灵芝孢子粉提取物对甲醛所致小鼠遗传毒性干预研究

目的:探讨灵芝孢子粉提取液对甲醛所致小鼠遗传毒性的干预作用。方法:将昆明种小鼠随机分成4组,每组10只,分别为阳性对照组,高剂量、中剂量和低剂量灵芝液组,各组小鼠每天以10 mg/m3甲醛溶液静态染毒2h后,实验组分别以150、30和15 mg/(kg·d)剂量灵芝孢子粉提取液灌胃,阳性对照组以同等体积蒸馏水灌胃,染毒和灌胃过程持续14 d。14 d后,处死小鼠,检测各组小鼠的睾丸系数、精子畸形率和骨髓细胞微核率。结果:与阳性对照组比较,高、中、低剂量实验组小鼠的睾丸脏器系数均升高(P<0.01),以高、中剂量组显著;小鼠精子畸形率与骨髓微核率不同程度降低(P<0.01),而且存在明显的剂量效应关系。结论:灵芝孢子粉提取液对甲醛所致小鼠遗传毒性具有一定的保护作用。     

破壳灵芝孢子粉对昆明小鼠免疫功能的影响

本文采用昆明小鼠对破壳灵芝孢子粉进行了免疫功能学实验研究,结果表明,经口给予不同剂量破壳灵芝孢子粉20天后,与对照组相比能显著地提高脾/体比值、胸腺/体比值、血凝抗体积数、小鼠左右耳差值和巨噬细胞吞噬百分率。提示本品可促进小鼠免疫器官发育,同时有增强体液免疫、细胞免疫、单核-巨噬细胞吞噬功能的作用。因此认为破壳灵芝孢子粉作为调节免疫功能的保健食品是可行的。     

灵芝孢子粉对大鼠长期毒性研究

观察连续重复给予灵芝孢子粉对大鼠产生的毒性反应.选大鼠80只,随机分为4组,每组20只,实验设低、中、高3个剂量组和1个对照组,连续灌胃给药30 d,每周称体重1次,停药后测试大鼠血液学、血液生化学、脏器系数及病理组织学变化.结果：各剂量组大鼠各项生化指标、血常规均在正常值范围内,对受检脏器进行组织病理学检查,未见特异性病变.结论：灵芝孢子粉4.50 g/kg剂量大鼠连续服用30 d为无毒剂量.     

三七和灵芝孢子粉提取混合物对小鼠免疫功能的影响

目的:探讨三七和灵芝孢子粉提取混合物对小鼠免疫功能的影响.方法:144只BALB/C雄性小鼠随机分为4组,即低、中、高剂量组和溶剂对照组,前3组分别给予0.25 g/kg、0.49 g/kg、1.48 g/kg的三七和灵芝孢子粉提取混合物,溶剂对照组给予蒸馏水,连续灌胃30 d后分为3个亚组,分别检测以下指标:脏器/体质量比值、24 h足跖肿胀度、脾淋巴细胞增殖能力,溶血空斑数、半数溶血值,碳廓清能力、鸡红细胞吞噬率与吞噬指数及NK细胞活性.结果:高剂量三七和灵芝孢子粉提取混合物可增强小鼠脾淋巴细胞增殖能力,使小鼠24 h足跖肿胀度增加,促进抗体和血清凝血素的生成,提高NK细胞活性(P均＜0.05);各剂量组对免疫器官/体质量比值、小鼠碳廓清能力和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力均无明显影响(P均＞0.05).结论:三七和灵芝孢子粉提取混合物对正常小鼠免疫功能具有调节作用.     

肝复新口服液对小鼠免疫功能的影响

目的　研究中药肝复新口服液对小鼠免疫功能的影响。方法　分别用碳粒廓清法、血清半数溶血素、T淋巴细胞的增殖反应测定肝复新口服液对小鼠单核 -巨噬细胞及T、B淋巴细胞功能的影响。结果　与对照组比较 ,肝复新组小鼠的碳粒廓清指数明显提高 (P <0 .0 1 ) ;淋巴细胞转化程度明显提高 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1 ) ,大、中剂量肝复新组小鼠血清溶血素含量明显提高 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1 )。结论　肝复新口服液可以增强机体免疫功能     

