直肠癌肠系膜静脉血CK20 mRNA的检测及其临床意义

目的　检测直肠癌肠系膜静脉血细胞角蛋白 2 0 (CK2 0 )mRNA ,并探讨其临床意义。方法　以RT -PCR方法检测 4 2例直肠癌术中肠系膜静脉血CK2 0mRNA。结果　 4 2例中 2 2例CK2 0mRNA阳性 ,阳性率 5 2 .4 %。随着病理分期的进展 ,肠系膜静脉血CK2 0mRNA阳性率升高 :DukesC +D期CK2 0mRNA阳性率高于DukesA +B期(P <0 .0 1)。随访发现 ,肠系膜静脉血阳性者远处转移率增高 (18.2 % )。结论　肠系膜静脉血CK2 0mRNA的检测可提高直肠癌临床分期的准确性 ;CK2 0mRNA阳性者 ,远处转移的可能性大。     

巢式RT-PCR技术检测肺癌76例微量癌细胞转移分析

目的 :建立检测肺癌患者外周血及淋巴结微转移癌细胞的敏感的分子检测方法 ,并探讨其临床应用的意义。方法 :采用巢式逆转录聚合酶链反应 ( RT- PCR)技术特异引物扩增 CK19- m RNA,以检测肺癌患者外周血及淋巴结中 CK19- m RNA的表达情况。分析CK19- m RNA扩增结果与患者临床指标的关系。结果 :76例肺癌患者外周血标本中 39例CK19- m RNA阳性 ,阳性率为 5 1 .3% ,2 7例肺良性病变中仅 1例阳性 ,阳性率为 3.7% ,1 5例健康对照者均为阴性。全部患者 1 5 7枚淋巴结中 CK19- m RNA检测出阳性率为 38.9%( 61 / 1 5 7) ,常规病理方法检出阳性率为 1 4.6% ( 2 3/ 1 5 7) ,两种方法比较 ,有显著性差异 ( P<0 .0 5 ) ,且 HE染色阴性的 1 34枚淋巴结中 ,经 RT- PCR法证实存在癌转移的阳性率为 2 8.3% ( 38/ 1 34) ,两组比较有显著性差异 ( P<0 .0 5 )。结论 :巢式 RT- PCR是一种特异性和敏感性均较高的癌细胞微量转移检测方法 ;可能有助于肺癌细胞微转移的早期诊断。     

KAI1基因在人结直肠癌的表达及临床意义

目的　探讨 KAI1基因在人结直肠癌的表达及其与结直肠癌转移的关系。　方法　用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)方法检测 4 5例结直肠癌组织 ,4例肝转移灶 ,10例淋巴结转移灶并同时取距癌边缘 >10 cm正常结直肠粘膜组织作对照组。　结果　 (1) 4 0例 (4 0 / 4 5 ,89% )结直肠癌组织 KAI1m RNA表达水平比相应的正常结直肠粘膜高(P<0 .0 1)。癌组织 KAI1m RNA表达水平与有无淋巴结转移呈负相关 (r=- 0 .5 6 6 ,P<0 .0 1)。伴淋巴结转移的结直肠癌 KAI1m RNA表达水平比不伴淋巴结转移低 (F=2 0 .2 2 8,P<0 .0 1)。转移淋巴结的 KAI1m RNA表达比相应的原发灶表达降低 (P<0 .0 5 )。(3)结肠癌组织 KAI1m RNA表达水平与临床 Dukes’分期负相关 (r=- 0 .4 74 ,P<0 .0 5 ) ,Dukes’C、D期表达均比 B期低 (P<0 .0 5 )。 (4 )结肠癌组织 KAIlm RNA表达与患者年龄、性别、肿瘤分化程度、肿瘤浸润肠壁深度、远处转移与否无明显关系 (P>0 .0 5 )。 (5 )多因素分析显示 ,有无淋巴结转移与癌组织 KAI1m RNA表达相关 (r=- 0 .735 ,P<0 .0 5 )。　结论　 KAI1表达增高可能参与结肠癌的早期阶段。结肠癌中 KAI1m RNA的表达与淋巴结转移、Dukes’分期呈负相关。KAI1m RNA表达降低与结肠癌的淋巴结转移密切相关。 KAI1     

