清开灵注射液对脑缺血大鼠急性期病理形态学、炎症因子及凋亡基因Bcl-2和p53表达的影响

目的观察清开灵注射液对脑缺血大鼠急性期病理形态学、炎症因子及凋亡基因Bcl-2和p53表达的影响。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性组以及实验组。除假手术组外均建立脑缺血大鼠模型。假手术组和模型组给予0.9%氯化钠注射液灌胃,阳性组给予尼莫地平灌胃,实验组注射清开灵注射液,7 d后评估各组大鼠的神经功能评分、神经行为学评分,比较脑梗死体积和神经细胞凋亡。Elisa法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)以及白介素-18(IL-18)等炎症因子水平,Western blotting法检测凋亡基因Bcl-2表达,免疫组织化学法检测凋亡基因p53的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠的脑组织神经元明显减少,结构模糊构型紊乱,不规则出现不同程度变性坏死及炎细胞浸润、核体固缩深染,脑梗死体积和神经细胞凋亡明显升高,BBB评分和神经功能评分明显降低(P 0.05);TNF-α、IL-1β、IL-6以及IL-18等炎症因子水平明显升高(P 0.05);Bcl-2表达显著下调,p53表达显著上调(P 0.05)。给予药物干预后,阳性组和实验组的神经元均明显增多,有不同程度的缓解恢复,核固缩核体均有不规则程度的减轻,间质水肿减轻,细胞结构较完整,脑梗死体积和神经细胞凋亡水平明显降低,BBB评分和神经功能评分明显高于模型组(P 0.05),炎症因子明显降低,Bcl-2蛋白水平显著上调,p53表达显著下调(P 0.05)。结论清开灵注射液对脑缺血模型大鼠可有较地减少脑梗死面积,保护脑组织免受炎症因子的损伤,调整凋亡相关因子表达,减少神经细胞的凋亡。     

益血方对急性脑梗死大鼠血管新生的作用及对促血管生成因子HIF-1α和Ang-2表达的影响

目的观察益血方对急性脑梗死大鼠血管新生的作用及对促血管生成因子低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和促血管生成素-2(Ang-2)表达的影响并探讨其作用机制。方法将40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、益血方组和阳性组,对照组采用假手术,剩余组采用改良自身栓子法制备急性脑梗死大鼠模型,对照组和模型组给予生理盐水灌胃,益血方组给予益血方煎液灌胃,阳性组给予尼莫地平灌胃,1周后比较行为学、脑组织病理、微血管密度、脑梗死百分比、神经细胞凋亡、血清炎症因子、HIF-1α和Ang-2水平。结果益血方组和阳性组水平、垂直和修饰次数行为学评分高于模型组(P 0.05),但益血方组和阳性组比较差异无统计学意义(P 0.05)。模型组脑组织梗死,灶内细胞和血管坏死,神经元肿胀,间质水肿;益血方组和阳性组脑组织少数神经细胞死亡,水肿减轻,神经细胞肿胀减轻;益血方组和阳性组微血管密度大于模型组,而脑梗死百分比和神经细胞凋亡低于模型组(P 0.05),但益血方组和阳性组比较差异无统计学意义(P 0.05)。模型组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-8(IL-8)水平升高,益血方组和阳性组TNF-α、IL-2和IL-8水平降低(P 0.05),但益血方组和阳性组比较差异无统计学意义(P 0.05)。模型组HIF-1α和Ang-2水平高于对照组,益血方组和阳性组HIF-1α和Ang-2水平高于模型组(P 0.05)。结论益血方可改善急性脑梗死大鼠脑组织损伤,促进缺血脑组织血管新生,其机制可能与减轻炎症反应,上调HIF-1α和Ang-2表达有关。     

