高血压患者循环内皮祖细胞改变与Ang-1／Tie-2表达的关系研究

目的研究Ang-1／Tie-2在高血压患者外周血中内皮祖细胞的表达及其调控意义。方法选择医院2012年原发性高血压患者30例为观察组,正常体检人群30例为对照组。测定外周血中内皮祖细胞数量和增殖活性,RT—PCR法和Western-blot法检测Ang-1／Tie-2表达。结果观察组内皮祖细胞数量和增殖活性为（6．17±0．89）×103／L和0．784-0．25,低于对照组（6．94±1．12）×103／L和1．14±0．36（P〈0．05）。观察组内皮祖细胞Ang-1和Tie-2的OD值分别为1．65±0．97和4．32±0．84,均低于对照组2．37±1．52和5．02±1．18（P〈0．05）;观察组内皮祖细胞Ang-1和Tie-2的蛋白表达分别为0．06±0．02和0．09±0．04,均低于对照组0．21±0．05和0．20±0．03（P〈0．05）。结论高血压患者内皮祖细胞数量减少,活性减弱,且内皮祖细胞上Ang-1／Tie-2表达下降,提示Ang-1／Tie-2通路的下调可能影响内皮祖细胞的修复功能。     

Ang-2及Tie-2在宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的探讨血管生成素-2（Ang-2）及其受体内皮细胞特异性酪氨酸激酶受体（Tie-2）在宫颈癌组织中发生、发展和临床病理学特征的关系。方法采用免疫组织化学、RT-PCR及Westernblot分别检测Ang-2及Tie-2在60例正常宫颈及宫颈癌组织中的组织定位、基因差异表达及蛋白差异表达;采用Spearman法分析Ang-2及Tie-2的表达相关性。结果宫颈癌组织中Ang-2及Tie-2的阳性表达率明显高于正常宫颈组织,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。Ang-2及Tie-2在淋巴结发生转移或临床分期Ⅲ~Ⅳ级的患者中的表达明显高于未发生淋巴结转移或临床分期Ⅰ~Ⅱ级的患者（均P＜0.05）。宫颈癌组织中Ang-2及Tie-2mRNA及蛋白表达水平均明显高于正常宫颈组织,差异均有统计学意义（均P＜0.01）。Tie-2与Ang-2在宫颈癌组织中的表达呈正相关(r=0.8479,P＜0.01)。结论Ang-2及Tie-2的表达水平与宫颈癌临床分期和有无淋巴结转移密切相关,且Ang-2、Tie-2mRNA及蛋白在宫颈癌组织中的表达明显高于正常宫颈组织,Ang-2及Tie-2可能在宫颈癌发生、发展过程中发挥重要作用。     

Ang-1和Ang-2及其受体Tie-2在鼻咽癌患者血循环中的表达及临床意义

目的 探讨Ang-1和Ang-2及其受体Tie-2在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者血循环中的表达及其临床意义.方法 应用酶联免疫吸附试验检测2009年5月至2010年6月本科收治的低分化鳞状细胞癌患者68例,其中男性52例,女性16例,中位年龄42(19 ～65)岁(初治32例,完全缓解20例,复发16例)及20例健康对照者血清Ang-1和Ang-2及其受体Tie-2水平.结果 初治组和复发组NPC患者血清Ang-1和Ang-2及其受体Tie-2的水平均高于完全缓解组及健康对照组(P＜0.01),而这些分子的含量在完全缓解组和健康对照组比较无明显差异(P＞0.05).Ang-2及Tie-2的水平在NPC患者不同T分期、临床分期比较有差异(P＜0.05),并随着NPC进展呈上升趋势;Ang-1水平在不同T分期、临床分期比较差异不显著(P＞0.05);Ang-2水平在不同N分期比较有差异(P＜0.05).转移NPC患者血清Ang-2及其受体Tie-2水平明显高于无转移组(P＜0.01).Ⅰ+Ⅱ期NPC患者血清Ang-1/Ang-2比值高于Ⅲ+Ⅳa期(P＜0.01).结论 Ang-1和Ang-2及其受体Tie-2在鼻咽癌的发生、发展过程中起重要作用,并与肿瘤的侵袭转移有密切关系.     

