人参皂苷通过调节HIF-1α-VEGF通路对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探究人参皂苷通过调节HIF-1a-VEGF通路对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法:选取30只6周龄SPF级SD大鼠,体质量200±30g,采用改良线栓法制作脑缺血再灌注损伤模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO),随机分为3组,空白对照组、模型组、人参皂苷治疗组。使用HE将大鼠脑组织细胞染色,观察缺血侧脑组织形态学变化;使用TUNEL染色,在12小时、24小时、36小时分别观察大鼠脑组织细胞凋亡情况;使用Westen Bolt和RT-PCR定性、定量检测大鼠HIF-1α、VEGF蛋白表达情况。结果:与空白组相比,模型组大鼠脑组织细胞明显出现凋亡;与模型组相比,人参皂苷治疗组大鼠脑组织细胞凋亡显著减少。与空白组相比,模型组大鼠脑组织细胞凋亡百分比显著升高(P0.01),人参皂苷治疗组大鼠脑组织细胞凋亡百分比有一定程度升高(P0.05);与模型组相比,人参皂苷治疗组大鼠脑组织细胞凋亡百分比显著降低(P0.01)。与空白组相比,模型组大鼠HIF-1α、VEGF蛋白表达显著升高(P0.01),与模型组相比,人参皂苷治疗组大鼠HIF-1α、VEGF蛋白表达显著上升(P0.01),且上升相比模型组更为显著。结论:人参皂苷可以通过提高HIF-1α、VEGF蛋白的表达水平,激活HIF-1α/VEGF通路,使血管新生能力增强从而减轻脑缺血再灌注损伤。     

针刺对光老大鼠皮肤组织中Bcl-2、Bax表达的影响及意义

目的:观察Bcl-2、Bax蛋白在光老化大鼠皮肤组织中的表达状况,探讨针刺抗大鼠皮肤光老化的作用机制。方法:将大鼠随机分成正常组、模型组、针刺组、阳性对照组,除正常组外,其余各组模拟日光中UV(UVA+UVB)照射,造成皮肤光老化模型,每次造模前,针刺组给予电针刺激,阳性对照组采用VE涂抹造模部位,15周后取皮肤组织采用免疫组织化学方法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达水平,利用计算机图像分析技术测量单位面积各组大鼠皮肤组织Bcl-2、Bax蛋白表达的灰度平均值作为其表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠Bcl-2蛋白表达明显降低(P0.05),Bax蛋白表达明显升高(P0.05)。针刺组和阳性对照组与模型组比较,Bcl-2蛋白表达提高(P0.05),Bax蛋白表达明显降低(P0.05)。结论:Bcl-2、Bax蛋白参与了皮肤光老化进程,针刺能够抑制皮肤光老化皮肤细胞凋亡,上调Bcl-2蛋白表达、下调Bax蛋白表达。     

绞股蓝总皂苷含药血清对皮肤光老化HaCaT细胞分泌炎症因子IL-1β、IL-6的影响

目的:研究绞股蓝总皂苷含药血清对皮肤光老化HaCaT细胞分泌炎症因子IL-1β、IL-6表达的影响.方法:选取20只大鼠,随机分为四组,每组5只,分别设为空白血清组、低剂量绞股蓝总皂苷含药血清组、中剂量绞股蓝总皂苷含药血清组、高剂量绞股蓝总皂苷含药血清组,采用UVB照射人工模拟光老化HaCaT细胞模型,照射后用含不同浓度绞股蓝总皂苷的大鼠血清进行干预,12h后采用ELISA方法检测各组细胞分泌IL-1β、IL-6的表达水平.结果:与空白对照组比较,UVB模型组细胞IL-1β、IL-6表达显著上调;与UVB模型组比较,低剂量绞股蓝总皂苷含药血清组、中剂量绞股蓝总皂苷含药血清组、高剂量绞股蓝总皂苷含药血清组细胞中IL-1β、IL-6表达显著下调(P＜0.01).结论:绞股蓝总皂苷含药血清可能通过抑制UVB辐射人皮肤角质细胞诱导炎症信号分子防护皮肤光老化.     

