BMP2mRNA在骨折愈合过程中的表达及意义

目的：探讨骨形成蛋白（ＢＭＰ）在骨诱导过程中的作用机理．方法：建立骨折愈合模型，利用原位杂交方法检测骨折愈合过程中ＢＭＰ２ｍＲＮＡ的表达．结果：骨折后第５日间充质细胞、成骨细胞内均见阳性信号，第７日开始信号明显增强，软骨细胞内也可见阳性信号，第１４日后信号逐渐减弱．结论：在成骨活动活跃时，间充质细胞、成骨细胞、软骨细胞均有ＢＭＰ２ｍＲＮＡ的转录，然后编码形成ＢＭＰ２蛋白来促进及调节骨折的修复．     

BMP2 mRNA在骨年愈合过程中的表达及意义

目的：探讨骨形成蛋白（ＢＭＰ）在骨诱导过程中的作用机理。方法：建立骨折愈合模型，利用原位杂交方法检测骨折愈合过程中ＢＭＰ２ ｍＲＮＡ的表达。结果：骨折后第５日间充质细胞、成骨细胞内均见阳性信号，第７号开始信号明显增强，软骨细胞内也可见阳性信号，第１４日后信号逐渐减弱。结论：在成骨活动活跃时，间充质细胞、成骨细胞、软骨细胞均有ＢＭＰ２ ｍＲＮＡ的转录，然后编码形成ＢＭＰ２蛋白来促进及调节骨折的修复。     

BMP对异种骨移植局部TNF-α和IL-6基因表达的调节

观察骨形态发生蛋白在异种骨移植局部对ＴＮＦ－α和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达的调节作用。方法将含有一定抗原性的牛松质骨载体与不同剂量的牛ＢＭＰ复合,植入小鼠股部肌袋,于术后５,１０和２０ｄ取材,制备石蜡切要用核酸分子原位杂交的方法,定性定位检测植骨局部ＴＮＦ－α和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达情况,通过图像分析,确定ＴＮＦ－α和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达强度,分析植骨局部不同计量ＢＭＰ对ＴＮＦ－α和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达强     

哮喘中外周血单个核细胞白细胞介素5表达及意义研究

该文研究了哮喘豚鼠嗜酸性粒细胞（ＥＯＳ）在外周血及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中的变化,用ＲＴ－ＰＣＲ半定量测定了外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）及支气管组织白细胞介素５（ＩＬ－５）ｍＲＮＡ表达量。结晶显示哮喘豚鼠ＥＯＳ及ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达量均较对照组及地塞米松干预组显著升高,ＰＢＭＣ中ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达量与支这组织ＩＬ－５表达及外周血ＥＯＳ计数成正相关。提示哮喘豚鼠ＰＢＭＣ、ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达     

人骨形成蛋白与肿瘤细胞凋亡

骨形成蛋白 (ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｉｃｐｒｏｔｅｉｎ ,ＢＭＰ)最初因其具有诱导骨形成的作用而得名。随着研究的不断深入 ,人们发现它还是一个多功能因子 ,在胚胎发生和发育、组织与细胞的分化和增殖等方面起重要作用。Ｗｏｚｎｅｙ[1] 于 1988年首次报道了人ＢＭＰ 1、ＢＭＰ 2Ａ、ＢＭＰ 2Ｂ和ＢＭＰ 3的ｃＤＮＡ克隆及表达 ,以后相继有 16种不同的人骨形成蛋白ｃＤＮＡ得到克隆。目前国内也已克隆了多种ＢＭＰ亚型的ｃＤＮＡ ,在ＢＭＰ家族中 ,具有较强功能活性者为ＢＭＰ 2、ＢＭＰ 4和ＢＭＰ 7。1　ＢＭＰ的结构特征和理化性质…     

3种药物对饲服TCDD的胎鼠腭突超微结构的影响

目的：观察叶酸、白藜芦醇和α-萘黄酮拮抗四氯二苯二噁英（2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD）诱导胎鼠腭裂发生的效应,及对饲服TCDD的胎鼠腭突表面超微结构的影响。方法：妊娠第10天（gestation day 10,GD10）孕鼠随机分组,每组8只。TCDD组以TCDD 28 μg/kg灌胃,对照组以玉米油0.1 ml灌胃,叶酸组以叶酸10 mg/kg + TCDD 28 μg/kg灌胃、白藜芦醇组以白藜芦醇50 mg/kg+TCDD 28 μg/kg灌胃、α-萘黄酮组以α-萘黄酮5 mg/kg+TCDD 28 μg/kg灌胃,于GD17.5在解剖显微镜下观察胎鼠腭裂的发生率。另取15只孕鼠随机分组,每组3只,处理方法同前,分别于GD13.5、14.5、15.5剪取胎鼠头部,扫描电镜观察腭突表面的超微结构。结果：TCDD组胎鼠腭裂发生率为92.86%,对照组未见胎鼠腭裂形成。叶酸组、白藜芦醇组和α-萘黄酮组胎鼠腭裂发生率分别为73.08%、74.51%、65.52%,与TCDD组相比,差异有统计学意义（P<0.05）。TCDD组腭中嵴上皮细胞表面逐渐破裂、皱缩,伪足结构逐渐减少、消失,最终形成腭裂;对照组、叶酸组、白藜芦醇组和α-萘黄酮组腭中嵴上皮细胞表面光滑整齐、饱满膨胀,表面丝状伪足逐渐增多、延长,一直持续到腭突融合结束。结论：叶酸、白藜芦醇和α-萘黄酮均能恢复小鼠腭中嵴上皮细胞表面的超微结构,从而拮抗TCDD的致腭裂效应。     

