复方清开灵注射液的效应物质探索

目的:以黄芩归经为指导,探索清开灵注射液(QKL)的效应物质.方法:取大鼠,给药后于不同时间点处死,取脑、肺、肝.另取大鼠,分为正常组和缺血再灌注组,各组大鼠按采样点随机分为5组,每组5只.正常组大鼠经尾静脉给予800 mg· kg-1QKL.脑缺血再灌注组采用改良的腔内线拴法通过阻闭大脑中动脉120 min后再灌注120 min复制局灶性脑缺血-再灌注病理模型,并于恢复再灌注120 min时给予800 mg· kg- QKL.给药后于不同时间点处死,取脑、肺、肝.HPLC-MS 法测定黄芩苷浓度.结果:正常大鼠注射清开灵后,大量黄芩苷很快分布至肺、肝中,脑中分布较少.脑缺血-再灌注大鼠脑中黄芩苷量较正常组明显升高.结论:黄芩苷为清开灵治疗肝、肺、脑缺血疾病的效应物质之一;以中药归经为指导,进行复方效应物质探索具有可行性.     

注射用益气复脉(冻干)改善小鼠心肌缺血再灌注损伤的作用

目的考察不同时间点给药时,注射用益气复脉(冻干)(红参、麦冬、五味子)改善小鼠心肌缺血再灌注损伤的效应。方法采用小鼠冠状动脉左前降支结扎诱导心肌缺血再灌注损伤模型,根据不同给药时间分为8组,即假手术组,模型组,缺血前10 min给予益气复脉组(益气复脉+10 min),益气复脉-0 min组,缺血后10、20、30 min给予益气复脉组(益气复脉-10 min、益气复脉-20 min、益气复脉-30 min)以及维拉帕米(Verapamil)组,分别在缺血前10 min及缺血后0、10、20、30 min腹腔注射给予益气复脉(1.067 g/kg),以及缺血后20 min给予Verapamil(1.85 mg/kg),模型组及假手术组给予同体积氯化钠注射液。在缺血30 min再灌注24 h后,采用小动物高频彩色超声(US)测定心脏功能,红四氮唑法测定心脏梗死面积,苏木精-伊红染色法观察心脏病理组织形态学,试剂盒法测定血清乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性。结果益气复脉各时间点给药均可有效保护缺血再灌注损伤心肌,降低心脏梗死面积(P0.01);一定程度提高心脏射血分数(EF)、缩短分数(FS);显著降低LDH及CK活性(P0.05,P0.01)。除益气复脉+10 min组与模型组相比没有显著性差异(P0.05)外,益气复脉显著改善心肌病理组织形态学变化,减少炎性细胞浸润(P0.01);益气复脉-20 min组、益气复脉-30 min组与益气复脉其他组相比,LDH活性显著降低(P0.01)。结论益气复脉能有效改善小鼠心肌缺血再灌注损伤,特别是在缺血后20 min和30 min给予更有效。     

四逆汤对急性缺血性心肌梗死模型大鼠SOD和MDA的动态药效及各指标间相关性研究

目的:观察四逆汤对急性缺血性心肌梗死模型大鼠SOD和MDA的动态药效,分析时间与SOD和MDA指标相关性。方法:将Wistar大鼠随机分为心肌缺血组、假手术组、四逆汤组。心肌缺血组:于左冠状动脉前降支起始部下2mm处结扎;假手术组:穿线不结扎;四逆汤组:预先给大鼠灌服四逆汤4d,第4日给药30min后,进行急性缺血性心肌梗死手术。分别于手术后按时间点0、5、10、20、40、60、90、120、150、180、210、360min腹主动脉采血,检测SOD和MDA含量,分析动态药效和时间与指标间的相关性。结果:与假手术组比较,心肌缺血组大鼠SOD(40、120、150、180、210、360min)、四逆汤组SOD(5、210、360min)含量显著降低,心肌缺血组MDA(10、60、90、150、210min)、四逆汤组MDA(210min)含量显著升高;在造模后40min时,四逆汤组大鼠SOD明显高于心肌缺血组;造模后10、60、120、150min时,四逆汤组大鼠MDA含量明显低于心肌缺血组。心肌缺血组、四逆汤组SOD含量与时间变化均为负相关关系,四逆汤组MDA含量与时间变化为正相关关系。结论:四逆汤能够有效地清除氧自由基,减轻脂质过氧化反应,减轻对缺血心肌的损伤,对大鼠缺血心肌具有一定的保护作用。但通过与时间相关性分析,提示四逆汤所具有的减轻氧自由基损伤作用可能不是其抗急性缺血性心肌梗死的主要途径。     

