组(AN组)、空气+多西环素组(AD组)、高氧+生理盐水组(ON组)、高氧+多西环素组(OD组).高氧组(ON、OD组)大鼠于90%氧气条件下饲养.多西环素组(AD、OD组)每天早晚两次经胃管喂人多西环素20 mg/(kg·次),喂药至实验日或生后14 d.1、3、7、14及21 d进行肺组织切片的体视学研究.结果 高氧及多西环素均导致平均肺泡面积增加,14 d OD组星体积高于同期ON组.除ON组外,各组肺泡间隔均逐渐增厚,氧气和多西环素共同作用增加肺泡间隔厚度,且作用持续.单纯高氧使肺问质胶原含量明显增加;高氧合并多西环素作用早期胶原含量较AN组增加明显,14 d后胶原含量降低并与AN组相近.结论 高氧和(或)多西环素均影响肺发育,多西环素可减少高氧导致的肺间质中胶原比例增加.     

胰岛素样生长因子与新生大鼠高氧肺损伤的关系

近年来的研究表明，胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor，IGF)在肺损伤中扮演了重要角色。为进一步探讨其与新生儿高氧肺损伤的关系，2002年10月～2003年6月，我们对新生大鼠高氧肺损伤模型中IGFs的表达及维甲酸(Retinoic acid，RA)干预结果进行了对比观察，现报道如下。     

多西环素对新生鼠高氧肺损伤影响的体视学研究

Objective To explore the influence and potential protective effects of non-specific panMetrix Metalloproteinases(MMPs) inhibitor Doxycycline on hyperoxic lung injury and lung development in neonatal rats.Methods Neonatal SD rats were divided into 4 groups randomly within 12 hours after birth:air with normal saline(AN),air with doxycycline(AD),hyperoxia with normal saline(ON),and hyperoxia with doxycycline group(OD).Hyperoxia groups(ON and OD) were exposed to ≥90% O2.Doxycycline 20 mg/kg or equal volume of 0.9% saline(Doxycycline concentration 2 mg/ml) was administered by gastric gavage,twice daily from day 1 to experimental day,but it didn't exceed 14 days.Stereological study was carried out at day 1,3,7,14 and 21 after birth.Results Enlarged mean alveolar area was noted both in hyperoxia and Doxycycline groups.OD group had larger star volume than ON group on day 14.Except ON group,all other groups had increased alveolar septum and the condition was worsened by hyperoxia with Doxycycline.The percentage of collagen in lung parenchymal tissue in ON group increased persistently.This increasing trend was stopped in OD group on day 14,and collagen percentage had no significantly difference between OD and AN groups on day 14 and 21.Conclusion Both hyperoxia and Doxycycline influence neonatal lung development,percentage of coUgen in lung parenchymai can be reduced by Doxycycline in hyperoxic lung injury.     

多西环素对新生鼠高氧肺损伤影响的体视学研究

Objective To explore the influence and potential protective effects of non-specific panMetrix Metalloproteinases(MMPs) inhibitor Doxycycline on hyperoxic lung injury and lung development in neonatal rats.Methods Neonatal SD rats were divided into 4 groups randomly within 12 hours after birth:air with normal saline(AN),air with doxycycline(AD),hyperoxia with normal saline(ON),and hyperoxia with doxycycline group(OD).Hyperoxia groups(ON and OD) were exposed to ≥90% O2.Doxycycline 20 mg/kg or equal volume of 0.9% saline(Doxycycline concentration 2 mg/ml) was administered by gastric gavage,twice daily from day 1 to experimental day,but it didn't exceed 14 days.Stereological study was carried out at day 1,3,7,14 and 21 after birth.Results Enlarged mean alveolar area was noted both in hyperoxia and Doxycycline groups.OD group had larger star volume than ON group on day 14.Except ON group,all other groups had increased alveolar septum and the condition was worsened by hyperoxia with Doxycycline.The percentage of collagen in lung parenchymal tissue in ON group increased persistently.This increasing trend was stopped in OD group on day 14,and collagen percentage had no significantly difference between OD and AN groups on day 14 and 21.Conclusion Both hyperoxia and Doxycycline influence neonatal lung development,percentage of coUgen in lung parenchymai can be reduced by Doxycycline in hyperoxic lung injury.     

