心阳片通过调节RAGE 介导的自噬改善心力衰竭小鼠心功能的作用研究

目的探讨心阳片通过调节晚期糖基化终产物受体（RAGE）介导的自噬改善心力衰竭小鼠心功能的作 用。方法将60 只C57BL/6J 小鼠随机分为6 组,分别为假手术组、模型组、3-甲基腺嘌呤组（自噬抑制剂, 15 mg·kg-1）以及心阳片低、中、高剂量组（455、910、1 820 mg·kg-1）,每组10 只;另将10 只经基因型鉴定确 认为RAGE-/-的小鼠作为RAGE 敲除组。采用主动脉弓缩窄术（TAC）建立压力负荷性心力衰竭小鼠模型。模型 复制成功后,按上述剂量对心阳片各剂量组小鼠进行灌胃给药,3-甲基腺嘌呤组进行腹腔注射给药,其余组 别灌胃等容积生理盐水,每天给药1 次,连续4 周。采用心脏彩超检测各组小鼠心功能,采集小鼠左室射血分 数（LVEF）及左室短轴缩短率（LVFS）;使用Masson 染色观察小鼠心肌组织纤维化程度;采用蛋白免疫印迹法 （Western Blot）检测小鼠心脏左室心肌组织中的RAGE 蛋白及自噬相关蛋白Beclin-1、LC3BII/I 的表达情况。 结果与假手术组比较,模型组小鼠的LVEF 及LVFS 明显降低（P＜0.05）,心肌纤维化面积明显增加（P＜ 0.05）,RAGE 蛋白及自噬相关蛋白Beclin-1、LC3BII/I 的表达明显上调（P＜0.05）;与模型组比较,RAGE 敲除 组、3-甲基腺嘌呤组及心阳片低、中、高剂量组小鼠的LVEF 和LVFS 明显升高（P＜0.05）,心肌纤维化面积 明显减少（P＜0.05）,RAGE、Beclin-1、LC3BII/I 蛋白表达明显下调（P＜0.05）。结论心阳片可能通过调节 RAGE 介导的自噬,从而改善心力衰竭小鼠的心功能。     

养心康片通过Akt/AMPK-mTOR通路对心肌梗死后心力衰竭模型兔心肌细胞自噬的影响

目的观察养心康片通过Akt/AMPK-mTOR通路对心肌梗死后心力衰竭模型兔心肌细胞自噬的影响。方法对实验兔应用结扎冠脉的方法建立心肌梗死后心力衰竭兔模型,随机分为模型组、养心康组、AMPK抑制剂组、Akt抑制剂组和mTOR抑制剂组。并另取不造模的兔设立空白对照组。每组5只,共30只。造模后第3天开始分别给予相应的处理措施,共4周。观察养心康片对模型兔心肌beclin 1、LC3蛋白表达,心肌beclin 1和Atg5 mRNA的表达的影响,电镜检测各组心肌细胞超微结构。结果养心康组的beclin 1 mRNA的表达量、beclin 1蛋白表达量较模型组、mTOR抑制剂组降低(P<0.05或P<0.01),较空白对照组、AMPK抑制剂组升高(P<0.05或P<0.01);养心康组的LC3-Ⅱ/LC3-I比值较模型组、mTOR抑制剂组降低(P<0.05),较空白对照组、AMPK抑制剂组升高(P<0.05)。养心康组的Atg5 mRNA表达量较模型组降低(P<0.05),较空白对照组、AMPK抑制剂组升高(P<0.05或P<0.01)。电镜结果显示养心康组的自噬体、自噬体溶酶体数量较模型组、Akt抑制剂组和mTOR抑制剂组降低减少,较AMPK抑制剂组增多。结论养心康片可通过干预Akt/AMPK-mTOR通路调控心肌细胞自噬水平,改善心肌梗死后心衰模型的心肌细胞超微结构。     