Ang-2、Tie-2及VEGFR-2在大肠癌中的表达及与预后的关系

目的检测Ang-2、Tie-2及VEGFR-2在大肠癌组织中的表达,分析其与大肠癌复发、转移的关系。方法采用免疫组化SP法检测54例大肠癌组织、18例大肠癌旁组织中Ang-2、Tie-2、VEGFR-2的表达,探讨其与大肠癌预后的关系。结果①Ang-2、Tie-2、VEGFR-2在大肠癌组织中的阳性表达率分别为77.78%、74.07%及59.26%,显著高于癌旁正常组织的阳性表达率的27.28%、16.67%及22.22%,差异均有统计学意义(P<0.05)。②Ang-2、Tie-2及VEGFR-2在根治术后5年内发生复发转移者的阳性表达率分别为87.50%、75.00%和75.00%,显著高于未复发转移组阳性表达率(分别为44.44%及22.22%、33.33%),差异均有统计学意义(P<0.05)。③Kaplan-Meier生存分析结果表明,Ang-2、Tie-2及VEGFR-2表达阴性者5年生存率均明显高于阳性表达者(P<0.05)。结论 Ang、Tie-2及VEGFR-2的表达与大肠癌复发转移及预后密切相关,可作为预测侵袭转移及评估预后的分子生物学标志物。     

Ang-2、Tie-2与MVD在大肠癌中的表达及临床相关性研究

目的检测血管生成素-2(Ang-2)及其特异性酪氨酸激酶受体-2(Tie-2)在大肠癌组织中的表达,分析其表达与微血管密度(MVD)和临床病理特征的关系。方法采用免疫组化法检测54例大肠癌组织、18例大肠癌旁组织和20例大肠腺瘤组织中Ang-2、Tie-2的表达,以CD34作为血管内皮标记物,对CD34阳性血管进行MVD计数。结果①Ang-2、Tie-2在大肠癌组织中的阳性表达率分别为77.78%和74.07%,显著高于癌旁组织(阳性表达率分别为27.28%和16.67%)及大肠腺瘤组织(阳性表达率均为30%),差异均有统计学意义(P<0.01)。②大肠癌组织、癌旁组织和大肠腺瘤组织中MVD分别为28.57±9.41、10.53±3.94、16.50±4.62,三者比较差异均有统计学意义(P<0.01)。③Ang-2的阳性表达及MVD与大肠癌浸润深度、淋巴结转移、远处转移及临床分期呈正相关(P<0.05),且MVD表达量与分化程度亦呈正相关(P<0.05)。④Tie-2阳性表达与远处转移及临床分期呈正相关(P<0.01)。⑤Ang-2和Tie-2表达呈正相关,相关系数为0.497(P<0.01);Ang-2和Tie-2阳性表达率均与MVD表达量呈正相关,相关系数分别为0.512及0.497(P<0.01)。结论大肠癌组织中存在Ang-2、Tie-2蛋白的过表达,其参与了肿瘤血管生成,可作为判断大肠癌恶性程度和侵袭转移的分子生物学标志物。     

Ang-1和Ang-2在大肠癌中的表达和临床病理特征的关系

目的：研究血管生成素1,2（Ang-1,Ang-2）蛋白在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系。方法：应用免疫组化法检测50例大肠癌患者及正常人大肠黏膜组织中Ang-1、Ang-2蛋白表达水平。结果：大肠癌组织中Ang-2蛋白表达阳性率为78%（39/50）,明显高于正常大肠黏膜组织的33.3%（5/15）（P〈0.01）,大肠癌组织Ang-1蛋白表达阳性率为46%（23/50）,大肠黏膜正常组织Ang-1蛋白表达阳性率为66.7%（10/15）。Ang-1蛋白在正常组织和大肠癌组织中均有表达,两者差异无统计学意义（P〉0.05）,Ang-2蛋白表达水平与患者性别、年龄及癌的体积、癌分化程度、淋巴结转移无关（P〉0.05）,Dukes分期D期Ang-2蛋白表达水平明显高于A期（P〈0.05）。有血道转移的比无血道转移的Ang-2表达水平高（P〈0.05）。肠壁浸润越深,Ang-2蛋白表达水平越高（P〈0.05）。结论：Ang-2蛋白表达水平与癌的肠壁浸润深度、临床分期及大肠癌血道转移有关,提示Ang-2蛋白高表达可能促进大肠癌的生长及转移;Ang-1蛋白表达与癌的发生无关。     