咳喘落协同地塞米松抑制哮喘大鼠白细胞介素4，5mRNA表达

目的 探讨咳落协同地塞米松拮抗支气管哮喘气道变应性炎症作用的分子机制。方法 采用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）半定量地测定了不同剂量的咳喘落对哮喘大鼠肺组织和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＩＬ－４ｍＲＮＡ、ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达的影响。结果 哮喘时大鼠肺组织和ＰＢＭＣ中ＩＬ－４ｍＲＮＡ与ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达均增强，显然高于空白对照组（Ｐ〈０．０１），经大剂量咳落治疗后，其表达同时显著降低（Ｐ〉     

珊瑚人工骨复合骨形成蛋白修复狗下颌骨缺损

应用珊瑚人工骨（ＣＡＢ）／骨形成蛋白（ＢＭＰ）材料修复１０只狗下颌骨缺损，观察４～２６周，分别于术后第４、８、１４、２０、２６周处死动物（每次１组，每组２只），取材作Ｘ线拍片和组织切片，结果表明ＣＡＢ是ＢＭＰ又一良好载体，ＣＡＢ／ＢＭＰ复合材料是一种较为理想的骨缺损修复材料。     

唾液腺肿瘤中转化生长因子和骨形成蛋白表达与分布的免疫组化研究

转化生长因子β（ＴＧＦ－β）和骨形成蛋白（ＢＭＰ）与胚胎发育、细胞分化密切相关．本研究利用多克隆及单克隆抗ＢＭＰ抗体、单克隆抗ＴＧＦ－β抗体，通过免疫组化方法，初步观察了１１类６０例各种唾液腺肿瘤中ＴＧＦ－β，ＢＭＰ的表达与分布．结果发现，ＴＧＦ－β与ＢＭＰ的分布模式基本一致，只是ＴＧＦ－β在肿瘤纤维组织基质中呈弥漫性轻度阳性，而ＢＭＰ则为阴性．多形性腺瘤、基底细胞腺瘤、肌上皮瘤等良性唾液腺肿瘤中ＴＧＦ－β，ＢＭＰ呈强阳性，而腺癌、乳头状囊腺癌、腺样囊性癌等恶性唾液性肿瘤中则呈弱阳性．因此，ＴＧＦ－β，ＢＭＰ的表达可能与唾液腺肿瘤的发生和细胞分化有关．     

利用三维CT重建和基因检测系统评价TCDD对小鼠面颅骨发育的致畸作用

目的 通过小鼠胚胎面颅三维计算机断层扫描重建技术，结合成骨相关基因检测系统分析2, 3, 7, 8-四氯代二苯并[b, e][1, 4]-二噁英（TCDD）对面颅骨发育的致畸作用。方法 将孕鼠分为对照组和实验组，于小鼠胚胎期第12.5天，使用TCDD （玉米油配制）按40μg/kg对实验组孕鼠单次灌胃，对照组单次灌胃等体积玉米油。收集胚胎期第13.5天和第14.5天胎鼠头颅，组织切片检测成骨相关基因的表达情况。收集两组胚胎期第18.5天小鼠胚胎头颅进行显微计算机断层扫描并三维重建，将面颅骨分块测量、对比分析。结果 TCDD造成小鼠多种面颅畸形，包括颅缝早闭、上颌骨及腭骨水平短小、翼腭突畸形及下颌下降不足。实验组小鼠下颌骨的宽度和体积明显减少，腭突的水平生长明显受损，导致垂直延伸过度，腭中缝宽大，形成腭裂。实验组小鼠腭突内，成骨分化相关基因Runx2、Osterix、Col1a1、Bmp2和Bmp4表达下调。实验组小鼠腭突内芳香烃受体水平升高，雌激素受体水平下降。结结论 TCDD能显著抑制小鼠面颅骨发育，特别是造成颅缝早闭和腭骨成骨抑制，该效应与多种成骨相关基因的异常表达相关。     

