河南林州地区贲门癌和癌旁组织中p16基因启动子甲基化及蛋白表达

目的探讨贲门癌变过程中p16基因启动子区甲基化和p16蛋白表达变化特征和规律及其相互关系。方法采用甲基化特异PCR（MSP）及免疫组化方法,检测林州地区32例贲门癌患者癌组织、癌旁不典型增生组织和正常组织p16基因启动子区甲基化状态及蛋白表达情况。结果p16基因在癌组织中表达缺失18例（56%）,不典型增生组织中表达缺失8例（73%）;26例（81%）癌组织、7例（64%）不典型增生组织和18例（67%）正常组织发生了p16基因启动子区的甲基化。贲门癌组织中p16基因甲基化与表达缺失一致率为56%。差异无统计学意义,P〉0.05。结论p16蛋白表达缺失可能是贲门癌变过程中的重要分子事件,p16基因启动子区甲基化可能是导致其蛋白表达缺失的机制之一。     

肿瘤抑制基因p16与卵巢癌

p16基因为一肿瘤抑制基因.1993年Serrano等首先克隆了p16的载体DNA(cDNA),并对其表达产物p16~(INK4)蛋白进行了分析.p16的cDNA分析表明,该基因编码一个含148个氨基酸残基分子量的15.85KD的蛋白质,称p16~(INK4).功能上p16~(INK4)能与CDK_4特异性结合,从而抑制Cyclin/CDK4激酶的活性.Kamb等研究了各型肿瘤与人类染色体9p21,从9p21上克隆出了基因MTS_1,其含1个307bp的序列,与Serrano测定的p16编码序列一致,MTS_1的全部序列是在p16cDNA上增加两个内含子,从而分隔成3个外显子:①外显子1含126bp;②外显子2含307bp;③外显子3含11bp.可见,抑癌基因p16定位于染色体9p21,同时还发现此区带存在1个与MTS_1第2个外显子高度同源的DNA序列,命名为MTS_2推测可能存在一个包括多个抑癌基因的p16家族.     

肿瘤抑制基因p16研究进展

 0　引言　　肿瘤的发生发展是多种基因参与的复杂过程 ,包括癌基因的异常激活和肿瘤抑制基因失活 ,在过去的十几年里 ,已有 10 0余种癌基因和 10余种肿瘤抑制基因被分离鉴定 ,新近分离鉴定的一个重要的肿瘤抑制基因ｐ16 (ＣＤＫＮ2、ＭＴＳ1、ＩＮＫ4Ｉ)在许多肿瘤细胞株中存在高频率的缺失和突变[1,2 ] ,体外培养细胞ｐ16ｃＤＮＡ转染实验证明该基因有抑制细胞克隆形成的作用[3] 。ｐ16蛋白直接参与细胞周期的调节 ,是细胞Ｇ1期重要的负调节蛋白 ,随着研究的广泛开展 ,对 ｐ16基因及其与肿瘤关系的认识也越加深入 ,本文就 ｐ16基因的研究进展作一综述 :1　ｐ16基因的结构　　Ｓｋｏｌｎｉｃｋ等[4 ] 于 1992年提出在 9号染色体短臂2 1 2 2区 (9ｐ2 1 2 2 )可能存在一个家族性黑色素瘤易感基因 ＭＬＭ ,并发现该区不到 10 0ｋｂ范围出现缺失 ,该区缺失在许多其它肿瘤细胞株中也相继得到证实 ,这一现象提示该区可能存在至少一个肿瘤抑制基因。Ｋａｍｂ等[1] 测得该区有两个独特的序列 ,其中一个与先前冷泉港实验室报告[5] 的一种周期素依赖激酶(ｃｙｃｌｉｎ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ...     

肿瘤抑制基因p16,p15与胆胰肿瘤

ｐ１６，ｐ１５基因是重要的多肿瘤基因，目前研究显示其重要性已超过ｐ５３和Ｒｂ抑瘤基因，在胆胰系统肿瘤中尤为突出。本文就其在胆胰肿瘤方面的研究进展作一综述。     

p16基因在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 :研究p16基因在乳腺癌中的表达及临床意义。方法 :应用免疫组织化学方法 (SABC法 ) ,检测了 92例乳腺癌组织p16基因蛋白的表达。结果 :发现p16基因表达阳性率为 4 5 7% (42 /92 ) ,p16基因表达与腋淋巴结转移无关 ;但p16阳性者远隔转移率 14 3% (6 / 4 2 )低于p16阴性组 34%(17/ 5 0 ,P <0 0 5 )。本组p16基因表达与疾病缓解期无关。结论 :提示p16基因在乳腺癌病程中起重要作用 ,对筛选乳腺癌术后高危转移患者 ,加强随访诊治有一定参考意义。     