CEA mRNA、CK20 mRNA在胃肠道肿瘤患者外周血、引流静脉血中的表达及临床意义

目的 :研究胃肠道肿瘤患者外周血、引流静脉血中CEAmRNA、CK2 0mRNA的表达与胃肠道肿瘤的临床病理联系及预后的关系。方法 :以CEAmRNA、CK2 0mRNA为指标 ,用RT PCR方法检测对照组 10例外周血 ,14例胃癌和 11例结直肠癌外周血及腹腔内引流静脉血中的肿瘤细胞。 结果 :对照组 10例无CEAmRNA、CK2 0mRNA表达 ,CEAmRNA、CK2 0mRNA在 2 5例胃肠道肿瘤患者外周血、引流静脉血中的阳性表达率分别为5 / 2 1(2 3.8% )、12 / 2 4 (5 0 % ) ,0 / 2 1(0 % )、0 / 2 4 (0 % )。CEAmRNA阳性表达率高于CK2 0mRNA阳性表达率 (P <0 .0 5 )。CEAmRNA在引流静脉血中的阳性率 (5 0 % )高于外周血中阳性率 (2 3.8% ) ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。 3例外周血、引流静脉血CEAmRNA阳性的患者半年内出现复发和转移。 2 5例病例中未发现CEAmRNA阳性表达与年龄、性别、肿瘤的浸润深度、分化、分期及淋巴结转移相关。 结论 :CK2 0mRNA在外周血、引流静脉血中表达非常不稳定 ,以CEAmRNA、CK2 0mRNA为指标监测肿瘤的复发或者作为预后的指标还需要扩大样本进一步的研究。     

甲胎蛋白mRNA在肝癌组织中的表达及其意义

目的 :探讨甲胎蛋白 (AFP) m RNA在肝癌组织中的表达及其临床意义。方法 :用巢式逆转录聚合酶链反应 (nestedRT- PCR)检测 19例肝细胞癌患者癌组织 AFP m RNA。结果 :16例 (88.9% )患者癌组织 AFP m RNA呈阳性表达 ,其外周血 AFP m RNA亦为阳性 ;而阴性表达的 3例其外周血 AFP m RNA和血清 AFP亦为阴性。癌组织 AFP m RNA阳性率在血清 HBs Ag阳性组 (93.8% )、合并肝硬化组 (10 0 % )和血清 AFP≥ 2 5 μg/ L 组 (10 0 % )高于 HBs Ag阴性组 (33.3% )、无合并肝硬化组 (5 7.1% )和 AFP<2 5 μg/ L 组 (5 7.1% ) (P <0 .0 5 )。相关分析显示外周血 AFP m RNA阳性率和血清 AFP水平均与癌组织 AFP m RNA阳性表达呈正相关 (r =0 .6 413,P <0 .0 5 ;r=0 .6 0 2 4,P <0 .0 5 )。癌组织 AFP m RNA阳性表达和血清 HBs Ag阳性表达及合并有肝硬化呈正相关 (r =0 .6 5 0 3,P <0 .0 5 ;r =0 .5 90 8,P <0 .0 5 ) ,而与有无门静脉癌栓或肝外转移及癌灶大小无相关性 (P >0 .0 5 )。结论 :大多数肝细胞癌的 AFP基因处于活化状态。外周血 AFP m RNA阳性表达和血清 AFP水平均与癌组织 AFP m RNA阳性表达有关     

大肠癌患者手术期间门静脉血中癌细胞CK20mRNA的检测及意义

目的:研究手术刺激对大肠癌患者门静脉血中癌细胞的影响。方法:应用RT-PCR技术,检测82例大肠癌患者术前和术后门静脉血中CK20mRNA的表达。结果:手术前54.9%的患者CK20mRNA表达阳性,CK20mRNA阳性检出率与Dukes分期、淋巴结转移、肝转移存在差别有显著性。手术后门静脉血中有76.8%的患者CK20mRNA表达阳性,较术前阳性表达明显增多(P<0.005)。结论:门静脉血液中癌细胞的存在是大肠癌的一种常见的早期事件,手术刺激可增加肿瘤细胞向门静脉血中释放。     

