Sonic hedgehog mRNA及其蛋白在大肠癌的表达及其临床意义

目的 探讨大肠癌中Hedgehog信号通路相关基因Sonic hedgehog(SHH)的表达及其临床意义.方法 应用RT-PCR及免疫组织化学法(Envison二步法)检测本院2008年12月至2009年4月收集的43例大肠癌组织和距离癌10 cm以上的癌旁组织的SHHmRNA及蛋白的表达情况,并与20例非肠癌患者的正常大肠组织对照,分析其与大肠癌患者临床和病理各变量的相关性.结果 凝胶成像分析显示阳性表达的样本SHH mRNA片段大小为280 bp,与理论值相符,未表达的样本则未见相应条带.大肠癌组织SHHmRNA表达阳性率为27.9%(12/43),与癌旁组织的18.6%(8/43)差异无统计学意义(P＞0.05),但均显著高于正常大肠黏膜的0%(0/20)(均P＜0.05).SHH mRNA在大肠癌组织的表达强度显著高于癌旁组织(P＜0.05),在正常大肠黏膜则未见其表达.免疫组织化学显示SHH蛋白在大肠癌组织和癌旁组织均有阳性表达,细胞膜及胞质内出现棕黄褐色颗粒,背景不着色;正常大肠黏膜阴性表达.SHH蛋白在大肠癌组织的表达阳性率显著高于正常大肠黏膜[25.6%(11/43)比0%(0/20),P＜0.05],在大肠癌组织与癌旁组织、癌旁组织与正常大肠黏膜的表达阳性率差异则无统计学意义(均P＞0.05).SHH蛋白的表达强度大肠癌组织＞癌旁组织＞正常大肠黏膜(均P＜0.05).大肠癌组织中的SHH mRNA和蛋白表达强度与患者的年龄、性别、临床分期、肿瘤部位、肿瘤浸润深度、病理分型等变量均无明显关系(均P＞0.05).结论 SHH mRNA和蛋白在大肠癌组织中表达显著增强,但与临床和病理各变量无关联.     

Ezrin在骨肉瘤中的表达及临床意义

目的探讨人体骨肉瘤组织中的Ezrin mRNA和蛋白的表达及其与骨肉瘤临床病理特征的关系。方法收集42例骨肉瘤和15例良性骨肿瘤标本,应用免疫组织化学技术检测Ezrin的蛋白表达,应用RT-PCR检测Ezrin mRNA的表达情况,并与临床病理特征进行相关性分析。结果 Ezrin蛋白及mRNA在骨肉瘤中的阳性表达显著高于其在良性骨肿瘤中的阳性表达（P〈0.05）;Ezrin mRNA表达的阳性率和骨肉瘤分化程度密切相关,而与患者性别、年龄及肿瘤部位无关。结论 Ezrin可能参与了骨肉瘤的发生、发展和转移,Ezrin的表达情况可作为评估骨肉瘤生物学行为的一项指标。     

乳腺癌中同源异型盒基因(HOX)A5表达的研究

目的研究乳腺癌组织中同源异型盒基因（HOX）A5mRNA和蛋白表达,并分析其与乳腺癌临床病理参数间的相关性,以探讨HOXA5基因在乳腺癌发生、发展及转移中的作用。方法运用TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（Real-time RT-PCR）技术检测60例乳腺癌（其中54例浸润性导管癌）和24例乳腺良性病变中HOXA5 mRNA表达,免疫组织化学SP法检测HOXA5蛋白表达。统计学办法分析HOXA5攮因表达与乳腺癌临床病理参数间的关系。结果（1）乳腺癌中HOXA5 mRNA相对表达量为0．73～193．07,均值为20．85;乳腺良性病变中相对表达量为5．42～81.91,均值为30．94。乳腺癌HOXA5 mRNA表达明显低于良性乳腺病变（P〈0．01）。（2）乳腺癌中HOXA5蛋白表达减少或消失。（3）淋巴结转移阳性乳腺癌病例HOXA5 mRNA表达明显低于转移阴性组,两者间差异有统计学意义（P〈0．05）。HOXA5蛋白在淋巴结转移阳性和阴性乳腺癌中的表达差异具有显著性（P〈0．01）。淋巴结转移阳性的乳腺癌中HOXA5蛋白主要呈弱阳性表达或表达缺失,在淋巴结转移阴性的乳腺癌中主要呈中度至强阳性表达。（4）HOXA5 mRNA和蛋白表达与乳腺癌患者年龄、肿瘤大小、临床分期、组织学分型、浸润性导管癌分级等其他临床病理学参数间未见相关性（P〉0．05）。结论HOXA5基因表达异常可能与乳腺癌有关。HOXA5基因表达抑制可能与乳腺癌淋巴结转移有关。     