内质网应激与高氧诱导早产大鼠肺损伤的作用

目的探讨内质网应激在早产鼠高氧肺损伤中的作用。方法 48只新生早产Wistar大鼠在生后12 h随机分为对照组和高氧组,高氧组吸入95%的高浓度氧建立高氧肺损伤模型,对照组置于同一条件常压空气中。在处理后1、3、7 d分批断颈放血处死大鼠后取肺组织。每个时间点取动物8只,左肺制作石蜡切片,采用HE染色观察肺组织病理变化;免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法检测内质网应激相关指标,内质网蛋白57(ERp57)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)在肺组织中的表达;采用原位末端标记法(TUNEL)检测肺细胞凋亡情况。结果高氧组肺组织呈典型的急性肺损伤改变。除了暴露3 d,其余时间点,高氧组ERp57和CHOP表达均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。随高氧暴露时间延长,高氧组ERp57表达呈增高趋势,差异有统计学意义(P0.05);但CHOP表达在各时间点差异无统计学意义(P0.05)。肺组织细胞凋亡指数随时间延长呈渐升趋势,在暴露1 d、3 d、7 d之间的差异有统计学意义(P0.01);在各时间点,高氧组凋亡指数均高于对照组,差异有统计学意义(P均0.01)。ERp57、CHOP表达与高氧组肺组织细胞凋亡指数呈显著正相关(P均0.01)。结论内质网应激启动的凋亡途径参与高氧肺损伤,并发挥重要作用。     

急性肺损伤患儿血浆血小板活化因子和尿白三烯E_4水平变化及其临床意义

目的探讨急性肺损伤(acute lung injury)患儿血浆血小板活化因子(platelet-activating factor,PAF)和尿白三烯E4(leukotriene E4,LTE4)的动态变化及其临床意义。方法采用ELISA法分别检测肺损伤患儿血浆中急性期及恢复期PAF的水平以及尿液中LTE4的变化。同时检测吸入氧浓度、血气分析、C-反应蛋白及胸片、心超等。同期接受健康体检的儿童为对照组,检测其PAF和LTE4。结果急性肺损伤患儿急性期PAF较恢复期水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),恢复期PAF与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);LTE4水平急性期较恢复期和正常对照组高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论PAF和LTE4参与了急性肺损伤的发病过程,可作为肺损伤急性期指标之一,反映其病情变化及预后。     

新生大鼠高氧性肺损伤中HOXB5表达变化及其作用分析

目的建立新生大鼠高氧性肺损伤模型,观察高氧性肺损伤过程中HOXB5蛋白表达的变化,探讨其与高氧肺损伤肺的关系,为临床防治高氧性肺损伤提供理论依据。方法将新生12 h内的SD大鼠60只,随机分为高氧(FiO2为85%～90%)实验组和空气对照组2组,再按生后不同的时间点分为6个亚组,观察两组实验动物的一般情况、肺组织学变化,并检测肺组织中HOXB5基因蛋白表达量。结果对照组与实验组肺组织中HOXB5蛋白表达在不同时间点均呈现出起伏不定的变化特点,两组呈现相同的变化趋势,但实验组变化时间滞后。两组除生后24 h末和生后21 d 2个时间点表达差异无统计学意义(P>0.05)外,从生后第3天起及第5、7、14天相应的4个时间点与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论高氧暴露后新生大鼠肺组织中HOXB5基因蛋白表达变化出现滞后,同时出现支气管分支形成的紊乱和结构简单的肺泡,提示HOXB5基因蛋白异常变化可能是导致高氧慢性肺损伤的原因,HOXB5蛋白可能对支气管和肺泡上皮发育和成熟起调节作用。     