艾灸对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞自噬功能的影响

目的:观察艾灸对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心功能及自噬相关蛋白LC3、p62表达的影响,探讨艾灸防治CHF的可能机制。方法:SD大鼠随机分为正常组12只与造模组48只,采用腹腔注射盐酸多柔比星复制CHF模型,将建模成功的大鼠随机均分为模型组、艾灸组、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、自噬激动剂雷帕霉素(RAPA)组。艾灸组用艾条温和灸双侧肺俞心俞穴,每日1次,每次20min,治疗3周。3-MA组按15 mg/kg给予3-MA混悬液腹腔注射,每日1次,共3周。RAPA组按2mg/kg给予RAPA混悬液灌胃,每日1次,共3周。观察大鼠的一般情况及行为体征;心功能测量仪检测大鼠心率(HR)、心输出量(CO)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左室内压最大上升或下降速率(±dp/dtmax);HE染色法观察心肌病理变化;Western blot法检测心肌细胞自噬相关蛋白LC3及p62表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠心肌细胞出现肿胀、空泡,肌纤维断裂、溶解,排列紊乱;与模型组比较,艾灸组和3-MA组大鼠心肌细胞的数量正常,心肌纤维排列相对整齐,RAPA组心肌细胞出现肿胀、空泡,心肌纤维断裂、溶解,排列紊乱等状况。与正常组比较,模型组HR和LVEDP明显升高(P0.01),CO、LVSP及±dp/dtmax明显下降(P0.01),LC3-Ⅱ表达、LC3-Ⅱ/Ⅰ明显升高(P0.01),而p62表达明显下降(P0.01)。与模型组比较,艾灸组和3-MA组HR和LVEDP明显下降(P0.05),CO、LVSP及±dp/dtmax明显升高(P0.05),LC3-Ⅱ表达、LC3-Ⅱ/Ⅰ明显降低(P0.01),p62表达明显升高(P0.01),而RAPA组LC3-Ⅱ/Ⅰ明显升高(P0.01),p62表达明显降低(P0.01)。结论:艾灸可以改善CHF大鼠心肌损伤,其作用可能与降低心肌细胞LC3-Ⅱ/Ⅰ、升高p62蛋白表达水平,发挥类似于3-MA的自噬抑制作用,抑制心肌细胞过度自噬、减轻心肌损伤有关。     

心阳片通过抑制NLRP3炎性小体保护慢性心力衰竭肾脏炎性损伤的作用及机制研究

目的:观察慢性心力衰竭(CHF)对肾脏炎性损伤和纤维化影响及心阳片的干预作用.方法:随机将60只C57BL/6J小鼠分为假手术组、模型组、中药低、中、高剂量组、阳性对照组,通过主动脉缩窄术建立CHF模型小鼠,造模后中药低、中、高剂量组给予心阳片对应剂量灌胃,阳性对照组给予培哚普利灌胃,假手术组和模型组给予等量生理盐水灌...     

活血解毒中药配伍抑制心肌细胞自噬改善大鼠冠脉无复流的作用机制研究

目的 探讨活血解毒中药配伍改善大鼠冠脉无复流所致心肌损伤的作用机制.方法 选择96只8～10周龄SPF级雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组、冠脉无复流模型组、阳性药对照组、活血解毒中药低、中、高剂量组.假手术组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,阳性药物组给予等体积阿司匹林灌胃,活血解毒中药低、中、高剂量组给予相应剂量...     