小鼠胚胎腭突间充质细胞的分离与体外培养方法研究

目的改进小鼠胚胎腭突取材方法,原代培养C57BL／6J小鼠胚胎腭突间充质细胞并加以纯化。方法通过改良方法在显微镜下切取胚胎腭突,然后应用Dispase酶消化离体腭突,纯化腭突胚胎间充质细胞,免疫荧光染色法鉴定腭突间充质细胞生物学特性。结果改良的取材方法使小鼠胚胎腭突取材更精确,操作更简单;纯化后的原代间充质细胞几乎不含上皮细胞;免疫荧光显示细胞HNK-1、S-100、波形蛋白标记阳性,角蛋白标记阴性。结论建立了一种小鼠胚胎腭突精确取材及纯化腭突外胚间充质细胞的方法,为下一步研究工作打下基础。     

骨形成蛋白在胫骨截骨快速延长成骨过程中的表达及意义

目的:探讨快速延长成骨过程中骨形成蛋白(BMP)的表达及意义. 方法: 制作兔胫骨截骨快速延长动物模型,分别于延长第5, 10, 15, 20, 30和40日在延长区取材,以抗骨形成蛋白单克隆抗体(BMP-McAb)行SP法免疫组化染色光镜观察. 结果: 在骨延长的整个过程中均有BMP的表达,不同时相BMP表达的部位不同. 除炎症细胞、类骨样组织及骨小梁外,几乎所有细胞及组织均有BMP存在. 间充质细胞、软骨细胞、成骨细胞、骨细胞、骨髓细胞BMP呈高表达. 结论: BMP在骨延长成骨过程中发挥着重要作用. BMP表达量不足可能是导致快速骨延长骨不连接的重要因素.     

骨折愈合过程中BMP2和TGFβ1 mRNA的表达与凋亡的相关性

目的　探讨骨折愈合过程中骨形成蛋白2（BMP2）,转化生长因子β1（TGFβ1） mRNA的表达与凋亡发生的相关性及意义.方法　建立颌骨骨折模型,利用原位杂交方法检测骨折愈合的不同时期BMP2和TGFβ1 mRNA的表达,同时采用TUNEL法检测细胞凋亡,并进行相关性分析.结果　①骨折愈合早期（5～11 d）的间充质细胞、成骨细胞和软骨细胞内有BMP2 mRNA表达,而TGFβ1 mRNA主要在骨折愈合后期（11～14 d）的成骨细胞和软骨细胞内表达;②细胞凋亡在骨折愈合的5 d和11 d最多,以间充质细胞和软骨细胞为主;③BMP2 mRNA的表达与凋亡具有正相关（r=0.887, P<0.01）,TGFβ1 mRNA的表达与凋亡无相关性（r=0.51, P>0.05）.结论　骨折愈合过程伴随凋亡的发生,以控制细胞的数量和清除无用的细胞,BMP2可能直接参与了凋亡发生过程.     

RARα和β-catenin在过量维甲酸致昆明小鼠腭裂发生中的作用

目的探讨RARα和β-catenin在过量维甲酸致昆明小鼠腭裂发生中的作用。方法采用免疫组织化学及图像分析方法，检测维甲酸致畸小鼠和相应对照组小鼠腭板中RARα和β-catenin的表达状况。结果实验组RARα在腭板上皮细胞和间充质的表达量明显低于对照组；实验组β-catenin在腭板上皮细胞中的表达量明显高于正常对照组。结论RARα在腭板上皮和间充质细胞中表达的下调和β-catenin在腭板上皮细胞中表达的上调与维甲酸致昆明小鼠腭裂发生相关。     

骨形态发生蛋白激活自身肌肉间质细胞拯救骨髓衰竭

目的探讨骨形态发生蛋白(BMP)激活自身肌肉间质细胞以拯救骨髓造血衰竭的作用。方法采用5-氟脲嘧啶与白消安合用诱导大鼠致死性再生障碍性贫血模型,于诱导再障前3d肌肉内植入重组人-BMP-2(rh-BMP-2),并以肌肉内植入琼脂为对照。观察血象、病理形态等变化以及两组再障大鼠的死亡率。同时,给正常小鼠大腿肌肉内植入rh-BMP-2,动态观察植入后局部的形态变化、形成骨及骨髓的形态特点,脾集落形成单位以及基质细胞干细胞生长因子(SCF)的表达。结果小鼠在BMP肌肉内植入1周内,在BMP周围有大量间质细胞增殖,随后形成骨及骨髓,其骨髓基质细胞的SCF表达明显高于自体骨髓;BMP植入组的再障大鼠,不仅血象与对照相比有明显改善,而且死亡率也明显下降,有56.3%大鼠存活超过3个月,其血象完全恢复正常,骨髓和脾脏的组织形态学改变也恢复正常。对照大鼠除1只存活超过3个月外(占4.3%),其余均死于急性再生障碍性贫血。结论BMP肌肉内植入可拯救骨髓造血衰竭,其机制可能与BMP诱导成年自体肌肉内存在的干细胞向造血分化有关;本研究结果为应用成体自身干细胞进行细胞治疗提供了新的途径。     