蛋白激酶WEE1在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的　探讨蛋白激酶WEE1在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床指标的相关性,并阐述其在胃癌发生发展中的作用。 方法　使用Oncomine数据库分析WEE1在胃腺癌和胃黏膜组织中的表达差异。选取100例胃腺癌和80例癌旁组织标本,通过免疫组织化学法和组织芯片技术检测WEE1蛋白在胃癌和癌旁组织中的表达水平。对免疫组织化学结果中染色的比例以及染色程度进行半定量分析,对半定量分析结果与胃癌临床指标进行相关性分析。使用RT-PCR和Western blotting检测WEE1在胃癌和癌旁组织中的mRNA和蛋白表达水平。 结果　WEE1在100例胃癌患者中的阳性率为86%,高表达86例,低表达14例。通过Oncomine数据库分析,蛋白激酶WEE1在胃腺癌中的表达明显高于胃黏膜组织中的表达（P<0.01）。免疫组化、RT-PCR和Western blotting均显示,WEE1在胃癌组织中的表达明显高于癌旁组织（P<0.01）;免疫组化还显示WEE1的表达量随着胃癌组织分期的增加而增加（P<0.01）。 结论　蛋白激酶WEE1在胃癌组织中高表达,提示其可作为胃癌治疗靶点之一。     

肝癌组织中MAGE-A1表达及其临床意义

目的检测黑色素瘤抗原-A1(MAGE—A1)在肝癌组织中表达,探讨MAGE—A1基因与肝细胞肝癌(HCC)患者临床病理指标的关系。方法应用RT—PCR法检测31例HCC组织及相应癌旁组织中MAGE—A1基因的表达。应用组织芯片和免疫组化技术分析178例HCC组织及相应癌旁组织中MAGE—A1抗原表达。结果31例HCC组织标本中有21例(67．74％)表达MAGE—A1基因,而相应的癌旁组织MAGE—A1基因均不表达。178例HCC组织中95例表达MAGE—A1抗原(53．37％),相应的癌旁组织MAGE—A1抗原均不表达。结论MAGE—A1基因在HCC组织中有较高表达,其阳性率与HCC患者的临床病理指标无相关关系。     

ALEX1在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:检测乳腺癌组织中ALEX1的表达水平,明确ALEX1与其临床病理特征是否具有相关性。方法:应用real-time PCR、免疫组化方法检测乳腺癌组织中ALEX1含量。结果:乳腺癌组织ALEX1蛋白的表达水平低于癌旁组织(P0.01);ALEX1的表达与乳腺癌病理分级、临床分期和分子分型有关(P0.05),而与病人年龄、肿瘤大小和肿瘤类型无关。此外,real-time PCR结果表明,乳腺癌组织中ALEX1的mRNA表达明显低于对应的癌旁组织(P0.01)。结论:ALEX1在乳腺癌组织中的表达明显低于相应的癌旁组织,乳腺癌的病理分级、临床分期越高,ALEX1的表达水平越低。     

IRF-1基因在白血病中的表达及其临床意义

目的 :初步分析了白血病细胞IRF 1基因表达水平及其临床意义。方法 :采用逆转录 聚合酶链反应扩增IRF 1基因 ,以 β actin基因作为对照 ,结合凝胶图象扫描 ,以IRF 1/ β actin作为IRF 1相对表达量进行分析。分析白血病 77例 ,难治性贫血RAEB 2例及 4个白血病细胞系。结果 :急性白血病 18例未检测到IRF 1基因 ,急白组及慢粒组IRF 1表达低于正常组(P <0 0 5 )。HL6 0 ,K5 6 2 ,U9373个白血病细胞系IRF 1表达明显降低。慢粒患者应用IFN治疗后IRF 1表达量增加。结论 :IRF 1基因是影响白血病发病的一个重要的抑癌基因 ,在白血病可能存在缺失或部分失活的异常改变 ,对白血病的诊治有参考价值。     