麦冬多糖中抗急性心肌缺血活性部位研究

目的:筛选麦冬多糖中抗心肌缺血的活性部位,明确其抗心肌缺血作用.方法:以异丙肾上腺素造成大鼠心肌坏死程度为评价指标,筛选麦冬多糖中不同分子量的组分,通过垂体后叶素诱发大鼠冠状动脉痉挛实验以及冠状动脉结扎致大鼠急性心肌缺血实验,证明了麦冬活性多糖的抗心肌缺血作用.结果:麦冬活性多糖可拮抗垂体后叶素引起的S-T段抬高,可使结扎大鼠冠脉后升高的S-T段明显降低,同时降低动物血清中CK和LDH含量升高,对心肌缺血造成的SOD降低和MDA增加有一定的抑制作用.结论:麦冬活性多糖可保护心肌细胞,同时具有抑制心肌缺血造成的自由基生成增加和清除氧自由基的作用.     

温阳通脉方预处理对心肌再灌注大鼠CK—MB LDH的影响

目的:观察温阳通脉方预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤模型CK-MB、LDH含量的影响,探讨温阳通脉方对大鼠再灌注心肌的保护机制.方法:采用结扎大鼠冠状动脉左前降支,缺血30min,再灌120min的方法建立心肌缺血再灌注损伤模型;缺血5min,再灌5min,反复3次后缺血30 min,再灌注120 min建立心肌缺血预适应模型.检测大鼠灌胃14天后温阳通脉方组、心肌缺血预适应组(IP组)、再灌注损伤组(IR组)、假性处理组血清CK-MB、LDH含量.结果:温阳通脉方组、IP组CK-MB、LDH含量低于再灌注损伤组(P＜0.05),温阳通脉方组CK-MB、LDH与IP组比较.无显著性差异(P＞0.05).结论:温阳通脉方预处理后,能降低大鼠心肌缺血再灌注损伤模型CK-MB、LDH的含量.能够减轻大鼠急性心肌缺血所致心肌损伤,其机制可能是通过模拟心肌缺血预适应参与心肌保护作用.     

丹酚酸B对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究丹酚酸B对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的作用及其作用机制。方法:SD大鼠48只,随机分为6组,分别是空白对照组、阳性给药组(维拉帕米150μg.L-1)、丹酚酸B高、中、低剂量组(10,5,2.5 mg.L-1),每组8只。采用Langendorff法灌流离体大鼠心脏,停灌25 min后再灌30 min,造成心肌缺血再灌注损伤模型。于大鼠左心房插入水囊导管,记录丹酚酸B对血流动力学指标的影响,测定不同时间点冠脉流出液中天门冬氨酸氨基转移酶(AST),乳酸脱氢酶(LDH)的活性及心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)的含量。结果:丹酚酸B不同剂量组(10,5,2.5 mg.L-1),可显著改善缺血再灌注所致大鼠的心功能损伤,减少AST,LDH释放和MDA的产生,增加SOD的活性。结论:丹酚酸B对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与改善心肌舒缩功能,清除氧自由基,减少脂质过氧化反应有关。     

