川芎平喘合剂对慢性阻塞性肺疾病肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖及对Rho激酶的影响

目的:观察川芎平喘合剂对肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖及对Rho激酶的影响。方法:体外培养PASMCs,分为对照组、模型组、川芎平喘合剂组(低、中、高浓度组)、Rho激酶抑制剂组。采用CCK-8方法测定PASMCs增殖,Western blot测定PASMCs中ROCK1、ROCK2表达水平。结果:与正常对照组相比,模型组PASMCs增殖明显升高,ROCK1、ROCK2表达增强;Rho激酶抑制剂组PASMCs增殖、ROCK1、ROCK2表达均显著低于模型组;与模型组相比,中、高剂量组PASMCs增殖水平显著降低,低、中、高剂量组ROCK1、ROCK2表达低于模型组,以高剂量组降低显著;低、中剂量组ROCK1、ROCK2表达均低于抑制剂组(P0.05或P0.01)。结论:川芎平喘合剂可明显抑制COPD相关肺动脉高压大鼠PASMCs增殖,与降低Rho相关蛋白表达有关。     

活血化瘀祛痰法对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响

目的:观察活血化瘀祛痰法对野百合碱(MCT)诱导的肺动脉高压大鼠的影响，探讨其作用机制。方法:SD大鼠60只随机分为假手术组、模型组、中药复方组、法舒地尔组。采用MCT腹腔注射诱导肺动脉高压大鼠模型。观察大鼠一般状态，采用生物信号采集系统测定肺动脉压力，HE染色观察肺血管病理形态变化，Western blot法检测肺动脉组织ROCKⅠ、ROCKⅡ蛋白表达。结果:与假手术组比较，模型组右心肥大指数(RVHI)、肺动脉压力、肺血管增殖程度高于假手术组(P<0.05或P<0.01),中药复方组、法舒地尔组大鼠RVHI、肺动脉压力、肺血管壁厚度均低于模型组(P<0.05或P<0.01)。模型组ROCKⅠ、ROCKⅡ水平均较假手术组升高(P<0.05或P<0.01);中药复方组、法舒地尔组ROCKⅠ、ROCKⅡ水平低于模型组(P<0.05或P<0.01);中药复方组与法舒地尔组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。结论:活血化瘀祛痰法对MCT诱导的肺动脉高压具有一定疗效，可降低肺动脉压力、改善肺血管重构，其机制与调节Rho激酶信号通路有关。     

法舒地尔对VEGF诱导肺动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用

肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）增殖是肺动脉高压（PAH）中肺动脉重塑的一个重要因素.各种刺激均可促进PASMCs的移行和增殖,导致动脉壁增厚和PAH的形成[1].血管内皮生长因子（VEGF）可以促进PASMCs的增殖[2,3],在严重的PAH发病过程中,VEGF控制着毛细血管前动脉的重构[4].小G蛋白Rho及其效应物Rho激酶（ROCK）信号通路在各种细胞功能中,包括血管平滑肌细胞的收缩和增殖中都起着重要作用.     

血府逐瘀汤含药血清对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖及PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响

目的研究血府逐瘀汤含药血清对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响及其机制。方法低氧诱导大鼠PASMCs增殖,设置正常对照组、低氧模型组、血府逐瘀低剂量组、血府逐瘀高剂量组和NVP-BEZ235组,血府逐瘀低、高剂量组含药血清浓度分别为5%和20%。运用CCK-8法检测不同低氧时间和药物干预对于PASMCs增殖的影响,Western Blot检测细胞p-Akt、p-mTOR和PCNA表达。结果低氧培养36 h时PASMCs OD值最高,且高于常氧培养(P0.01);与正常对照组比较,低氧模型组OD值明显升高(P0.01),p-AKT、p-mTOR、PCNA表达增加(P0.05);与低氧模型组比较,血府逐瘀高剂量组和NVP-BEZ235组OD值不同程度降低(P0.01),各药物组p-AKT、p-mTOR、PCNA表达减少(P0.05);与血府逐瘀低剂量组比较,NVP-BEZ235组p-AKT、p-mTOR、PCNA表达减少(P0.05)。结论血府逐瘀汤含药血清可以抑制低氧诱导的大鼠PASMCs增殖,可能通过阻断PI3K/Akt/mTOR信号通路活化并下调PCNA表达而发挥作用。     

