GRP78、GRP94蛋白和mRNA在人胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨GRP78及GRP94蛋白和mRNA在人胃癌组织中的表达及临床意义。方法收集胃癌手术标本183例,制成组织芯片,用免疫组化法检测GRP78和GRP94的蛋白表达;取30例胃癌新鲜组织用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测GRP78、GRP94 mRNA相对表达。结果免疫组化法检测结果显示:GRP78、GRP94蛋白的阳性表达率分别为80.1%和73.8%,与癌旁正常胃黏膜比较差异有统计学意义(P<0.05);与肿瘤的大小、浸润、转移、分期有关(P<0.05);与性别、年龄和组织分化无关。半定量RT-PCR结果显示癌组织和癌旁组织中的GRP78、GRP94mRNA均有表达,胃癌组织的表达明显高于癌旁组织(P<0.05)。结论 GRP78、GRP94蛋白在人胃癌中呈高表达并与胃癌的转移和侵袭有关,可作为判断胃癌恶性程度的有用指标。GRP78、GRP94 mRNA的高表达可能与胃癌组织中的转录调控相关。     

胆囊良恶性病变组织中GRP78和GRP94蛋白表达及临床病理意义

目的 研究胆囊腺癌、癌旁组织、腺瘤性息肉和慢性胆囊炎组织中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和94(GRP94)蛋白表达水平及其临床病理意义.方法 应用EnVisionTM免疫组化法检测108例胆囊腺癌、46例癌旁组织、15例腺瘤性息肉和35例慢性胆囊炎组织中GRP78和GRP94蛋白的表达;分析两者表达与胆囊腺癌临床病理特征的相关性及患者生存期的关系.结果 胆囊腺癌中GRP78和GRP94蛋白表达明显高于癌旁组织、腺瘤性息肉和慢性胆囊炎(P ＜0.01);GRP78和/或GRP94蛋白阳性表达的良性病变胆囊上皮呈不同程度非典型增生.高分化腺癌、淋巴结未转移及未侵犯周围组织器官病例GRP78和GRP94蛋白表达明显低于低分化腺癌、淋巴结转移及侵犯周围组织器官病例(P ＜0.05或P＜0.01).Kaplan-Meier单因素生存分析显示GRP78(P=0.009)或GRP94(P=0.022)蛋白阳性表达与生存期减少密切相关,Cox回归多因素因素分析显示GRP78(P =0.014)或GRP94(P =0.020)蛋白阳性表达是胆囊腺癌预后不良的独立评估指标.结论 GRP78和GRP94蛋白表达水平可能是反映胆囊腺癌发生发展、临床生物学行为及预后的重要标记物,检测胆囊腺癌中GRP78和GRP94蛋白表达水平可能对指导临床辅助治疗有重要临床价值.此外,检测胆囊良性病变组织中GRP78和GRP94蛋白表达水平对早期发现胆囊腺癌可能有较重要的临床意义.     

GRP78核酸疫苗在非小细胞肺癌模型中的抗肿瘤作用研究

目的:研究GRP78核酸疫苗对非小细胞肺癌的预防作用及生存期影响。方法:将携带GRP78基因的真核表达载体肌肉内注射免疫C57BL/6小鼠,完成3次免疫后,接种小鼠非小细胞肺癌细胞(Tc-1),以此来观察该疫苗对非小细胞肺癌的预防作用及生存期影响。结果:免疫后的治疗组肿瘤生长体积小于对照组,平均生存期比对照组延长了25天,免疫细胞分泌细胞因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)的水平和对靶细胞的杀伤率明显高于对照组。结论:GRP78核酸疫苗能够提高机体免疫细胞对非小细胞肺癌的杀伤能力,延缓肿瘤生长,延长生存期。     