活血复方对脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响

目的:探究活血复方对脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响。方法:建立大鼠脑缺血再灌注及神经细胞凋亡模型,观察大鼠神经行为学改变,将尼莫地平作为对照组,观察组活血复方对脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响。结果:假手术组术后2d、5d大鼠神经行为学评分与缺血再灌注组、活血复方中剂量组、活血复方高剂量组及尼莫地平组对比,具有统计学差异(P0.05);假手术组术后20d大鼠神经行为学评分与缺血再灌注组、尼莫地平组对比,具有统计学差异,P0.05;缺血再灌注组梗死面积占给梗死面积百分比为(19.27±2.29)%与活血复方低剂量组、活血复方中剂量组、活血复方高剂量组、尼莫地平组(P0.05);经缺血再灌注后6h,缺血再灌注组海马神经凋亡细胞数与假手术组比较显著增多,具有统计学差异(P0.05)。活血复方各剂量组凋亡细胞数与缺血再灌注组、尼莫地平组比较显著减少,具有统计学差异(P0.05)。结论:活血复方治疗脑梗塞可有效可缓解缺血再灌注后神经细胞凋亡,有效改善大鼠脑缺血再灌注模型的神经行为症状。     

败酱总黄酮对局灶性脑缺血再灌注大鼠的神经保护作用及炎症因子的影响

目的观察败酱总黄酮对局灶性脑缺血再灌注大鼠的神经保护作用及炎症因子的影响。方法将98只Wistar大鼠随机分为假手术组,模型组,尼莫地平组(20 mg·kg~(-1)),脑络通组(500 mg·kg~(-1)),败酱总黄酮高、中、低剂量组(200、100、50 mg·kg~(-1))。灌胃体积为20 mL·kg~(-1),每天给药1次,连续给药7 d。末次给药后采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。采用ELISA法检测脑组织匀浆中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)水平;氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察并测定脑梗死面积百分比;免疫组织化学法检测脑组织中神经生长因子(NGF)、核因子(NF)-κBp65表达情况。结果与假手术组比较,模型组大鼠脑组织脑梗死面积百分比、ICAM-1、IL-6、IL-1β、TNF-α、Bax、Bcl-2、Caspase-3水平以及NGF、NF-κBp65免疫阳性表达水平显著升高(P 0.01)。与模型组比较,败酱总黄酮各剂量组的大鼠脑组织ICAM-1、IL-6、IL-1β、Bax、Caspase-3含量水平均显著降低(P 0.05,P 0.01),Bcl-2含量水平及NGF免疫阳性表达水平均显著升高(P 0.01);败酱总黄酮高、中剂量组的大鼠脑梗死面积百分比、TNF-α含量水平及NF-κBp65免疫阳性表达水平均明显降低(P 0.05,P 0.01)。结论败酱总黄酮对局灶性脑缺血再灌注损伤有较好的保护作用,可以减少脑梗死面积,保护脑组织免受炎症因子的损伤,增加神经细胞营养因子保护神经元,减少神经细胞的凋亡,激活脑细胞自我保护,减少脑缺血再灌注损伤。     

岭南地区子宫内膜异位症与体质相关性研究

目的观察败酱总黄酮对局灶性脑缺血再灌注大鼠的神经保护作用及炎症因子的影响。方法将98只Wistar大鼠随机分为假手术组,模型组,尼莫地平组(20 mg·kg~(-1)),脑络通组(500 mg·kg~(-1)),败酱总黄酮高、中、低剂量组(200、100、50 mg·kg~(-1))。灌胃体积为20 mL·kg~(-1),每天给药1次,连续给药7 d。末次给药后采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。采用ELISA法检测脑组织匀浆中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)水平;氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察并测定脑梗死面积百分比;免疫组织化学法检测脑组织中神经生长因子(NGF)、核因子(NF)-κBp65表达情况。结果与假手术组比较,模型组大鼠脑组织脑梗死面积百分比、ICAM-1、IL-6、IL-1β、TNF-α、Bax、Bcl-2、Caspase-3水平以及NGF、NF-κBp65免疫阳性表达水平显著升高(P 0.01)。与模型组比较,败酱总黄酮各剂量组的大鼠脑组织ICAM-1、IL-6、IL-1β、Bax、Caspase-3含量水平均显著降低(P 0.05,P 0.01),Bcl-2含量水平及NGF免疫阳性表达水平均显著升高(P 0.01);败酱总黄酮高、中剂量组的大鼠脑梗死面积百分比、TNF-α含量水平及NF-κBp65免疫阳性表达水平均明显降低(P 0.05,P 0.01)。结论败酱总黄酮对局灶性脑缺血再灌注损伤有较好的保护作用,可以减少脑梗死面积,保护脑组织免受炎症因子的损伤,增加神经细胞营养因子保护神经元,减少神经细胞的凋亡,激活脑细胞自我保护,减少脑缺血再灌注损伤。     