三七有效组分对离体大鼠心肌缺血再灌注的影响

目的探讨三七有效组分(Rx)对离体大鼠心肌缺血再灌注的影响。方法利用改良的Langendorff灌流装置建立离体大鼠心脏缺血再灌注损伤动物实验模型,分别用Rx灌流液小剂量(10 mg/L)、中剂量(20 mg/L)、大剂量(30 mg/L)、丹参3 g/L、PNS 80 mg/L分别再灌注缺血离体心脏,检测各组大鼠各时间点(正常灌流10 min,低灌60 min,再灌15 min)冠脉流量及冠脉流出液中CPK、LDH含量。结果Rx大、中、小剂量组及PNS组、丹参组离体大鼠心脏低灌60 min、再灌注15 min CPK、LDH释放较模型组减少,有显著性差异(P<0.05)。Rx大、中、小剂量组及PNS组、丹参组可使离体大鼠心脏低灌60 min再灌注15 min时冠脉灌流量分别增加20.15%,14.96,9.48%,11.41%,8.15%。结论Rx大剂量组可明显减少CPK、LDH的释放,增加冠脉流量。     

高乌头生物碱高乌甲素对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用研究

目的:研究高乌甲素注射液预处理和后处理对大鼠在体心肌缺血/再灌注损伤的保护作用。方法:随机将48只雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、高乌甲素预处理组和高乌甲素后处理组。除假手术组外其余各组大鼠采用可逆性冠脉左前降支结扎的方法复制心肌缺血/再灌注模型,给予大鼠心脏缺血30min再灌注120min;假手术组不缺血维持生命体征2h。高乌甲素预处理组于心肌缺血开始前15min静脉注射高乌甲素注射液(4mg/kg),高乌甲素后处理组于心肌缺血开始后10min静脉注射高乌甲素注射液(4mg/kg)。实验结束后用氯化三苯四氮唑染色法(TPT)测定心肌梗死范围,并测定血清中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果:模型组大鼠心肌出现缺血、梗死区,血清NO含量、SOD活性明显低于假手术组(P0.01),MDA含量明显高于假手术组(P0.01),说明造模成功。与模型组比较,高乌甲素预处理组和后处理组大鼠心肌梗死范围显著减少(P0.05),NO含量、SOD活性显著增加(P0.01),MDA含量显著降低(P0.05)。结论 :高乌甲素预处理和后处理可以减小心肌缺血/再灌注大鼠心肌梗死范围,其可能通过抗氧化机制对缺血再灌注心肌发挥保护作用。     

灯盏花素抑制大鼠心肌缺血再灌注损伤诱导的细胞凋亡

目的:观察灯盏花素(breviscapine,bre)对大鼠心肌缺血再灌注损伤诱导的细胞凋亡的影响并探讨其机制。方法:采用结扎大鼠左冠状动脉前降支方法制备心肌缺血再灌注模型。40只SD大鼠随机分为正常对照组(control)、缺血再灌注组(ischemiareperfusion,IR)和灯盏花素组。灯盏花素组大鼠于术前1周分别腹腔注射不同剂量的灯盏花素(25、50 mg.kg-1.d-1),另2组给予等量生理盐水。缺血30min、再灌注2h后,采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况,western blotting检测Caspase-3蛋白表达的变化。结果:缺血再灌注组凋亡指数和Caspase-3蛋白表达较正常对照组明显升高(P<0.01),灯盏花素组各指标较缺血再灌注组降低(P<0.05,P<0.01)。结论:灯盏花素对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制与通过下调Caspase-3基因表达抑制心肌缺血再灌注损伤诱导的细胞凋亡有关。     

黄芩苷对心肌缺血再灌注损伤大鼠心功能的影响

目的:研究黄芩苷(Bai)对心肌缺血再灌注损伤大鼠心功能的影响.方法:结扎大鼠左冠状动脉前降支复制心肌缺血再灌注损伤模型.Bai 50、100mg/kg于冠脉结扎前10min静脉注射后,左心室插管测定缺血再灌注大鼠左心室功能的变化.结果:Bai对正常麻醉大鼠心肌收缩性能有短时的抑制作用,一过性升高LVEDP,减慢HR,降低心肌耗氧量(HR×LVSP);能明显改善缺血再灌注损伤大鼠左室心功能各参数,增加再灌注区心肌干湿重之比,改善心脏舒张功能.结论:黄芩苷对心肌缺血再灌注损伤大鼠左心室功能具有保护作用.     

