乌司他丁与地塞米松对大鼠光气吸入性肺损伤的保护作用比较

目的 比较乌司他丁和地塞米松对大鼠光气吸入性急性肺损伤(ALI)的保护作用,并探讨其可能机制.方法 光气吸入性肺损伤大鼠随机分为四组:正常对照组、损伤组、地塞米松预处理组(2.5 mg/kg)、乌司他丁预处理组(50 000 U/kg).实验期间记录动物呼吸频率,并与光气吸入后2 h收集支气管肺泡灌洗液(BALF)测定中性粒细胞数、蛋白含量和肺湿/干质量比(W/D),比较各组血清和BALF中致炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的水平,并行肺组织的病理学检查.结果 乌司他丁可明显减轻光气吸入性肺损伤动物损伤组大鼠肺组织病理学改变,降低肺湿/干质量比,降低血清和BALF中TNF-α和MMP-9的含量,与地塞米松比较差异无统计学意义.结论 乌司他丁能有效地改善大鼠光气吸入性急性肺损伤的肺功能, 与地塞米松有相似的肺保护作用.两者可能通过抑制细胞因子的过度生成和抑制MMP-9表达从而达到肺保护作用.     

急性肺损伤大鼠肺组织白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α表达及黄芪的干预效应

目的:观察黄芪注射液对急性肺损伤时肺组织白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α表达的影响,分析黄芪在急性肺损伤中的治疗机制。方法:实验于2005-11/2006-04在南华大学动物实验中心完成。清洁级健康SD雄性大鼠24只,以随机数字表法分3组,即对照组、模型组和黄芪组,各8只。对照组从尾静脉注入1mL生理盐水;模型组和黄芪组以内毒素5mg/kg溶解于1mL生理盐水,从尾静脉注入,制造急性肺损伤模型;45min后,黄芪组予黄芪注射液(每支10mL含20g生药,成都地奥九泓制药厂)0.5g/kg,加生理盐水稀释成1mL,并从尾静脉注入。免疫组化法检测各组肺组织白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α的表达情况。并做肺组织大体观察和200倍光镜下观察,以胞浆出现棕黄色颗粒为阳性表达。结果:实验大鼠24只全部进入结果分析。①模型组大鼠右下肺湿质量、干质量及湿/干比值较对照组显著增加(P<0.01);黄芪组大鼠右下肺湿质量、干质量及湿/干比值较模型组明显降低(P<0.01),但仍明显高于对照组(P<0.01)。②对照组肺组织大体观察可见,表面光滑,呈淡粉红色无充血水肿及梗死灶;模型组肺组织呈现暗红色,肺包膜下明显充血水肿,广泛出血点;黄芪组大体观察同模型组。镜下观察可见,对照组肺组织结构清晰,无充血渗出,未见明显炎性细胞浸润;模型组可见肺微血管充血、出血、微血栓形成,肺间质和肺泡内有水肿液和炎症细胞浸润,部分可见灶状肺不张;黄芪组病理学改变可见肺微血管充血、出血、微血栓形成及炎症细胞浸润,但比模型组稍轻。③模型组和黄芪组白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α的表达水平均高于对照组(P<0.01),但黄芪组白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α的表达水平低于模型组(P<0.01)。④白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α主要表达于肺组织的单核巨噬细胞胞浆中,呈棕黄色颗粒;模型组的表达最多,黄芪组的表达次之,对照组几乎不表达。结论:黄芪可能通过抑制白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α等前炎性因子的表达来促进急性肺损伤的修复。     

