RAPD在山麦冬属四种植物分类中的应用

采用随机扩增多态DNA（RAPD）技术对山麦冬属的4种植物进行研究，并以沿阶草OphiopogonbodlinienLevl．为组外比较，用SPSS3．1＋软件对实验数据进行统计分析，得到聚类图。观察所得结果，发现这5种植物被分为两大类群，短葶山麦冬、阔叶山麦冬、山麦冬、湖北山麦冬为一类，沿阶草为另一类，这与经典分类相一致，前4种隶属于山麦冬属，后一种属于沿阶草属；同时，我们发现短葶山麦冬和阔叶山麦冬相对遗传距离较近，结果为阔叶山麦冬是短葶山麦冬的阔叶变种提供分子遗传方面的佐证。     

湖北麦冬及其近缘种的ISSR多样性研究

目的:对形态上难以区分的湖北麦冬及其近缘植物,利用ISSR分子标记技术进行多样性研究,并探索其亲缘关系。方法:设计5因素4水平正交实验,进行PCR反应体系的优化;从ISSR引物序列表中随机选取80个引物,对所有样品进行PCR扩增,筛选实验有效引物;用优选的条件对样品进行ISSR分子标记,计算样品间的相似系数,构建聚类分析树系图。结果:建立了麦冬类植物优化的PCR扩增程序,筛选出了9个有效引物,得到了各样品的ISSR电泳谱和系统发育树系图,谱和图清楚反映出了各品种之间的区别及其亲缘关系。结论:本文建立的IS-SR分子标记技术可用于湖北麦冬及其近缘种的多样性及亲缘关系研究。     

短葶山麦冬遗传多样性TRAP标记研究

目的:利用TRAP分子标记技术研究短葶山麦冬遗传多样性。方法:以果糖、光合或甾体皂苷代谢途径7个关键酶基因和1个凝集素基因作为靶标序列设计固定引物13条,筛选随机引物19条,利用其中11对多态性较高引物组合对50份短葶山麦冬种质进行分析。结果:共扩增了335条带,其中多态性带323条,占96.42%。引物平均多态信息量0.930。遗传分化系数0.610。UPGMA聚类表明相似系数0.52~0.98。结论:短葶山麦冬遗传多样性水平较高,出现了一定程度的遗传分化。     

川产贝母种质资源遗传多样性的ISSR分析

目的:为阐明川产贝母资源间亲缘关系提供更多证据.方法:利用ISSR分子标记技术对川产10个种1变种共19份材料进行分析,采用NTSYS软件计算材料间相似系数,并用UPGMA法构建了系统树.结果:从35个ISSR引物中共筛选出11个多态性明显、反应稳定的引物,在19份供试材料DNA中共扩增出179条谱带,其中多态性条带163条,占86.8%.材料间ISSR标记遗传相似性系数(GS)在0.569～0.855.聚类分析结果显示,所有供试材料均可区分开,并聚为4组.第1组包括川贝母、甘肃贝母、长腺贝母和短丝贝母,第Ⅱ组由暗紫贝母和浓蜜贝母组成,槽鳞贝母、浙贝母、瓦布贝母和梭砂贝母聚为第Ⅲ组,湖北贝母单独为第Ⅳ组.试验结果还表明,来源于同一地区的多数川产贝母材料可分别聚在一起.结论:ISSR标记适用于川产贝母资源的遗传多样性研究,但药典收载的川贝母药材的4种基原植物种间及其与其他川产贝母属各物种间尚不能仅通过采用ISSR标记技术进行分子鉴定.此外,ISSR聚类结果同川产贝母资源的地理分布有一定关系.     

短葶山麦冬遗传多样性SRAP标记研究

目的对短葶山麦冬进行遗传多样性分析。方法利用SRAP分子标记技术对47份短葶山麦冬材料进行遗传多样性分析。结果 15对引物共扩增出323条多态性带,平均多态位点百分率为88.47%。平均引物多态信息量(PIC)为0.90。Nei’s基因多样性指数(H)为0.197 7,Shannon’s信息指数(I)为0.319 0。遗传分化系数(Gst)为0.252 8。UPGMA聚类表明遗传相似系数为0.59～0.99。结论短葶山麦冬遗传多样性水平较高,遗传变异主要在居群内。     