同源异型盒基因HOXB7在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

<正>目的:乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,并且有发病年龄提早的趋向,因此研究促进乳腺癌发生的因素显得尤为重要。HOXB7是同源异型盒基因家族中新近发现的一种转录因子,它在生理状态下的表达对维持正常细胞的生长和分化有非常重要的作用,然而其异常表达时可能促进肿瘤形成。本实验探讨HOXB7在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法::收集正常乳腺组织20例、乳腺纤维瘤组织20例、癌组织60例,应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(Real-time RT-PCR)检测三种乳腺组织中HOXB7 mR-NA的表达;应用Western Blotting法检测三种乳腺组织中HOXB7蛋白的表达水平     

MMP9及TIMP1 mRNA在先兆子痫患者胎盘中的表达及其意义

目的检测基质金属蛋白酶9及其抑制物1的mRNA(MMP9mRNA、TIMP1mRNA)在先兆子痫患者胎盘中的表达,以探求MMP9在先兆子痫发病机制中的意义.方法用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测正常妊娠(10例),先兆子痫(22例)剖宫产后胎盘中MMP9、TIMP1基因在转录水平的表达.结果重度先兆子痫胎盘中MMP9mRNA表达量降低(0.05±0.04),TIMP1mRNA表达量增加,MMP9/TIMP1比值下降(0.04±0.03),与轻度先兆子痫及正常对照组比较有明显意义.结论 MMP9表达在基因转录水平就已经下调,同时因TIMP1表达增强其活性进一步被抑制,因而在先兆子痫的发生和发展中有重要意义.     

原位杂交法检测BP1基因在乳腺癌组织中表达

目的探讨BP1同源盒基因在乳腺癌中的表达及其与临床病理指标的关系。方法收集165例乳腺癌临床和病理资料,采用原位杂交法检测BP1的表达,同时用二步法进行ER、p53、PCNA、bcl2、cerbB2免疫组化染色。结果BP1基因表达率为67.88%,免疫组化:ER70.30%、p5349.09%、PCNA74.55%、bcl253.33%、cerbB275.52%。BP1与bcl2具有相关性(P<0.01),且均与ER相关(P<0.05),与p53呈负相关(P<0.05)。BP1与PCNA、cerbB2、患者年龄、组织学类型、淋巴结转移等无相关性。结论BP1可能通过某种非依赖p53基因调控机制,与bcl2、ER协同抑制肿瘤细胞的凋亡而参与乳腺癌的发生。     

Artemin在三阴性乳腺癌中的表达及其临床意义

目的 初步分析和探讨三阴性乳腺癌患者artemin表达情况,及其对疾病预后的价值.方法 选取我院肿瘤科2005年7月至2009年7月收治的149例浸润性乳腺癌患者为研究对象,根据ER、PR和HER-2免疫组化检测结果,将其分成三阴性乳腺癌组和非三阴性乳腺癌组,采用RT-PCR和免疫组织化学方法检测artemin在两组患者肿瘤组织中的表达情况,并分析artemin在不同组织学分级、临床分期和N分期三阴乳腺癌组患者中表达情况.结果 三阴性乳腺癌组免疫组化artemin阳性表达率为79.22％ (61/77),高于非三阴性乳腺癌组患者25.00％ (18/72),差异有统计学意义(x2=5.170,P =0.006);三阴性乳腺癌组artemin mRNA表达量为(3.36±0.04)×103 copies/mL,非三阴性乳腺癌组患者为(2.52±0.06)×103copies/mL,两组差异有统计学意义(x2=3.416,P=0.04);三阴性乳腺癌患者中artemin表达率与组织学分级、临床分期和N分期相关,差异具有统计学意义(P＜0.05),而与就诊年龄、恶性肿瘤家族史、肿瘤长径以及绝经状态无关(P＞0.05).结论 三阴性乳腺癌患者的artemin表达率显著高于非三阴性乳腺癌患者,artemin在三阴性乳腺癌组织中的表达与组织学分级、临床分期和N分期密切相关,临床检测artemin可以对患者疾病的发展和预后判断提供重要的依据.     

原发性肝细胞癌患者外周血AFP mRNA的表达及其临床意义

采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测78例原发性肝细胞癌(HCC)患者及109例其它疾病组患者外周血AFP mRNA的表达,同时用微粒子酶免疫法检测血清AFP水平.HCC外周血AFP mRNA的阳性率为61.5%,其它疾病组阳性率为1.8%,对照组均为阴性.HCC患者外周血中,AFP mRNA的阳性率与肝内静脉癌栓形成、肝内外转移以及与肿瘤分期、大小有关.作为肿瘤微转移检测的灵敏指标,外周血AFP mRNA能更好反映肿瘤的早期转移.     