基质金属蛋白酶-9和肿瘤坏死因子α在大鼠光气吸入性肺损伤中的表达及意义

目的：探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）在大鼠光气吸入性肺损伤中的表达及意义。方法：SPF级SD大鼠（180~220g）50只,随机分为空气对照组和光气暴露组。建立大鼠光气吸入性肺损伤动物模型,并分别于光气染毒后2、46、、8h采用实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定MMP-9mRNA在肺组织中的表达含量,酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中的TNF-α含量,同时对肺湿/干质量比,支气管肺泡灌洗液（BALF）中蛋白含量、中性粒细胞数以及肺组织病理学改变进行动态监测和对比分析。结果：与空气对照组相比,光气暴露组肺组织出现水肿、出血、炎性细胞浸润,随时间延长进一步加重。光气暴露组肺湿/干质量比值,BALF中蛋白含量、TNF-α含量、中性粒细胞计数均明显高于空气组（P〈0.05）;光气暴露各组MMP-9mRNA表达水平和BALF中MMP-9的表达明显高于空气对照组,随时间延长肺水肿加重（P〈0.01）。结论：基质金属蛋白酶的过度激活和表达及其与炎症因子相互影响在光气肺损伤过程中发挥重要的作用。     

乌司他丁调控重症脓毒症大鼠IL-10、TNF-α、IL-1 β水平的研究

目的:探讨乌司他丁(UTI)对细菌性重症脓毒症大鼠血清白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平的调控作用.方法:将SD大鼠经腹腔内注射创伤弧菌建立脓毒症模型,并随机分为3组:生理盐水对照组、氧氟沙星抗感染组、乌司他丁+氧氟沙星抗炎抗感染组,每组15只.15 h后取单侧颈总动、静脉血标本测定血清IL-10、TNF-α、IL-1β的水平.结果:合用乌司他丁的抗炎抗感染组较单纯氧氟沙星抗感染组及生理盐水对照组IL-10水平显著增高(P<0.01),而TNF-α、IL-1β水平则显著降低(P<0.01);IL-10与TNF-α、IL-1β水平呈线性负相关.结论:乌司他丁能上调脓毒症大鼠抗炎因子IL-10水平,并可下调炎症因子TNF-α、IL-1β,阻断炎症反应,改善预后.     

乌司他丁对失血性休克复合内毒素模型兔肺组织中核因子-κB的影响

目的 探讨失血性休克复合内毒素打击兔急性肺损伤(ALI)中核因子-KB(NF-κB)的活化和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的释放及乌司他丁的抑制作用.方法 失血性休克复合内毒素打击法复制AU兔模型:90只兔随机分为对照组(A组)、创伤组(B组)和乌司他丁组(C组).各时相点检测动脉血氧分压(PaO2)、肺干质量/湿质量比值(D/W)、血清TNF-α浓度、肺组织内NF-κB的变化情况,并进行肺大体外观及组织病理学光镜检查.结果 与A组比较,B组PaO2进行性下降,C组Pao2于4 h达到最低值后逐渐上升;B组血清TNF-α含量及肺组织NF-κB p65的表达升高,并均于4 h达到最高峰(P<0.01),C组24 h、48 h时TNF-α含量及NF-κBp65的表达较B组明显降低(P<0.05).C组动物肺损伤程度明显减轻.结论 乌司他丁可通过抑制NF-κB活化,减少TNF-α等炎性介质的释放从而减轻肺损伤.     