水飞蓟宾在正常大鼠和肝损伤模型大鼠体内代谢的比较研究

目的 研究水飞蓟宾在正常和肝损伤模型大鼠的体内分布与代谢差异.方法 分别口饲正常组和免疫性肝损伤模型大鼠相同剂量的水飞蓟宾胶囊水溶液,HPLC法分别测定各类生物样品中不同时间的水飞蓟宾含量.结果 正常组在各时间点各类生物样品中的水飞蓟宾含量均比模型组高,且正常组中水飞蓟宾在各脏器中分布的浓度由大到小顺序依次为肝脏＞肾脏＞血浆＞心脏,而模型组中为肾脏＞心脏＞肝脏＞血浆.结论 水飞蓟宾在正常大鼠的分布与代谢与肝损伤模型大鼠有显著性差异.     

淫羊藿苷在大鼠体内的药代动力学

 目的：研究淫羊藿制剂中淫羊藿苷（Ica）在大鼠体内的吸收、分布、排泄、生物利用度及蛋白结合率等药动学特性。方法：淫羊藿苷在生物样品的浓度用高效液相色谱法测定。结果：淫羊藿注射液含Ica10,15和22mg.kg^-1iv给药,其药-时过程符合二室开放模型特征t_1/2β分别为（170±75.1）、（168±41.7）和（209±40.1）min。按含Ica10,15mg.kg^-1iv后,其药-时过程符合线性动力学,按含Ica22mg·kg^-1iv后为非线性动力学。大鼠灌胃及肝门静脉给药后,其药 时过程符合单室开放一级吸收模型特征。体内绝对生物利用度为12.0％,肝门静脉注射的绝对生物利用度为45.17％。按含Ica22mg.kg^-1iv后,结果表明服药2h后药物可广泛分布于各组织中,主要集中在肺、血浆中,心、肝、肾次之,脾和脑较少。尿、胆汁和粪的排泄实验表明：尿、胆汁和粪24h排泄量分别占给药量的1.99％,0.066％和12.83％。Ica的血浆蛋白结合率为80.05％。结论：该研究可为淫羊藿制剂内在质量评价和剂型改革提供一定科学依据。     

吸烟与性别对异丙酚药动学的影响及临床效应的关系

 目的:研究吸烟及性别对异丙酚药动学及临床效应的影响。方法:用HPLC法测定异丙酚血药浓度，3P87软件进行系统分析。结果:吸烟者异丙酚K₁₀、T_1/2β、T_1/2γ、CL分别为（0.10±0.10）h-1、（1.5±1.2） h、（0.90±0.10） h、（15.8±4.2） L·kg^-1·h^-1，明显低于非吸烟者。在浅睡，朦胧，清醒状态下，非吸烟者的血药浓度普遍高于吸烟者，但统计学差异无显著性，男性的表现分布容积大于女性，统计学无差异显著性。结论:吸烟可加快异丙酚的代谢。     

氧化苦参碱在大鼠体内药代动力学特征

目的 建立大鼠血浆中氧化苦参碱的HPLC检测方法,考察氧化苦参碱大鼠口服后药代动力学特征.方法 分别给予大鼠静脉注射和灌胃氧化苦参碱后,于不同时间点采血,血浆经处理后采用HPLC方法进行检测,条件为:C18柱,柱温30℃,流动相0.1 mol/L KH2PO4水溶液-乙腈(93∶7),用H3PO4调pH 2.5.结果 氧化苦参碱在50～100μg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 2),日内和日间RSD均小于5.2％,回收率大于88.67％;氧化苦参碱静注后AUC 19.92μg/(mL·h),t1/2 1.33 h;口服AUC 9.27μg/(mL·h),t1/2 1.89 h,Cmax为2.28μg/mL,tmax1.89 h,绝对生物利用度9.31％.结论 该法灵敏、简单、专属性强,可用于大鼠血浆中氧化苦参碱的测定.氧化苦参碱在大鼠体内的生物利用度较低.     