罗格列酮对新生大鼠高氧肺损伤的保护作用

目的：探讨PPAR-γ配体罗格列酮在新生大鼠高氧肺损伤中的保护作用。方法：取新生Sprague-Dawley大鼠96只,随机分为对照组、高氧组和罗格列酮治疗组。对照组在空气中饲养,后两组暴露在85%～90%氧气中。治疗组给予罗格列酮腹腔内注射每日1次（2 mg/kg）。3组于实验第1、3、7、14 d各处死8只大鼠并取其肺组织,行苏木精-伊红染色观察其病理形态改变,同时取其肺泡灌洗液（BALF）,检测其中的丙二醛（MDA）含量及白细胞计数。结果：对照组在各时间点均未见明显病理性改变;高氧组3 d时肺泡上皮细胞肿胀,肺泡腔内可见大量炎性渗出液,14 d时肺泡减少,肺间质增厚,肺泡发育受阻;与高氧组相比,罗格列酮治疗组炎症反应表现较轻,肺泡发育障碍有所缓解。与对照组相比,高氧组3 d时辐射状肺泡计数(RAC)明显下降（P<0.05）,MDA和白细胞计数明显增高（P<0.05）,这种变化一直持续至14 d（P<0.05）;与高氧组相比,罗格列酮治疗组3、7、14 d各亚组RAC明显增高（P<0.05）,MDA和白细胞计数水平较低（P<0.05）。结论：高氧肺损伤时出现肺部的急性炎症反应和肺泡发育受阻,罗格列酮对高氧肺损伤可能具有保护作用。     

新生大鼠高氧肺损伤血管内皮生长因子蛋白及其mRNA表达变化研究

目的：血管内皮生长因子（VEGF）参与肺的发育和损伤修复,VEGF具有促进肺泡和肺血管增殖以及预防新生儿支气管肺发育不良（BPD）的作用。该研究的目的是探讨新生大鼠高氧肺损伤后肺组织VEGF蛋白及VEGF mRNA表达的变化。方法：新生Sprague-Dawley大鼠48只随机分为高氧实验组和空气对照组,高氧实验组吸入95%以上高氧建立高氧肺损伤模型。分别采用免疫组化法和逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）检测新生大鼠3 d,7 d,14 d肺组织VEGF蛋白及VEGF mRNA表达变化。结果：空气对照组新生大鼠生后随着肺发育,肺组织中VEGF蛋白及VEGF mRNA表达逐渐增加。高氧实验组新生鼠吸入高氧3 d,肺VEGF蛋白表达出现降低,在7 d,14 d明显降低与对照组比较差异有显著性（VEGF 蛋白:12.67±3.82 vs 7.79±5.23; 15.10±8.91 vs 5.85±3.37, 均P<0.01）;高氧实验组VEGF mRNA表达在3 d,7 d,14 d均明显低于对照组（VEGF mRNA: 1.19±0.63 vs 0.78±0.22, 1.52±0.47 vs 0.53±0.18, 1.89±0.81 vs 0.48±0.12, 均P<0.01）。结论：VEGF能促进新生大鼠肺发育,VEGF蛋白及VEGF mRNA表达与新生大鼠肺发育有密切关系。高氧可抑制VEGF蛋白及VEGF mRNA在新生大鼠肺内的表达,VEGF在新生鼠肺发育和高氧肺损伤发病机制中起重要作用。     

乌司他丁对高氧诱导的新生小鼠肺损伤模型的疗效研究

目的 研究乌司他丁对高氧诱导的新生小鼠肺损伤的疗效,并初步探讨其作用机制.方法 新生2日龄昆明小鼠随机分为空气组(46只)及高氧组(46只),分别在空气或55％～65％氧气中饲养至21 d.21 d后空气组随机选取9只作为空气对照组(n=9);高氧组造模成功后再随机分为高氧对照组(n=9),乌司他丁低剂量治疗组(n=9...     