通络化痰胶囊对脑缺血损伤大鼠神经细胞凋亡及Bcl-2,Bax的影响

目的:探讨通络化痰胶囊对脑缺血损伤大鼠神经细胞凋亡的影响和机制.方法:98只SD大鼠通过永久性大脑中动脉闭塞(pMCAO)制备脑缺血损伤模型,待大鼠清醒后,根据Longa评分(≥2分)随机分为7组,分别为正常对照组、假手术组、模型组、尼莫地平组、通络化痰高、中、低剂量组.于术后第1天开始分别给予蒸馏水(正常对照组、假手术组、模型组)、尼莫地平(32.4 mg·kg-1)和通络化痰胶囊高、中、低剂量组(648,324,162 mg·kg-1)灌胃治疗,并于术后第1,2,3,5,7天行Narrow-Alley Corner Test检测脑缺血损伤大鼠神经功能的改变,术后第8天行4％多聚甲醛(pH 7.0)灌注固定后断头取脑,观察脑组织病理学的改变,利用TUNEL法检测缺血半暗带神经细胞凋亡水平的变化,利用免疫组化技术测定缺血半暗带Bcl-2相关x蛋白(Bax)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)表达水平的改变.结果:模型组大鼠Narrow-Alley Corner Test得分较正常对照组和假手术组显著增加(P＜0.01),尼莫地平组和通络化痰胶囊组得分较模型组降低(P＜0.01,P＜0.05).缺血后大鼠脑组织损伤明显,尼莫地平组和通络化痰胶囊组的损伤减轻.模型组较正常对照组和假手术组神经细胞凋亡增多、缺血半暗带Bax和Bcl-2表达增加(P＜0.01).尼莫地平组和通络化痰胶囊组较模型组神经细胞凋亡减轻、缺血半暗带Bax表达减少,Bcl-2表达增强(P＜0.01).结论:通络化痰胶囊可促进脑缺血损伤大鼠损伤后神经功能障碍的恢复,减轻神经元病理损害,其机制可能与其促进缺血半暗带Bcl-2表达,抑制Bax表达,从而减少细胞凋亡水平有关.     

解毒通络注射液对MCAO大鼠脑组织炎性细胞因子的影响

目的：研究解毒通络注射液(JDTL)对局灶性脑缺血大鼠脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)以及单核细胞趋化蛋白(MCP-1)含量的影响，探讨解毒通络注射液减轻脑缺血性损伤的作用机制。方法：成年雄性SD大鼠，线栓法复制大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO),随机分成假手术对照组、模型组、解毒通络注射液高、中、低剂量组(83.2，41.6，20.8 mg·kg-1)和尼莫地平组。应用放射免疫法(RIA)检测脑组织匀浆TNF-α和IL-1β含量，酶联免疫吸附法(ELISA)检测脑组织匀浆ICAM-1和MCP-1含量。结果：脑缺血6，24 h，大鼠脑组织TNF-α,IL-1β，ICAM-1以及MCP-1含量均有不同程度的升高。解毒通络注射液高、中剂量组可以明显阻抑缺血脑组织上述细胞因子含量的增加。结论：解毒通络注射液对抑制脑缺血后炎症因子和黏附分子的表达具有良好的作用，能够减轻炎性损伤，阻抑脑缺血损伤级联反应，减轻缺血对神经元的损害。     