联合表达BMP2和Sox9促进体外培养间充质干细胞成软骨分化

目的探讨联合表达骨形态发生蛋白2（BMP2）和Sox9对间充质干细胞（MSCs）成软骨分化的影响,为构建组织工程软骨
提供实验依据。方法以小鼠胚胎骨髓MSCs（C3H10T1/2）为种子细胞,重组腺病毒BMP2诱导其分化,联用重组腺病毒Sox9
过表达Sox9信号,重组腺病毒GFP作为对照。Real-Time PCR检测成软骨标志物Ⅱ型胶原（Col2a1）、蛋白聚糖（Aggrecan）、X
型胶原（Col10a1）表达变化;Alcian blue染色了解细胞基质糖胺聚糖合成情况;免疫组化和Western blotting检测Col2a1合成情
况。结果BMP2 能诱导C3H10T1/2 细胞成软骨分化,当与Sox9 联合作用时,Sox9 可促进BMP2 诱导的（Col2a1、Aggrecan、
Col10a1）基因表达上调;促进细胞基质糖胺聚糖、Col2a1蛋白合成。结论BMP2与Sox9联合作用可以促进体外培养MSCs成
软骨分化,可能为组织工程软骨提供新的方法。
     

BMP2诱导C3H10T1／2细胞成软骨分化的分子机制研究

目的：探讨骨形态发生蛋白2（BMP2）诱导鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1／2向成软骨分化的可能分子机制。方法：20μg／mLBMP2诱导C3H10TI／2细胞0,4h,1,3,6,10,13,15d后,RT—PCR检测BMP信号通路中关键分子BMPRI,BMPRII,Smadl／5／8的表达,Westernblot检测smad蛋白及MAPK信号通路中p38磷酸化水平变化,QRT—PCR检测成软骨标志基因aggrecan,Col2a1以及成软骨相关转录因子FGFR3,Sox9表达水平,同时用Alcine Blue染色,观测C3H10T1／2细胞成软骨分化情况。结果：经BMP2诱导后,C3H10T1／2细胞表现出成软骨分化,smad蛋白及p38磷酸化水平有所上升,同时成软骨标志基因col2a1以及成软骨相关转录因子FGFR3,Sox9表达水平都有增加。与未诱导组相比,Col2a1,FGFR3,Sox9在3d的表达与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）,FGFR3,Sox9在6d的表达与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：在一定培养条件下,BMP2具有诱导C3H10T1／2细胞成软骨分化能力。     

胎鼠MEE细胞与腭裂发生关系的组织学研究

为探讨ＭＥＥ细胞与腭裂发生的关系，对１８４例ＮＩＨ胎鼠腭器官发生期不同阶段的头颅标本进行了组织胚胎学研究。结果表明，两组ＭＥＥ细胞于胎龄１４（１８）ｄ（ｈ）的标本中开始出现差异，正常组ＭＥＥ细胞逐渐由二层变为一层；给药组ＭＥＥ细胞有３种存在形式：①二层细胞；②假复层纤毛柱状上皮；③复层扁平鳞状上皮。１５（０）～１６（１８）ｄ（ｈ），正常组两腭突基底层ＭＥＥ细胞逐渐接触融合，最后中胚层组织也接触融合，ＭＥＥ细胞消失；给药组的腭裂标本ＭＥＥ细胞转归为口腔上皮。证明ＭＥＥ细胞的异常转归可导致腭裂畸形     

多发性骨髓瘤的免疫表型特征及其意义

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)的细胞免疫表型特征及意义。方法应用多参数流式细胞术(MPFCM)测定多发性骨髓瘤30例和反应性免疫球蛋白增高症患者15例(对照组)骨髓细胞的免疫表型。结果 MM组CD138和CD38阳性率均为100%,CD56阳性率86.67%,CD117阳性率33.33%,CD19阳性率仅3.33%;对照组CD38、CD138阳性率均为100%,CD19阳性率93.33%,CD56阳性率6.67%,CD117不表达。MM组浆细胞比例及CD138、CD56、CD117表达率均高于对照组(P<0.01),CD19表达率低于对照组(P<0.01)。结论应用MP-FCM同时检测细胞表面CD38、CD138、CD19、CD56、CD117等抗原表达情况,可方便区分骨髓瘤细胞与良性浆细胞,是多发性骨髓瘤的重要诊断依据。