中医骨折3期治疗对家兔骨折各种骨痂组织VEGF及VEGF mRNA表达的影响

目的：研究中医骨折3期治则对骨痂VEGF及VEGF-mRNA表达的影响,探讨中药治疗骨折的分期治疗的合理性。方法：动物实验采用双因素一元析因设计方案。140只雄性新西兰白兔,无菌状态下手术在家兔双侧桡骨下1/3段处,造成3 mm完全骨质缺损,作为骨折愈合模型。采用计算机产生随机数字的方法,将家兔随机平均分为4组：中药3期治疗组、中药1期治疗组、阳性药物对照组以及模型对照组,分别给予3期治疗、1期治疗、阳性药物治疗以及等量蒸馏水。分别于术后3,6,9,14,28,42,56 d每组随机处死5只家兔,取左侧桡骨标本作为观察对象,通过免疫组化和原位杂交方法检查骨折端血肿、纤维骨痂和软骨骨痂中VEGF及VEGF mRNA表达。结果：各中药治疗组对于术后骨折端血肿、纤维骨痂和软骨骨痂VEGF和VEGF mRNA表达均有促进作用,大部分时间点3期治疗组在3种骨痂组织中VEGF及VEGF mRNA表达均有高于其他3组的趋势。结论：中药可以促进骨折端各种骨痂组织VEGF及VEGF mRNA的表达。中药对骨折愈合不同阶段各种组织有不同的作用,针对骨折愈合阶段施以不同方剂的3期组较单一方剂的1期组和阳性药组对骨痂VEGF及VEGF mRNA表达的促进作用更加明显,骨折分期治疗是必要的。     

骨愈注射液对家兔骨折愈合影响的实验研究

目的：验证骨愈注射液促进骨折愈合的作用。方法：通过手术造成家兔双侧桡骨中段3mm完全缺损的骨折模型。分设骨愈组，金葡组，空白组，分别予以骨愈注射液，金葡液，生理盐水骨折端注射。从骨痂X线评分，骨密度测定，生物力学测试和病理组织学观察等方面进行研究。结果：16天时，骨愈组骨愈合尚无明显优势；29天时，骨愈组和金葡组骨愈合情况明显优于空白组。结论：骨愈注射液在骨折中后期具有明显促进骨折愈合的作用。其特点是改善骨折局部血循环；增加细胞数量，促进细胞分化，成熟，加速胶原形成和钙盐沉积，提高骨痂质量。增加骨的强度。     

小针刀治疗对骨折愈合血管内皮细胞生长因子表达及血清无机盐和碱性磷酸酶影响的实验研究

目的:观察小针刀刺激对骨折愈合过程中骨痂组织内血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达以及对血清Ca、P、ALP浓度的影响,探讨小针刀治疗对骨折愈合的促进作用。方法:采用日本大耳白兔60只均制作左侧桡骨中段骨折模型,随机分成实验组、对照组、空白组各20只,术后1w、2w、4w、6w抽血检测血清Ca、P、ALP,同时按不同时相点取骨折端标分别检测VEGF。结果:血清Ca、P、ALP在1w三组比较无统计学意义(P>0.05),2w、4w、6w实验组高于空白组,差异有显著性(P<0.01),但与对照组比较无统计学意义(P>0.05)。VEGF表达在1w、2w实验组优于空白组,但与对照组表达相似;4w三组比较差异不明显,6w实验组又优于空白组和对照组。结论:小针刀治疗对兔骨折愈合有促进作用。     