GCC mRNA在早期老年直肠癌患者淋巴结中的表达与预后的关系

目的:探讨早期老年直肠癌淋巴结中GCC mRNA表达与预后的关系及能否作为判定淋巴隐匿性转移的有效指标。方法:应用RT-PCR技术检测48例早期老年直肠癌淋巴结中GCC m RNA表达水平(GCC m RNA阳性组12例,GCC m RNA阴性组36例),并分析患者的局部复发率、远处转移率、3年无瘤生存率(DFS)、3年总生存率(OS)与不同GCC m RNA表达水平的关系。结果:GCC m RNA阴性组患者的局部复发率、远处转移率更低,3年无瘤生存率更高(P0.05)。两组3年总生存率无明显差异。结论:早期老年直肠癌淋巴结中GCC m RNA不同表达状态患者的预后有差异,GCC m RNA可以作为直肠癌淋巴结微转移的有效检测指标,可以作为甄别早期老年直肠癌高危患者的可靠分子学指标,有利于高危患者后续辅助治疗的选择。     

腹腔镜结直肠癌根治术对血循环微转移影响的研究

目的 检测腹腔镜结直肠癌根治术患者外周静脉血肿瘤标志物细胞角蛋白20(CK20) mRNA的表达,探讨腹腔镜结直肠癌根治术对术后肿瘤细胞血循环微转移的影响及临床意义.方法 应用FQ-PCR方法检测24例行腹腔镜辅助下结直肠癌根治术和31例传统开腹结直肠癌根治术患者外周静脉血的CK20 mRNA,并用免疫组化(IHC)SP法测定术后组织标本的CK20和CD44 v6的表达水平.结果 TNM分期Ⅲ期结直肠癌患者外周静脉血的CK20 mRNA阳性表达率显著高于Ⅰ期+Ⅱ期患者(P<0.05).腹腔镜辅助下结直肠癌根治术患者CK20手术开始时阳性率为29.16%(7/24),手术结束时阳性率为37.50%(9/24),两组之间差异无统计学意义(P>0.05),手术前后和开腹组比较,差异无统计学意义(P>0.05).CK20 mRNA阳性表达患者结直肠癌组织中CK20(57.14%)和CD44 v6(71.43%)阳性表达率明显高于CK20 mRNA阴性表达患者的CK20(35.29%)和CD44 v6(47.06 %)阳性表达率(P<0.05).结论 结直肠癌患者外周静脉血CK20 mRNA的水平和组织学分级、TNM分期、淋巴结转移有关,腹腔镜结直肠癌根治术和传统开腹手术一样,并不增加外周静脉血CK20 mRNA的阳性率,不增加术后肿瘤血行微转移的危险性.     

结直肠癌MDM2基因表达与生物学行为的关系

目的 :探讨结直肠癌MDM2癌基因异常表达与肿瘤生物学行为间的关系 ,为判断预后提供客观依据 .方法 :应用免疫组化技术检测MDM2 ,p5 3和PCNA在 72例结直肠癌的表达特点 .结果 :伴有肝转移的结直肠癌组MDM2和p5 3蛋白表达阳性率 (5 9.3%和 78.0 % )与非肝转移组 (30 .0 %和5 5 .0 % )比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 ) .结直肠癌伴淋巴结转移组MDM2和 p5 3蛋白表达阳性率 (5 8.8%和 79.4 % )明显高于与无淋巴结转移组 (2 8.9%和 5 2 .6 % ,) ,两者间有显著的统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;有静脉侵袭组MDM2表达阳性率 (6 0 .7% )高于无静脉侵袭组 (31 .8% ) ,MDM2基因异常表达同静脉侵袭有关 (P <0 .0 5 ) .结论 :MDM 2和p5 3基因蛋白阳性率与淋巴结转移、肝转移有明显相关性 ,MDM2和p5 3联合检测对评估结直肠癌预后有重要的临床价值     

pN0直肠癌患者淋巴结GCC mRNA表达与预后的关系

目的:探讨GCC mRNA在淋巴结阴性(pN0)直肠癌患者淋巴结中表达与预后的关系。方法:应用RT-PCR检测60例pN0直肠癌淋巴结中GCC mRNA表达水平,并分为GCC mRNA阳性组(pN0(mol+))16例与阴性组(pN0(mol-))44例。分析两组患者的局部复发率、远处转移率、无瘤生存期(DFS)与GCC mRNA表达水平的关系。结果:GCC mRNA阴性组的局部复发率及远处转移率更低(P0.05),无瘤生存期更长(P0.05);TNM分期中T3~T4淋巴结GCC mRNA表达阳性率明显高于T1~T2(P0.05)。结论:GCC mRNA表达水平与患者的预后密切相关,提示GCC mRNA可作为直肠癌淋巴结微转移的有效分子学检测指标。     