芍药苷对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响及其作用机制

目的:探讨芍药苷对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:选择健康雄性SD大鼠80只,随机分为假手术组、模型组、芍药苷组及尼莫地平组各20只,建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型,观察各组大鼠神经行为学评分及脑梗死面积,TUNEL检测大鼠神经细胞凋亡情况,免疫组化法检测大鼠大脑皮层中Bcl-2和Bax蛋白表达情况。结果:假手术组大鼠未表现出神经功能缺失症状,模型组大鼠神经行为学评分及脑梗死面积高于假手术组,芍药苷组及尼莫地平组均低于模型组,差异具有统计学意义(P0.05);假手术组几乎未见神经细胞凋亡,模型组TUNEL阳性细胞明显多于假手术组,芍药苷组及尼莫地平组细胞凋亡个数及阳性率均低于模型组,其差异具有统计学意义(P0.05);假手术组大鼠大脑皮质中Bcl-2及Bax的灰度值均高于模型组,芍药苷组及尼莫地平组大鼠Bcl-2灰度值较模型组降低,而Bax灰度值较模型组明显升高,2组Bcl-2/Bax灰度值较模型组下降,其差异具有统计学意义(P0.05)。结论:芍药苷可通过抑制Bax的表达,上调Bcl-2的表达来抑制神经细胞凋亡,从而保护神经功能,减轻脑梗死。     

三化汤对脑缺血再灌注模型大鼠脑组织IL-1β、ICAM-1表达的影响

目的:观察三化汤对脑缺血再灌注模型大鼠脑组织IL-1β、ICAM-1表达的影响。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、三化汤低剂量组、三化汤高剂量组、尼莫地平组。采用线栓法制备脑缺血再灌注大鼠模型。采用免疫组织化学法检测各组大鼠脑组织IL-1β、ICAM-1的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠脑组织IL-1β、ICAM-1表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,各用药组大鼠脑组织IL-1β、ICAM-1表达均显著降低,其中三化汤高剂量组和尼莫地平组降低较明显,三化汤高剂量组与尼莫地平组之间无显著性差异(P>0.05)。结论:三化汤能降低脑缺血再灌注模型大鼠脑组织IL-1β、ICAM-1的表达,对脑缺血再灌注模型大鼠脑损伤起到一定的保护作用。     

防己黄芪汤对脑缺血再灌注模型大鼠脑损伤的保护作用

目的:研究防己黄芪汤(FJHQT)对大鼠局灶性脑缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用,为其临床防治脑缺血提供实验依据。方法:采用线栓法制备脑缺血再灌注损伤大鼠模型1 d后。将神经行为评分合格的大鼠随机分为FJHQT高、低剂量组、模型组、假手术组和阳性对照尼莫地平组。连续口服给予FJHQT(按生药量计,1,2 g·kg-1)或尼莫地平(2 mg·kg-1)7 d后,观察脑组织的梗死面积,测定脑组织Na+-K+-三磷酸腺苷(Na+-K+-ATP),还原型谷胱甘肽(GSH),过氧化氢酶(CAT)活性及炎症因子白介素-6(IL-6),白介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。采用原位末端标记(TUNEL)法测定脑组织中细胞凋亡,并采用免疫组化和蛋白免疫印迹法(Western blot)分析测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠缺血脑组织中Na+-K+-ATP,GSH,CAT活性显著降低(P0.01),IL-6,IL-1β和TNF-α水平显著提升(P0.01),凋亡程度及Caspase-3蛋白表达显著提升(P0.01)。与模型组相比,FJHQT各剂量组均能提高缺血脑组织中Na+-K+-ATP,GSH,CAT活性;降低炎症因子IL-6和TNF-α含量(P0.05,P0.01);减轻细胞凋亡程度并降低Caspase-3蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:FJHQT能明显减轻缺血脑组织脑梗死面积,减少细胞凋亡、氧化损伤、炎症反应。     