黄芪甲苷促进乳鼠心肌细胞自噬及抑制缺血诱导的心肌细胞凋亡作用研究

目的 观察黄芪甲苷(AS)对缺血模型诱导的乳鼠心肌细胞自噬的影响,探讨黄芪甲苷的心肌保护作用及机制。方法 建立乳鼠心肌缺血的细胞损伤模型,采用分子生物学及免疫细胞化学法观察心肌细胞在缺血模型及黄芪甲苷处理后的自噬与细胞损伤变化。结果 心肌细胞的自体吞噬程序会被缺血刺激激活,缺血可致心肌细胞死亡。黄芪甲苷可明显恢复缺血处理诱导的心肌细胞损伤,10,20 μmol·L-1的黄芪甲苷分别使细胞活性恢复至80 %及85 %(均P＜0.05),使凋亡细胞数目降低至正常对照组的2.6倍及1.8倍(均P＜0.05),且呈现出剂量依赖效应。同时,黄芪甲苷可促进自噬蛋白(LC3)的表达;10,20 μmol·L-1的黄芪甲苷分别使细胞LC3升高至正常对照组的1.5倍及1.7倍(均P＜0.05)。结论 黄芪甲苷可恢复缺血降低的心肌细胞活性,降低缺血诱导的心肌细胞凋亡,其机制可能与促进缺血诱导的心肌细胞自噬相关。     

姜黄素对小鼠肾足细胞系(MPC5)自噬作用的影响

目的:通过研究姜黄素(curcumin)对小鼠肾足细胞系(MPC5)自噬作用的影响,探讨姜黄素对糖尿病肾病足细胞保护作用的可能机制。方法:将足细胞分为6组:正常对照组(5.5 mmol/L)、高糖组(30 mmol/L)、姜黄素低、中、高浓度组(1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L)、雷帕霉素组(10 nmol/L)。Western blot分别检测LC3B、Beclin-1、Synaptopodin及Nephrin蛋白表达。将足细胞分为6组:正常对照组(5.5 mmol/L)、高糖组(30 mmol/L)、姜黄素低、中、高浓度组(1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L)、LY294002组(10μmol/L)。Western blot检测PI3K/Akt/mTOR信号通路中p-mTOR、p-Akt蛋白表达水平。结果:高糖组自噬相关蛋白LC3II/I比值及Beclin-1蛋白表达明显低于正常对照组(P0.05);姜黄素组LC3B、Beclin-1等自噬标志性蛋白表达均高于高糖组(P0.05);姜黄素组足细胞功能性标志蛋白表达水平明显高于高糖组(P0.05);姜黄素组p-mTOR、p-Akt蛋白表达水平均低于高糖组(P0.05)。结论:姜黄素能明显改善高糖刺激对小鼠肾足细胞的自噬抑制作用,并且通过抑制P13K/Akt/mTOR信号途径减轻足细胞损伤。     

充血性心力衰竭患者B型钠尿肽和肌钙蛋白Ⅰ与心功能的相关性研究

目的探讨充血性心力衰竭(CHF)患者血浆B型钠尿肽(BNP)及血清肌钙蛋白I(cTnⅠ)与心功能的相关性,评估BNP及cTnⅠ浓度变化的临床价值。方法对明确诊断为CHF不同病因的90例患者依据NYHA心功能分级,分为心功能Ⅱ级、心功能Ⅲ级、心功能Ⅳ级3组,采用Axsym全自动免疫分析仪及其配套试剂检测血浆BNP及血清cTnⅠ浓度。结果心力衰竭患者血浆BNP浓度显著高于对照组(P0.05),且患者血浆BNP水平与心力衰竭严重程度呈正相关(r=0.851)。血清cTnⅠ浓度虽然呈升高趋势,但与心力衰竭严重程度无明显相关性。结论心力衰竭患者随心功能分级越差,血浆BNP浓度呈递增升高,血清cTnⅠ浓度虽然呈升高趋势,但与心功能无明显相关性。     