益肺活血颗粒对缺氧培养大鼠肺动脉 平滑肌细胞NO,iNOS的影响

目的:观察益肺活血颗粒对缺氧条件下大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)一氧化氮(NO)产生及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性的影响。方法:采用组织块贴壁法培养大鼠PASMCs,取对数生长期PASMCs随机分为常氧组,缺氧组,缺氧+益肺活血颗粒组(7.5,1.5,0.15 g.L-1)。利用硝酸还原酶法测定各组PASMCs NO的产生,RT-PCR测定iNOS mRNA的水平,免疫组化法测定胞内iNOS蛋白的表达量。结果:与单纯常氧组相比,缺氧组PASMCs iNOS转录和翻译增强,NO生成显著升高(P<0.05);且与单纯缺氧组相比,益肺活血颗粒组随着药物浓度的增加,可进一步提高PASMCs iNOS的活性和NO的生成(P<0.05)。结论:益肺活血颗粒可以促进缺氧条件下PASMCs NO产生及iNOS活性和表达,其可能是通过提高iNOS基因的转录和蛋白的表达来实现,从而抑制PASMCs的增殖及介导血管的舒张,在缺氧性肺动脉高压方面有着独特的疗效。     

茶多酚对缺氧诱导的大鼠肺动脉高压及右心室肥厚的影响

目的:探讨茶多酚对缺氧诱导的大鼠肺动脉高压及右心室肥厚的干预作用。方法:24只SD大鼠随机均分为正常对照组、缺氧组和茶多酚组。缺氧前茶多酚组大鼠每日予茶多酚[200 mg/(kg·d)]灌胃,正常对照组和缺氧组大鼠给予等体积生理盐水灌胃,随后茶多酚组和缺氧组大鼠置于常压低氧舱内间断缺氧4周(8 h/d,6 d/w)。4周后比较各组的平均肺动脉压(m PAP)、右心室肥厚指数(RVHI)及肺小动脉管壁厚度,比较肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)凋亡情况。结果:缺氧组大鼠的m PAP、RVHI及肺小动脉管壁厚度均比正常对照组显著升高(均P<0.01),且PASMCs凋亡明显减少(P<0.01);茶多酚组m PAP及RVHI与缺氧组相比均明显降低(P<0.05或P<0.01),肺小动脉管壁增厚程度减轻,而PASMCs凋亡明显增加(P<0.05)。结论:茶多酚能降低肺动脉高压大鼠的肺动脉压,促进肺动脉平滑肌细胞凋亡,改善右心室肥厚,具有抗肺动脉高压的作用。     

川芎嗪对肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响

目的:观察川芎嗪对野百合碱(MCT)引起的肺动脉高压大鼠肺动脉压力及肺血管重构的影响。方法:将30只雄性SD大鼠随机分为3组各10只。MCT组和治疗组建立大鼠肺动脉高压模型。对照组、MCT组以生理盐水灌胃,每天2 mL,每天1次,连续20天;治疗组以川芎嗪80 mg/(kg·d),每天灌胃1次,连续20天。检测平均肺动脉压力(mPAP)、右心室肥大指数(RVHI)、肺血管增殖细胞核抗原(PCNA)和α-平滑肌肌动蛋(α-SMA)的表达。结果:对照组大鼠的mPAP低于MCT组(P0.01);治疗组、对照组大鼠的mPAP、RVHI较MCT组降低(P0.01);MCT组肺血管PCNA及α-SMA表达较治疗组、对照组增加。结论:川芎嗪可降低MCT引起的肺动脉高压大鼠肺动脉压力,减轻大鼠肺动脉重构。     

基于络病学探讨内毒素“二次打击”急性肺损伤大鼠的Rho/ROCK机制及川芎嗪的保护作用

目的:研究内毒素血症"瘀滞络脉"急性肺损伤大鼠的Rho/ROCK机制及川芎嗪的保护作用。方法:以内毒素"二次打击"建立大鼠内毒素血症"瘀滞络脉"急性肺损伤模型,分别设正常对照组、模型组、川芎嗪低剂量组、高剂量组,测定呼吸频率、肺泡灌洗液中性粒细胞(PMN)百分率、肺湿/干重比、肺组织髓过氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO)活性、ROCK mRNA表达量,并观察、评估肺组织损伤严重程度。结果:与模型组相比,川芎嗪显著降低呼吸频率、PMN百分率、肺湿/干重比、MPO活性、ROCK mRNA表达量,减轻大鼠急性肺损伤病理改变。结论:川芎嗪可能通过抑制Rho/ROCK通路对内毒素血症"瘀滞络脉"大鼠急性肺损伤有较好的保护作用。     

