水泡状胎块的分子病理诊断与研究进展

水泡状胎块(hydatidiform moles)是一组与妊娠相关的滋养细胞疾病,根据组织学形态和免疫组化等辅助手段诊断可重复性不高。该文就水泡状胎块的常规辅助诊断方法、分子病理诊断及研究进展进行综述,重点介绍STR基因分型检测在水泡状胎块诊断和分型中的应用及水泡状胎块发生、恶性进展相关机制的研究进展。     

水泡状胎块的内分泌学、免疫学和遗传学

妇女的胎块妊娠有两种,一种是完全水泡状胎块,另一种是部分水泡状胎块。这两种胎块妊娠从遗传学上看来很值得注意,因为前者是雄核发育,不含母方染色体,而后者可能是三倍体,常常带有两套父方染色体和一套母方染色体。完全水泡状胎块跟部分水泡状胎块不同,完全水泡状胎块的滋养层增生程度更高,而分泌更多的绒毛膜促性腺激素(HCG)到母体的血浆中。为要了解HCG     

印迹基因p57kip2蛋白在水泡状胎块诊断和分型中作用

目的 探讨p57kip2蛋白表达在水泡状胎块诊断和分型中的作用和意义.方法 应用免疫组化SP法检测p57kip2蛋白30例在完全性水泡状胎块(complete hydatidiform moles,CHMs)、25例部分性水泡状胎块(partial hydatidiform mole,PHMs)和20例水泡状流产(hydropic abortions,HAs)三组病变中的表达情况,正常成熟胎盘(normal mature placentas,NMPs)为正常对照.结果 p57kip2蛋白在10例NMPs、20例HAs组织中的细胞滋养层细胞、绒毛间质细胞和绒毛外滋养细胞团核表达阳性,合体滋养层细胞不表达;CHMs的绒毛间质细胞和细胞滋养层细胞p57kip2蛋白不表达,阳性表达仅见于绒毛外散在滋养细胞团中;25例CHMs的绒毛间质细胞和细胞滋养层细胞p57kip2均表达阳性.结论 p57kip2蛋白在CHMs和PHMs的表达和分布有明显差异,可作为胎块分型诊断的客观辅助指标,值得在国内妇产科病理诊断常规工作中推广应用.     

水泡状胎块中p57、survivin、Ki-67的表达及意义

目的研究p57、survivin、Ki-67在完全性水泡状胎块(complete hydatidiform mole,CHM)和部分性水泡状胎块(partial hydatidiform mole,PHM)中的表达情况,探讨其在水泡状胎块(hydatidiform mole,HM)诊断中的意义。方法应用免疫组化法检测p57、survivin、Ki-67在32例CHM、21例PHM和20例正常早孕绒毛中的表达。结果 CHM组p57的表达明显低于PHM、正常组;CHM组survivin的表达明显高于正常组;CHM组、PHM组Ki-67的表达均明显高于正常组。结论 p57可作为CHM与PHM、正常早孕绒毛鉴别的有用指标,对于p57都表达的PHM、早孕流产绒毛的鉴别,检测survivin、Ki-67的表达水平可有一定帮助。     

水泡状胎块排空前后单纯阴道转移结节的病理分析

根据水泡状胎块第一次刮宫、阴道转移结节及切除子宫的病理资料及尿中hCG测定的分析,发现水泡状胎块在排空前发生转移结节的12例,在切除子宫标本中无一例发生滋养细胞及绒毛的深肌层浸润。水泡状胎块排空后30例发生转移结节的切除子宫标本中,有11例呈深肌层浸润。经统计学处理P<0.05,差异有显著性。尿中hCG测定在排空前发生转移结节11例在4周内转为阴性;排空后发生转移的15例在4～8周转为阴性,4例在8周以上转为阴性,故此认为,单纯阴道转移发生在水泡状胎块发生前,比排空后预后更好。     

P57kip2蛋白表达与水泡状胎块分型的关系

目的探讨P57kip2蛋白在水泡状胎块分型诊断中的作用。方法完全性和部分性水泡状胎块分别为78和42例,应用免疫组织化学SP法检测其P57kip2蛋白表达情况。结果P57kip2蛋白在完全性水泡状胎块中表达主要呈弱阳性,在部分性水泡状胎块中以强阳性为主,在部分性水泡状胎块中的阳性率为(92.86%),显著高于完全性水泡状胎块(P<0.01)。结论检测水泡状胎块中P57kip2蛋白表达,有助于水泡状胎块的分型和判断预后。     