天麻素在大鼠体内的药动学研究

 目的研究天麻素在大鼠体内的药动学，探讨其在大鼠体内的动力学特征。方法采用胆管结扎术和颈静脉插管术，同时建立高效液相色谱法测定血浆中天麻素浓度的变化，应用3P87药动学程序对血药浓度数据进行拟合。结果天麻素在25～800 μg·mL^-1浓度范围内样品峰面积与内标峰面积比呈良好线性关系，其相关系数r=0.995。提取平均回收率83.6%，日内、日间RSD＜15%。大鼠静脉注射天麻素后体内药动学符合开放性双隔室模型，而灌胃给药符合开放性单隔室一级吸收模型，其绝对生物利用度为86.1%。大鼠结扎胆管前后AUC_0～180分别为(18±9)，(15±13) mg·min·mL^-1，经方差分析无显著性意义。结论天麻素在大鼠体内不存在肠肝循环。     

Hepatotoxicity of gossypol in rats

Gossypol acetic acid (GAA) at the dosage of 30 mg/kg daily for 2 weeks could prolong the sleeping time of pentobarbital, increase the SGPT level, decrease the liver concentration of cytochrome P-450 and GSH content, inhibit the activity of cytochrome C reductase and aminopyrine-N-demethylase, but was without effect on cytochrome b5 and aniline hydroxylase. At a smaller daily dosage (15 mg/kg for 4 weeks), GAA could induce the rise of SGPT level and GSH content without affecting the liver metabolizing enzymes. GAA at both dosages could induce marked pathological changes of liver cells in treated rats, such as vacuolation of mitochondria, dilation of endoplasmic reticulum and widening of perinuclear space as well as proliferation of collagen fibers in Disse's spaces. GAA could induce the formation of O2 and H2O2 and could inhibit Ca2+ sequestration in rat liver microsomes in vitro. [C14]-gossypol could bind to microsomal protein irreversibly either in the presence or absence of NADPH. It may be concluded that GAA is capable of causing damage to liver cells.     

补肾利湿法对急性痛风性关节炎大鼠血清MMP-7影响的实验研究

目的通过观察补肾利湿法对急性痛风性关节炎炎性指标MMP-7的表达水平,探讨补肾利湿法对急性痛风性关节炎的防治作用机制。方法将84只SD大鼠随机分为7组:空白组、模型组、中药对照组、西药对照组、中药复方低、中、高剂量组。空白组和模型组予蒸馏水灌胃;中药对照组予痛风舒片混悬液灌胃;西药对照组予秋水仙碱混悬液灌胃;中药复方低、中、高组,分别用补肾利湿法中药复方混悬液灌胃。采用尿酸钠联合氧嗪酸钾诱导大鼠急性痛风性关节炎模型,用酶联免疫(ELISA)法测定大鼠血液中MMP-7含量。结果模型组MMP-7含量(2.84±0.14)μg/L明显高于空白组(1.19±0.72)μg/L(P0.01),证明MMP-7参与了急性痛风性关节炎的发生;中药对照组,西药对照组,中药复方低、中、高剂量组MMP-7含量(2.42±0.28)、(1.62±0.14)、(2.35±0.24)、(1.53±0.28)、(2.31±0.14)μg/L均较模型组低(P0.01);中药复方中剂量组与中药对照组、中药复方低、高剂量组相比差异有统计学意义(P0.01),但与西药对照组相比差异无统计学意义。结论补肾利湿法中药复方可降低急性痛风性关节炎大鼠血清MMP-7含量,抑制炎症反应,对防治急性痛风性关节炎有一定作用。     

