血小板保存技术及其研究进展

血小板极其脆弱，在外周血循环中寿命仅为8～10d，离体后易发生变形和破坏，影响输后体内存活率，如何尽量地保护血小板的活力、提高存活率及延长贮存期限，对于血小板输注意义很大。多年来人们一直致力于延长血小板保存期的研究，取得了一定的成果，笔者现就血小板保存技术及其研究进展作一综述。     

4℃冷藏保存血小板的储存损伤与应用研究进展

血小板输注是临床预防出血和止血的重要治疗手段之一,但目前(22±2)℃震荡保存的血小板保质期短,易造成细菌污染,输入人体可能产生输血不良反应等.4℃保存血小板可以明显延长血小板的保存时间、降低细菌污染的风险且有更好的止血效果,但4℃冷藏的血小板保存过程中存在储存损伤,输入人体后容易被激活,降低体内有效存活率.本文就4℃...     

冻干血小板再水化后聚集

本研究旨在观察冻干血小板再水化后聚集反应性变化。以4种不同浓度的凝血酶、瑞斯托霉素、ADP、胶原作诱导剂,使用APACT2型血小板聚集仪,检测冻干再水化和新鲜血小板的最大聚集率,以ADP为诱导剂,检测胞内外海藻糖对再水化冻干血小板最大聚集率的影响。结果表明当凝血酶、瑞斯托霉素、ADP、胶原浓度分别为1U/ml、1.6mg/ml、20μmol/L、2μg/ml时,新鲜血小板最大聚集率达100%左右,冻干再水化血小板最大聚集率分别达(70.17±7.36)%、(15.3±2.81)%、(68.67±6.86)%、(64.67±11.6)%。胞内外海藻糖组、胞外海藻糖组、空白对照组冻干再水化血小板最大聚集率分别达(66.0±4.69)%、(25.3±2.42)%、(11.5±1.87)%(P<0.01)。结论凝血酶、瑞斯托霉素、ADP、胶原浓度分别为1U/ml、1.6mg/ml、20μmol/L、2μg/ml可作为血小板聚集实验的合适浓度,胞内外海藻糖使冻干再水化血小板最大聚集率显著提高。     

人冻干血小板复水程序的优化

目的探讨不同复水条件对冻干血小板功能的影响。方法经过添加激活抑制剂(PGE1、左旋精氨酸、植酸钠和百维利肽)、DMSO和海藻糖等低温保护剂、冷冻干燥后获得冻干血小板,在一系列不同复水程序下对冻干血小板复水,应用流式仪检测并分析其CD62p和PAC-1的表达,评价血小板活化状态。通过正交设计,研究不同复水程序包括复水溶液、复水温度、复水方式3个影响因素对冻干血小板复水后活性的影响。结果 3个对冻干血小板复水后活化的影响因素排序:复水温度>复水方式>复水液(P<0.05);37℃条件下冻干血小板复水后血小板膜蛋白CD62p和PAC-1活化率最低,分别为(5.96±2.51)%和(4.55±1.97)%;预水化后再行四步添加复水可降低冻干血小板膜蛋白CD62p和PAC-1的表达率至(6.68±2.62)%和(5.45±2.06)%;添加聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和血小板抑制剂的2号复水液对冻干血小板复水后膜蛋白CD62p和PAC-1的表达率影响最低,分别为(6.72±3.35)%和(5.28±2.30)%。总体模型评价进一步显示,第5实验组,即在37℃条件下加入PVP和血小板抑制剂的复水液配方,先预水化后再行四步法添加复水,其复水血小板活化率最低,CD62p和PAC-1的表达率分别为(3.06±1.36)%和(2.70±0.84)%。结论 37℃下,饱和蒸汽环境中预水化后,采用加入PVP及血小板抑制剂的复水液四步添加复水,其复水血小板活化率最低。     