GRP78及CHOP在大鼠心肌缺血后处理中的表达变化

目的：观察内质网应激标志蛋白GRP78及其下游调控分子CHOP在大鼠心肌缺血后处理过程中的表达变化,探讨其可能的作用机制.方法：选取SD大鼠30只,随机分为假手术组、缺血-再灌注组和缺血后处理组,每组各10只.观察各组大鼠心肌梗死面积并测定各组大鼠血清中乳酸脱氢酶和磷酸肌酸激酶的含量;采用western blot检测心肌组织中GRP78、CHOP的表达变化.结果：与假手术组比较,缺血-再灌注组大鼠心肌梗死面积、血清中乳酸脱氢酶和磷酸肌酸激酶的含量均显著增高,而心肌组织中总Akt及p-Akt的表达则明显减少;与缺血-再灌注组比较,缺血后处理组大鼠心肌梗死面积、血清中乳酸脱氢酶和磷酸肌酸激酶的含量均有所降低,而心肌组织中GRP78及CHOP的表达显著高于缺血-再灌注组,差异具有显著性（P＜0.05）.结论：GRP78及CHOP的表达变化可能在大鼠心肌缺血后处理保护机制中发挥重要的作用.     

Wnt信号通路调控肠癌细胞GRP78表达与细胞膜转位

 目的 本研究旨在探讨Wnt/β catenin信号通路和葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)两者在肠癌细胞中的调控关系。方法 本研究采用氯化锂(LiCl)处理肠癌HT 29和DLD1细胞,激活其Wnt/β catenin信号通路。通过Western blot和荧光定量PCR,检测Wnt信号活化对GRP78表达的影响;通过对细胞组分的分离和免疫荧光染色技术分析Wnt信号活化对GRP78细胞膜转运的影响。结果 LiCl处理能够显著激活HT 29和DLD1细胞中的Wnt/β catenin信号通路,GRP78蛋白在HT 29细胞膜表面呈独特的“簇状”分布,LiCl处理明显提高了细胞中GRP78的转录和翻译水平,且GRP78在细胞表面的分布水平也有明显增加。结论 肠癌细胞中GRP78的表达和细胞膜转位受Wnt/β catenin信号通路活性的调控。     

内质网分子伴侣GRP78在人肺癌组织中的高表达及其临床意义

ＧＲＰ78 ,即糖调节蛋白 78,也叫免疫球蛋白重链结合蛋白 (ＢｉＰ) ,广泛存在于内质网内 ,在低糖、缺氧等应激条件下合成量明显提高[1] ,并能协助蛋白质的折叠、装配和运输 ,还与许多疾病有关 ,因此被称为内质网分子伴侣[2 ] 。但目前关于ＧＲＰ78的研究主要集中在动物和标准细胞株的体外实验 ,特别是它在人类肺癌中的表达 ,临床研究很少。本研究通过探讨ＧＲＰ78在 5 4例肺癌患者中的表达来说明其在人类肺癌中的作用。一、对象与方法1 材料 :收集 2 0 0 0年 1月至 2 0 0 0年 12月在大连医科大学第一、第二临床学院及中国医科大学第一、第二…     

内质网伴侣分子GRP78在胆管癌细胞中的作用研究

目的:研究葡萄糖调节蛋白78 (glucose-regulated protein 78,GRP78)在胆管癌细胞中的表达及其对胆管癌细胞增殖和迁移的影响.方法:体外培养胆管癌细胞QBC939、RBE和HCCC-9810,应用Western blot检测GRP78的表达,用CCK-8比色法和Transwell小室迁移实验检测GRP78对胆管癌细胞增殖和迁移的影响.结果:胆管癌细胞中GRP78呈高表达,且GRP78的高表达不依赖于内质网应激.干扰GRP78表达显著抑制胆管癌细胞的增殖和迁移(P＜0.05).结论:GRP78对胆管癌细胞的增殖和迁移起重要促进作用,GRP78在胆管癌治疗中具有潜在的靶点价值.     

GRP78、Ki67在胃癌中的表达及与临床参数之间的关系*

目的：应用免疫组织化学技术检测胃癌组织中葡萄糖调节蛋白78（GRP78）及Ki67表达水平,探讨二者与临床各参数之间的关系,二者的相关性及与胃癌疗效和预后的关系。方法：选择胃癌D2术后患者172例手术标本,先制成组织芯片,通过免疫组织化学方法检测GRP78、Ki67的表达,结合临床病理特征及随访资料进行综合分析。结果：172例胃癌组织中GRP78和Ki67表达阳性者分别为117例（68.02%）和103 例（59.88%）。GRP78的表达与浸润深度、分化程度、淋巴结转移、临床分期、脉管癌栓有关,Ki67与浸润深度、分化程度、淋巴结转移、临床分期有关（P<0.05）。GRP78与Ki-67的表达呈正相关（r=0.5025,P<0.05）。 GRP78及Ki67共表达阳性患者的总生存期低于共表达阴性者,差异有统计学意义（P<0.05）。GRP78表达阳性患者使用两药及以上联合化疗方案对比氟尿嘧啶类单药方案总生存时间的差异有统计学意义（P<0.05）。结论：GRP78、Ki67与胃癌各临床参数间关系密切,且二者表达呈正相关,对于胃癌D2术后辅助化疗的总生存有预测意义;GRP78对辅助化疗方案的选择具有判断价值。     