绞股蓝总皂苷对光老化HSF细胞MMP-3、TIMP-2mRNA及蛋白表达影响的实验研究

目的:观察绞股蓝总皂苷(gypenosides,GPs)含药血清对光老化人皮肤成纤维细胞株(HSF)MMP-3和TIMP-2 mRNA及蛋白表达的影响。方法:采用长波紫外线(UVA)照射方法建立老化HSF细胞模型,并给予含不同浓度GPs大鼠血清进行干预,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western-blot)法,分别对各组细胞MMP-3与TIMP-2 mRNA和蛋白表达进行检测。结果:与空白对照组比较,UV模型组细胞内MMP-3基因和蛋白表达显著增加,同时TIMP-2基因和蛋白表达显著减少。与UV模型组比较,低、中、高剂量含药血清组细胞内MMP-3基因和蛋白表达显著下降,TIMP-2基因和蛋白表达显著上升。结论:GPs通过抑制HSF细胞MMP-3表达,同时促进TIMP-2表达,恢复MMP-3与TIMP-2表达平衡状态,抑制基质金属蛋白酶对细胞外基质(胶原蛋白、蛋白多糖)的降解,为GPs抗皮肤光老化作用机制之一。     

人参皂苷Rg1对AD模型大鼠脑片P-Tau, caspase-3表达的影响

目的:研究人参皂苷Rg_1对AD模型大鼠脑片磷酸化Tau蛋白(Phosphory protein Tau,P-Tau)、半胱氨酸蛋白酶(caspase-3)表达的调控作用.方法:将5周龄的雄性Wistar大鼠脑片(含海马及皮层)随机分为5组:空白对照组,模型组,人参皂苷Rg,低、中、高(60,120,240 μmol·L~(-1))3个浓度组,每组10张脑片.脑片放置人工脑脊液中培养.人参皂苷Rg_1预防性加入人参皂苷Rg_1各组2 h后,模型组和人参皂苷Rg_1各组分别加入用冈田酸(okadaic acid,OA)3 h,诱导大鼠脑片Tau蛋白过度磷酸化制备AD模型,运用免疫组织化学、图像分析技术等方法,观察人参皂苷Rg_1预防性干预对各组大鼠脑片P-Tau,caspase-3表达的影响.结果:模型组P-Tau,caspase-3的表达水平明显高于空白对照组(P<0.01);人参皂苷Rg_1低、中、高浓度组与模型组比较,P-Tau,caspase-3的表达水平明显降低(P<0.01或P<0.05);P-Tau,caspase-3的表达随着人参皂苷Rg_1浓度增加而降低.结论:人参皂苷Rg_1可以降低P-Tau水平,从而减缓神经纤维缠结的形成;还可通过抑制凋亡效应蛋白caspase-3的表达,从而抑制神经元凋亡,保护神经细胞,发挥抗痴呆的作用.     

绞股蓝总皂苷干预光老化人皮肤角质形成细胞炎症分泌因子的研究

目的:研究绞股蓝总皂苷对光老化人皮肤角质形成细胞分泌炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达的影响。方法:选取10只大鼠,随机分为2组,每组5只,分别设为空白血清组、绞股蓝总皂苷含药血清组,分别用以制备空白大鼠血清和绞股蓝含药血清。应用UVB人工照射方法制备光老化人皮肤角质形成细胞模型,用含绞股蓝总皂苷的大鼠血清进行干预,12h后采用ELISA方法检测各组细胞培养上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α的水平。结果:与空白对照组比较,UV模型组细胞IL-1β、IL-6和TNF-α表达显著上调(P<0.01);与UV模型组比较,绞股蓝总皂苷含药血清组细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α表达均显著下调(P<0.01);与空白血清组比较,绞股蓝总皂苷含药血清组细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α表达均显著下调(P<0.01)。结论:绞股蓝总皂苷可抑制UV辐射人皮肤角质细胞分泌炎症因子,抑制皮肤光老化。     