口服高氧液对急性光气中毒性肺损伤小鼠的干预效应

目的:分析口服高氧液对双用途毒剂光气所致急性中毒性肺损伤小鼠的干预效应。方法:实验于2003-09/2004-04在第四军医大学预防医学系毒理学教研室完成。选择健康昆明种系清洁级小鼠60只,随机分为高浓度染毒组(n=30)、低浓度染毒组(n=20)和正常对照组(n=10)。制备动物染毒模型,固定染毒时间为3min。高浓度染毒组放入光气剂量为28.56mg/L染毒柜中;又分为平衡盐对照组(染毒后分别于1,3,5h经胃灌入平衡盐0.05mL/g)、高氧液治疗组(染毒后分别于1,3,5h经胃灌入高氧液0.05mL/g)和光气中毒组(染毒后不予干预),每组10只;低浓度染毒组放入光气剂量为14.88mg/L染毒柜中,分为平衡盐对照组和高氧液治疗组,两组均分别于染毒后1,3,5h经胃灌入平衡盐或高氧液0.05mL/g,每组10只;正常对照组放入相同染毒柜内吸入新鲜空气3min。高浓度染毒组记录动物染毒后生存时间,低浓度染毒组均在染毒后8h处死,处死前心脏取血,测定动脉血氧分压及血清肿瘤坏死因子α含量,开胸取肺,测定肺组织丙二醛、还原型谷胱甘肽含量及肺系数的变化,留取部分肺组织作组织病理学检查。结果:在实验过程中无动物死亡,全部进入结果分析。①高浓度染毒后,高氧液治疗组生存时间较光气中毒组、平衡盐对照组延长,但差异无显著性[(8.0±2.0),(6.45±1.99),(6.55±1.89)h]。②低浓度染毒组中平衡盐对照组动脉血氧分压进行性下降,肺系数、血清肿瘤坏死因子α含量升高,肺组织还原型谷胱甘肽含量下降、丙二醛含量增加,与正常对照组比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01);高氧液治疗组肺系数明显低于平衡盐对照组(P<0.05);高氧液治疗组与平衡盐对照组相比,肺组织丙二醛、血清肿瘤坏死因子α含量显著降低(P<0.01),但还原型谷胱甘肽含量没有明显改变。③正常对照组肺泡大小均匀、结构完整,无充血、淤血和水肿,光气中毒及平衡盐对照组动物,光镜下可见肺泡间隔明显增宽、肺泡壁损伤、充血,组织间隙、肺泡腔可见大量红细胞及炎性细胞浸润;高氧液治疗组肺泡腔及组织间隙内充血、渗出及细胞浸润明显减少,肺泡壁多数完整。结论:口服高氧液能减轻光气中毒小鼠肺水肿程度,升高动脉血氧分压,降低血清肿瘤坏死因子α、肺组织丙二醛含量,减轻光气中毒造成的机体脂质过氧化反应及炎症损伤,对光气中毒肺损伤有一定的保护作用。     

乌司他丁丹参注射液联合治疗创伤后急性肺损伤的临床研究

目的 探讨乌司他丁、丹参注射液联合治疗对创伤后急性肺损伤(ALI)的效果及机制.方法 将60例急诊胸腹部创伤患者随机分为治疗组和对照组,每组30例,两组常规治疗相同.治疗组加用乌司他丁600 kU/d、丹参注射液30 mL/d静脉注射.观察两组患者治疗前后血气分析、住院时间、住ICU时间、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)发生率和病死率,并测定血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平.结果 治疗组住院时间、住ICU时间、ARDS发生率和病死率均显著优于对照组(P<0.01);治疗组呼吸频率、动脉血氧分压、氧合指数改善程度均显著优于对照组(P<0.01);治疗组TNF-α、IL-6水平均显著低于对照组(P<0.01).结论 乌司他丁、丹参注射液联合治疗能显著改善创伤后急性肺损伤预后,缩短治疗时间,具有积极推广价值.     

乌司他丁对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者TNF-α、IL-6及SOD的影响

目的探讨乌司他丁对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及超氧化物歧化酶(SOD)的影响。方法 AECOPD患者随机分为两组,每组30例,两组常规治疗相同。治疗组在常规治疗基础上加用乌司他丁治疗,治疗前后观察血清TNF-α、IL-6及SOD的变化。结果随着治疗时间的延长,两组患者治疗后TNF-α、IL-6及SOD的水平均呈下降趋势,治疗组的TNF-α和IL-6下降较对照组明显,而SOD的活性较对照组高。结论乌司他丁可抑制AECOPD患者炎症因子和氧自由基,减轻AECOPD过度炎症反应及脂质过氧化引起的损伤。     