针药结合对脑缺血再灌注损伤大鼠MPO、ICAM-1和IL-lβ的影响

目的:研究五神针(针刺百会、四神聪穴)结合不同剂量的当归四逆汤加减对大鼠脑缺血再灌注后脑组织髓过氧化物酶(MPO)活性、黏附分子-1(ICAM-1)及白细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响。方法:将108只SD大鼠随机分假手术组、模型组、尼莫地平片组、针药低剂量组、针药中剂量组和针药高剂量组,每组再分为3个亚组,每亚组6只。除假手术组外均建立脑缺血再灌注模型,尼莫地平片组采用尼莫地平片干预,针药低剂量组、针药中剂量和针药高剂量组分别采用五神针结合低剂量、中剂量和高剂量当归四逆汤加减进行干预,模型组和假手术组给予等量的生理盐水。采用运动功能检测法评估各组大鼠的运动能力;TTC染色法检测各组大鼠脑梗死体积;采用紫外分光光度比色法检测MPO;采用免疫组化法检测脑组织中ICAM-1和IL-1β的表达。结果:尼莫地平片组和针药高剂量组第3 d、5 d与模型组、针药低剂量组和针药中剂量组比较,行为异常均有明显改善(P均0.05),脑梗死体积明显减少(P均0.05),MPO活性、ICAM-1蛋白和IL-lβ蛋白表达有显著的改善(P均0.05),针药高剂量组与尼莫地平片组比较无显著性差异(P0.05)。结论:五神针结合高剂量当归四逆汤加减能够明显缩小脑缺血再灌注后的脑梗死体积,减轻运动功能缺损,有效改善MPO活性、ICAM-1和IL-lβ蛋白的表达,对缺血后的脑组织具有保护作用。     

藏族药二十五味珍珠丸对缺血性脑卒中大鼠的保护作用及其机制研究北大核心CSCD

研究二十五味珍珠丸对缺血性脑卒中大鼠的保护作用。将90只4周龄的SPF级SD雄性大鼠随机平均分成6组(n=15):假手术组、模型组、尼莫地平组(12 mg·kg^(-1))、二十五味珍珠丸高剂量组(400 mg·kg^(-1))、二十五味珍珠丸中剂量组(200 mg·kg^(-1))、二十五味珍珠丸低剂量组(100 mg·kg^(-1))。模型组、尼莫地平组、二十五味珍珠丸组采用改良的线栓法制作永久性大脑中动脉闭塞模型(permanent middle cerebral artery occlusion model,PMCAO),假手术组不插入线栓。造模手术前尼莫地平组和二十五味珍珠丸组每天灌胃给药1次,连续24 d,并于造模前1 h给药1次,假手术组和模型组给予等体积蒸馏水灌胃。测定存活大鼠的神经行为学评分;采用TTC法检测大鼠脑梗死体积;采用HE法观察大鼠脑组织病理学;采用ELISA检测血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)表达水平;采用RT-PCR检测大鼠脑组织中Notch 1、Jagged 1、Hes 1、Bcl-2 mRNA的表达;采用Western blot检测大鼠脑组织中凋亡相关因子caspase-3蛋白的表达;采用免疫荧光法检测大鼠脑组织血管内皮生长因子(VEGF)、CD34阳性细胞表达水平。二十五味珍珠丸低、中、高剂量组及尼莫地平组可显著降低永久性大脑中动脉闭塞大鼠神经行为学评分及脑梗死体积,减少神经细胞形态学改变,降低大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6表达,提高SOD、CAT活力,降低MDA水平。并且上调Notch 1、Jagged 1、Hes 1及Bcl-2 mRNA表达水平,降低caspase-3蛋白表达水平。同时治疗组中VEGF、CD34阳性细胞数增加,差异均有统计学意义。二十五味珍珠丸对缺血性脑卒中大鼠具有保护作用,其机制可能与抗炎、抗氧化、促进神经细胞增殖、抑制神经细胞凋亡及促进血管新生有关。     