人参皂苷Rg_5对胃癌BGC-823细胞增殖、凋亡及凋亡相关因子的影响

目的观察人参皂苷Rg_5对胃癌BGC-823细胞增殖、凋亡及凋亡相关因子Bcl-2相关X蛋白(BAX)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)表达的影响,探讨人参皂苷Rg_5抑制胃癌生长转移的可能作用机制。方法采用CCK-8法检测人参皂苷Rg_5对BGC-823细胞24、48 h的细胞增殖抑制作用,流式细胞术检测高、低浓度人参皂苷Rg_5对BGC-823细胞凋亡的影响,Western blot法检测凋亡相关因子Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果与空白组比较,人参皂苷Rg_550、100、200μmol/L 24 h存活率降低(P0.05),人参皂苷Rg_512.5、25、50、100、200μmol/L 48 h存活率降低(P0.05);与空白组比较,低浓度人参皂苷Rg_5凋亡率升高(P0.05),高浓度人参皂苷Rg_5凋亡率升高(P0.05);与空白组比较,高低浓度人参皂苷Rg_5组Bax蛋白表达均升高(P0.05),高浓度人参皂苷Rg_5组Bcl-2蛋白表达降低(P0.05)。结论人参皂苷Rg_5可有效抑制胃癌BGC-823细胞的增殖,促进BGC-823细胞凋亡,且其促进BGC-823细胞凋亡的机制可能与其降低线粒体途径相关的细胞凋亡因子Bcl-2蛋白的表达,升高Bax蛋白的表达相关。     

黄芪总皂苷对实验性脑出血大鼠脑水肿与神经功能的影响及作用机制

目的观察黄芪总皂苷对实验性脑出血大鼠脑水肿与神经功能的影响及作用机制。方法将大鼠分为假手术组,模型组和黄芪总皂苷低、中、高剂量组,制备脑出血模型,在造模成功1 d后分别腹腔注射给予50、100、200 mg/kg的黄芪总皂苷溶液,每日1次,持续给予7 d,假手术组和模型组给予等量生理盐水。在实验结束时进行神经功能缺损评分和脑含水量测定,Western blotting法检测脑水肿周围组织中Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达量,TUNEL法检测脑水肿周围组织中细胞凋亡情况。结果给予黄芪总皂苷干预后,与模型组比较,大鼠神经功能评分增高,脑组织含水量降低,差异有统计学意义(P 0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠脑水肿周围组织中Bax和Caspase-3蛋白表达水平及细胞凋亡率增加,Bcl-2蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P 0.05);给予黄芪总皂苷干预后,与模型组比较,大鼠脑水肿周围组织中Bax和Caspase-3蛋白表达水平及细胞凋亡率降低,Bcl-2蛋白表达水平增高,且具有一定剂量依赖性,差异有统计学意义(P 0.05)。结论黄芪总皂苷能减轻实验性脑出血大鼠脑水肿和保护神经功能,这种作用可能是通过抑制脑细胞凋亡有关。     

人参皂苷素Rb1预处理对异丙肾上腺素诱导大鼠急性心肌缺血心肌凋亡相关蛋白表达的影响

目的:研究人参皂苷素Rb1对异丙肾上腺素(ISO)致大鼠急性心肌缺血心肌细胞凋亡相关蛋白表达作用的影响。方法:采用异丙肾上腺素皮下多点给药注射建立大鼠急性心肌缺血模型,将大鼠随机分为5组,即空白组、模型组、葛根素对照组、人参皂苷素高、低剂量用药组(20.0、10.0 mg·kg-1),MOOR散斑观察心肌表面血流情况;HE法观察心肌病理情况;免疫组化法及WB法检测Bcl-2、Bax蛋白表达情况。结果:人参皂苷素Rb1各剂量组与模型组比较,心肌组织损伤的病理学变化明显减轻,人参皂苷素Rb1各剂量组提高大鼠急性心肌缺血Bcl-2蛋白表达量(P<0.05)、降低大鼠心肌缺血的Bax蛋白表达量(P<0.05)。结论:人参皂苷素Rb1对缺血心肌的保护效应可能与其抑制缺血心肌细胞凋亡有关。     