乌司他丁对重度烫伤大鼠全麻中肺组织保护作用的实验研究

目的 探讨重度烫伤后麻醉时乌司他丁预处理对机械通气造成的肺组织损伤是否具有保护作用.方法 90只Wistar大鼠,随机分为3组,对照组30只,全麻组30只,乌司他丁组30只.建立大鼠重度烫伤模型后,对照组不进行机械通气,全麻组和乌司他丁组机械通气1 h（乌司他丁组通气前接受乌司他丁预处理）.通过观察肺组织大体标本,HE染色观察肺部病理学改变,电镜观察组织超微结构改变,评估肺系数,免疫组织化学染色检测肺组织细胞因子TNF-α、IFN-γ IL-2的表达水平来检测重度烫伤后,乌司他丁对机械通气造成的肺损伤是否具有保护作用.结果 对照组和全麻组大鼠两肺明显水肿,可见出血灶,切面疏松、肿胀;乌司他丁组大鼠两肺充血水肿相对温和.HE染色可见乌司他丁组肺组织病变轻于全麻组.电镜下：对照组和全麻组肺组织细胞器破坏严重;乌司他丁组相应改变较轻.对比肺系数发现乌司他丁组肺系数与全麻组相比显著下降.免疫组织化学结果显示乌司他丁预处理后肺组织表达TNF-α、IL-2、IFN-γ的强度较全麻组显著降低.结论 乌司他丁对重度烫伤大鼠全麻时机械通气所导致的肺损伤具有保护作用.这种保护作用可能与乌司他丁降低细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2的表达水平有关.     

琥珀酸美托洛尔缓释片联合乌司他丁对慢性心力衰竭患者血清NT-proBNP与TNF-α的影响

目的:探讨琥珀酸美托洛尔缓释片联合乌司他丁对慢性心力衰竭患者血清N末端B型利钠肽原(NT-pro BNP)与肿瘤坏死因子(TNF-α)的影响。方法:选取2014年6月~2015年3月我院收治的慢性心力衰竭患者74例,随机分为对照组和观察组各37例。对照组予以乌司他丁治疗,观察组予以琥珀酸美托洛尔缓释片联合乌司他丁治疗。比较两组治疗前后血清NT-pro BNP、TNF-α水平及左心室射血分数(LVEF)。结果:治疗后观察组血清NT-pro BNP、TNF-α水平低于对照组,LVEF高于对照组(P0.05)。结论:琥珀酸美托洛尔缓释片联合乌司他丁治疗慢性心力衰竭,可有效改善患者心功能,降低NT-pro BNP、TNF-α水平,值得临床推广应用。     