化浊解毒活血通络法对脑缺血再灌注损伤小鼠行为学及海马CA1区神经细胞形态学的影响

目的：观察应用化浊解毒活血通络法对脑缺血再灌注损伤小鼠学习记忆能力及海马CA1区神经细胞形态学的影响。方法：将50只昆明小鼠随机分为模型组、中药高剂量组、中药低剂量组、尼莫地平组、假手术组。前4组采用双侧颈总动脉结扎法合并尾端放血制造脑缺血再灌注模型,假手术组只分离颈总动脉不结扎。手术造模成功后假手术组、模型组灌服生理盐水,尼莫地平组灌服尼莫地平液,中药高剂量组、中药低剂量组分别给予高、低剂量的化浊解毒活血通络中药灌服。在治疗后进行行为学测试,并通过光镜观察小鼠海马CA1区的病理形态学改变。结果：与模型组相比,化浊解毒活血通络法能提高脑缺血再灌注损伤小鼠的学习成绩,改善小鼠海马CA1区的神经细胞形态学表现。结论：化浊解毒活血通络法对小鼠的脑缺血再灌注损伤有保护作用。     

化浊解毒活血通络法对脑缺血再灌注损伤小鼠行为学及海马神经细胞形态学的影响

目的探讨化浊解毒活血通络法对脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法将50只昆明小鼠随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组、尼莫地平组,每组10只。采用线栓法制造小鼠右侧大脑中动脉脑缺血再灌注模型。手术造模成功后假手术组、模型组灌服生理盐水20ml/(kg.d),尼莫地平组灌服尼莫地平液19.6g/(kg.d),中药高剂量组、中药低剂量组分别给予化浊解毒活血通络中药19.6g/(kg.d)及9.8g/(kg.d)灌服。均每日1次,14天后进行行为学测试,并通过光镜观察小鼠海马CA1区的病理形态学改变。结果与模型组相比,中药高剂量组能提高脑缺血再灌注损伤小鼠的学习和记忆成绩,改善小鼠海马CA1区的神经细胞形态学表现,并且优于尼莫地平组和中药低剂量组(P<0.05)。结论化浊解毒活血通络法对脑缺血再灌注损伤小鼠的行为学能力及海马CA1区的神经细胞具有保护作用,这可能是该法对抗脑缺血再灌注损伤的机制之一。     

白藜芦醇对脑缺血再灌注损伤后脑保护作用的研究

目的观察白藜芦醇对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响,探讨其可能作用机制。方法将32只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、白藜芦醇低剂量组、白藜芦醇高剂量组,每组8只。白藜芦醇低剂量组和白藜芦醇高剂量组大鼠分别给予白藜芦醇45 mg/kg和90 mg/kg灌胃,假手术组和模型组大鼠给予等体积的生理盐水灌胃,均每日1次,连续14 d。在末次灌胃2 h后,除假手术组外,其余组大鼠均采用线栓法制备脑缺血再灌注模型。采用姿势反射评分、平衡木测试评分、脱胶试验评分和神经功能缺损评分评估各组大鼠神经功能损伤情况,采用TUNEL染色检测各组大鼠海马区神经细胞凋亡率,采用Western blot技术检测各组大鼠脑组织中凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2及Wnt1蛋白的表达水平。结果模型组大鼠姿势反射评分、平衡测试评分、脱胶试验评分、神经功能缺损评分、海马区神经细胞凋亡率均显著高于假手术组(P均0.05),而白藜芦醇低、高剂量组各项评分及海马区神经细胞凋亡率均显著低于模型组(P均0.05),且白藜芦醇高剂量组均显著低于白藜芦醇低剂量组(P均0.05)。模型组大鼠脑组织中Caspase-3、Bax、Wnt1蛋白表达水平均显著高于假手术组(P均0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著低于假手术组(P0.05);白藜芦醇低、高剂量组大鼠脑组织中Caspase-3、Bax、Wnt1蛋白表达水平均显著低于模型组(P均0.05),Bcl-2蛋白表达水平均显著高于模型组(P均0.05),且白藜芦醇高剂量组各指标升高或降低幅度较白藜芦醇低剂量组更明显(P均0.05)。结论白藜芦醇可通过Wnt通路降低促凋亡蛋白的表达来抑制脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡,从而发挥神经保护作用。     