KCNQ1、p57~(KIP2)蛋白在水泡状胎块中的表达及意义

目的 观察母系印迹基因KCNQ1和p57KIP2在正常绒毛及水泡状胎块组织中蛋白的表达情况,探讨检测KCNQ1、p57KIP2蛋白对鉴别不同类型水泡状胎块组织的意义.方法 用免疫组化方法检测KCNQ1、p57KIP2蛋白在30例正常早孕绒毛组织、56例完全性水泡状胎块和26例部分性水泡状胎块中的表达情况,然后用多组秩和检验计算其与临床分型的关系.结果 KCNQ1、p57KIP2蛋白在完全性水泡状胎块中的表达明显低于正常早孕绒毛和部分性水泡状胎块.而在部分性水泡状胎块和正常早孕绒毛间,两者的表达呈正相关(P<0.01).结论 KCNQ1、p57KIP2蛋白在水泡状胎块组织中的表达与其临床分型显著相关,联合检测p57KIP2、KCNQ1对鉴别不同类型的水泡状胎块有临床意义.     

APOE和SORL1基因联合检测对阿尔兹海默病患者早期诊断的意义

目的探讨载脂蛋白E(APOE)和分拣蛋白相关受体L1基因(SORL1)基因联合检测对阿尔兹海默病(AD)患者早期诊断的临床意义。方法选择2017年10月-2018年10月我院神经内科收治的AD患者118例作为研究组,另选90例同期健康体检者作为对照组,采用qRT-PCR检测两组外周血白细胞中APOE和SORL1基因相对表达量,比较APOE、SORL1基因对AD联合诊断与单独诊断的效果。结果对照组APOE基因平均相对表达量明显低于研究组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组APOE基因平均相对表达量明显低于研究组,差异有统计学意义(P<0.05);APOE、SORL1基因联合诊断效果明显优于单独诊断效果,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 APOE和SORL1基因联合检测可互补二者单独应用时的不足,在阿尔兹海默病患者早期诊断中具有较好的应用价值,值得推广。     

妊娠滋养叶细胞疾病的超声诊断

妊娠滋养叶细胞疾病( gestational trophoblastic disease,GTD)是指一组来源于胎盘绒毛滋养细胞的疾病。包括葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒毛膜癌等。可以认为这几种疾病之间有一定联系,良性葡萄胎可能延续发展,经侵蚀性葡萄胎至绒癌。萄葡胎亚洲国家发病率比欧洲或北美高3~10倍[1]。约10%~20%的葡萄胎患者有可能发展为侵蚀性葡萄胎。绒癌除上述途径恶化而来外,也可直接发生于葡萄胎、流产或足月妊娠分娩以后。其临床诊断有一定困难,主要依靠病史、临床表现、HCG测定、诊断性刮宫等项检查。早期诊断与及时化疗是治疗成功的关键。近年来,随着超声显像技术的应用和发展,妊娠滋养叶细胞疾病的诊断率明显提高。现将其超声诊断的研究综述如下。     

游离β-HCG检测在滋养细胞肿瘤诊断中的意义

采用放射免疫与免疫放射分析法检测了滋养细胞疾病与肿瘤患者血清中的HCG及其游离β-亚单位(F-β-HCG),计算F-β-HCG/HCG比值,并与正常妊娠标本比较。结果,妊娠组于妊娠第5周后F-β-HCG/HCG比值平均为1.18％(0.07～5.90％);葡萄胎组为4.25％(0.08～11.00％),显著高于妊娠组P〈0.005;侵蚀性葡萄胎组为7.d7％(0.30～21.20％)显著高于妊娠组与葡萄胎组,P〈0.005;绒癌组为11.25％(0.80～30.00％),显著高于妊娠组与葡萄胎组,P〈0.005。提示,在葡萄胎和滋养细胞肿瘤时F-β-HCG显著增高,检测F-β-HCG,计算F-β-HCG/HCG比值有助于滋养细胞疾病与肿瘤的诊断和鉴别诊断。     