大肠癌患者手术前后血循环中癌细胞CK20m RNA检测的临床意义

目的:研究手术对大肠癌患者血循环中癌细胞的影响。方法:应用RT-PCR技术,检测82例大肠癌患者术前和术后血循环中CK20mRNA的表达。结果:在所有大肠癌患者血循环中术前有42.7%的患者CK20mRNA表达阳性,CK20mRNA阳性检出率与Dukes分期、淋巴结转移、肝转移有显著性差别。手术后在所有大肠癌血循环中有59.8%的患者CK20mRNA表达阳性,较术前阳性表达明显增多(P<0.05)。结论:血循环中癌细胞的存在是大肠癌的一种常见的早期事件,手术刺激可增加肿瘤细胞向血循环中释放。     

胃癌患者外周血CK20 mRNA表达及其临床意义

目的:探讨胃癌患者外周血CK20 mRNA表达及临床意义。方法:应用Taq Man定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测58例胃癌患者(其中50例化疗2周期后复查CK20 mRNA)、20例健康对照者外周血CK20 mRNA表达;患者平均随访2年。结果:胃癌患者外周血CK20 mRNA阳性率为46.55%(27/58),显著高于健康对照组,二者差异有统计学意义(P<0.001);单因素分析胃癌患者外周血CK20 mRNA表达与远处转移(P<0.05)和临床分期相关(、期之间比较P<0.05);多因素Logistic回归分析表明:远处转移是影响胃癌患者外周血CK20 mRNA表达的独立因素;化疗2周期后CK20mRNA阳性率无显著下降,但近期疗效无效的患者外周血CK20 mRNA阳性率显著高于近期疗效有效的患者(P<0.05)。平均随访2年后,CK20 mRNA阳性患者与阴性患者的1年生存率分别为34.78%和64.29%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:外周血CK20 mRNA可作为检测胃癌患者肿瘤细胞微转移的分子标志;定期监测胃癌患者外周血CK20 mRNA表达有助于评估化疗疗效和预测预后。     

反转录聚合酶链反应检测胃癌病人中心静脉血CK20mRNA表达及其临床意义

目的：运用巢式反转录聚合酶链反应（nest RT—PCR）技术，探讨细胞角蛋白20（CK20mRNA）在胃癌病人中心静脉血的表达及其临床意义。方法：nest RT—PCR检测胃癌病人中心静脉血及良性疾病病人中心静脉血CK20mRNA，表达情况与临床病理因素进行分析。结果：64例胃癌病人34例CK20mRNA阳性，阳性率为53．1％，良性病病人16例均阴性；胃癌病人血液CK20mRNA的阳性率与肿瘤大小、腹腔和肝转移、临床分期相关（P〈0．05），与病理组织学类型无相关性（P〉0．05）；8例早期胃癌病人中2例CK20mRNA阳性。结论：扩增CK20mRNA的nest RT—PCR方法是检测胃癌病人中心静脉血微转移敏感而特异的方法。     

CEA mRNA及CK19mRNA在非小细胞肺癌外周血中的表达及其与临床病理参数的关系

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中癌胚抗原mRNA(CEA mRNA)及细胞角蛋白19 mRNA(CK19mRNA)的表达及与临床病理参数(病理类型、分期、细胞分化程度、淋巴结转移)之间的相关性。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测48例NSCLC患者、15例肺良性疾病(BLD)患者和10例健康人外周血中CEA mRNA及CK19 mRNA的表达。结果 NSCLC患者外周血中CEAmRNA及CK19 mRNA的阳性表达率分别为58.33%(28/48)、68.75%(33/48),在BLD患者中的阳性表达率分别为6.67%(1/15)、13.33%(2/15),而健康对照组均无表达,差异有统计学意义(P<0.05)。其中Ⅰ、Ⅱ期NSCLC患者外周血中CEA mRNA及CK19 mRNA阳性表达率分别为27.78%(5/18)、83.33%(10/12)及44.44%(8/18)、75%(9/12)。外周血CEA mRNA及CK19 mRNA的阳性表达与临床分期及淋巴结转移密切相关,而与病理类型及分化程度无关。结论 NSCLC患者早期(Ⅰ、Ⅱ期)外周血中也有微转移的存在,说明微转移可能是NSCLC预后不良的原因之一。CEAmRNA与CK19 mRNA均可作为检测NSCLC患者外周血微转移较为合适的分子标志物,联合检测有助于提高检测的准确度。     