肝得宁片对小鼠免疫功能的影响

目的：观察肝得宁片对小鼠免疫功能的影响。方法：分别采用不同的小鼠免疫模型，观察肝得宁片对小鼠免疫性肝损伤、小鼠单核巨噬细胞吞噬功能、溶血素抗体生成、小鼠淋巴细胞增殖反应的影响。结果：肝得宁片对BCG＋LPS所致免疫性肝损伤小鼠血清转氨酸的升高有明显的抑制作用；可激活小鼠网状内皮系统；增加小鼠血清溶血素含量；提高淋巴细胞的转化程度。结论：肝得宁片具有一定的机体免疫能力增强作用。     

丹皮酚对小鼠免疫功能的影响

目的：研究丹皮酚对小鼠免疫功能的影响。方法：测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能，小鼠血清溶血素的形成，二硝基氯苯(DNCB)所致小鼠迟发型变态反应。结果：丹皮酚能提高巨噬细胞的吞噬功能．使小鼠血清溶血素明显增加，增强DNCB所导致的皮肤迟发性变态反应。结论：丹皮酚对特异性体液免疫功能和特异性细胞免疫功能以及非特异性免疫功能均有增强作用。     

灵芝孢子粉对小鼠的免疫调节及抑瘤作用研究

目的 研究灵芝孢子粉对小鼠免疫系统和荷瘤小鼠肿瘤生长的影响.方法 将小鼠按体重随机区组分组,根据小鼠体重的2%分别经口灌胃蒸馏水和不同剂量的灵芝孢子粉溶液,每日1次,连续30日,观察各组小鼠的瘤重、迟发型变态反应(DTH)、自然杀伤(NK)细胞的活性和用以测定单核-巨噬细胞功能的吞噬指数.结果 75 mg/kg灵芝孢子粉组小鼠的瘤重、DTH、NK细胞的活性和单核-巨噬细胞的功能与阴性对照组比较有显著性差异(P<0 05).结论 一定剂量的灵芝孢子粉增强了小鼠的免疫功能,对肿瘤细胞的生长有一定的抑制作用.     

破壁灵芝孢子粉对ConA诱导免疫损伤小鼠的血清ALT、AST水平及肝组织炎症程度的影响

[目的]探讨破壁灵芝孢子粉对ConA诱导免疫损伤小鼠血清ALT、AST水平及肝组织炎症程度的影响。[方法] 雄性Balb/ c小鼠随机分成4组,正常组、模型组、低剂量破壁灵芝孢子粉组(低灵组)、高剂量破壁灵芝孢子粉组(高灵组),除正常组外,用ConA 5 mg/kg尾静脉注射,隔天1次,共2 周,建立免疫性肝损伤模型。正常组和模型组分别用生理盐水灌胃,低灵组及高灵组分别用破壁灵芝孢子粉1.0g/kg、2.0 g/kg灌胃。4周后观察血ALT、AST水平及肝组织炎症程度。 [结果]与模型组比较,低灵组及高灵组血ALT、AST水平降低、肝组织炎症程度改善,差异有统计学意义。[结论]破壁灵芝孢子粉能改善ConA诱导免疫损伤小鼠血清ALT、AST水平及肝组织炎症程度。     

HPLC-ELSD法测定灵芝孢子油中三油酸甘油酯的含量

目的 建立灵芝孢子油中三油酸甘油酯的HPLC-ELSD含量测定方法.方法 采用HPLC-ELSD法,色谱柱:Diamonsil C18(250 mm ×4.6 mm,5μm)柱,流动相∶乙腈-异丙醇(体积比51∶49),流速:1 mL·min-1,ELSD漂移管温度:80℃,载气流速:2.0 L·min-1.结果 三油...     