金芪枳术汤对糖尿病胃轻瘫GK大鼠胃动力的影响

目的观察金芪枳术汤对糖尿病胃轻瘫(DGP)GK大鼠胃动力的影响,探讨其作用机制。方法 80只雄性GK大鼠随机选取12只作为正常组,其余68只给予高糖高脂饲料不规则喂养8周制备DGP模型,成模大鼠随机分为模型组、阳性药组和金芪枳术汤低、中、高剂量组,干预12周,测定胃内色素残留率,ELISA检测血浆多巴胺(DA)、乙酰胆碱(ACh)、5-羟色胺(5-HT)含量,HE染色观察胃窦组织病理变化,透射电镜观察胃窦组织黏膜层超微结构,Western blot检测胃窦组织Rho A、ROCK1、ROCK2蛋白表达。结果与正常组比较,模型组胃内色素残留率升高,DA、ACh、5-HT含量降低,Rho A、ROCK1、ROCK2蛋白表达降低(P0.01);与模型组比较,阳性药组和金芪枳术汤高剂量组胃内色素残留率降低,DA、ACh、5-HT含量明显升高,Rho A、ROCK1、ROCK2蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01),胃窦组织病理变化和黏膜层超微结构明显改善;与阳性药组比较,金芪枳术汤高剂量组胃内色素残留率、DA含量及Rho A、ROCK1、ROCK2蛋白表达差异均无统计学意义(P0.05);与金芪枳术汤低剂量组比较,金芪枳术汤高剂量组胃内色素残留率明显降低,DA、ACh、5-HT含量明显升高,Rho A、ROCK1、ROCK2蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01)。结论金芪枳术汤能提高DGP大鼠胃动力,促进胃排空,改善和修复胃窦组织黏膜层损伤,这可能与其调节Rho A/ROCK信号通路蛋白表达有关。     

肺络瘀阻与COPD合并肺动脉高压的相关性研究

目的：通过观察COPD合并肺动脉高压大鼠肺血管病理变化及血管内皮功能的变化,探讨肺络病变与COPD合并肺动脉高压的相关性。方法：采用一次性腹腔注射MCT（60mg/kg）复制COPD合并肺动脉高压大鼠模型,常规饲养28天后处死并收集大鼠血清及肺组织标本。应用HE染色及免疫组织化学技术观察肺小动脉病理形态学变化及VEGF在肺小动脉血管壁的表达;采用放射免疫及硝酸还原酶法分别测定肺组织匀浆中ET-1、NO含量;采用ELISA法测定血清中VEGF水平。结果：模型组大鼠在细支气管周围或其它部位的小动脉可见管腔变小、狭窄,甚至不完全闭锁,血管中膜变厚且平滑肌细胞增生肥厚明显,肺血管损伤明显,内皮细胞变性肿胀增生,突向血管腔内,甚至坏死脱落,免疫组化显示模型组VEGF表达明显高于正常对照组（P〈0.01）;与正常组相比较模型组大鼠肺组织匀浆中NO表达明显减少（P〈0.01）,ET-1水平明显升高（P〈0.05）;模型组血清中VEGF表达明显高于正常组（P〈0.01）。结论：一次性腹腔内注射MCT即可引起肺血管内皮细胞损伤、促使大鼠肺小血管结构重建,从而诱导肺动脉高压形成,与COPD渐进为肺动脉高压的病理特点相符合;COPD合并肺动脉高压大鼠肺血管舒缩功能异常与久病入络,导致肺络中气滞、血瘀、津凝或脉络损伤密切相关。     

Effects of San-Huang-Xie-Xin-Tang on U46619-induced increase in pulmonary arterial blood pressure