线粒体DNA Cyt-b和血管内皮生长因子mRNA在乳腺癌中的表达及意义

目的探讨线粒体DNA(mtDNA)Cyt-b和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达在乳腺癌发生、发展过程中的意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),分别对19位乳腺癌患者的19例乳腺癌组织标本和19例癌旁组织标本的mtDNA Cyt-b、VEGF mRNA的表达进行检测(β-actin作为定量标准物),观察它们在乳腺癌组织和癌旁正常组织中的表达差异以及与临床病理参数的关系。结果19位乳腺癌患者中,乳腺癌组织mtDNACyt-b和VEGF mRNA的表达均高于癌旁组织,两组比较均有明显差异(P<0.01),而乳腺癌组织中VEGF的两个异构体VEGF145和VEGF189的mRNA表达高于癌旁组织,两组比较均有差异(P<0.05),并且mtDNA Cyt-b与VEGFmRNA的表达呈正相关性(P<0.01),与VEGF145、VEGF189的mRNA表达均呈正相关性(P<0.05);淋巴结转移组mtDNA Cyt-b和VEGF mRNA的表达较无淋巴结转移组高,两组比较均有差异(P<0.05);TNM分期Ⅰ期mtDNA Cyt-b和VEGF mRNA的表达较Ⅱ期低,两组比较均有差异(P<0.05);Ⅰ期与Ⅲ期比较两组mtDNA Cyt-b mRNA的表达有明显差异(P<0.01),而VEGF mRNA的表达有差异(P<0.05)。结论乳腺癌中mtDNA Cyt-b和VEGF mRNA的表达上调,并且在肿瘤的能量传递过程起着一定作用。     

系统性红斑狼疮PBMCs c-myc mRNA的表达及其与疾病活动性相关性研究

目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)外周血单个核细胞(PBMCs)的c-myc mRNA表达在SLE发病中的作用.方法:从33例SLE患者及20例健康对照组外周静脉血中分离PBMCs,提取总RNA作模板,按文献设计合成c-myc引物,以β-actin作内参,应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测SLE患者及健康对照的PBMCs c-myc mRNA表达水平并进行组间比较,用系统性红斑狼疮疾病活动性指数(SLEDAI)评定每例患者疾病活动性,并对SLE患者PBMCs的c-myc mRNA表达水平与SLEDAI进行相关分析.结果:c-myc及β-actin的RT-PCR扩增产物电泳显示分别为268和163 bp条带.SLE患者PBMCs的c-myc mRNA相对表达量为0.58±0.26,而正常对照的相对表达量为0.07 ±0.04,两组差别有显著性(t'=11.024,P=0.000).25例活动期SLE患者的c-myc mRNA相对表达量为0.62±0.25,而8例缓解稳定期SLE患者的c-myc mRNA相对表达量为0.25 ±0.01,组间差别也有显著性(t'=7.86,P=0.000).SLE患者PBMCs的c-myc mRNA相对表达量与SLEDAI呈正相关(r =0.865 1,P＜0.05).结论:SLE患者PBMCs的c-myc mRNA表达异常,c-myc mRNA表达水平与SLE疾病活动评分指数呈直线正相关关系.c-myc mRNA表达水平可作为判断SLE疾病活动性的一个指标.     

PRLr mRNA在人体免疫系统中的表达

目的：探讨催乳素受体（PRLr）在人体免疫系统中的表达。方法：临床获取人中枢免疫器官胸腺瘤、骨髓和外周免疫器官淋巴结、外周血单个核细胞，经RNA抽提，RT-PCR扩增PRLr mRNA的特异片段，并进行测序。结果：从胸腺瘤、骨髓、淋巴结及外周血单个核细胞均扩增出PRLr mRNA，其片段长度与预计长度一致，均为276bp，经测序证实为所需片段。结论：人中枢免疫器官胸腺瘤、骨髓以及外周免疫器官淋巴结、外周血单个核细胞存在PRLr表达，从受体角度直接证实内分泌激素PRL发挥免疫调节作用的生物学结构依据。     