持续静脉泵注利多卡因对脓毒症大鼠急性肺损伤及炎症反应的影响

目的探讨利多卡因对脓毒症大鼠肺损伤及炎症因子表达的影响。 方法采用随机数字表法将60只雄性成年Sprague Dawley大鼠分为假手术组、盲肠结扎穿孔（CLP）组、利多卡因组和乌司他丁组,每组各15只。假手术组大鼠打开腹腔后缝合,其他各组采用CLP法制备脓毒症模型。利多卡因组大鼠在给予10 mg/kg的负荷剂量后,以10 mg·kg^-1·h^-1的剂量通过尾静脉持续泵注利多卡因3h;乌司他丁组大鼠进行CLP的同时,以100 000 U·kg^-1·h^-1的剂量通过尾静脉持续泵注乌司他丁3 h;假手术组和CLP组用等量等渗NaCl溶液代替。于CLP后24 h处死大鼠,采用酶联免疫吸附实验（ELISA）法测定血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）及高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达水平;实时荧光定量PCR检测肺组织HMGB1 mRNA表达水平;苏木素-伊红（HE）染色法观察各组大鼠肺组织病理变化。另取40只大鼠（每组10只）用于观察4组大鼠72 h死亡情况。 结果4组大鼠血清中TNF-α、IL-6、HMGB1及HMGB1 mRNA表达水平比较,差异均有统计学意义（F = 189.886、237.952、175.999、179.491,P均< 0.001）。进一步两两比较发现,与假手术组比较,CLP组、利多卡因组和乌司他丁组血清TNF-α、IL-6、HMGB1及HMGB1 mRNA表达水平均显著升高（P均< 0.05）;与CLP组比较,利多卡因组和乌司他丁组血清TNF-α、IL-6、HMGB1及HMGB1 mRNA表达水平均显著降低（P均< 0.05）;与利多卡因组比较,乌司他丁组IL-6表达水平显著升高（P < 0.05）。HE染色结果显示,假手术组大鼠肺泡大小均匀、结构完整,肺泡上皮细胞形态正常;CLP组大鼠肺泡间隔增厚、间质充血水肿、炎症细胞浸润、肺泡塌陷;而利多卡因组和乌司他丁组病理学改变较CLP组均明显减轻,肺组织轻度水肿,肺泡及肺间质出现少量炎症。四组大鼠死亡构成比（0 /10、9/1、4/6、3/7）比较,差异有统计学意义（χ²=17.500,P < 0.001）。CLP组、利多卡因组和乌司他丁组大鼠死亡构成比均较假手术组显著升高（P均<0.008）;利多卡因组和乌司他丁组大鼠死亡构成比均较CLP组显著降低（P均<0.008）;而利多卡因组和乌司他丁组大鼠死亡构成比比较,差异无统计学意义（P > 0.008）。 结论持续静脉泵注利多卡因可以有效降低脓毒症大鼠炎症因子TNF-α、IL-6及HMGB1的表达,抑制肺组织中HMGB1 mRNA表达量,减轻脓毒症对肺组织的损伤,有效提高动物存活率,其减轻脓毒症炎症反应及肺保护作用疗效与乌司他丁相似。     

山莨菪碱联合乌司他丁对严重多发创伤患者血清炎症因子水平影响的研究

目的探讨山莨菪碱联合乌司他丁对严重多发创伤患者血清炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-6水平影响。方法将248例严重多发创伤患者随机分为4组,其中常规治疗组60例、山莨菪碱治疗组61例、乌司他丁治疗组62例、联合用药治疗组65例。四组患者入院均给予止血输血输液、抗感染、维持水电解质及酸碱平衡、营养支持以及呼吸循环支持等常规治疗措施;山莨菪碱治疗组在常规治疗基础上加用山莨菪碱10 mg静脉滴注,连续用药5 d;乌司他丁治疗组在常规治疗基础上加用乌司他丁20万单位+0.9%氯化钠溶液250 ml静脉滴注,1次/12 h,连续用药5 d:联合用药治疗组在常规治疗基础上加用山莨菪碱和乌司他丁静脉滴注,剂量和疗程同上两组。治疗前后采用双抗夹心法检测四组血清TNF-α和IL-6水平。结果四组治疗后血清TNF-α和IL-6水平均明显低于治疗前,且联合用药治疗组改善程度明显优于常规治疗组(P<0.01)。结论山莨菪碱联合乌司他丁对严重多发创伤患者能显著抑制炎性因子TNF-α和IL-6表达。     