鹿瓜多肽注射液对家兔长节段单椎体压缩性骨折VEGF及PMMA颗粒诱导骨溶解的影响

目的观察鹿瓜多肽注射液对家兔长节段单椎体压缩性骨折合并骨溶解治疗过程中血管内皮生长因子(VEGF)表达及PMMA颗粒诱导骨溶解抑制作用的影响。方法健康兔50只,将其中40只随机分为模型对照组、鹿瓜多肽A、B、C组,采用手术方法建立家兔长节段单椎体压缩性骨折基础上于骨折周围组织注入PMMA颗粒以造成骨折合并骨溶解动物模型,另10只不做造模型处理设为空白对照组。术后10 d鹿瓜多肽A、B、C 3组于骨折局部肌肉注射鹿瓜多肽注射液治疗4周,空白对照组及模型对照组肌肉注射等体积0.9%氯化钠注射液。兔疫组化染色及图像分析法测定兔L1节骨折椎体VEGF及VEGF m RNA阳性表达,ELISA法检测血清PGE2、IL-1及IL-8水平,影像学检测骨折椎体骨密度,HE染色病理检测兔L1骨折椎体骨溶解病理改变情况。结果鹿瓜多肽B、C组在治疗4周后,其VEGF、VEGFm RNA在兔L1节骨折椎体中的阳性表达及骨密度均明显增强,PGE2、IL-1、IL-8水平及病检兔L1节骨折椎体骨溶解明显降低,与本组治疗前及模型对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。鹿瓜多肽A组无明显变化,B、C组两组间比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论鹿瓜多肽注射液可促进兔长节段单椎体压缩性骨折合并骨溶解愈合过程中VEGF及VEGFm RNA阳性表达,增加L1节骨折椎体局部组织血液供应,促使L1节骨折椎体周围组织血管内皮新生,降低PGE2、IL-1及IL-8水平以减轻炎症反应,调节兔L1节骨折椎体组织细胞代谢及平衡,抑制骨溶解而增加骨密度,对骨折椎体骨痂形成及维持成骨及破骨过程的平衡稳定具有明显的促进作用。     

中药接骨颗粒对家兔肾虚骨折愈合的组织形态学影响

为研究中药接骨颗粒对家兔肾虚骨折愈合的组织形态学影响。将30只家兔随机分成对照组、肾虚组、中药组。各组均造成桡骨中段7mm缺损。肾虚组、中药组口服泼尼松造肾虚动物模型,中药组加服中药接骨颗粒。6周后,取完整双侧尺桡骨,剔除附着的软组织,拍X线片,评价骨折愈合情况;将骨标本处理、切片、染色后,进行组织形态学观察。结果显示,经X线片评价优良率对照组为80%、肾虚组为63%、中药组为75%。组织形态学观察,对照组骨痂已部分骨化,中心区有软骨性组织和纤维性组织,ALP检查呈棕黑色颗粒;肾虚组骨痂以软骨性组织为主,较多为未成熟胶原,ALP染色仅少量面积,且染色浅;中药组有不同程度骨痂生长,骨痂内成熟胶原成分较多,ALP染色较浅,但面积广泛。表明实验用中药接骨颗粒有纠正肾虚的良好作用。     

愈骨胶囊加速实验性骨折愈合的作用及机理

目的观察愈骨胶囊对新西兰兔桡骨骨折愈合的影响及机理。方法将实验动物随机分成模型组、愈骨胶囊组和接骨七厘片组,造成骨折模型后,口服给药6周,于第2、4、6周进行X射线拍照,双能X线骨密度仪测定骨密度（BMD）和骨矿（BMC）,紫外-可见分光光度计测定血清钙（Ca）、磷（P）和碱性磷酸酶（ALP）。结果 X线片检查显示,愈骨胶囊组骨痂形成、骨愈合程度良好。与接骨七厘片组和模型组比较,术后第4周愈骨胶囊组的BMC和血清Ca含量有显著差异;术后第6周愈骨胶囊组的BMD和BMC,血清P含量和Ca、P乘积有显著差异。结论愈骨胶囊能加速实验兔骨折愈合,其作用机理可能与促进钙盐沉积有关。     

接骨冲剂对家兔骨折愈合影响的实验研究

目的研究接骨冲剂对家兔骨折愈合的影响。方法选用新西兰大白兔48只,雌雄各半,造成左桡骨中上段的骨折模型,术后第1天将家兔随机分为空白组、对照组、中药组,并开始灌胃给药。术后第10天、第20天、第30天、第40天每组处死4只兔子,取其左侧桡骨,拍X线片,测骨密度。取左上肢仔细剔除附着的肌肉等组织,保留骨膜及骨痂;以骨折间隙为中心两端各保留1 cm,投入10%甲醛溶液中固定,脱钙,石蜡包埋,行HE染色。结果与其他2组比较,中药组骨折愈合情况较好。结论接骨冲剂能影响兔骨折愈合过程中软骨内成骨,增加成骨细胞活性,促进钙在细胞内沉积,促进骨痂形成及骨折愈合。     