预先服用灵芝孢子降低维甲酸诱导的孕鼠胚胎神经管畸形发生率

目的探讨预先服用灵芝孢子能否降低维甲酸诱导的胚胎神经管畸形的发生率。方法将胚胎(embryo,E)0d孕鼠随机分为正常对照组、溶剂组、模型组和灵芝孢子组,每组5只。灵芝孢子组孕鼠于E0d起即给予胃饲灵芝孢子溶液,溶剂组孕鼠胃饲等量溶剂。至E7.75d时,模型组和灵芝孢子组孕鼠一次性胃饲全反式维甲酸。E10.5d时取孕鼠胚胎,计算神经管畸形发生率及测量胚胎顶臀距。采用免疫荧光组织化学染色和流式细胞术检测胚胎神经管神经上皮细胞巢蛋白的表达及细胞周期分布,采用DNA定量荧光染色及RT-PCR技术检测胚胎神经管细胞周期素依赖性蛋白激酶2(cyclin-dependentkinase2,Cdk2)和Cdk4mRNA的转录水平。结果孕鼠胚胎神经管畸形发生率模型组为79.41%,灵芝孢子组为21.67%;顶臀距模型组为(3.62±1.27)mm,灵芝孢子组为(5.84±0.92)mm。胚胎神经管神经上皮细胞巢蛋白表达阳性率模型组为32.44%,灵芝孢子组为77.65%。模型组孕鼠胚胎神经管神经上皮细胞G0/G1期比例为82.80%,灵芝孢子组为53.74%。灵芝孢子组Cdk4mRNA转录水平高于正常对照组和溶剂组,但未检测到Cdk2mRNA。结论预先服用灵芝孢子能够降低维甲酸诱导的孕鼠胚胎神经管畸形的发生率。     

破壁与不破壁灵芝孢子粉多糖的分析

目的研究灵芝孢子粉多糖的组成、相对分子质量及相对分子质量分布,比较破壁与不破壁灵芝孢子粉多糖的异同。方法用不同提取方法提取灵芝孢子粉多糖,采用气相色谱-质谱(GC-MS)、高效液相色谱(HPLC)分析灵芝孢子粉多糖的单糖组成,用凝胶渗透色谱(GPC)分析灵芝孢子粉多糖的相对分子质量及其分布。结果不同提取方法所得灵芝孢子粉多糖的得率不同,破壁后灵芝孢子粉含的多糖是不破壁的1.7倍;灵芝孢子粉多糖是由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的杂多糖,破壁与不破壁的多糖组成完全相同,其相对质量分数略有区别;破壁灵芝孢子粉多糖的GPC有两个多糖峰,相对分子质量分别为7.80×104和1.17×104,而不破壁灵芝孢子粉多糖只有相对分子质量为7.80×104的一个峰。结论破壁与不破壁孢子粉多糖的单糖组成相同,但破壁灵芝孢子粉多糖较不破壁孢子粉的多糖高出70%,增加部分为相对分子质量较小的多糖。这可以解释破壁灵芝孢子粉的功效好于不破壁灵芝孢子粉的原因。     

灵芝孢子和破壁孢子多糖对体外培养的小鼠脾淋巴细胞及腹腔巨噬细胞免疫调节活性的比较

目的:比较体外给药时灵芝孢子多糖(Gl-SP)和灵芝破壁孢子多糖(Gl-BSP)对小鼠脾淋巴细胞及腹腔巨噬细胞免疫调节活性的影响.方法:噻唑蓝(MTT)法检测淋巴细胞增殖、混合淋巴细胞培养反应(MLR)、自然杀伤细胞(NK细胞)活性;比色分析检测巨噬细胞吞噬中性红的能力;流式细胞术测定脾T细胞亚群;ELISA法测定白细胞介素-2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)含量,生物法测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)活性,Griess法测定NO含量.结果:当质量浓度为0.2～12.8 mg/L时两种多糖均可促进淋巴细胞增殖及丝裂原诱导的淋巴细胞增殖,提高NK细胞活性,增强腹腔巨噬细胞吞噬能力并促进TNF-α和NO分泌.两种多糖均可促进MLR,在质量浓度为12.8 mg/L时,Gl-BSP促增殖作用明显强于Gl-SP,Gl-SP或Gl-BSP(0.2～12.8 mg/L)可显著增加IL-2、IFN-γ的分泌,但相同浓度的Gl-BSP增加IL-2和IFN-γ分泌的作用均强于Gl-SP.在一定的浓度范围内,两种多糖均可显著增加双向MLR反应中CD3 T、CD4 T和CD8 T细胞百分率,Gl-BSP在质量浓度为0.2～12.8 mg/L或3.2～12.8 mg/L时,增加CD4 或CD8 T细胞的作用较Gl-SP更为显著.在质量浓度为0.2～0.8 mg/L时,Gl-BSP组的CD4 T和CD8 T细胞的比值大于Gl-SP组.结论:Gl-SP和Gl-BSP在体外试验中具有相似的免疫调节活性,Gl-BSP的某些免疫调节作用强于Gl-SP.     