ETHNOPHARMACOLOGICAL RELEVANCE: San-Huang-Xie-Xin-Tang (SHXT), composed of Coptidis rhizoma, Scutellariae radix and Rhei rhizoma, is traditionally used to treat hypertension. AIM OF THE STUDY: Our aim was to investigate the pharmacology effect of SHXT on a thromboxane A(2) analogue U46619-induced increase in pulmonary hypertension and protein expression in primary pulmonary smooth muscle cells (PASMCs). MATERIALS AND METHODS: Arterial blood pressure and isometric tension in the aorta and pulmonary artery of rats were measured by pressure and force transducers, respectively. Protein expressions on PASMCs were detected by Western blotting. RESULTS: SHXT significantly attenuated U46619-induced increase in arterial blood pressure. The inhibitory effect of SHXT on pulmonary arterial pressure was greater than systemic arterial pressure in U46619 treated rats. Similarly, the inhibitory effect of SHXT on U46619-induced vasoconstriction in rat pulmonary arterial rings was greater than that in aortic rings. In U46619 treated PASMCs, SHXT down-regulated expression of phosphodiesterase type 5 (PDE5), Rho-kinase (ROCK) II, cyclooxygenase-2 (COX-2) and up-regulated expression of soluble guanylyl cyclase (sGC) alpha(1) and sGCbeta(1). CONCLUSIONS: SHXT attenuated U46619-induced increase in systemic and pulmonary arterial blood pressure. Inhibition of PDE5, ROCK-II, COX-2 and stimulation of sGC may play important roles in the cardiovascular effects of SHXT.     

肺心宁治疗73例慢性阻塞性肺疾病肺动脉高压

目的探讨肺心宁对慢性阻塞性肺疾病肺动脉高压的作用。方法将73例慢性阻塞性肺疾病(COPD)肺动脉高压气虚血瘀证患者随机分为肺心宁治疗组34例和欣然片(硝苯地平控释片)对照组39例。观察治疗前后的肺动脉收缩压(PASP)、肺功能、血液流变学的变化。结果肺心宁方能在一定程度上降低肺动脉压,改善肺功能,降低血液黏稠度,疗效优于对照组。结论以温阳活血立论的肺心宁方对COPD肺动脉高压疗效确切。     

替米沙坦对慢性阻塞性肺疾病合并高血压患者血压和肺功能影响的临床观察

目的 慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者约有30%合并高血压.本研究旨在探讨替米沙坦对慢性阻塞性肺疾病合并高血压患者血压及肺功能的影响,为该类患者选择用药提供参考.方法 筛选符合COPD及高血压诊断的患者80例,按随机的方法分为替米沙坦治疗组和氨氯地平治疗组.在COPD传统治疗的基础上,替米沙坦治疗组应用替米沙坦进行降压治疗,氨氯地平组则以氨氯地平进行降压治疗.观察周期为24周,治疗前后观察患者的血压控制及肺功能(FEV1)情况.结果 替米沙坦治疗组更有效地控制血压,且肺功能改善要优于氨氯地平组,P＜0.05.结论 COPD合并高血压患者,替米沙坦有较好的疗效,无明显副作用,值得临床推广.     

中医药对各型慢性阻塞性肺疾病大鼠核因子κB和γ-谷氨酰半胱氨酸合酶表达的影响

目的 通过观察慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠核因子κB和γ-谷氨酰丰胱氨酸合酶（γ-GCS）水平的变化，探讨中医药治疗COPD的机理。方法 采用改良烟熏加气管滴加脂多糖方法复制COPD模型，以免疫组化法检测核因子κB和γ-GCS水平：二次造模后，各治疗组分别灌服相应证型的中药合剂，连续14天。寒痰蕴肺治疗组灌服小青龙汤煎剂，痰热阻肺治疗组大鼠灌服麻杏石甘汤煎剂，肺气虚治疗组灌服王屏风散煎剂，脾气虚治疗组灌服六君子汤煎剂，肾气虚治疗组灌服人参蛤蚧散煎剂，模型组大鼠每天给与2mL.生理盐水灌胃。空白对照组不做任何干预。结果与空白对照组相比，各模型组γ-GCS、NF-κB在支气管和肺泡上皮等都为高表达；经过中药治疗后，阳性表达率有明显降低，其差异均有显著性（P〈0．05），结论 通过辨证论治各中药方剂能纠正COPD大鼠的氧化／抗氧化失衡，减少炎性反应，从而有效治疗COPD。     