CK19检测早期宫颈癌淋巴结微转移的临床研究

目的：采用免疫组化法检测常规病理检查无淋巴结转移的早期宫颈癌盆腔淋巴结中CK19的表达,探讨早期宫颈癌微转移的检测率及检测方法,论证检测早期宫颈癌淋巴结微转移的意义。方法：对于入选患者275例按随访结果将有术后复发或远处转移者32例（复发转移率11.6%）纳入病例组,其余无复发或转移者随机的按照下列因素进行配比纳入对照组：治疗、年龄、组织类型、手术病理分期和肿瘤最大径。将选取的患者淋巴结石蜡切片采用免疫组化法检测其中CK19的表达。结果：①病例组477个淋巴结中11个CK19阳性（2.3%）,来自32名患者中的8人（25%）;对照组425个淋巴结中均无CK19阳性表达（0/425）,32名患者中CK19的阳性表达率0。二者之间比较差异有统计学意义;②CK19表达与病理类型及组织的分化程度有相关性（P〈0.05）。②微转移与术后复发转移有相关性（P〈0.05）。结论：采用免疫组化技术检测淋巴结中CK19表达可检测出早期宫颈癌淋巴结中的微转移,与传统的病理组织学比较,显著提高微转移的检出率。通过本研究证实微转移与术后的复发转移有相关性。     

子宫内膜癌患者外周血细胞CK20 mRNA的表达及其临床意义

目的:检测子宫内膜癌患者外周血细胞中细胞角蛋白 20(CK20)基因 mRNA表达,探讨其表达对子宫内膜癌微转移的诊断价值。方法: 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测44例子宫内膜癌患者、34例子宫良性病变患者和 32名健康志愿者外周血细胞中CK20 mRNA表达水平,分析其表达与子宫内膜癌患者病理学参数之间的关系。结果: 44例子宫内膜癌患者外周血细胞CK20 mRNA检测出阳性12例,阳性率为27.3％;子宫良性病变患者及健康女性外周血中均未见其表达,子宫内膜癌患者CK20 mRNA阳性表达率高于子宫良性病变患者及健康女性（χ2=20.204,P<0.05）;子宫内膜癌患者外周血细胞CK20 mRNA 表达水平与临床分期（χ2=16.712,P<0.05）、淋巴结转移（χ2=6.381,P<0.05）和浸润深度（χ2=6.381,P<0.05）存在关联性,而与病理分级（χ2= 0.229,P>0.05）及是否绝经（χ2=0.004,P>0.05）无关联。结论:相对于子宫良性病变患者及健康女性,CK20 mRNA在子宫内膜癌患者中阳性表达率明显升高,且表达水平与临床分期、是否有淋巴结转移及浸润深度有关;CK20的特异性强,可作为判断子宫内膜癌血源性微转移的参考指标。     

早期宫颈癌患者外周血中CK19 mRNA的检测意义

目的:探讨CK19 mRNA在早期宫颈癌患者外周血中的表达水平及临床意义.方法:采用RT - PCR技术对47例Ⅰ a～Ⅱa期宫颈癌患者及37例对照组健康体检者行外周血CK19 mRNA检测.结果:在Ⅰ a～Ⅱa期患者外周血中CK19 mRNA阳性表达率为14.89％ (7/47),对照组外周血中CK19mRNA阳性表达率为0％ (0/37).在Ⅰ a～Ⅱa期中CK19 mRNA表达与淋巴结转移正相关(rs=0.367,P＜0.05),与年龄、病理类型及分化程度无关(P＞0.05).结论:CK19 mRNA表达在早期宫颈癌与淋巴是否结转移相关,与年龄、病理类型及分化程度无关;推测检测此指标可以作为预测宫颈癌淋巴结转移的指标.