血小板低温保存保护剂的研究进展

血小板是血液重要的组成成分，选择有效的深低温保护剂保存血小板可有效延长保存期，减少细菌污染，提高血小板的使用效率。本文就血小板深低温保存保护剂作一综述。     

人红细胞冻干保护剂的研究进展

冷冻干燥法是实现红细胞长期保存的方法之一,要实现冻干,首要解决的问题是维持细胞膜的完整性和功能。低温和干燥是对膜产生损伤的主要因素,通过添加保护剂,优化降温速率及冻干程序、复水方法等,可以缓解冻干过程对膜的损伤。其中冻干保护剂的作用是保持细胞膜结构和减少渗透性损伤,其构成主要为碳水化合物(糖类)、聚合物、蛋白类和其他一些成分。本文对目前常用的冻干保护剂的种类、作用机制、研究进展和存在的问题,进行了分析和总结,并对未来研究及发展方向进行了展望。     

海藻糖用于血细胞冻干保存中的研究进展

冰冻干燥方法是保存血细胞最佳的方法，因为冻干的血细胞制品能在常温下保存，性能稳定，保存时间长．便于运输，保存费用低廉等优势，解决了目前血细胞保存的局限性。然而，在冻干过程中血细胞膜的损伤、细胞功能的降低是一个重要的问题。目前，研究者多以海藻糖为保护剂，将海藻糖导入血细胞内，对血细胞进行冻干。本文主要综述冻干对血细胞损伤机理，海藻糖对血细胞冻干过程中的保护机制及海藻糖在血细胞冻干保存中的研究现状。     

人血小板冻干前负载海藻糖技术的研究

为研究人血小板冻干前负载海藻糖技术与方法，筛选出最佳负载海藻糖实验条件并进一步研究血小板在温度37℃条件下、氪载海藻糖4小时后的平均体积、体外激活程度和聚集反应性的变化，绘制血小板胞内海藻糖负载效率及浓度随温度、时间、胞外海藻糖浓度变化曲线，筛选合适的负载条件，分别以凝血酶、ADP、胶原、瑞斯托霉素4种物质作为血小板激活诱导剂，用血小板聚集仪分别检测血小板负载海藻糖前后的聚集反应性，用流式细胞仪检测分析血小板负载海藻糖前后其膜表面糖蛋白分子CD62p、PAC-1的表达率，加可逆性激活抑制剂PGE-1、腺苷后血小板激活被抑制的程度。结果表明：海藻糖负载效率与孵育时间（2小时后）、温度（30-40℃）呈良好线性关系，在37℃条件下经4小时孵育后负载效率可达60％，载入到胞内海藻糖浓度随胞外海藻糖浓度（〈50mmol／L）的升高而递增；同负载前相比较，血小板平均体积（MPV）、血小板对4种激活诱导剂的最大聚集率均无显著性差别（P〉0.01），经4小时负载海藻糖后血小板膜表面CD62p表达率升高，但联合添加可逆性激活抑制剂PGE-1、腺苷后CD62p表达率显著下降。结论：37℃、4小时、胞外海藻糖浓度小于50mmol／L为合适负载条件，添加可逆性血小板激活抑制剂后．冻干前负载海藻糖过程对血小板的体外激活和聚集活性没有显著影响．     

低温保存血小板基础与应用研究进展

随着成分输血的普及与推广 ,血小板输注已成为治疗出血、改善各种原因导致的血小板减少的重要手段 ,血小板的临床需求量迅速增加。常温液态震荡保存方法 (2 2℃ ,5d) ,血小板保存期短、易激活及污染、报废率高 ,无法满足临床需要。低温保存血小板有效期长、可大量储备、即刻止血效果可靠 ,能更好地适应平战时血液储备的卫勤需要。笔者就低温保存血小板的基础研究与临床应用进展综述如下。1　低温保存细胞损伤原理1 1　低温保存技术是目前生物细胞、组织维持生物活性的最理想保存方法。在低温条件下 ,生物细胞的代谢急速减缓 ,在<- 80℃冰箱…     