鼻咽血管纤维瘤中Ang-1、Ang-2及其受体Tie-2的表达及临床意义

目的 观察促血管生成素Ang-1、Ang-2及其受体Tie-2在鼻咽血管纤维瘤（JNA）中的表达情况,探讨其与鼻咽血管纤维瘤扩展性生长的关系.方法 采用免疫组化法检测并比较Ang-1、Ang-2、Tie-2蛋白及CD34在30例JNA（JNA组）、20例鼻咽部慢性炎症组织（对照组）中的表达情况.结果 JNA组Ang-1、Ang-2及Tie-2阳性表达率分别为80%（24/30）、76.67%（23/30）、100%（30/30）,对照组分别为80%（16/20）、30%（6/20）、45%（9/20）,两组患者Ang-1阳性表达率差异无统计学意义（P ＞0.05）,JNA组Ang-2及Tie-2阳性表达率均显著高于对照组（均P＜0.01）.对照组CD34呈低阳性表达、JNA组呈强阳性表达,微血管密度（MVD）分别为17.6007±3.03881、14.0267±2.93158,差异有统计学意义（P＜0.01）.Ang-2在JNA组不同年龄、性别间的表达差异无统计学意义（P ＞0.05）,而在Ⅲ＋Ⅳ期的阳性表达率（90%）明显高于Ⅰ＋Ⅱ期（50%）,差异有统计学意义（P＜0.05）.肿瘤周边组织中Ang-1的表达与Ang-2的表达呈负相关（P＜0.05）,Ang-2蛋白的表达与MVD呈正相关（P＜0.05）.结论 Ang-1与Ang-2在JNA外周组织血管生成中相互拮抗,Ang-2可能决定JNA外周组织血管生成和肿瘤扩展性生长.当Ang-2高表达而Ang-1低表达时,促进JNA外周组织的血管生成;反之则抑制JNA外周组织血管生成.推测Angs及其受体系统在JNA外周组织血管生成和肿瘤扩展性生长中的调节作用是以Ang-2的作用为主导.     

Ang-2、Tie-2和VEGFR-2表达在大肠癌血管生成和预后中的作用

目的 检测大肠癌组织中Ang-2、Tie-2和VEGFR-2的表达水平,探讨3者在大肠癌发生、复发转移、预后及血管生成中的调节作用.方法 采用免疫组SP方法,检测118例大肠癌组织中、40例癌旁组织及40例肠道良性疾病组织中Ang-2、Tie-2及VEGFR-2的表达及CD34标记的微血管(MVD)进行检测,分析它们与大肠癌血管生成的关系.结果 大肠癌组织中Ang-2、Tie-2及VEGFR-2在的阳性表达率分别为74.58％、69.49％和61.02％明显高于癌旁组织中的25.00％、17.50％和17.50％及大肠良性病变组织中的35.00％、32.50％和32.50％;(P值均＜0.05);大肠癌组织中2个或3个因子共同表达率为61.02％,明显高于单个因子阳性表达率(15.25％);癌组织中MVD表达量为(31.43±10.50),明显高于癌旁组织中的(10.61±3.76)和大肠良性病变组织中的(16.89±3.83)(P＜0.05).三者表达与CEA和MVD均呈正相关(P＜0.05).Ang-2的表达与CA19-9呈正相关(P＜0.05),Tie-2和VEGFR-2的表达则与CA19-9无关(P＞0.05);根治术后5年内复发转移者和未复发转移者Ang-2、Tie-2和VEGFR-2的表达差异均有统计学意义(P＜0.05),阴性表达者5年生存率明显高于阳性表达者(P＜0.05).结论 Ang-2、Tie-2和VEGFR-2在大肠癌血管生成过程中发挥重要作用,其高表达与大肠癌的发生、复发转移和预后有关.     