RCN1和GRP78在结直肠癌中的表达及临床意义

目的：检测RCN1和GRP78在结直肠癌组织中的表达水平,分析与临床病理特点的相关性,并探索预后价值。方法：采用TCGA及UALCAN数据库分析RCN1和HSPA5 mRNA在结直肠癌中的表达情况,收集临床标本进行免疫组化验证两者表达情况,分析与临床病理特征的相关性及预后价值。结果：生物信息学分析表明,RCN1和HSPA5 mRNA在结直肠癌中都显著高表达,并且两者表达呈正相关。RCN1表达与N分期及TP53突变显著相关,HSPA5在黏液腺癌中的表达较高。在结直肠癌组织中,RCN1和GRP78蛋白均高表达并定位于细胞质,GRP78的表达与T分期显著相关。Kaplan-Meier生存分析曲线显示,RCN1高表达组患者DFS明显低于低表达组患者,且有较短的OS趋势。多因素COX回归分析表明,神经侵袭、TNM分期及高表达的RCN1是结直肠癌DFS的独立危险因素。相关性分析：RCN1和GRP78在结直肠癌中表达呈正相关。结论：RCN1与GRP78表达呈正相关,是结直肠癌不良预后的独立危险因素。     

胃癌组织中GRP78的表达与临床病理特征的相关性分析

目的探讨胃癌组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达与临床病理特征的相关性及其与胃癌发生、发展的关系。方法收集临床资料完整的胃癌组织蜡块76例、胃正常组织蜡块(含正常胃黏膜组织及癌旁正常胃组织)20例制成组织芯片,免疫组化SP法检测其GRP78蛋白的表达。结果胃癌组织、胃正常组织中均有GRP78蛋白的表达,胃癌组织表达指数为(5.80±3.45),胃正常组织表达指数为(3.20±1.70),两组比较差异有统计学意义(P=0.002)。胃癌组织中GRP78蛋白的表达随肿瘤分化程度的降低而增强(P=0.001),但与患者的年龄、性别、肿瘤大小、有无淋巴结转移、浸润深度等无关。结论胃癌组织中GRP78蛋白的表达增高,并与胃癌的分化程度密切相关。     

抑制葡萄糖调节蛋白78表达对阿霉素诱导人乳腺癌SK-BR-3细胞凋亡的增敏作用

目的:探讨特异性下调葡萄糖调节蛋白78(GRP78)对阿霉素(adriamyc in,ADR)诱导人乳腺癌SK-BR-3细胞凋亡的影响,以期为乳腺癌化疗提供新的靶点。方法:培养人乳腺癌SK-BR-3细胞,用ADR(1 mg/L)处理人乳腺癌SK-BR-3细胞0、6、12、24、36 h,W estern b lot检测GRP78的表达;ADR处理SK-BR-3细胞48 h后,用溴化丙啶染色测定细胞凋亡率;用小分子干扰RNA siRNA预处理SK-BR-3细胞,再予ADR同上处理,检测细胞凋亡率,比较siRNA作用前后细胞凋亡率的变化。结果:ADR可诱导内质网应激,上调GRP78的表达,SK-BR-3细胞对ADR诱导的细胞凋亡率<30%;siRNA可明显阻断GRP78的表达,显著增加ADR诱导的细胞凋亡作用,凋亡率达到(62.30±0.88)%(P<0.01)。结论:抑制GRP78的表达可增强人乳腺癌SK-BR-3细胞对ADR经内质网应激途径诱导细胞凋亡的敏感性,促进肿瘤细胞的凋亡,增强其抗肿瘤作用。     