冻干再水化血小板结构与功能研究

目的探索血小板冻干保存及再水化后结构与功能的改变。方法选择过期的冻干再水化血小板为实验对象,以新鲜血小板作为对照,分别用血小板计数仪、扫描电镜、透射电镜、血小板聚集仪和三色流式细胞仪检测血小板的回收率、稳定性、形态、超微结构、聚集反应和膜表面糖蛋白的表达。结果实验组血小板计数明显下降,血小板回收率为49.36%,且随着血小板放置时间的延长,血小板回收率逐渐下降,血小板透光性较差,分泌颗粒数目较少。实验组凝血酶、ADP、胶原及瑞斯托霉素的最大聚集率均与对照组有明显统计学差异（P〈0.05）。凝血酶作用后CD62p再表达率为44.02%,显著低于对照组70.31%（P〈0.05）,PAC-1再表达率为38.90%,显著低于对照组65.28%（P〈0.05）。结论过期血小板冻干再水化后的恢复率较低,稳定性较差,结构和功能均低于新鲜血小板,但冻干再水化血小板仍具有一定的活性,为新鲜血小板的冻干保存提供了基础。     

冰冻血小板低温损伤及防护机制的研究进展

血小板作为人体血液中的重要组分,在生理性止血中起着非常重要的作用。血小板的输注主要用于特发性血小板减少性紫癜、放化疗病人的血小板减少以及其他原因导致的出血性血小板减少症。室温保存时间（5 d）限制了血小板的临床应用,导致血小板的废弃率不断升高,因此延长血小板的保存时间对血小板的临床应用意义重大。目前-80℃冻存血小板是一种较为理想的长期保存方法,本文就血小板冰冻保存过程中损伤及对其防护机制的研究进展作一综述。     

机采新鲜血小板与新鲜冰冻血小板的临床疗效分析

目的分析机采新鲜冰冻血小板的临床应用效果,缓解抢救患者时新鲜血小板供不应求的现象。方法将患者随机分为两组．分别采用机采新鲜血小板与机采新鲜冰冻血小板进行临床输注,观察输注前后患者的临床体征及血小板计数。结果机采新鲜血小板组疗效显著优于新鲜冰冻血小板组（P〈0．05）。结论机采新鲜冰冻血小板可用于抢救因血小板减少导致的出血性疾病患者。     

Platelets and autoimmunity

Vascular injury is the initial manifestation of inflammation resulting in the recruitment and activation of various cell types. The integrity of the vascular wall is monitored by platelets that become activated in the presence of exposed subendothelium. Besides their well‐established role in haemostasis, ample data are now emerging on the many immunoregulatory functions of platelets. Platelets store and release a large plethora of cytokines, chemokines and growth factors. They also represent the largest circulating pool of many inflammatory mediators like P‐selectin, CD40L and non‐neuronal serotonin. Furthermore, complement activation occurs on the platelet surface and deposition of complement results in platelet activation. Overall, platelets have multiple functions in both innate and adaptive immunity. Further insight into the multifaceted role of platelets could therefore provide important clues into how we could implement current platelet therapy to reduce both platelet‐induced thrombosis and inflammation. In this review, we discuss the current perceptions of platelet involvement in various autoimmune diseases like rheumatoid arthritis, systemic lupus erythematosus, systemic sclerosis and multiple sclerosis.     

冰冻血小板制备研究

[目的]探讨冰冻单采血小板制备的可行性,为其临床应用提供可靠依据.[方法]通过认真选择献血员,单采血小板,并对40袋新鲜血小板进行计数等质控,用二甲基亚砜（DMSO）作冰冻保护剂,-80℃深低温保存1年内,解冻后观察外观,分别进行计数、计算回收率、测定PH值、粘附率、无菌试验,并且与新鲜血小板进行比较.[结果]-80℃保存冰冻单采血小板1年内血小板计数、pH值、粘附率与冻前新鲜血小板进行比较差异无显著性（P〉0.05）;血小板平均体积、血小板体积分布宽度冰冻前后差异有显著性（P〈0.01）,保存1年内平均回收率为90.49% , 无菌实验无细菌生长.[结论]-80℃深低温保存冰冻血小板质量达到标准要求,可以应用于临床.     