自然铜炮制前后促进骨折愈合作用及机制研究

目的探讨自然铜炮制促进骨折愈合作用及机制。方法建立家兔骨折模型,观察自然铜生品、煅品对血清生化指标、骨密度、骨痂中微量元素及骨组织形态的影响。结果在给药后3周煅品高、低剂量组血清碱性磷酸酶(ALP)活性,血磷(P)、血清钙磷乘积([Ca×P])均显著高于模型组(P0.05,P0.01)和生品组(P0.05,P0.01);与模型组比较,给药后3周两组煅品骨密度有显著性升高(P0.05);与模型组比较,给药后3周煅品高剂量组骨痂中Fe和Cu均显著升高(P0.05)。X线结果显示,与模型组比较,煅品高、低剂量组能明显促进骨痂生长。结论自然铜煅品促进骨折愈合疗效显著优于生品,且主要作用于骨折中期,其作用机制可能是通过促进成骨细胞合成、分泌ALP,增加血磷含量,促进钙盐沉积,增加微量元素的吸收、增强骨密度,从而促进骨折的愈合。     

外用白脉软膏对家兔桡骨骨折模型愈合过程及骨痂组织结构的影响

目的:观察白脉软膏影响家兔骨折愈合过程的作用及可能的机制。方法:机械法建立家兔桡骨骨折动物模型,步态测试系统分析动物患肢着地力;软组织张力测试仪记录动物骨折处软组织张力;X线摄片观察骨折线形成;骨病理切片观察骨折处骨组织结构。结果:外用白脉软膏可增加模型动物患肢着地力,升高模型动物骨痂处X射线扫描评分,促进骨折后新骨生长。结论:外用白脉软膏对骨折模型动物骨伤愈合过程具有明显的促进作用。     

接骨木根皮促进骨折愈合作用的研究

目的 观察接骨木根皮促进骨折愈合的作用.方法 制备桡骨骨折家兔模型.实验分对照组,模型组,跌打丸(0.28g/kg)阳性对照组,接骨木低、中、高(0.17、0.34、0.68 g/kg)组,药物掺入饲料,于造模后第2天连续给药36 d.观察接骨木根皮对骨折区骨组织形态和血清相关生化指标的影响.结果 与模型组比较,给药12d,即骨折愈合初期,接骨木高、中剂量组兔血清碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(ACP)水平显著升高(P＜0.05、0.01);给药24 d,即骨折愈合中期,接骨木高、中剂量组兔血清骨钙素(BGP)水平显著升高(P＜0.05、0.01).X光片显示,接骨木中剂量组兔骨膜反应密度较深,骨痂增深、量增多,且其密度与骨密度相似;光镜观察显示骨膜下新生骨组织形成均质的骨小梁,新生骨组织对原骨质两端成“工”字形包裹.结论 接骨木根皮通过促进成骨细胞合成、分泌ALP和BGP及破骨细胞分泌ACP,提高成骨细胞的数量、加快局部坏死骨质的吸收及骨基质的成熟和钙化,从而加快骨折愈合.     

骨愈丹促进实验性肾虚骨折愈合的生化学研究

目的:研究骨愈丹对实验性肾虚骨折愈合的促进作用。方法:将57只家兔造成桡骨中段0.7cm缺损后分成3组,对照组和实验组动物口服泼尼松片造成肾虚,空白组为非肾虚骨折模型,实验组口服骨愈丹。结果:对照组动物骨痂修复指标均低于空白组和实验组,实验组动物骨折修复骨痂的骨矿含量、骨密度、骨痂钙、磷含量和碱性磷酸酶活性均高于对照组(P<0.05),血液粘度低于对照组(P<0.05)。证明骨愈丹可拮抗泼尼松对骨折修复的抑制作用,对肾虚骨折的愈合有明显的促进作用。     