E-Cadherin在乳腺癌中的表达及其意义

目的：探讨Ｅ－Ｃａｄｈｅｒｉｎ表达与乳腺癌的分级、浸润，淋巴结转移及病人后的关系。方法．：采用免疫组化Ｓ－Ｐ方法对１０９例乳ａｄｈｅｒｉｎ表达进行研究。结果：乳腺癌Ｅ－Ｃａｄｈｅｒｉｎ表达阳笥纺为５２．３％，，其表达与肿瘤组织学类型无关。Ｅ－Ｃａｄｈｅｒｉｎ表达，阴性患者淋巴结转移率显著高于阳性者；Ｅ－Ｃａｄｈｅｒｉｎ阳性患者５年生存率比阳性者显著增高。结论：Ｅ－Ｃａｄｈｅｒｉｎ表达对估计乳腺癌淋     

胃癌患者外周血中CK20 mRNA的检测及其临床意义

目的:检测胃癌患者外周血中CK20 mRNA的表达情况,并探讨其存在的临床意义.方法:应用逆转录聚合酶链反应,检测66例胃癌、良性胃病患者38例及对照组40例外周血中的表达.结果:对照组40例及良性胃病组38例外周血中CK20 mRNA均为阴性表达.胃癌组外周血中阳性表达率为34.8%,胃癌患者外周血中的阳性表达率与肿瘤组织学类型、TNM分期具有相关性(P＜0.05),与肿瘤的部位、病人性别无明显相关性(P＞0.05).手术后复查阳性表达率上升为60%,系手术操作所致.结论:胃癌患者外周血中的阳性表达可作为肿瘤细胞血行播散的标志,有助于胃癌预后的判断.手术操作可促使肿瘤细胞释放入血,胃癌手术中应采用"不接触肿瘤的游离技术"以减少癌细胞的播散.     

Bim与BCSG1蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义研究

目的 探究Bcl-2相互作用细胞凋亡调节因子(Bim)与乳腺癌特异性基因1(BCSG1)蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义.方法 选取我院2015年1月至2017年2月期间收治的60例乳腺癌患者,通过外科手术收集60例患者乳腺癌组织以及癌旁组织,通过免疫组织化学染色检测两种组织中Bim与BCSG1蛋白表达情况,分析不同分期、不同分化程度、不同病理、不同直径和是否转移情况下Bim与BCSG1蛋白表达差异.结果 免疫组织化学染色结果显示:Bim与BCSG1在乳腺癌组织中高表达,而在癌旁组织中低表达,比较差异有统计学意义(P＜0.05);肿瘤直径≥4cm、低分化程度、浸润性乳腺癌、Ⅲ-Ⅳ期和远处转移的乳腺癌患者,Bim与BCSG1阳性率明显高于肿瘤直径＜4cm、高度分化、中度分化、非浸润性乳腺癌、Ⅰ-Ⅱ期和非转移的乳腺癌患者(P＜0.05).结论 Bim和BCSG1蛋白在乳腺癌组织中高表达,且表达水平与肿瘤大小、分期、浸润、分化程度和转移性密切相关.     

DNAJB6蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义

目的：探讨DNAJB6蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学的方法检测78例乳腺癌组织DNAJB6蛋白水平的表达,分析其与临床病理特征的关系。结果：DNAJB6蛋白低表达率为62.8% (49/78),DNAJB6蛋白的表达水平与乳腺肿瘤大小、组织学分级负相关(分别为rs=-0.254和rs=-0.293,P＜0.05)。结论：DNAJB6蛋白低表达与乳腺癌恶性程度有关。     

乳腺癌中RRIG1 mRNA的表达及意义

目的探讨维甲酸受体诱导基因1(retinoic receptor-induced gene 1,RRIG1)在人乳腺癌组织中的表达及其与患者临床病理参数的关系。方法以GAPDH为内对照采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法(real time quantitative reverse transcrip-tion polymerase chain reaction,RQ RT-PCR)检测76例新鲜乳腺浸润性导管癌组织5、例导管原位癌组织和20例乳腺良性增生组织中RRIG1 mRNA的表达水平,并分析其与患者临床病理参数的关系。结果乳腺导管原位癌、浸润性导管癌组织中RRIG1 mRNA相对表达水平(3.5±2.1、6.7±4.1)明显低于良性增生组织(10.2±6.5),差异具有统计学意义(P=0.004,P=0.036);乳腺浸润性导管癌中淋巴结转移组RRIG1 mRNA相对表达水平(5.2±3.1)明显低于无淋巴结转移组(7.48±4.5),两组之间差异具有统计学意义(P=0.023)。结论 RRIG1可能作为一种新的抑癌基因参与乳腺癌的发生、浸润和转移,对乳腺癌早期诊断和预后评估具有重要的参考价值。