麦冬不同种群遗传多样性的RSAP分析

利用RSAP标记技术对120份不同地理来源的麦冬种质资源进行多样性分析,结果表明:筛选出的16对引物组合共扩增出326条带,其中318条多态性条带,多态性比率为97.55%,多态性含量PIC在0.87~0.95,平均0.92,表明试供材料间在分子水平上具有丰富的遗传多样性。种群遗传多样性结果表明,20个种群多态性位点比例(PPL)为19.94%~85.58%,Nei’s基因多样性指数(H)和Shannon信息指数(I)分别在0.082 6~0.210 7,0.120 6~0.328 1,其中浙麦冬遗传多样性最高,矮小山麦冬遗传多样性最低。种群遗传距离在0.024 6~0.286 8,浙江山麦冬和浙江阔叶山麦冬遗传距离最小,福建短葶山麦冬和沿阶草遗传距离最大。20个自然种群间基因分化系数(Gst)为0.430 7,种群间遗传变异占总遗传变异的43.07%,种群内变异为56.93%,基因流(Nm)为0.660 9。UPMGA聚类分析与主坐标分析结果基本一致,120份样本被分成四大类,聚类结果与形态分类基本一致,同时与地理来源也有很高的的一致性。     

采用ISSR和SRAP技术评价浙南忍冬属药材遗传多样性

目的 评价浙南忍冬属LoniceraL.药材遗传多样性.方法 采用ISSR和SRAP分子标记技术检测5种忍冬属药材遗传多样性,NTSYS软件处理数据,UPGMA构建聚类图;Mantel检测法对2种标记进行相关性检验;用引物分辨力(RP)、多态性条带比率(PPB)等参数对标记效率进行评价.结果 16条ISSR引物和22对SRAP引物分别扩增出232、215条带;UPGMA可将5种忍冬属药材聚为2大类,一类为金银花基原植物,另一类则为山银花基原植物,两种标记技术相关系数(r)为0.970 3.结论 ISSR和SRAP均可有效地分析忍冬属药材资源的遗传多样性,且ISSR标记技术优于SRAP.     

三种麦冬主流商品的理化鉴别

通过对麦冬主流商品(麦冬、湖北山麦冬和短葶山麦冬)进行薄层层析、紫外光谱及导数光谱分析比较。结果表明:三者的TLC图、UV谱及其一阶导数谱均有不同,可资鉴别;同时说明三种麦冬的总皂甙数与量均有明显差异,不宜混用。     

罗汉果三倍体雌株与二倍体雄株遗传背景的ISSR分析

目的探索罗汉果Siraitia grosvenorii三倍体雌株与二倍体雄株的遗传背景,为无籽罗汉果优良品种的选育提供分子生物学依据。方法利用ISSR分子标记对28份罗汉果种质进行遗传背景分析,用AFLP-SURV计算材料间遗传距离;用TSYS-pc和Gen AIEx分别进行聚类和主坐标分析。结果从100条ISSR引物中筛选出13条用于扩增,共获得131条清晰可辨条带,其中多态性条带99条,多态性位点百分率为75.57%。聚类和主坐标分析表明罗汉果三倍体雌株和二倍体雄株的遗传背景存在一定的丰富性,但大多遗传相似性系数较大,遗传距离较近。结论罗汉果三倍体雌株和二倍体雄株遗传背景的复杂性较低,应该尽快采取相应措施,进行种质创新,丰富无籽罗汉果亲本的遗传背景。     

牻牛儿苗种质资源遗传多样性的ISSR研究

目的:研究牻牛儿苗亲缘关系和遗传多样性.方法:23个样品进行简单序列重复区间(ISSR)分析,利用NTSYS软件计算材料间遗传相似系数,并用UPGMA方法聚类,构建亲缘关系系统图.结果:从100条ISSR引物中筛选出14条多态性明显、反应稳定的引物,在23份供试材料DNA中共扩增出185条谱带,其中多态性条带142条,占76.8％.材料间ISSR标记遗传相似性系数(GS)在0.458 ～0.916.聚类分析结果显示,所有供试材料均可区分开,并聚为6组.结论:分子标记研究结果与牻牛儿苗的地理位置、形态性状存在显著的相关性,较好地揭示了牻牛儿苗种源间的遗传关系,可为牻牛儿苗资源划分和良种选育提供科学依据.