葡萄糖调节蛋白78在大鼠非酒精性脂肪性肝炎中的表达及意义

目的 观察高脂饮食诱导大鼠非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)过程中内质网应激标志物葡萄糖调节蛋白78的表达变化,探讨内质网应激在NASH发病机制中的作用.方法 建立大鼠高脂饮食诱导NASH模型,检测血清ALT、AST、FFA、TG和肝组织MDA的变化,用RT-PCR与Western blot方法 检测NASH形成过程中肝组织GRF78在基因和蛋白水平的表达变化.结果 NASH组大鼠血清ALT、AST、FFA、TG和肝组织MDA水平均较对照组有不同程度的升高.肝组织GRP78基因和蛋白表达也随NASH加重而增强,16周时升高最为显著(P<0.01).结论 高脂饮食可诱导GRP78表达增强,启动内质网应激,导致脂质异常沉积,其可能与NAsH的发病机制密切相关.     

葡萄糖调节蛋白78在大鼠肠缺血再灌注损伤中的表达及其意义

目的：观察大鼠肠缺血再灌注损伤（intestine ischemia reperfusion injury,IIRI）过程中肠黏膜的组织损伤和细胞凋亡及内质网（endoplasmic reticulum,ER）分子伴侣葡萄糖调节蛋白78（glucose regulated protein 78 kD,GRP78）的表达变化,并探讨ER应激在肠IIRI中的作用及机制。方法：45只雄性SD大鼠随机分成9组：缺血再灌注0、1、3、6、12、24、48、72 h组,以及假手术对照组,每组5只。实验组均用无创性动脉夹夹闭肠系膜上动脉1 h后实施再灌注来建立再灌注模型,假手术组仅游离肠系膜上动脉,不夹闭。然后采用HE染色观察肠黏膜变化,TUNEL法检测细胞凋亡,Western blot和RT-PCR检测GRP78表达。结果：缺血再灌注后,肠黏膜损伤程度及细胞凋亡指数随再灌注时间延长而增加,于再灌注3 h达峰值（与其他组各组比较均P<0.001）;再灌注后,GRP78的表达明显增加,于1 h达第1个小高峰（与0 h组和3 h组比较P<0.05）,但随再灌注时间的延长,表达量逐步减少,再灌注12 h后开始回升（与6 h组比较P<0.004）,于24 h达峰值（与其他各组比较均P<0.05）,72 h降至对照组水平（与假手术对照组比较P >0.069）。结论：GRP78在大鼠肠缺血再灌注过程中表达变化,可能与其对肠IIRI保护机制有关。     

葡萄糖调节蛋白78在糖尿病常见慢性并发症中的作用研究

葡萄糖调节蛋白78（GRP78）是存在于内质网上主要的分子伴侣蛋白,也是内质网应激的标志性分子之一.近年来实验研究证实GRP78与糖尿病慢性并发症的发生、发展密切相关;靶向GRP78的研究也为糖尿病慢性并发症的治疗提供了新思路和新方法.     

胃癌中葡萄糖调节蛋白78和葡萄糖调节蛋白94表达的临床意义及与预后的相关性

目的确定葡萄糖调节蛋白78（glucose-regulated protein 78,GRP78）和葡萄糖调节蛋白94（glucose-regulated protein 94,GRP94）与胃癌（gastric cancer,GC）临床病理特征及预后的相关性。方法应用Western blotting和免疫组织化学方法检测GC和切缘组织中GRP78和GRP94的表达;Kaplan-Meier或卡方检验GRP78、GRP94和临床病理资料与GC术后整体生存期相关性。结果 GRP78和GRP94蛋白主要表达于胃癌细胞的胞质及胞膜,其阳性表达与淋巴结转移、TNM分期呈负相关,与分化程度正相关（P〈0.05）;GRP78、GRP94高表达及低表达GC患者术后平均生存时间分别为（23.51±2.32）个月和（37.54±3.24）个月、（21.31±1.46）个月和（40.02±2.19）个月,5年整体生存率分别为21.23%和41.42%、20.73%和43.86%（log-rank test,P〈0.01）,TNM分期、GRP78和GRP94是影响GC预后的独立因素。结论 GRP78和GRP94高表达可能是GC预后不良的分子标志物之一。     