金欣康颗粒提高线粒体自噬蛋白LC3/Beclin1 表达改善心力衰竭大鼠心肌纤维化的研究

目的 探讨金欣康颗粒（丹参、桂枝、黄芪、人参、毛冬青等7味药组成）对心力衰竭（简称心衰）大鼠线粒体自噬蛋白LC3/Beclin1表达的影响,阐述金欣康颗粒改善心梗后心衰心肌纤维化的机制。方法 复制心梗后心衰大鼠模型。将造模成功的心衰大鼠随机分为4组：模型组,金欣康颗粒低剂量组、高剂量组和培哚普利组,另设假手术组,每组10只。给药12周,以HE染色、天狼猩红染色评估心肌组织的病理变化,心脏彩超对心脏结构和心功能进行评估,透射电镜观察自噬小体,免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型和Ⅲ型胶原（CollagenⅠ和CollagenⅢ）蛋白的表达,Western Blot法检测自噬蛋白LC3、Beclin1的表达。结果成功复制心梗后心衰大鼠模型,模型组大鼠梗死区周边区域有大量红色的胶原沉积,心肌纤维排列紊乱,部分纤维断裂;线粒体明显肿胀,出现峭断裂,能观察到较多的自噬小体。金欣康颗粒组和培哚普利组心肌纤维排列较模型组整齐,纤维化程度较轻,自噬小体更加明显。与假手术组比较,模型组的射血分数（LVEF）和短轴缩短率（LVFS）显著降低（P<0.01）,左室舒张末期内径（LVED...     

麝香保心丸对慢性心力衰竭心功能及血浆NT-proBNP的影响

目的:观察麝香保心丸对慢性心力衰竭(CHF)心功能及血浆N-末端脑钠肽前体(NT-proBNP)的影响.方法:84例CHF患者随机分为治疗组和对照组各42例.对照组采用西医常规治疗,治疗组在西医常规治疗的基础上加用麝香保心丸.治疗4周后比较两组患者心功能及血浆NT-proBNP水平.结果:治疗后两组左室舒张末内径(LVEDD、左室收缩末期内径( LVESD)、左室射血分数(LVEF)、心输出量(CO)及6 min步行距离均较治疗前有改善,治疗组改善的程度优于对照组(P＜0.05,P＜0.01);疗后治疗组血浆NT-proBNP水平低于对照组(P＜0.05),疗后治疗组临床疗效优于对照组(P＜0.05).结论:麝香保心丸能显著改善CHF患者心脏舒缩功能,降低其血浆NT-proBNP水平.     

参附注射液对慢性心力衰竭心功能及血浆NT-proBNP水平的影响

目的:观察慢性心衰患者使用参附注射液后心功能及血浆N-末端原脑利钠肽(NT-proBNP)水平的变化,探究参附注射液对该类患者心功能及血浆NT-proBNP水平的影响机制。方法:将130例慢性心力衰竭患者,按照随机数字分表法,分成对照组患者65例与治疗组65例,对照组使用常规西药治疗,治疗组在常规治疗基础上加用参附注射液,对比两组患者治疗前后心功能、血浆NT-proBNP水平。结果:两组患者治疗后的左室舒张末期内径、左室收缩末期内径、射血分数、心排血量等心功能指标均得到显著的改善,而治疗组治疗后的心功能指标与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者治疗后的血浆NT-proBNP水平均出现明显降低,而治疗组治疗后的血浆NT-proBNP水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:参附注射液可显著改善慢性心力衰竭患者的心功能,并促使血浆NT-proBNP水平恢复正常,具有较高的推广价值。     

心力衰竭患者脑钠肽变化与间质胶原及心功能的关系

目的探讨心力衰竭患者B型脑钠肽（BNP）的变化及其与间质胶原及心功能的关系。方法选取心力衰竭患者47例（风湿性心脏病20例,扩张性心脏病7例,先天性心脏病20例）和5例正常心肌标本作对照,应用病理染色结合图像分析,RT—PCR测定心肌胶原容积分数（CVF）、BNPmRNA表达水平、超声心动图测量左室舒张末内径（LEVDD）;免疫荧光法测定血浆BNP的含量,并和CVF及LEVDD作相关分析。结果心力衰竭患者心肌间质CVF明显高于正常对照组（P〈0．01）;心力衰竭患者心肌BNPmRNA表达水平较正常心肌明显增高（P〈0．01）;心力衰竭患者血浆中BNP的含量明显增高,心功能分级越高其升高越显著（P〈0．01）。血浆BNP水平与CVF及LEVDD呈显著正相关（r分别为0．67、0．59,P〈0．01）。结论心力衰竭患者血清BNP舍量增高并能反应心肌纤维化和心功能降低程度,快速检查血浆BNP可以用来评估病情并反映预后。     