自身抗体联合检测对系统性红斑狼疮诊断的意义

为了评价抗核小体抗体(anti-nucleosome antibody,AnuA)、抗Sm抗体、抗双链DNA(double stranded-DNA,dsDNA)抗体、抗核糖体P蛋白(ribosomal P protein,rRNP)抗体联合检测对系统性红斑狼疮(SLE)诊断的价值,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定123例SLE患者、61例其他结缔组织病患者和30名健康对照者血清中An.uA、抗dsDNA抗体、抗Sm抗体、抗rRNP抗体含量.结果显示,AnuA、抗dsDNA抗体、抗Sm抗体和抗rRNP抗体在SLE患者中的阳性率明显高于疾病对照组和正常对照组;AnuA与抗dsDNA抗体的敏感性显著高于其他两种自身抗体;抗dsDNA抗体、抗sm抗体和抗rRNP抗体阴性的SLE患者中,AnuA阳性率为52.6%～68.0%;SLE活动期患者与非活动期患者AnuA、抗dsDNA抗体阳性率有显著性差别.四种自身抗体在SLE的诊断中有明显的互补作用,特别是AnuA和抗dsDNA抗体可以弥补其他抗体的不足;AnuA、抗dsDNA抗体与疾病活动性密切相关.AnuA与抗sm抗体或AnuA与抗dsDNA抗体的二联检测可明显提高其对SLE诊断的敏感性.AnuA、抗dsDNA抗体、抗Sm抗体三联检测的阳性率可达87%.自身抗体联合检测提高了诊断的敏感性,对SLE的诊断和治疗有重要意义.     

苦参碱联合阿霉素对乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨苦参碱(MA)对阿霉素(ADM)抗肿瘤作用的影响,以期为乳腺癌的治疗提供新的靶点.方法:MTT法分别检测不同浓度(0,0.125,0.25,0.5,1.0,2 g/L) MA、不同浓度(0,0.625,1.25,2.5,5,10 mg/L) ADM以及ADM(0.4 mg/L)与MA(0.5 g/L)合用对乳腺癌细胞株MCF -7的增殖抑制作用.溴化丙啶(PI)单染检测MA(0.5 g/L)联合ADM(0.4 mg/L)诱导MCF -7细胞凋亡的影响.结果:随着药物作用时间以及药物浓度的增加,MA、ADM以及两种合用对MCF -7细胞增殖的抑制作用逐渐增强.0.5 g,/LMA诱导MCF -7细胞凋亡率低,仅为12.58％,0.4 mg/LADM诱导MCF -7细胞凋亡率为35.12％;而0.5 g/LMA与0.4ng/LADM联合使用诱导MCF -7细胞凋亡率为68.11％,明显高于ADM或MA单独使用.结论:MA、ADM及二者联用对MCF -7细胞的增殖抑制作用具有时间依赖性和剂量依赖性.MA本身诱导MCF -7细胞凋亡率低,但它能增加ADM诱导MCF -7细胞的凋亡率.MA可作为抗癌药的化疗增敏剂.     

血清HCG RIA对滋养叶细胞肿瘤的诊断与监测

绒毛膜促性腺激素(HCG)为滋养叶细胞所分泌,测定HCG含量是监测恶性滋养叶细胞肿瘤最好的标志物。现已广泛应用于妇产科疾病和肿瘤诊断。作者自1985～1991年采用放射免疫分析法(RIA)对110例滋养叶细胞肿瘤患者的血清HCG进行了测定,并着重对恶性肿瘤患者HCG含量变化进行观察。现将结果报告如下。资料和方法一、检测对象:全部病例均系本院妇产科住院及门诊治疗随访患者。110例滋养叶细胞肿瘤患者中葡萄胎15例,恶性葡萄胎(简称恶葡)45例,绒毛膜上皮癌(简称绒癌)50例。上述病例均经临床、手术及病理证实。年龄20～50岁,平均29.6岁,20～40岁者100例占90.9％。病程最短者16天,最长达193天,恶葡及绒癌病程较葡萄胎长。恶葡转移者19例(肺转移16例,阴道转移3例),     

七项生物标志物联合检测对胰腺癌诊断的意义

探讨七项生物标志物联合分析对胰腺癌诊断的价值.采用CLIA、ELISA、凝固点检测法和生物化学分析法对125例胰腺癌患者、48例胰腺癌肝转移患者、40例胰腺良性肿瘤患者及60名正常人测定CA19-9、CA242、CEA、β2-MG、PALB、Fib和D-D水平,并分析其临床诊断价值.结果表明,CA19-9、CA242、CEA、β2-MG、PALB、Fib和D-D联合检测可使胰腺癌诊断的敏感性提高至96.0%.对不同的组织学分级,Fib差异没有统计学意义(P＞0.05),而CA19-9、CA242、CEA、β2-MG、PALB和D-D差异有统计学意义(P＜0.05).胰腺癌及胰腺癌肝转移患者CA19-9、CA242、CEA、β2-MG、Fib和D-D水平均升高,而PALB降低;联合检测可提高胰腺癌诊断的敏感性.     