胃癌和胃癌前病变中Fhit蛋白表达及意义初探

目的:研究胃癌和胃癌前病变(肠上皮化生、不典型增生)中Fhit蛋白表达的改变,并对其意义进行初步探讨。方法:用免疫组化SP法检测了30例胃癌和癌旁不典型增生、33例肠上皮化生、14例正常对照胃黏膜中Fhit蛋白的表达。结果:胃癌、不典型增生、肠上皮化生Fhit蛋白表达分别为23.07±10.44、26.39±12.75、37.33±8.94,胃癌、不典型增生Fhit蛋白表达显著低于肠上皮化生(P<0.01),而胃癌和不典型增生之间Fhit蛋白表达的差异无统计学意义;有淋巴结转移与无淋巴结转移、早期与进展期胃癌之间Fhit蛋白表达的差异无统计学意义;高分化、中分化、低分化胃癌Fhit蛋白表达分别为28.77±10.20、24.81±10.83、15.22±4.46,高、中分化与低分化之间的差异有统计学意义(高与低相比P<0.01,中与低相比P<0.05)。结论:Fhit蛋白表达减低可能是部分胃癌发生过程中的早期事件,Fhit蛋白减低与胃癌的恶性程度相关,检测Fhit蛋白可能有助于判断胃癌的恶性程度。     

cyclin E在肠型胃癌中的表达及意义

目的：探讨ｃｙｃｌｉｎＥ蛋白表达与肠型胃癌的临床病理特征及预后的关系。方法：以免疫组化法分析５９例肠型胃癌的ｃｙｃｌｉｎＥ蛋白表达情况。结果：正常胃粘膜上皮细胞呈阴性反应,而３０例（３０／５９）肠型胃癌组织被免疫染色。ｃｙｃｌｉｎＥ的异常表达与肿瘤的浸润深度显著相关,强阳性者５年生存率低。结论：ｃｙｃｌｉｎＥ的异常表达与肠型胃癌的发展有关,并可作为一项预后指标     

促红细胞生成素对高氧脑损伤新生大鼠CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白及葡萄糖调节蛋白78表达的影响

[目的]探讨促红细胞生成素(EPO)对高氧脑损伤新生大鼠CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达的影响.[方法]取足月新生Wistar大鼠随机分为正常对照组(FiO_2为21%)、高氧组(FiO_2高于85%)和高氧+EPO组(FiO_2高于85%).将正常对照组新生大鼠置于室内空气中饲养,高氧组和高氧+EPO组大鼠置于FiO_2高于85%的室内玻璃箱中饲养.实验第1 d起,高氧+EPO组大鼠每日腹腔注射给予EPO(800 U/kg),实验第1,3,7,14 d时测定各组大鼠脑组织湿/干质量(W/D)比值,采用蛋白免疫印记法检测脑组织中CHOP,GRP78蛋白表达水平.[结果]高氧组新生大鼠第1,3,7,14 d时的脑组织W/D值较正常对照组显著升高(P<0.05),高氧下暴露时间越长,W/D值升高越显著;高氧+EPO组新生大鼠脑组织含水量较高氧组显著降低(P<0.05).高氧组第1,3,7,14 d时的CHOP和GRP78蛋白表达水平较正常对照组显著升高(P<0.05),高氧+EPO组CHOP,GRP78蛋白表达水平较高氧组显著降低(P<0.05).[结论] EPO可缓解高氧引起的新生大鼠脑水肿,对高氧脑损伤具有神经保护作用,其机制认为可能与下调CHOP和GRP78蛋白表达有关系.     

胃癌中抑癌基因p16与KLF6蛋白的表达及相关性研究

目的:探讨胃癌组织中抑癌基因p16与KLF6在胃癌发生、发展中的作用。方法:应用免疫组化SP技术,检测73例胃腺癌组织中p16与KLF6的表达,分析其与临床病理特征的关系和两基因之间的相关性。结果:胃癌组织中p16和KLF6均呈低表达,在低分化胃癌中显著低于高-中分化胃癌,在淋巴结转移较多时其表达明显下降,与临床分期密切相关。两基因之间表达呈正相关(rs=0.326)。结论:p16和KLF6对胃癌的发生、发展、侵袭和转移起重要作用,且两者之间存在相关。联合检测两者的表达水平对胃癌的诊断和预后有一定的参考价值。