接骨膏促进骨折愈合的机理研究

目的:研究土家药接骨膏促进骨折愈合的作用机理。方法:以新西兰兔建立左前肢桡骨骨折模型，实验分为接骨膏组、模型对照组及正常对照组，通过X线检测骨折愈合进程，血清钙磷检测，酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中IL-6、TNF-α、OC、PINP、FGF2、ALP及ACP5的浓度，苏木精-伊红(HE)染色检测骨折愈合进程，IHC检测骨折部位骨母细胞bFGF的表达，来研究接骨膏对新西兰兔骨折愈合的影响。结果:与模型对照组比较，接骨膏组的桡骨骨折线提前1周消失，血清钙峰值提前1周出现，钙磷乘积峰值显著升高，IL-6、TNF-α的下降速度更快、浓度更低(P<0.05或P<0.01),而血清中OC、PINP、FGF2、ALP的浓度更高(P<0.05或P<0.01),血清中ACP5浓度在造模后第7天达到峰值，随后呈快速下降趋势，显著提前骨痂、骨髓腔形成与贯通及骨钙化和血管生成的时间，骨母细胞bFGF的表达量更高。结论:接骨膏对新西兰兔桡骨骨折愈合具有促进作用。     

香丹骨折端注射促进骨痂生长过程中TGF-β、bFGF的表达及骨密度实验研究

目的：通过香丹注射液骨折端注射,治疗家兔桡骨中段骨折的实验研究,观察转化生长因子-β（TGF-β）、碱性成纤维生长因子（bFGF）,在骨折愈合过程中的表达和分布情况;观察骨密度的测定情况,了解香丹注射液对促进骨折愈合的影响,探讨其作用机制。方法：通过手术造成家兔双侧桡骨中段3mm完全缺损的骨折模型,分设香丹组、空白组、对照组,分别予以香丹注射液、生理盐水骨折端注射、伤科接骨片灌胃。观察转化生长因子-β（TGF-β）、碱性成纤维生长因子（bFGF）,在骨折愈合中的表达和分布特点,证明有调节骨原细胞的增殖和成骨细胞、软骨细胞分化的作用;并从骨密度（BMD）、骨矿含量（BMC）、骨面积（Area）测定等方面进行研究。结果：8天时,香丹组血肿吸收明显,骨折端肿胀明显减轻,改善骨折端血运;TGF-β、bFGF染色呈弱阳性表达。15天时香丹组骨愈合骨密度测定尚无明显优势;TGF-β、bFGF染色呈阳性表达。22天时香丹组和对照组骨愈合情况已无明显差别。31天时骨密度测定香丹组优于对照组,两组均明显优于空白组;香丹组TGF-β、bFGF染色呈强阳性表达。结论：香丹注射液在骨折早中期具有明显促进骨折愈合的作用,其特点是改善骨折局部血循环;通过诱发成骨细胞的活性和增殖,直接刺激膜内成骨,促进细胞分化、成熟,并且激发成骨细胞合成Ⅰ型胶原和骨连接素,加速胶原形成和钙盐沉积,提高骨痂质量,增强骨的强度。     

超声经皮促渗术联合骨伤膏对创伤性骨折愈合兔血清碱性磷酸酶活性水平及钙、磷含量的影响

目的观察超声经皮促渗术联合骨伤膏对创伤性骨折愈合兔血清碱性磷酸酶(AKP)活性水平及钙、磷含量的影响。方法将80只雄性健康新西兰兔随机分为超声经皮促渗术联合骨伤膏组(简称联合组)和单纯骨伤膏对照组(简称对照组),每组40只,均建立右侧桡骨骨折模型,以治疗第2、4、6、8周4个时间点将每组动物随机等分成4个小组,每组10只,联合组所有动物右侧骨折部位给予超声经皮促渗术联合骨伤膏治疗,对照组右侧骨折部位单纯给予骨伤膏治疗。2组在治疗第2、4、6、8周4个时间点,各取相应时间点的10只动物进行血清碱性磷酸酶(AKP)活性水平及钙、磷含量测定,X线影像学检查,组织切片和形态学检测。结果联合组实验兔治疗第2、4、6、8周血清AKP活性水平及钙、磷含量均高于对照组治疗同期(P0.05,P0.01),随着时间的推移,治疗第6、8周,联合组上述指标水平变化更明显(P0.01)。2组实验兔治疗第2、4、6、8周X线评分比较差异均有统计学意义(P0.05,P0.01),联合组X线评分高于对照组。2组治疗第4、8周骨折断端的矿化骨痂均宽(AWMC)及矿化骨痂面积(MCA)比较差异均有统计学意义(P0.05,P0.01),联合组高于对照组。结论超声经皮促渗术联合骨伤膏通过对骨折愈合的整个过程施加影响从而加速了骨折的愈合。     