人参皂苷Rbl对小鼠皮肤光老化氧化应激的改善作用

【目的】 探讨人参皂苷Rbl对小鼠皮肤光老化的治疗作用及机制。【方法】 将成功构建的59只皮肤光老化模型小鼠随机分为模型组,人参皂苷Rbl低、高剂量组各15只,阳性对照组14只,另取15只为正常组。建模成功后第2天,人参皂苷Rb1低、高剂量组分别灌胃人参皂苷Rb1 50、100 mg/kg,阳性对照组灌胃维生素E 30 mg/kg,正常组和模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续给药30 d。干预结束,黄嘌呤氧化酶法测定血浆超氧化物歧化酶（SOD）水平,硫代巴比妥酸法测定血浆丙二醛（MDA）水平,酶联免疫吸附分析（ELISA）法测定血浆肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素1β（IL-1β）水平,苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠皮肤组织病理学变化并测量皮肤表皮厚度及纹理评分,蛋白免疫印迹法检测皮肤组织核因子 E2 相关因子 2（Nrf2）、Kelch 样环氧氯丙烷相关蛋白 1（Keap1）、血红素氧合酶 1（HO-1）蛋白相对表达水平。【结果】 模型组小鼠表皮层角质层增厚,细胞分层不清,真皮层纤维组织排列紊乱,分布不均,有大量炎性细胞浸润,人参皂苷Rb1低、高剂量组皮肤病理学变化得到改善,但仍可见表皮角质层增厚,真皮层纤维组织断裂、破碎,卷曲扭结,阳性对照组表皮稍有增厚,真皮层可见较完整的纤维组织,少见断裂、破碎,未出现卷曲扭结。与模型组比较,人参皂苷Rb1 低、高剂量组和阳性对照组皮肤表皮厚度及纹理评分,MDA、TNF-α、IL-6 和 IL-1β 水平降低,SOD 活性及 Nrf2、Keap1、HO-1蛋白相对表达水平升高（P < 0.05）。【结论】 人参皂苷Rbl可降低皮肤光老化小鼠体内氧化应激水平,促进光老化皮肤修复,可能是通过激活Nrf2/Keap1/HO-1信号通路发挥作用。     

Chemopreventive effect of Panax ginseng

Asian ginseng (Panax ginseng C. A. Meyer) has been used in Chinese medicine for two thousand years. The root of ginseng contains several saponins (ginsenosides) which are biologically active compounds. Individual ginsenosides suppress tumor cell growth, induce cell differentiation, regulate apoptosis and inhibit metastasis formation. The aim of this study was to evaluate its chemo‐preventive effects in an animal test model, through its regulatory effects on apoptosis and the cell cycle. The expression of genes (Bcl‐2, Bcl‐x and Cyclin D1) which affect apoptosis were examined, in different organs of animals which had consumed a ginseng‐containing diet in the presence of a known carcinogen (DMBA). The pattern of gene expression was determined by Q‐RT‐PCR. The increase of antiapoptotic gene expression after carcinogenic exposure was suppressed by consumption of ginseng which promoted apoptosis. The population is exposed to numerous physical and chemical insults in the modern environment and these include compounds which are known carcinogens. Research has shown that it is possible to interfere with the multi‐step process of carcinogenesis through the use of compounds with chemo‐preventive effects, such as the inhibition of the activation of antiapoptotic genes. These results support the efficacy of ginseng‐containing diets and dietary supplements in the prevention of cancerous diseases. Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.     

益母草对紫外线所致皮肤光老化防护作用的研究

目的:建立皮肤光老化动物模型并探讨益母草对紫外线所致皮肤光老化的防护作用。方法:采取高剂量中波紫外线和长波紫外线短期联合照射的方法,建立皮肤光老化的实验动物模型。每天每次紫外线光照后的间歇,在紫外线照射区域的皮肤上外涂益母草赋形剂。结果:正常皮肤、紫外线照射和外涂益母草赋形剂皮肤区域的各组小鼠皮肤组织中CAT、MDA、SOD、HyP、GSH-Px的含量均有变化,差异有显著性(P<0.01)。结论:短期高强度的紫外线照射能够引起皮肤光老化的表现;益母草对紫外线照射所致皮肤光老化的损害有保护和修复作用。     