黄芩苷纳米混悬剂大鼠体内药代动力学研究

[目的]建立液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)的方法,并对大鼠灌胃给药黄芩苷纳米混悬剂(BL-NSPS)后黄芩苷的药代动力学进行研究。[方法]采用LC-MS/MS方法,色谱柱:Waters ACQUITY UPLC~HSS C_(18)柱(1.8μm,2.1 mm×50 mm,美国Waters公司);柱温:30℃;流速:0.3 mL/min;进样量:5μL;流动相:0.1%甲酸水(A)-乙腈(B);梯度洗脱。以卡马西平为内标,采用电喷雾离子源(ESI离子源),在正离子检测方式下进行多反应离子监测(MRM),检测离子对分别为m/z 447.09→270.80(黄芩苷)、m/z 237.10→193.80(卡马西平,内标),测定大鼠灌胃给药BL-NSPS后黄芩苷的血药浓度,并用Win Nonlin 6.0版药动学软件计算其药代动力学参数。[结果]黄芩苷在24.75~4 950.00 ng/m L范围内线性关系良好,血浆中内源性物质无干扰,LC-MS/MS方法回收率、基质效应、精密度、准确度和稳定性均符合生物样品的测定要求。BL-NSPS和黄芩苷原料药(BL-Bulk)的C_(max)分别为(3 329.10±499.10)ng/mL、(1 257.84±158.21)ng/mL。BL-NSPS的C_(max)较BL-Bulk有了显著提高(P0.05),BL-NSPS的相对生物利用度为(160.97±47.78)%。[结论]建立的LC-MS/MS测定方法准确度强、专属性好,可用于黄芩苷的药代动力学研究。结果显示,BLNSPS能增加药物的吸收速率,缩短了药物起效时间,提高药物体内生物利用度,可为黄芩苷制剂的进一步研发奠定基础。     

益脂平胶囊对实验性高脂血症大鼠血液流变学影响及对大鼠毒性研究

目的对实验性高脂血症大鼠血液流变学影响及其对大鼠的胚胎毒性和致畸作用.方法①用高脂饲料喂饲10天以形成实验性高脂血症大鼠模型,同时经口灌胃给予75、150mg·kg-1益脂平胶囊20天,测定血液流变学的各项指标.②根据毒理学检测程序[1],实验组经口灌胃给予250、500、1000mg·kg-1益脂平胶囊,观察其对大鼠的胚胎毒性及致畸作用.结果①益脂平胶囊能显著增加实验性高脂血症模型大鼠的红细胞电泳率、显著降低实验性高脂血症模型大鼠的红细胞沉降率(P＜0.05);能降低实验性高脂血症模型大鼠的全血粘度和血浆粘度(P＜0.05);②与对照组比较,益脂平胶囊实验组孕鼠未见体重增长显著减慢、活产仔数显著减少、死胎率及吸收胎率显著增加以及未见胎仔平均体重、体长、尾长发育指标显著减缓和外观畸形与骨骼畸形明显增加.结论①益脂平胶囊可以改善实验性高脂血症大鼠血液流变学指标;②在本试验剂量与条件下益脂平胶囊无母体毒性、胚胎毒性和致畸作用.     

栀子苷在大鼠体内的药代动力学研究

目的:研究注射栀子苷后栀子苷在大鼠体内的药代动力学特征。方法:尾静脉注射给药,颈静脉插管采血,采用高效液相色谱法测定栀子苷的血药浓度,所得数据用3P87软件进行药代动力学分析。结果:大鼠血浆中栀子苷在0.1～200 mg/L范围内线性关系良好,回收率大于92%(n=5),日内和日间精密度RSD值均小于15%(n=5),注射栀子苷后,大鼠体内药-时曲线符合三室模型。结论:明确了注射栀子苷后栀子苷在体内的变化规律,为栀子苷的临床应用提供参考依据。