基于VEGF/VEGFR-2信号通路探讨穿山龙总皂苷促进去势大鼠骨折血管形成和骨折愈合的效果

目的基于血管内皮生长因子(VEGF)/血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)信号通路观察穿山龙总皂苷促进去势大鼠骨折血管形成和骨折愈合的效果。方法 SD雌性大鼠50只,根据体质量随机分为骨折对照组、模型组、地塞米松组(10 mg/kg)、穿山龙总皂苷低剂量组(20 mg/kg)和穿山龙总皂苷高剂量组(40 mg/kg)。模型组、地塞米松组、穿山龙总皂苷低剂量组、穿山龙总皂苷高剂量组经戊巴比妥钠(0.3 m L/100 g)腹腔注射麻醉,切除双侧卵巢,建立去势骨折模型,骨折对照组只建立股骨的简单横向闭合性骨折。建模成功后,地塞米松组、穿山龙总皂苷低剂量组、穿山龙总皂苷高剂量组给予相应药物灌胃,模型组、骨折对照组给予等体积的0.9%氯化钠注射液。实验结束后,制作股骨折后骨痂处骨结构病理切片,对股骨折后骨痂处行骨密度、血管数量测定,RT-PCR、Western blotting法对股骨折后骨痂处VEGF、VEGFR-2基因和蛋白水平测定。结果与骨折对照组比较,模型组骨痂处骨密度、血管数量、VEGF、VEGFR-2 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P 0.05);与模型组比较,地塞米松组、穿山龙总皂苷低剂量组、穿山龙总皂苷高剂量组骨痂处骨密度、血管数量、VEGF、VEGFR-2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P 0.05),且穿山龙总皂苷高剂量组骨痂处骨密度、血管数量、VEGF、VEGFR-2 mRNA和蛋白表达水平高于穿山龙总皂苷低剂量组(P 0.05);与地塞米松组比较,穿山龙总皂苷低剂量组骨痂处骨密度、血管数量、VEGF、VEGFR-2 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P 0.05),穿山龙总皂苷高剂量组骨痂处骨密度、血管数量、VEGF、VEGFR-2 mRNA和蛋白表达水平无明显变化(P0.05)。结论穿山龙总皂苷可促进去势大鼠骨折血管形成和骨折愈合;其机制与穿山龙总皂苷可促进去势大鼠骨折骨痂处VEGF、VEGFR-2 mRNA和蛋白表达水平,进而激活VEGF/VEGFR-2信号通路有关。     

桃红四物汤促进实验性骨折愈合的分子机理研究

目的研究桃红四物汤对骨折断端骨痂组织内VEGF表达及对骨折愈合的影响.方法将日本大耳白兔65只随机分成4组,3组分别行右侧桡骨中段手术骨折造模后给予桃红四物汤、炎迪宁片、蒸馏水灌胃,另1组为正常对照组,在骨折后7、15、21、35d摄取骨折部位X线片,同时取骨折断端标本脱钙,采用免疫组化方法检测骨痂组织中VEGF表达,并作计量对比分析.结果桃红四物汤干预组VEGF表达量高于其它各组,并在第1 5天表达峰值后下降不明显,同时使骨折局部血肿吸收加快,骨痂生长和塑形优于其它各组.结论桃红四物汤能提高骨折后骨痂中VEGF的表达,加速断端血肿吸收和骨痂生长塑形,促进骨折愈合.     