灵芝孢子多糖对荷瘤小鼠的免疫调节作用

目的:研究灵芝孢子多糖对荷艾氏腹水癌(EC)和S180肉瘤小鼠的免疫调节作用。方法:研究灵芝孢子多糖对EC荷瘤小鼠体液免疫功能及网状内皮系统吞噬功能的影响,并采用流式细胞术研究灵芝孢子多糖对S180肉瘤荷瘤小鼠外周血淋巴细胞亚群CD3+CD8+杀伤性T淋巴细胞、CD3+CD4+辅助性T淋巴细胞、CD4+CD25+调节性T淋巴细胞的影响,以及对S180肉瘤荷瘤小鼠自然杀伤细胞(NK细胞)活性的影响。结果:灵芝孢子多糖明显提高EC荷瘤小鼠的血清半数溶血值,并显著提高荷瘤小鼠的廓清指数K及吞噬系数α值。此外灵芝孢子多糖对S180肉瘤荷瘤小鼠外周血杀伤性T淋巴细胞亚群和辅助性T淋巴细胞亚群有一定的增强作用,但对调节性T淋巴细胞亚群并无明显作用。灵芝孢子多糖还可增强S180肉瘤荷瘤小鼠NK细胞的杀伤活性。结论:灵芝孢子多糖可以提高荷艾氏腹水癌和S180肉瘤小鼠的免疫系统功能。     

灵芝提取物镇痛抗炎作用研究

目的研究灵芝提取物的镇痛与抗炎作用。方法用冰醋酸化学刺激疼痛模型和二甲苯诱导的鼠耳肿胀炎症模型，观察灵芝提取物的镇痛作用与抗炎作用。结果灵芝提取物能明显减少冰醋酸诱导的小鼠扭体次数（P〈0．01），对二甲苯诱导的鼠耳肿胀有明显的抑制作用（P〈0．01）。结论灵芝提取物具有镇痛和抗炎作用。     

灵芝孢子糖肽对小鼠肝损伤的保护作用

研究灵芝孢子糖肽对小鼠肝损伤的保护作用。分别建立四氯化碳（CCl₄）、乙醇致小鼠急性、慢性肝损伤,灌胃给予灵芝孢子糖肽65,130,260 mg/kg,测定小鼠肝指数,血清谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）,ELISA法检测肝组织炎症因子白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）含量,HE染色观察肝组织病理损伤。结果表明,灵芝孢子糖肽可显著降低急性、慢性肝损伤小鼠肝指数、血清AST和ALT含量。在CCl₄致慢性肝损伤模型中,灵芝孢子糖肽显著降低小鼠肝组织IL-6、TNF-α及iNOS的含量,改善肝组织病理损伤。上述结果表明,灵芝孢子糖肽可以显著减轻小鼠急、慢性肝损伤,并且具有一定的抗炎活性。     

HPLC法测定灵芝子实体和孢子粉中灵芝酸C2、灵芝酸G和灵芝酸A

目的 建立灵芝子实体和孢子粉中3种灵芝酸类成分的HPLC测定方法,为全面评价灵芝药材和孢子粉的质量提供依据。方法 采用HPLC方法测定,Diamonsil（钻石）C8色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相乙腈–0.03%磷酸（28∶72）,体积流量1.2 mL/min,检测波长250 nm;柱温35 ℃。结果 灵芝酸C2、灵芝酸G、灵芝酸A分别在0.40～10.06 μg（r=0.999 99）、0.40～10.00 μg（r=0.999 99）、0.40～10.00 μg（r=0.999 99）线性关系良好,平均回收率分别为101.04%、99.39%、101.22%,RSD值分别为1.64%、1.86%、2.20%（n=6）;灵芝子实体中3种灵芝酸的质量分数分别在0.06～0.29 mg/g、0.12～0.37 mg/g、0.19～0.41 mg/g,灵芝孢子粉供试品中3种灵芝酸的质量分数分别在0～0.01 mg/g、0、0～0.03 mg/g。结论 本方法简便,稳定,可用于灵芝三萜类成分C2、灵芝酸G、灵芝酸A的定量分析。