人参皂苷抗金葡菌肺感染的作用

目的:观察研究人参皂苷对金葡菌感染的作用及其特点。方法:体外肺AⅡ型上皮细胞及小鼠肺感染为模型,观察金葡菌感染后细胞侵染相关因子、炎性相关因子以及细菌数和死亡率,以及人参皂苷及人参皂苷Rg1的作用。结果:金葡菌感染后,人参皂苷能够明显降低胞内菌含量,降低粘附因子及其整合素的表达,抑制相关炎性因子,人参皂苷Rg1是其主要活性成分。结论:在抗金葡菌急性感染过程中,人参皂苷发挥了对感染细胞和组织的保护作用,而这些作用不完全依赖于机体免疫系统的功能。     

人参皂苷生物转化研究进展

人参皂苷是人参属植物药理活性的重要物质,尤以稀有人参皂苷及苷元的抗肿瘤,保护神经系统,保肝护肝等药理活性最为显著,因此,研究稀有人参皂苷获取的方法也日益增多。该文对人参属植物中人参皂苷的生物转化进行了简要的概述和展望。     

人参总皂苷诱导K562细胞凋亡的实验研究

目的：研究人参总皂苷诱导白血病细胞凋亡及其机制，为进一步开发人参总皂苷提供实验依据。方法：采用细胞体外培养，图像分析技术、流式细胞术、形态学观察与免疫细胞化学等方法，研究人参总皂苷诱导K562细胞凋亡。结果：人参总皂苷对K562细胞有增殖抑制作用，并可诱导K562细胞凋亡明显增加，同时K562细胞癌基因产物C－MYC，BCL－2表达明显降低。结论：人参总皂苷能诱导K562细胞凋亡，其机制可能与调控癌基因产物的表达有关。     

人参皂甙对内毒素所致大鼠急性肺损伤的影响

目的:探讨人参皂甙对内毒素所致大鼠急性肺损伤的保护作用及作用机制。方法:将成年大鼠30只按雌雄对半分为3组(每组10只):正常对照组(A组)、内毒素组(B组)、人参皂甙组(C组)。股静脉注射LPS(5mg/kg)复制大鼠ALI模型,比较各组大鼠的一般状况,观测各组大鼠肺脏的大体形态,测定动脉血氧分压(PaO2),氧合指数(PaO2/FiO2),肺湿重/干重(W/D),做病理切片观察肺组织学改变及免疫组织化学法检测肺组织中SP-A蛋白水平的表达情况。结果:与A组比较,B组的PaO2,PaO2/FiO2显著降低(P<0.01),W/D显著增高(P<0.01);C组的PaO2,PaO2/FiO2相对降低(P<0.05),W/D相对增高(P<0.05),B组和C组间PaO2,PaO2/FiO2和W/D存在显著差异(P<0.01)。免疫组化半定量结果显示,A组大鼠肺组织中SP-A蛋白呈强阳性表达。B组与A组相比,明显减弱(P<0.01)。C组与B组相比,B组大鼠肺组织中SP-A蛋白明显增强,呈阳性(P<0.01)。结论:人参皂甙可能通过上调SP-A蛋白的表达保护急性肺损伤。     