Ang-1和Ang-2在大肠癌中的表达和临床病理特征的关系

目的:研究血管生成素1,2(Ang-1,Ang-2)蛋白在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系。方法:应用免疫组化法检测50例大肠癌患者及正常人大肠黏膜组织中Ang-1、Ang-2蛋白表达水平。结果:大肠癌组织中Ang-2蛋白表达阳性率为78%(39/50),明显高于正常大肠黏膜组织的33.3%(5/15)(P<0.01),大肠癌组织Ang-1蛋白表达阳性率为46%(23/50),大肠黏膜正常组织Ang-1蛋白表达阳性率为66.7%(10/15)。Ang-1蛋白在正常组织和大肠癌组织中均有表达,两者差异无统计学意义(P>0.05),Ang-2蛋白表达水平与患者性别、年龄及癌的体积、癌分化程度、淋巴结转移无关(P>0.05),Dukes分期D期Ang-2蛋白表达水平明显高于A期(P<0.05)。有血道转移的比无血道转移的Ang-2表达水平高(P<0.05)。肠壁浸润越深,Ang-2蛋白表达水平越高(P<0.05)。结论:Ang-2蛋白表达水平与癌的肠壁浸润深度、临床分期及大肠癌血道转移有关,提示Ang-2蛋白高表达可能促进大肠癌的生长及转移;Ang-1蛋白表达与癌的发生无关。     

大肠癌K-ras基因突变状况与VEGF-c、Ang-2相关性分析

目的:探讨大肠癌K-ras基因突变状况与VEGF-c,Ang-2在大肠癌中的表达及相关性。方法:采用基因测序法,S-P免疫组化法对80例大肠癌组织及15例正常组织进行K-ras基因测序及免疫组化染色。结果:大肠癌组织中K-ras基因突变发生率为27.5%,VEGF-c,Ang-2,表达率分别为48.75%和35.00%。统计学显示K-ras基因突变与VEGF-c表达呈正相关(r=0.624,P<0.05),与Ang-2表达无相关性。结论:肿瘤新生血管的形成是一种多因素多途径的相互协同过程,对K-ras基因突变患者寻找新的靶点以便控制肿瘤微血管形成,切断肿瘤转移途径具有重要意义。     

结直肠癌组织中Ang-2、Tie-2 mRNA的表达及K-ras基因突变的检测

目的:探讨结直肠癌组织中促血管生成素-2(Ang-2)及酪氨酸激酶受体-2(Tie-2)mRNA的表达及K-ras基因突变的意义。方法:采用实时荧光定量PCR法分析40例结直肠癌组织和10例正常结肠黏膜组织中Ang-2及Tie-2的表达,应用PCR-SSCP方法检测40例结直肠癌组织中K-ras基因突变情况。结果:结直肠癌组织中Ang-2和Tie-2 mRNA的表达量高于正常组织(t=39.960、9.490,P<0.05)。K-ras基因突变率达42.5%(17/40),其中12密码子突变11例(64.7%),13密码子突变6例(35.3%)。浸润达肌层、有淋巴结转移和低未分化癌组织Ang-2mRNA高表达率较高(χ2=6.593、10.165、5.974,P均<0.05),Dukes分期C和D期、浸润达肌层、有淋巴结转移和低未分化癌组织Tie-2 mRNA高表达率也较高(χ2=4.365、8.864、8.087和9.086,P<0.05)。K-ras基因突变率在淋巴结转移的结直肠癌组织中高于无转移者(χ2=6.320,P<0.05),Dukes分期C、D期癌组织高于A、B期(χ2=13.961,P<0.05)。存在K-ras基因突变的癌组织中Ang-2和Tie-2 mRNA表达水平高于无突变者(t=4.056,7.518,P<0.05)。结论:Ang-2、Tie-2的表达与结直肠癌的血管生成以及早期转移有关。K-ras基因突变可作为评估结直肠癌转移和预后的分子生物学指标之一。     

人乳癌组织中血管生成素-2及其受体Tie-2的表达

目的:探讨乳癌组织中血管生成素-2(Ang-2)、血管生成素-2受体Tie-2的表达.方法:应用免疫组化SP法检测28例人乳腺导管内癌、49例浸润性导管癌、25例乳腺纤维腺瘤和51例正常乳腺间质组织中Ang-2及Tie-2、CD34的表达,根据CD34的表达情况计算微血管密度(MVD).结果:正常乳腺间质组织中Ang-2、Tie-2阳性表达率分别为12.0%(6/50)和18.0%(9/50),在乳腺纤维腺瘤组织中的阳性表达率为16.0%(4/25)和20.0%(5/25);而在乳腺导管内癌组织中的阳性表达率分别为53.57%(15/28)和64.28%(18/28),在乳腺浸润性导管癌组织中的表达率分别为93.87%(46/49)和97.96%(48/49),均显著高于正常乳腺间质组织和乳腺纤维腺瘤组织中的表达(P＜0.01).乳癌组织CD34的表达显著高于其在正常乳腺间质组织中的表达.结论:Ang-2及Tie-2的表达与乳癌血管生成关系密切,Ang-2表达与乳癌的浸润有关.     