转化生长因子β对异种骨移植局部免疫因子表达的调节

背景:异种骨移植免疫排斥反应是影响预后的主要问题。然而,对异种骨移植中免疫因子表达和调节的认识尚少。白细胞介素1,白细胞介素6和肿瘤坏死因子α是重要的免疫因子,与移植后排斥反应密切相关。目的:观察异种骨移植局部白细胞介素1、白细胞介素6和肿瘤坏死因子αmRNA和蛋白质的表达,并探索转化生长因子β对这些免疫因子的调节作用。设计:随机对照实验。单位:解放军第四军医大学西京医院骨科研究所。对象:雄性Balb/c小鼠72只,体质量20～25g,随机分为3组,复合松质骨载体组,单纯松质骨载体组和空白对照组,每组24只。方法:实验于2003-06/2004-06在解放军第四军医大学西京医院骨科研究所完成。复合松质骨载体组小鼠左侧股部肌间隙植入复合转化生长因子β的松质骨载体;单纯松质骨载体组植入单纯松质骨载体;空白对照组仅行手术,不植入材料。术后4,7,14和21d观察各组小鼠植骨或手术区周围组织中增殖细胞记数;应用原位杂交和免疫组化技术检测植骨局部多种免疫因子的表达。主要观察指标:各组小鼠移植骨局部组织学观察及细胞密度测定;移植骨局部白细胞介素1α,白细胞介素6和肿瘤坏死因子αmRNA和蛋白质的表达。结果:①各组小鼠移植骨局部组织学观察及细胞密度测定:7d时,复合松质骨骨粒组较单纯牛松质骨骨粒组增殖组织中细胞密度明显高[(470.63±132.89),(311.46±93.69)个/视野,P<0.01];但14,21d时两组间则无明显差异。②各组小鼠移植骨局部白细胞介素1α,白细胞介素6和肿瘤坏死因子αmRNA和蛋白质的表达:异种骨移植后的7,14d,复合了转化生长因子β的异种骨移植局部白细胞介素1α和白细胞介素6蛋白质表达分别较单纯异种骨低(7d白细胞介素1α:42.55±9.65比67.95±17.82,白细胞介素6:48.26±11.17比77.21±15.16;14d白细胞介素1αmRNA:84.77±7.42比112.94±7.02,白细胞介素6:78.10±17.22比121.18±15.44,P<0.01),但对肿瘤坏死因子α而言,则无明显差异(P>0.05)。结论:在异种骨移植局部,多种细胞可以表达白细胞介素1α,白细胞介素6和肿瘤坏死因子αmRNA和蛋白质,且这种表达受到转化生长因子β的调节。提示了转化生长因子β调节异种骨移植免疫的一种方式。     

甘草酸二铵对急性肺损伤大鼠肺组织糖皮质激素受体及核因子κB表达的影响

目的 观察甘草酸二铵(GL)对急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织核因子κB(NF-κB)、糖皮质激素受体(GR)表达的调控作用及对血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)表达的影响.方法 将24只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为生理盐水对照组、ALI模型组和GL干预组,每组8只.ALI模型组、GL干预组分别给予内毒素(LPS)5 mg/kg尾静脉注射;IPS注射前1 h,GL干预组给予GL 20 mg/kg静脉注射.观察4 h后各组大鼠肺组织病理,测定肺湿干比(W/D)、PaO_2,并采用逆转录-PCR反应检测肺组织NF-κB mRNA,GR mRNA的表达,western blot法测定肺组织Nf-κB及GR蛋白的表达,ELISA法测定血清TNF-α,IL-10质量浓度.采用SPSS 13.0软件进行统计学分析,各组间均数比较采用单因素方差分析,均数两两比较采用q检验.结果 (1)ALI模型组TNF-α为(153.68±20.42)ng/L,明显高于生理盐水组(43.96±7.57)ng/L(P<0.01)和GL干预组(87.23±7.52)ng/L(P<0.01).ALI模型组IL-10为(42.48±6.81)ug/L,明显高于生理盐水组(24.72±8.03)ng/L(P<0.01),但低于GL干预组水平(58.33±9.62)ug/L(P<0.05).(2)ALI模型组NF-κBmRNA和蛋白的表达水平[分别为(3.414±0.521),(254.7±16.4)]明显高于生理盐水组[分别为(0.432±0.085),(45.6±7.3)](P<0.01),而GRmRNA和蛋白的表达[分别为(0.152±0.025),(11.5±2.3)]则明显低于生理盐水组[分别为(0.434±0.013),(54.6±6.5)](P<0.01);GL干预组NF-κB mRNA和蛋白的表达水平[分别为(1.894±0.272),(133.5±11.7)]明显低于ALI模型组(P<0.01),GR mRNA和蛋白的表达[分别为(0.308±0.033),(28.2±5.6)]则明显高于ALI模型组(P<0.05,P<0.01).(3)ALI模型组肺组织出现充血、水肿、中性粒细胞浸润,GL干预组肺部炎症较ALI模型组减轻.结论 甘草酸二铵可能通过下调NF-κB的表达,同时提高GR的表达,进而调节炎症因子TNF-α及抗炎介质IL-10的表达,从而起到减轻ALI的作用.     