密蒙花方对高糖状态下视网膜Mtiller细胞增殖的影响

目的从离体细胞研究层面,研究中药密蒙花方对高糖状态下视网膜Mfiller细胞损伤的保护作用。方法（1）采用大鼠视网膜Mfiller细胞在30mmol／L高糖下进行体外培养,模拟高糖环境,再分别给予20％含密蒙花方血清（以下均称合药血清）干预12h,24h、36h,观察密蒙花方含药血清对大鼠视网膜Mtiller细胞增殖的影响。（2）采用流式细胞仪AnnexinV—FITC／PI双色染色法观察密蒙花方对高糖状态下视网膜Mtiller细胞凋亡的影响。结果（1）高糖组较正常组吸光度（OD）值增高;含药血清组与高糖组相比,0D值明显降低,各合药血清组间比较,随着时间的延长,OD值逐渐降低,差异具有统计学意义（P〈0．05）。（2）高糖组较正常组细胞早期凋亡比例减少,活细胞比例增高,各含药血清组与高糖组相比,细胞早期凋亡比例增高,活细胞比例减少（P〈0．05）。密蒙花方通过诱导早期高糖状态下视网膜Mtiller细胞的早期凋亡,抑制细胞反应性增生,从而起到防护高糖状态下视网膜神经细胞损伤的作用。结论密蒙花方可以抑制早期高糖状态下视网膜Mfiller细胞的增殖。     

人参皂苷的提取及总皂苷纯化工艺的研究进展

人参皂苷是人参重要的有效成分,研究显示人参皂苷具有广泛的药理作用,并可以作用于机体多个系统。人参皂苷的提取是进行人参皂苷活性研究的重要前提,现有多种提取工艺被应用,虽都能够获得人参皂苷,但也导致了人参皂苷质量标准的不同,这为人参皂苷药理活性的基础研究以及人参皂苷的临床应用设置了障碍。联合优化相关工艺发现高效便捷且质量标准统一的高纯度人参总皂苷提取工艺,能够保证人参皂苷相关研究物质基础的一致性,同时在临床应用相关药物时可以根据最佳工艺的原理改变剂型或改变药物处理方法增加药物疗效,逆向应用则可以补充完善药物质量控制手段。本文就近年来关于人参皂苷分离纯化工艺和方法作一综述,为发展优化人参总皂苷的分离纯化工艺提供理论依据和参考。     

Triterpene saponins from Vietnamese ginseng (Panax vietnamensis) and their hepatocytoprotective activity

The methanol extract of Vietnamese ginseng (Panax vietnamensis) was found to possess hepatocytoprotective effects on D-galactosamine (D-GalN)/tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha)-induced cell death in primary cultured mouse hepatocytes. Further chemical investigation of the extract afforded two new dammarane-type triterpene saponins, ginsenoside Rh(5) (1) and vina-ginsenoside R(25) (2), as well as eight known dammarane-type triterpene saponins, majonoside R(2) (3), pseudo-ginsenoside RT(4) (4), vina-ginsenosides R(1) (5), R(2) (6), and R(10) (7), ginsenosides Rg(1) (8), Rh(1) (9), and Rh(4) (10), and a known sapogenin protopanaxatriol oxide II (11). Their structures were elucidated on the basis of spectral analysis. In addition, by the using LC-electrospray ionization (ESI)-MS method, five known saponins, ginsenosides Rb(1), Rb(2), Rc, Rd, and Re (12--16), were also identified in the extract. Among the compounds isolated, majonoside R(2) (3), the main saponin in Vietnamese ginseng, showed strong protective activity against D-GalN/TNF-alpha-induced cell death in primary cultured mouse hepatocytes. This demonstrates that the hepatocytoprotective effect of Vietnamese ginseng is due to dammarane-type triterpene saponins that have an ocotillol-type side chain, a characteristic constituent of Vietnamese ginseng.     

复合酶法提取人参总皂苷

目的在人参根及茎叶总皂苷提取工艺中引入酶因素,提高人参总皂苷提取率。方法以人参总皂苷提取率为指标,运用单因素实验及正交试验确定复合酶作用的最佳工艺。结果无酶条件下人参根中总皂苷的提取率为3.22%,复合酶辅助法提取人参根总皂苷的最佳工艺条件为:中温淀粉酶5%,中性蛋白酶1%,时间2 h,温度60℃,得提取率为5.44%;无酶条件下人参茎叶中总皂苷的提取率为5.85%,复合酶辅助法提取人参茎叶总皂苷的最佳工艺条件为:漆酶5%,纤维素酶5%,甘露聚糖酶1%,时间2 h,温度40℃,提取率为11.93%。结论复合酶辅助提取法能够显著提高人参总皂苷提取率,且工艺简单、稳定性好,可用于产业化生产。