脑栓通胶囊对急性脑梗死模型大鼠炎症因子、MMP-9和TIMP-1表达及氧化应激指标的影响

目的探讨脑栓通胶囊对急性脑梗死模型大鼠炎症因子、MMP-9和TIMP-1表达及氧化应激指标的影响。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性组和实验组,采用改良线栓法制作急性脑梗死大鼠模型。假手术组自由饮水进食,模型组灌服纯净水,实验组灌服脑栓通胶囊,剂量120 mg/kg,阳性组以10 mg/kg灌服尼莫地平,每日1次,连续7 d。7 d后,测评各组大鼠的神经功能评分,观察比较各组大鼠炎症因子、MMP-9和TIMP-1表达及氧化应激指标。结果与假手术组比较,模型组大鼠的神经功能评分和神经行为学评分、TNF-α、CRP、IL-1β以及IL-6水平、MMP-9基因表达和MMP-9蛋白表达的相对丰度值以及MDA水平明显升高,TIMP-1基因表达和TIMP-1蛋白表达的相对丰度值、SOD、GSH以及CAT水平明显降低,具有显著差异(P 0.05)。给予药物干预后,阳性组和实验组大鼠的神经功能评分和神经行为学评分、炎症因子、MMP-9基因表达和MMP-9蛋白表达明显低于模型组(P 0.05),TIMP-1基因表达和TIMP-1蛋白表达的相对丰度值、SOD、GSH以及CAT水平明显高于模型组(P 0.05)。结论脑栓通胶囊可有效降低急性脑梗死模型大鼠炎症因子水平,改善MMP-9和TIMP-1表达,降低氧化应激指标。     

益血方对糖尿病合并脑梗死大鼠炎性因子的影响

目的探讨益气养阴活血方(益血方)对糖尿病合并脑梗死大鼠炎性因子的影响。方法选取60只SD大鼠,随机取10只为假手术组,除假手术组外,其他大鼠用高脂饲料喂养2周后,尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)复制2型糖尿病大鼠模型,挑选糖尿病造模成功的大鼠进行缺血性脑卒中模型复制,假手术组只分离不结扎。造模成功后随机分为模型组、二甲双胍+阿司匹林组(0.180 g/kg+0.27 g/kg)、益血方高剂量组(22.2 g/kg)及益血方低剂量组(7.4 g/kg)。连续给药治疗3周后,HE染色法观察各组大鼠脑、心、肾病理形态变化;ELISA法检测大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平;免疫组化法检测大鼠脑、心、肾组织核转录因子(NF-κB/P65)表达水平。结果与模型组比较,HE染色结果显示药物干预组大鼠脑、心、肾靶器官病理明显改善。ELISA结果显示益血方高剂量组大鼠炎症因子L-1β、IL-6、TNF-α水平明显降低,差异均具有统计学意义(P0.05或P0.01);益血方低剂量组大鼠炎症因子IL-1β、TNF-α水平明显降低,差异均具有统计学意义(P0.05)。免疫组化检测显示益血方高、低剂量组大鼠脑、心、肾组织NF-κB/P65表达水平下降,差异具有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论益血方具有明显的改善糖尿病合并脑梗死大鼠靶器官病理形态和降低炎症反应药理作用,其可能机制为抑制NF-κB激活,减少炎症因子L-1β、IL-6、TNF-α释放。     