参附注射液对慢性心力衰竭患者心功能及血浆BNP的影响

目的观察参附注射液对慢性心力衰竭（CHF）患者心功能及血浆B型钠尿肽（BNP）的影响。方法将72例慢性心力衰竭患者随机分为对照组和治疗组,对照组给予常规治疗,治疗组在常规治疗基础上加用参附注射液静脉输注,疗程15d。两组治疗前后检测心功能及血浆BNP水平。结果两组治疗后心功能指标均较治疗前明显改善,血浆BNP水平均较治疗前明显下降,但治疗组优于对照组（P〈0.05）。结论参附注射液可以明显改善心功能,提高疗效;血浆BNP是评价CHF治疗效果的良好指标。     

芪苈真武汤对慢性心功能不全患者心功能及血浆脑钠肽的影响

目的:探讨芪苈真武汤对慢性心功能不全患者心功能及血浆脑钠肽(BNP)的影响。方法:采用前瞻性研究方法,2013年8月至2016年1月选择在我院就诊的慢性心功能不全患者112例,根据随机对照分组方法分为观察组与对照组各56例,对照组给予常规西医治疗,观察组在对照组治疗的基础上给予芪苈真武汤治疗,2组都治疗观察4周。结果:治疗后观察组与对照组的总有效率分别为96.4%和89.3%,观察组明显高于对照组(P0.05)。观察组与对照组治疗后的LVEF值分别为(77.24±5.22)%和(70.24±4.56)%,都明显高于治疗前的(60.24±4.20)%和(60.11±5.10)%(P0.05),同时观察组治疗后的LVEF值也明显高于对照组(P0.05)。观察组与对照组治疗后的血浆BNP值分别为(1 673.42±256.30)pg/m L和(1 655.09±309.87)pg/m L,都明显低于治疗前的(180.24±45.10)pg/m L和(341.09±50.19)pg/m L(P0.05),同时观察组治疗后的血浆BNP值也明显低于对照组(P0.05)。观察组治疗后的低切和高切全血黏稠度都明显低于治疗前(P0.05),组间比较,差异有统计学意义(P0.05),对照组在组内比较,差异无统计学意义。结论:芪苈真武汤在慢性心功能不全患者在应用能有效改善心功能与血流动力学,促进血浆BNP表达下降,从而提高总体治疗疗效。     

参麦养心片对心力衰竭患者血浆BNP及心功能、室性心律失常的影响

目的观察参麦养心片对心力衰竭（CHF）患者血浆脑利钠肽（BNP）及心功能、室性心律失常的影响。方法 83例CHF患者按随机数表法分为治疗组（43例）和对照组（40例）。两组均予以西医强心、利尿、扩血管、抗心律失常治疗。治疗组在常规治疗基础上加用参麦养心片4片,每日3次,连续2周为1个疗程。两组均于治疗前后测定BNP浓度,并观察心功能、室性心律失常的情况。结果两组临床疗效分别为88.4%与75.0%,治疗组优于对照组。两组治疗后血BNP浓度较治疗前下降,心功能较治疗前改善;治疗组治疗后BNP下降及心功能、室性心律失常改善明显优于对照组（P〈0.05）。结论参麦养心片能有效降低CHF患者的BNP浓度,改善心功能、室性心律失常。     