支气管哮喘患儿尿白三烯E4 的测定及其临床意义

目的　探讨支气管哮喘患儿尿白三烯E4(LTE4)测定的临床意义。方法　采用竞争性酶联免疫吸附试验技术检测 2 8例哮喘患儿急性发作期和非急性发作期的尿LTE4水平 ,并与健康组儿童相比较 ;同时对哮喘患儿的尿LTE4与第 1秒用力呼气容积 (FEV1)及外周血嗜酸性粒细胞计数 (EC)进行相关性分析。结果　哮喘患儿非急性发作期尿LTE4比急性发作期明显下降 (P <0 0 1) ,但两期均明显高于健康组儿童 (均P <0 0 1)。急性发作期尿LTE4和FEV1呈负相关 (r =- 0 6 15 ,P <0 0 1) ,和EC无相关性 (r =0 16 3,P >0 0 5 )。结论　动态检测支气管哮喘患儿尿中LTE4水平 ,可能为将来的临床诊断和治疗提供有意义的参考指标。     

N-乙酰半胱氨酸对新生大鼠急性高氧性肺损伤的保护作用

目的评价N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对新生鼠高氧肺损伤的保护作用并探讨其机制。方法将出生3～5 d的SD大鼠随机分为4组:①高氧 NAC组(NAC治疗组);②高氧 生理盐水组(高氧组);③空气 NAC组(NAC对照组);④空气 生理盐水组(空气组)。分别于实验3、7 d检测肺组织匀浆液中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)的含量;比较肺湿/干重(W/D)以及肺组织病理改变;用ELISA法检测血清中α-肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量;用免疫组化法对肺组织细胞黏附分子-1(ICAM-1)的表达进行定量研究。结果实验3 d时,高氧组的MDA、TNF-α以及ICAM-1的表达与空气组相比有显著升高(P<0.05),而GSH-Px活性降低;NAC治疗组与高氧组相比GSH-Px活性升高,其余各项指标均有明显的下降(P<0.01)。7 d时,与空气组相比,高氧组的W/D、MDA、TNF-α、ICAM-1均显著增高,而GSH-Px活性继续下降,NAC治疗组中以上各项指标的改变明显减轻。病理切片显示,3 d时高氧组肺即有炎性改变,7 d时损伤进一步加重,NAC治疗组病理改变明显减轻。结论NAC用于新生鼠高氧肺损伤的治疗,可以减轻肺水肿,减轻炎症反应,起到有效的保护作用。     

呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患儿尿白三烯测定及临床意义

目的 探讨呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎(毛支)患儿尿白三烯E4(LTE4)的临床意义.方法 采用竞争性酶联免疫吸附试验技术检测20例健康婴儿和30例RSV毛支患儿急性期和恢复期的尿LTE4水平;采用潮气分析测定急性期患儿呼吸频率(RR)、达峰时间比(tPTEF/tE)及达峰容积比(vPTEF/vE),分析其与尿LTE4水平的相关性.结果 RSV毛支患儿急性期的尿LTE4比恢复期、正常健康组明显增高(P＜0.01),恢复期与正常健康组相比差异无统计学意义(P＞0.05);急性期毛支患儿潮气肺功能中RR增快、tPTEF/tE和vPTEF/vE下降,与正常健康组比较,差异有统计学意义(P＜0.0001);急性期尿LTE4浓度与RR呈正相关(r=0.4376,P=0.0126),与tPTEF/tE和vPTEF/vE呈负相关(r=-0.6895,-0.6636,P均＜0.001).结论 RSV毛支患儿尿LTE4增高,与肺功能指标呈负相关;尿LTE4浓度可作为RSV毛支临床诊治的非创伤性炎性指标.     

新生儿高氧肺损伤的肺修复机制与保护策略

新生儿高氧肺损伤是临床高氧治疗后较常见的并发症,目前尚无特异有效的防治方法.最近研究表明生长因子、骨髓间充质干细胞、促红细胞生成素、抗炎及抗氧化剂在新生儿高氧肺损伤的肺修复及保护中发挥了重要作用.该文综述以上分子系统在延缓和逆转新生儿高氧肺损伤病理过程中的作用机制.