复方冲剂对家兔骨折愈合的影响

目的:研究中药复方冲剂在骨折愈合中的作用,分析其促进骨折愈合的机制。方法:将48只实验用家兔随机分为中药复方冲剂组、伤科接骨片组和空白组,麻醉后于左前肢桡骨中段造成3mm~5mm骨折缺损模型,术后按组分别给予中药复方冲剂、伤科接骨片和蒸馏水灌胃,术后第10、20、30、40天分别做HE染色和检测血清碱性磷酸酶(ALP)、血钙(Ca)。结果:血ALP和Ca水平及HE染色显示中药复方冲剂组的骨痂形成速度和质量明显高于其他两组,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论:中药复方冲剂能够加快血肿机化的吸收和骨痂形成速度,调节血ALP和Ca水平,加速钙盐沉积,对骨折的愈合和修复有促进作用。     

红珊瑚对大鼠桡骨骨折愈合的影响

目的观察红珊瑚对实验大鼠骨折愈合过程的影响。方法 60只SPF级Wistar大鼠随机取12只为空白对照组,其余大鼠造成左前肢桡骨骨折模型,经X射线影像透视后确定大鼠桡骨骨折模型建立成功。将骨折模型大鼠随机分为模型组、阳性药物(伤科接骨片,150μg/g)组、红珊瑚高剂量组(300μg/g)、红珊瑚低剂量组(150μg/g),每组12只。造模后第2 d开始灌胃药,每天1次。给药后第10 d、20 d、30 d分别对每组大鼠骨折部位进行X射线影像评估,骨折部位HE染色后观察组织病理改变,并用酶联免疫法(ELISA)测定血清中碱性磷酸酶(ALP)活性及钙(Ca)、磷(P)含量。结果 X射线影像显示,给药第10 d时红珊瑚高剂量组大鼠骨折端边缘线变模糊;20 d时骨折断端骨痂增多,密度增加,边缘接近消失;30 d时骨痂填满骨折缺损,完全愈合。骨折部位HE染色可以看出红珊瑚高剂量组大鼠骨折处纤维组织多,骨痂形成速度较其他组更快,红珊瑚高剂量组的骨折愈合周期较其他组更短。红珊瑚高剂量组血清中Ca、P水平逐渐升高,并明显高于模型组,差异均有统计学意义(P0.05)。ALP含量有先升后降趋势,较其他组先出现且明显,差异有统计学意义(P0.05)。结论红珊瑚能够调节大鼠血清ALP和Ca、P水平,加速钙盐沉积,促进大鼠骨折部位纤维组织增多,加速骨痂形成,缩短骨折愈合周期,对骨折的愈合和修复有促进作用。     

骨康对去势大鼠骨质疏松症骨生物力学的影响

为探讨补肾活血类中药骨康防治去势大鼠骨质疏松症的影响，运用随机对照分组原则，将48只由于切除卵巢诱发绝经后骨质疏松症的清洁级SD大鼠模型分为正常组、模型组、骨康组、阳性组，采用骨生物力学指标，观察骨康预防去势大鼠的影响。结果显示与模型组比较，正常组的最大载荷、极限强度均明显高于模型组；骨康组则在最大载荷、最大桡度、极限强度各方面明显高于模型组；阳性组在最大载荷、极限强度均明显高于模型组。正常组、骨康组、阳性组在最大载荷、最大桡度、极限强度各方面均无明显差异。表明中药骨康能提高骨骼抵抗外力冲击的能力，改善大鼠骨的韧性，有效地防治大鼠切除卵巢后引起的骨质疏松，避免或减少骨折的发生。     

香丹注射液促进骨痂生长的生物力学研究

目的:通过香丹注射液骨折端注射,治疗家兔桡骨中段骨折的实验研究,了解香丹注射液对促进骨折愈合的影响,探讨其作用机制。方法:通过手术造成家兔双侧桡骨中段3mm完全缺损的骨折模型,分设香丹组、空白组、对照组,分别予以香丹注射液、生理盐水骨折端注射、伤科接骨片灌胃。从生物力学测试骨折处方面进行研究。结果:8d时,香丹组血肿吸收明显,骨折端肿胀明显减轻,改善骨折端血运。15d时香丹组骨愈合尚无明显优势。22d时香丹组和对照组骨愈合情况已无明显差别。31d时香丹组优于对照组,2组均明显优于空白组。结论:香丹注射液在骨折中后期具有明显促进骨折愈合的作用,其特点是改善骨折局部血循环;增加细胞数量,促进细胞分化、成熟;加速胶原形成和钙盐沉积,提高骨痂质量,增强骨的强度。