冻干血小板再水化后稳定性的实验研究

目的 探讨冻干血小板再水化后的稳定性变化。方法 使用血细胞计数仪测定冻干血小板再水化后细胞计数回收率,以及在室温条件下随放置时间的不同,胞内外海藻糖浓度变化的趋势。结果 冻干血小板再水化后,细胞计数回收率在8h内保持稳定。胞外海藻糖浓度为30mM和1％人血清白蛋白混合物,可使冻干血小板回收率显著提高（P〈0．01）。结论 负载海藻糖的冻干血小板再水化后8h内仍保持较好的稳定性,海藻糖可使冻干再水化血小板的稳定性显著提高。     

冷冻血小板的稳定性研究

目的探讨冷冻血小板融化复苏后的稳定性。方法将血小板分别置于-80℃和-85℃～-120℃保存，观察冷冻血小板融化复苏后纤维蛋白及絮状不可逆聚集的情况。结果-80℃保存血小板纤维蛋白及絮状不可逆聚集率为24．0％，～85℃～-120℃保存血小板纤维蛋白及絮状不可逆聚集率为0。血小板保存温度不同，纤维蛋白及絮状不可逆聚集发生率的差异有显著性（Х^2-243．18，P〈0．01），冷冻血小板冷冻速度和保存温度对血小板质量的影响有显著性。结论冷冻血小板于-85℃～-120℃保存的稳定性更好。     

Platelets, inflammation and atherosclerosis

Summary.  An expanding body of evidence continues to build on the role of platelets as initial actors in the development of atherosclerotic lesions. Platelets bind to leukocytes and endothelial cells, and initiate monocyte transformation into macrophages. Platelets internalize oxidized phospholipids and promote foam cell formation. Platelets also recruit progenitor cells to the scene that are able to differentiate into foam cells or endothelial cells depending on conditions. Platelets tip the scales in the initiation, development and total extent of atherosclerotic lesions.     

Platelets: handle with care

Platelets are delicate cells that require careful handling between collection, preparation and transfusion. This review addresses practical questions relating to platelet concentration, resting time after collection, total time and number of periods without agitation and temperature. The bags in which platelets are stored are made from gas‐permeable plastic to allow sufficient oxygen for the platelets to maintain aerobic respiration. Manufacturers have assigned limits for platelet content and concentration, and these must not be exceeded. There is no strong evidence for or against the resting of platelets post‐collection and pre‐agitation, but platelets should not be over‐wrapped during this period as this compromises gas exchange; a short rest period of up to 1 h may allow the separation of minor aggregates. It is necessary to transport platelet concentrates (e.g. from manufacturing site to hospital), but these periods without gas exchange must be limited to avoid excessive damage to the platelets. Current data support a total of 24 h of transportation per component but with no individual period lasting more than 8 h. Platelets need to be stored at 20–24 °C based on evidence that colder storage leads to irreversible changes on the platelet membrane, resulting in phagocytosis of the platelets following transfusion. Storage at warmer temperatures may lead to an increase in bacterial risk. On the basis of this review, the UK Guidelines for Blood Transfusion Services have been updated to ensure that platelets are handled in the most appropriate way to ensure that efficacious components are provided for patients.     

去白细胞单采血小板的临床应用

【目的】研究保存前白细胞过滤与保存后白细胞过滤对单采血小板临床输注效果及非溶血性发热输血反应（FNHTR）发生率的影响。【方法】46例肿瘤化疗后血小板减少患者，分别输注保存前过滤单采血小板（保存前组）与保存后过滤单采血小板（保存后组），输注后1h及24h后检测外周血小板计数，以校正血小板计数增殖（CCI）判定输注效果，并考查FNHTR发生率。【结果】保存前组与保存后组其1h及24hCCI值无明显差异（P〉0．05），但保存前组FNHTR发生率要明显低于保存后组（P〈0．05）。【结论】两种方法制备的单采血小板均能有效地治疗血小板减少，但保存前过滤能更有效地减少FNHTR的发生率。