胎肺中生存素和相关凋亡调控基因的表达及生物学意义

检测生存素(Survivin)和Caspase-3、Bax、p53在人胎肺发育过程的表达特征，探讨它们在胎肺发育中的意义。取16-35周人胎肺15例，中性福尔马林固定，石蜡包埋，5μm厚切片，常规HE染色；免疫组化SP法检测Survivin、Caspase-3、p53和Bax在胎肺中的表达特征。结果表明胎肺发育过程中，Survivin主要表达于远端支气管上皮和原始肺泡上皮，     

妊娠期糖尿病中胎盘外泌体对滋养细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响

目的：探讨妊娠期糖尿病（GDM）中胎盘外泌体对滋养细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法： 选取2018 年3 月至2019 年4 月间重庆市第七人民医院50 例诊断为GDM患者（GDM组）,另选取50 例正常孕产 妇作为对照组。分离纯化GDM组和对照组孕产妇外周血血浆中的胎盘外泌体,通过透射电镜观察外泌体的形 态,纳米粒径分析检测外泌体的直径,免疫印迹检测外泌体标志性蛋白CD63、TSG101 及胎盘标志性分子胎盘 碱性磷酸酶（PLAP）的表达。PKH67染色后荧光共聚焦显微镜观察体外培养滋养细胞系对外泌体的摄取情况; 应用MTT实验检测外泌体对滋养细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测外泌体对滋养细胞周期的影响,Annexin V-FITC/PI 双染色结合流式细胞术检测外泌体对滋养细胞凋亡的影响。结果：成功从外周血中分离获得了胎盘外 泌体,形态呈典型的杯状或双凹状,直径为40 ～ 120 nm,CD63、TSG101、PLAP 表达呈阳性;与对照组相比, GDM组胎盘外泌体以浓度依赖性促进滋养细胞的增殖、细胞周期进展,并抑制滋养细胞的凋亡。结论：GDM中 胎盘外泌体可能通过促进滋养细胞的增殖、细胞周期进展,抑制滋养细胞凋亡等参与GDM的发生和发展。     

RNA干扰SHBG基因表达对滋养细胞增殖的影响

目的探讨RNA干扰技术抑制SHBG基因表达对滋养细胞增殖的影响。方法在体外通过RNA干扰技术,将SHBG si RNA转染至原代培养的人绒毛滋养细胞中,MTT法检测滋养细胞增殖情况。结果成功将SHBG si RNA转染人绒毛滋养细胞;转染后24、48、72h,SHBG si RNA转染组的细胞生长速度显著减缓,正常对照组(未经转染的细胞)、空白对照组(只转染脂质体,无si RNA)和阴性对照组(转染非特异性si RNA)的组间比较差异均无统计学意义(P0.05);转染组(SHBG si RNA-I,SHBG si RNA-II,SHBG si RNA-III)之间差异均无统计学意义(P0.05),各转染组分别与各对照组的组间比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论 si RNA可以有效干扰人绒毛滋养细胞SHBG基因的表达,抑制滋养细胞增殖的增殖活性。     

人胎肺细胞增殖与凋亡及其与发育分化的关系

用原位核酸末端杂交和免疫细胞化学技术，分别观察２８例１６－３２周人胎肺组织不同发育阶段的增殖与凋亡的表达特征。实验结果表明：支气管粘膜上皮细胞在胎肺发育的早、中期，细胞的凋亡与增殖均明显较晚期旺盛，而且两者均于胎肺发育的小管期达到最高峰；但凋亡与增殖细胞在不同发育时期各有不同的定位，提示细胞的凋亡与增殖行为在胎肺管腔发生及分支延伸过程中有不同作用。     

人胎肺细胞增殖与凋亡及其与发育分化的关系

<正> 目的:探讨增殖与凋亡这两种细胞学行为在同一个胚胎器官中的发生时间、表达规律以及它们对胚胎器官发育的影响,以了解这两种细胞行为在胚胎器官正常发生中各自的作用及相互的的联系.方法:采用原位核酸末端缺口杂交方法(TUNEL法)和增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学技术,分别观察了28例胎龄16-32周的人胎肺组织在不同胎肺发育阶段细胞凋亡与增殖的表达率、表达部位及其随发育时间的变化趋势.结果:发现支气管粘膜上皮细胞在胎肺发育的早、中期(即假腺期和小管期),细胞的凋亡与增殖均明显较晚期(原始囊泡期)旺盛,而且两者均于胎肺发育的第24周达到最高峰(阳性细胞表达率分别为0.5263±0.0085及0.3684±0.0238),但凋亡与增殖细胞在不同发育时期表达部位有动态的变化:早期以间质细胞为主,中期以各级支气管粘膜上皮为主,晚期以支气管树远端的单扁上皮为主,而且增殖与凋亡在分布部位上的变化与胎肺发育过程中支气管树的形成发生的需要相一致.结论:细胞的凋亡