参草通脉颗粒对慢性心衰大鼠心功能和BNP影响的相关性研究

目的:通过建立慢性心衰大鼠模型,观察参草通脉颗粒对慢性心衰大鼠心功能及其血清脑钠素(BNP)水平影响的相关性。方法:以冠脉结扎法配合力竭式游泳、减食等方法造成大鼠慢性心衰动物模型,随机分为三组即中药组、西药组、模型组,空白对照组为未手术造模的正常大鼠。空白对照组和模型组大鼠常规等容积灌胃蒸馏水每次3mL,日2次;用药各组的大鼠按人鼠剂量换算公式给药,6周后,测定各组大鼠心功能LVIDs、LVIDd、EF%和血清BNP。结果:慢性心衰动物模型组LVIDs、LVIDd明显增大,血清BNP的含量增高,EF%降低(P<0.01),与模型组比较,中药组与西药组均能不同程度的降低心衰大鼠血清BNP的含量,减小LVIDs、LVIDd,提高EF%(P<0.01),中药组与西药组相比P>0.05。结论 :参草通脉颗粒降低心衰大鼠血清BNP的含量,且明显改善心功能。     

养心康片通过(Akt/AMPK)-mTOR通路抑制心梗后心力衰竭模型兔心肌细胞凋亡的机制

目的:观察养心康片通过[蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated kinase,AMPK)]-乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)通路对心梗后心力衰竭模型兔心肌细胞凋亡的影响。方法:应用结扎冠脉的方法建立心梗后心力衰竭兔模型,随机分为模型组,养心康组,AMPK抑制剂组(10 mg·kg-1Compound C腹腔注射,每日2次),Akt抑制剂组(10 mg·kg-1casodex灌胃,每日2次)和mTOR抑制剂组(0.5 mg·kg-1rapamycin灌胃,每日2次),并设立正常组,每组5只,共30只。给予养心康片0.51 g·kg-1灌胃,每日1次,正常组和模型组给予等体积的蒸馏水灌胃,共4周。心脏彩超检测心功能,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达,原位末端凋亡法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡。结果:与正常组比较,模型组的左室射血分数(LVEF)值降低(P0.01),Bcl-2,Bax蛋白表达量增高(P0.05,P0.01),Bcl-2/Bax降低(P0.01),心肌细胞凋亡率升高(P0.01);与模型组比较,养心康组的LVEF值升高(P0.01),Bax蛋白表达量降低(P0.01),Bcl-2/Bax升高(P0.01),心肌细胞凋亡率降低(P0.01)。与抑制剂各组比较,养心康组的LVEF值升高(P0.01),Bcl-2/Bax升高(P0.01),心肌细胞凋亡率降低(P0.01)。结论:养心康片可通过干预(Akt/AMPK)-mTOR通路调控心肌细胞Bcl-2,Bax蛋白表达水平减少心肌细胞凋亡,改善心梗后心衰模型的心脏功能。     

麝香通心滴丸对慢性心力衰竭病人心功能的影响

目的观察麝香通心滴丸对慢性心力衰竭（CHF）病人心功能的影响。方法将121例CHF病人随机分为治疗组（61例）和对照组（60例）,治疗组给予常规药物及麝香通心滴丸治疗8周,对照组给予常规药物治疗。评估6 min步行试验距离（6MWT）,监测血浆氨基末端脑钠肽前体（NT-proBNP）、左心室舒张末内径（LVEDD）及左室射血分数（LVEF）;常规实验室检查及心电图评估麝香通心滴丸的安全性。结果与治疗前比较,两组治疗后6MWT和LVEF明显增加,血浆NT-proBNP及LVEDD明显降低（P〈0.05或P〈0.01）;与对照组比较,治疗组治疗后6MWT、LVEF明显增加,血浆NT-proBNP明显下降（P〈0.05）。结论麝香通心滴丸能明显改善CHF病人的心功能,治疗期间未见明显不良反应。