化痰通络汤对MCAO大鼠脑保护作用及HMGB1-TLR4-NF-κB信号通路的影响

目的基于HMGB1-TLR4-NF-κB信号通路探讨化痰通络汤对脑缺血再灌注(MCAO)大鼠脑保护作用。方法将54只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、化痰通络汤组,其中模型组及化痰通络汤组行MCAO术,各组均于灌胃1 d、3 d、7 d后取材;比较各组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积、脑含水量、脑组织高迁移率族蛋白l(HMGB1)、Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)蛋白表达及炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)含量。结果各时间点神经功能缺损评分比较显示,化痰通络汤组较模型组有明显下降,组间比较差异有统计学意义(P0.05或P0.01);脑梗死体积比较显示,化痰通络汤组在各时间点脑梗死体积均小于模型组,组间比较具有明显差异(P0.01);化痰通络汤组1 d、3 d、7 d脑组织HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白表达均低于模型组,组间比较有明显差异(P0.05或P0.01);化痰通络汤组1 d、3 d、7 d脑组织炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量均低于模型组,组间比较差异有统计学意义(P0.05或P0.01);结论化痰通络汤对MACO大鼠的脑保护作用机制可能是通过抗炎症反应、阻断HMGB1-TLR4-NF-κB信号通路实现的。     

刺五加提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究刺五加提取物(ASE)对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法将120只大鼠随机分为6组,每组20只,分别为假手术组、模型组、尼莫地平组(15 mg·kg^-1)及ASE高、中、低剂量组(200、100、50 mg·kg^-1),每日1次,连续灌胃给药15 d。采用改良Longa法制备脑缺血再灌注损伤大鼠模型。进行神经功能缺损评分;红四氮唑(TTC)染色后计算脑梗死面积百分比;采用HE染色及TUNEL染色法进行脑组织病理学观察,计算顶叶区皮层及杏仁核区域的细胞凋亡百分率;ELISA法测定脑组织中白介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;利用试剂盒检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量。结果与假手术组比较,模型组大鼠的神经功能缺损评分及脑梗死面积百分比显著升高(P<0.001);顶叶皮层和杏仁核处存在大量凋亡细胞;脑组织中的SOD、GSH-Px活性显著降低(P<0.001),MDA、IL-6、IL-1β及TNF-α水平显著升高(P<0.001)。与模型组比较,ASE各剂量组大鼠脑组织中的IL-6、IL-1β含量显著降低(P<0.05,P<0.01);ASE中、高剂量组的神经功能缺损评分、脑梗死面积百分比、脑组织细胞凋亡百分率、MDA水平及TNF-α含量均显著降低(P<0.05,P<0.01),SOD活性显著升高(P<0.05,P<0.01);ASE高剂量组的GSH-Px活性显著升高(P<0.01)。结论 ASE对大鼠脑缺血再灌注损伤具有一定保护作用,其作用机制可能与提高脑组织抗氧化能力,抑制炎症细胞因子过度分泌,以及抑制组织细胞凋亡有关。     

复方红景天对大鼠缺血性脑损伤后海马组织细胞凋亡的影响

[目的]探讨复方红景天对大鼠缺血性脑损伤后海马组织细胞凋亡的影响。[方法]80只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平(阳性对照)组与复方红景天高、低剂量组,线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞模型。复制模型前7 d灌胃给药,1次/日,连续10 d。测定大鼠行为学指标及脑梗死比例;分离海马组织,TUNEL法检测神经细胞凋亡,免疫印迹技术检测Bax、Bcl-2蛋白表达情况。[结果]与假手术组相比,模型组大鼠横木行走实验评分升高,前肢握力下降,脑梗死比例增大(P0.01);凋亡阳性细胞明显增多,Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(P0.01)。与模型组比较,复方红景天高、低剂量组均能降低大鼠横木行走实验评分、增加前肢握力,降低脑梗死的比例(P0.05);降低大鼠海马组织神经细胞凋亡率,降低促凋亡蛋白Bax的表达,升高抑凋亡蛋白Bcl-2的表达(P0.05)。[结论]复方红景天通过抑制海马组织神经细胞的凋亡,发挥对缺血性脑损伤的保护作用,相关机制与抑制线粒体凋亡途径有关。