七龙天对实验性肺动脉高压大鼠ET-1、LTC4的影响

目的观察七龙天对实验性肺动脉高压（PAH）大鼠内皮素1（ET-1）、白三烯C4（LTC4）的影响。方法雄性SD大鼠随机分为6组：空白对照组（A）、模型组（B）、硝苯吡啶组（C）、七龙天低剂量组（D）、七龙天中剂量组（E）、七龙天高剂量组（F）。空白对照组大鼠以等量0.9%NaCl溶液腹腔注射,其余各组均以野百合碱（MCT）腹腔注射复制PAH模型造模。制模后14天开始,各组分别定时灌胃给药,每日1次,连续给药8天至检查前12h停药。以改良右心导管术测定肺血流动力学参数,用放射免疫（RIA）法测定血浆ET-1,酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清LTC4的变化。结果与A组比较,其余各组大鼠PASP、PADP、MPAP、ET-1、LTC4水平较空白对照组均有所升高,且B组升高最显著（P〈0.01）;与B组比较,C、D、E、F组均可降低大鼠PASP、PADP、MPAP、ET-1水平（P〈0.05,P〈0.01）;与C、D组比较,E、F组大鼠PASP、PADP、MPAP、ET-1水平降低更明显（P〈0.05）;各用药组对LTC4的影响差异无统计学意义（P〉0.05）。结论七龙天能够有效降低实验动物的肺动脉压,其机制与降低ET-1含量有关。     

稳心草黄酮类化合物对肺动脉平滑肌细胞增殖及其TGF-β表达影响的实验研究

目的：研究稳心草黄酮类化合物对大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMs）增殖和TGF-β表达水平的影响,探讨其防治肺动脉高压的疗效及作用机制。方法：组织帖块法培养大鼠肺动脉平滑肌细胞,MTT法确定高、中、低剂量分组及作用时间。MTT法进行细胞计数,流式细胞仪进行细胞周期测定,ELISA法进行细胞培养夜TGF-β含量测定。结果：贴块培养的细胞经电镜鉴定为动脉平滑肌细胞;台盼蓝染色倒置显微镜观察表明细胞生长状态良好。黄酮类化合物高、中剂量组细胞计数明显减少、细胞周期G0/G1期细胞增多,S期、G2/M期细胞减少;细胞TGF-β含量明显降低,与空白对照组比较有统计学意义（P〈0.05）;低剂量组与空白对照组比较无统计学意义（P〉0.05）。结论：稳心草黄酮类化合物可抑制大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖,延缓细胞周期进程,调节细胞分泌TGF-β水平。     

麻杏二三汤对COPD大鼠气道黏液高分泌MUC5AC、MUC5B表达的影响

目的观察麻杏二三汤对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道黏液高分泌的影响。方法36只SD大鼠随机分为正常组,模型组,阿奇霉素组,麻杏二三汤低、中、高剂量组,各6只。采用烟熏加气管内脂多糖滴入制备COPD模型。分别予以阿奇霉素及低、中、高剂量麻杏二三汤连续14 d灌胃干预,模型组予以等量0.9%氯化钠注射液。观察大鼠一般行为学表现;小动物肺功能仪检测大鼠肺功能指标;HE染色观察肺组织病理;酚红排痰实验检测气道黏液分泌;RT-PCR检测黏蛋白MUC5AC、MUC5B基因表达;Western blotting检测黏蛋白MUC5AC、MUC5B蛋白相对含量。结果与正常组比较,模型组大鼠肺组织HE染色符合COPD病理改变,肺阻力明显增加、肺顺应性明显下降(P<0.05),气道酚红排泌量及肺组织MUC5AC、MUC5B基因与蛋白明显增多(P<0.05)。与模型组比较,阿奇霉素组及麻杏二三汤中、高剂量组大鼠肺阻力明显减低(P<0.05),气道酚红排泌量及肺组织MUC5AC、MUC5B基因与蛋白明显减少(P<0.05)。结论下调MUC5AC、MUC5B基因与蛋白表达可能是麻杏二三汤治疗COPD气道黏液高分泌的作用机制之一。