三七总皂苷对博来霉素诱导的大鼠急性弥漫性肺泡损伤的保护作用

目的:研究三七总皂苷(total saponins of Panax notoginseng,PNS)对博来霉素诱导的大鼠弥漫性肺泡损伤(acute diffuse alveolar damage,ADAD)的保护作用及机制。方法:将24只SD大鼠随机分为3组。A组为健康对照组;B组为模型组,C组为研究组。B组和C组注射博来霉素以诱导急性弥漫性肺泡损伤,随后B组注射0.9%氯化钠液,连续3 d;C组注射PNS,连续3 d。干预结束后,测定3组大鼠动脉血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平、支气管肺泡灌洗液(BALF)中巨噬细胞(PAM)和中性粒细胞(PMN)总数、BALF中蛋白含量及肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)含量;计算肺组织含水率;在光镜下观察肺组织的形态学改变。结果:与A组比较,处理后B、C组的TNF-α水平、BALF中的蛋白含量和PMN总数、肺组织含水率均明显升高,而SOD含量明显降低;但C组上述指标的变化幅度均小于B组。光镜下观察可见,B组肺组织间质水肿,细胞浸润明显;C组肺组织的病理改变显著轻于B组。结论:PNS对博来霉素诱导的SD大鼠的ADAD具有保护作用。     

核转录因子-κB诱导肿瘤坏死因子-α在肝肺综合征大鼠肺血管内巨噬细胞中的表达及吡咯醛二硫氨基甲酸对其表达的影响

目的 探讨核转录因子-κB(NF-κB)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在大鼠肺血管内巨噬细胞(PIM)内的表达及吡咯醛二硫氨基甲酸(PDTC)对其表达的影响.方法 SD大鼠随机分4组:对照组、PDTC对照组、CCI4组、CCI4+PDTC组.取动脉血作血气分析,静脉血测内毒素和肝功能.取肠系膜淋巴结作细菌培养.应用免疫组化方法 观察PIM的粘附、聚集情况,以及TNF-α和NF-κB的蛋白表达和定位.非放射性凝胶电泳阻滞实验(EMSA)检测NF-κB活性,SYBR Green I实时定量PCR方法 检测肺组织中TNF-α的mRNA表达.结果 CCl4组发展成肝肺综合征(HPS)模型,表现为PaO2、PaCO2降低和肺泡一动脉血氧分压(A-aDO2)升高,肝功能异常,内毒素血症.CCl4组肠系膜淋巴结培养阳性率为62.5%(5/8),与CCl4+PDTC组的66.7%(6/9)比较差异无统计学意义(P>0.05).CCl4组超过10个巨噬细胞的血管为60.8%(292/480),而CCl4+PDTC组仅为19.6%(106/540),两组比较差异有统计学意义(P<0.01).对照组和PDTC对照组中肺血管内无巨噬细胞聚集.免疫组化染色NF-κB和TNF-α蛋白均在CCl4组的PIM中表达.CCl4组的NF-κB活性和TNF-α的mRNA表达明显高于对照组、PDTC对照组和CCl4+PDTC组(均P<0.05).结论 NF-κB诱导PIM内TNF-α表达在HPS中发挥重要作用,PDTC通过抑制PIM中NF-κB的活性,降低PIM活性以及其中TNF-α表达,从而改善HPS.     