补阳还五汤对局灶性脑缺血小鼠血管生成和Ang-1/Tie-2表达的影响

目的 观察补阳还五汤对局灶性脑缺血小鼠血管生成和血管生成素-1(Ang-1)及其受体Tie-2表达的影响.方法 35只KM小鼠分成假手术组(n=10),模型组(n=12)和补阳还五汤组(n=13).大脑中动脉阻塞(MCAO)30 min诱导小鼠局灶性脑缺血,缺血后24h开始灌服补阳还五汤,1次/d,缺血后28d内分别采用神经症状评分和角实验评价神经功能;缺血后第28天,采用免疫组化检测缺血周边区微血管密度和Ang-1/Tie-2的表达.结果 缺血后第3～28天,补阳还五汤能显著改善神经症状和减少小鼠右转次数,与模型组比较差异有显著性(P＜0.05);脑缺血后28d,模型组CD31、Ang-1、和Tie-2免疫阳性细胞增多[分别为(437±59)个,(389±61)个,(251±42)个],而补阳还五汤组为[分别为(609±68)个,(551±66)个,(342±46)个],两组之间差异有显著性(P＜0.01).结论 补阳还五汤促进脑缺血后神经功能恢复可能与其上调Ang-1/Tie-2表达促进缺血周边区血管生成有关.

Abstract：

Objective To investigate the effect of Buyanghuanwu decoction(BYHWD) on angiogenesis and Ang-1/Tie-2 expression after focal cerebral ischemia in mice. Methods Focal cerebral ischemia was induced by 30 min of middle cerebral artery occlusion followed by reperfusion. BYHWD (20 g/kg) was administered orally 24 h after ischemia and once a day. The neurological score and the corner test were used to evaluate sensorimotor function during 28 days after ischemia. The microvessels density and the expression of Ang-1/Tie-2 in the ischemic boundary zone were determined by immunohistochemistry on 28 days after ischemia. Results Compared with the model group, BYHWD significantly ameliorated neurological dysfunction and reduced the number of right turn during 3 to 28 days after ischemia(P＜0.05 ). In addition,the numbers of CD31 ,Ang-1 and Tie-2 immunopositive cells were (437 ±59) ,(389 ±61 ) and (251 ±42) at the boundary zone in model group 28 days after ischemia,respectively. However, BYHWD treatment significantly increased the numbers of CD31(609 ± 68 ), Ang-1 (551 ±66) and Tie-2 (342 ±46) immunopositive cells(P＜0. 01 ). Conclusion BYHWD promotes angiogenesis,which may contribute to recovery of neurological function after focal cerebral ischemia,and Ang-1/Tie-2 pathway appears to mediate BYHWD-induced angiogenesis.     

Ang-2和VEGF在大肠癌中的表达及其意义

目的：探讨血管生成素2（Ang-2）和血管内皮生长因子（VEGF）在大肠癌发生、发展、浸润、转移及血管生成中的调节作用。方法：运用免疫组织化学法分别检测85例大肠癌组织,24例癌旁肠组织,24例正常肠组织中Ang-2和VEGF的表达情况。根据CD34的表达分别计算大肠癌组织、癌旁肠组织及正常肠黏膜的微血管密度。结果：原发性大肠癌组织中Ang-2表达阳性率为63%（54/85）,VEGF表达阳性率为80%（65/85）,两者表达部位相似。在癌组织中,Ang-2和VEGF表达增高也可见MVD增高,但在癌旁组织中MVD不与两者表达水平平行。Ang-2、VEGF、MVD均与大肠癌组织分化程度、Dukes分期、转移密切相关。在24例癌旁组织中Ang-2和VEGF分别有10例和15例表达阳性,表达强度与癌组织无区别。在24例正常黏膜中,Ang-2几乎不表达,有10例组织呈VEGF弱表达。结论：Ang-2和VEGF均与大肠癌血管生成有关,两者协同作用,与大肠癌浸润、转移有关。Ang-2在肿瘤组织中特异性表达,可能与肿瘤的发生有关。