乌司他丁与氨溴索合用对婴幼儿体外循环术后的肺保护作用

[目的]探讨低体重婴幼儿体外循环（CPB）手术围术期联合应用乌司他丁与氨溴索的肺保护效果。[方法]以60例体重7奴及以下的先天性心脏病室间隔缺损患儿为研究对象,随机分四组（每组15例）：氨溴索组（A组,氨溴索20mg／kg·d）、乌司他丁组（U组,乌司他丁1～2万U／d）,联合组（AU组）按A、U组方案联合应用氨溴索和乌司他丁,对照组（C组）为空白对照,仅予以常规处理。以动态肺顺应性（Cd）、静态肺顺应性（Cs）以及呼吸指数（RI）来评价术后早期肺功能改变。[结果]手术后1h,AU组Cd优于A组、C组,RI优于A组、U组;手术后24h,AU组Cd和RI优于其他组,Cs优于A组、U组。[结论]围术期联合应用乌司他丁和氨溴索可抑制婴幼儿CPB术后炎症反应,改善术后肺功能,其效能大于其中任一药物单用。     

乌司他丁联合氨溴索治疗胸外伤所致ALI／ARDS的临床研究

目的探讨乌司他丁联合氨溴索在胸外伤所致ALI／ARDS患者中的治疗效果和作用。方法选取60例胸外伤所致ALI／ARDS的患者进行研究,随机分为：A（对照组）、B（氨溴索治疗组）、C（乌司他丁联合氨溴索治疗组）三组。测定各组患者治疗前后PaO2、PaO2／FiO2、血浆IL-6水平变化。结果B组患者各项指标均优于A组,通气24h后C组氧分压及氧合指数较B组改善,IL-6水平较B组降低,且较A组差异有统计学意义。结论氨溴索联合乌司他丁能较好减轻肺损伤程度,改善氧合,较单存使用氨溴索更为有益,两者均是急性肺损伤时的有效治疗药物。     

高迁移率族蛋白B1对大鼠脾脏树突状细胞细胞因子表达的影响

目的 观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对树突状细胞(dendritic cells,DC)细胞因子蛋白合成和基因表达的影响.方法 分离正常Wistar大鼠脾脏DC后置于96孔培养板(1×105/孔),给予重组HMGB1刺激,研究HMGB1刺激与TNF-α,IL-12蛋白合成和基因表达的时间-效应关系,24孔细胞随机分为6组:正常对照24 h组(4孔/组)、正常对照48 h组(4孔/组)、正常对照72 h组(4孔/组)、HMGB1 24 h组(4孔/组)、HMGB1 48 h组(4孔/组)和HMGB1 72 h组(4孔/组),后3组分别以1 μg/mLHMGB1 刺激.刺激相应时间检测TNF-α,IL-12 mRNA的表达和蛋白水平.研究HMGB1刺激与TNF-α,IL-12蛋白合成和基因表达的剂量-效应关系,16孔细胞随机分为4组:正常对照组(4孔/组)、0.1μg/mL组(4孔/组)、1 μg/mL组(4孔/组)和10 μg/mL组(4孔/组),分别以相应剂量HMGB1刺激.刺激后48 h后检测TNF-α、IL-12 mRNA的表达和蛋白水平.应用Promega公司mRNA提取试剂盒裂解收集的DC,提取细胞mRNA.采用SYBR Green real-time(实时荧光定量)PCR技术检测TNF-α mRNA,IL-12mRNA表达水平.以三磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)作为内参对照.扩增产物经Fast 7500 real-time PCR仪处理,作相对定量(RQ)分析.以ELISA试剂盒检测各组上清中IL-12,TNF-α蛋白水平.数据进行单因素方差分析,以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 1 μg/mL HMGB1 刺激后,脾脏DC IL-12,TNF-α蛋白合成和基因表达均分别于24～72 h明显上调(P<0.05或P<0.01),其中以作用48 h后其表达上调尤为显著(P<0.01);0.1/.μg/mL,1 tcVmL,10μg/mL HMGB1刺激48 h均可诱导DC IL-12、TNF-α蛋白合成和基因表达增强(P<0.01),其中HMGB1浓度在1 μg/mL时,DC IL-12和TNF-α蛋白合成和基因表达表达最明显(P<0.01).结论 HMGB1诱导DC成熟分化过程中能促进DC合成、释放IL-12和TNF-α,从而发挥其免疫调节作用.