肿瘤抑制基因p16的研究进展

Ｐ１６基因是１９９４年被鉴定的又一抑癌基因。本文介绍了近几年国外有关该基因的研究工作，特别对Ｐ１６基因的定位，Ｐ１６蛋白的作用途径以及该基因突变在肿瘤发生，发展过程中的作用及地位进行了综述。     

白血病中肿瘤抑制基因p16的缺失和突变研究

目的探讨肿瘤抑制基因ｐ１６在几种类型白血病中的改变及其频率。方法对７７例原发性白血病及非霍奇金淋巴瘤标本分别采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交，ＰＣＲ┐ＳＳＣＰ的方法检测缺失及点突变。结果Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交发现ｐ１６基因异常共１１例，其中纯合缺失７例，异常重组片段４例，ＳＳ┐ＣＰ发现ｐ１６第三外显子异常泳动带６例，是否为突变有待测序证实。结论ｐ１６基因改变主要集中在急性淋巴细胞性白血病，占４７．７％（９／１９），提示这一肿瘤抑制基因在淋巴细胞发生恶性变的机制中起一定作用     

甲状腺肿瘤中p16基因甲基化及p16蛋白的表达

目的探讨甲状腺肿瘤细胞中p16基因异常甲基化及p16蛋白的表达。方法采用甲基化敏感的限制性内切酶SmaI消化DNA，PCR扩增p16基因外显子1，分析60例甲状腺肿瘤中p16基因外显子15′CpG岛异常甲基化，采用免疫组化Envision法检测60例甲状腺肿瘤标本细胞中p16蛋白的表达。结果60例甲状腺肿瘤中p16基因外显子。5′CpG岛异常甲基化率为15．0％（9／60）。30例甲状腺癌中为30．0％（9／30）；30例腺瘤中无异常甲基化，组间比较差异有显著性（P〈0．001）。60例甲状腺肿瘤中p16蛋白阳性表达率为46．7％／60）。30例腺瘤中p16蛋白阳性表达率为60．0％（18／30）；30例甲状腺癌中为33．3％（10／30），组间较差异有显著性（P〈0．05）。结论p16基因外显子t5′CpG岛异常甲基化与甲状腺癌的发生、发展有关，其主要机制可能与甲状腺恶性肿瘤中p16基因失活导致P16蛋白表达缺失有关。     

大鼠肺鳞癌中p16INK4a和p19ARF基因的缺失研究

目的研究p16INK4a和p19ARF基因的缺失与大鼠肺鳞癌发生发展的关系.方法利用显微切割和聚合酶链反应(PCR)技术,在10例正常大鼠支气管黏膜上皮细胞、16例癌前病变细胞和34例肺鳞癌组织分别检测p16INK4aE1α和p19ARFE1β的缺失.结果10例大鼠正常支气管黏膜上皮细胞均未发现有p16INK4aE1α和p19ARFE1β的缺失.在16例癌前病变中发现p16INK4aE1α和p19ARFE1β缺失的检出率分别为12.50%(2/16)和6.25%(1/16);p16INK4aE1α或(和)p19ARFE1β总缺失率为18.75%(3/16).34例大鼠肺鳞癌中p16INK4aE1α和p19ARFE1β缺失的检出率分别为32.35%(11/34)和41.18%(14/34),其中有9例两者同时缺失,p16INK4aE1α或(和)p19ARFE1β总缺失率为47.06%(16/34).肺鳞癌的p19ARFE1β的缺失率显著高于癌前病变,P=0.012.结论在诱发性大鼠肺鳞癌的发生发展中,p16INK4a基因的缺失可能在早期已起作用,p19ARF的生物学活性可能强于p16INK4a.p16INK4a和p19ARF基因的同时缺失损伤了Rb和p53 2条肿瘤抑制途径,这可能有助于大鼠肺鳞癌的恶性进展.     

食管和贲门癌组织中肿瘤抑制基因maspin的表达

 采用免疫组织化学（ABC）法检测食管癌高发区55例食管和贲门癌组织中肿瘤抑制基因maspin的表达。结果表明,食管癌组织中maspin免疫阳性表达率为10%（3/30）,免疫阳性反应主要位于癌组织的细胞浆中;贲门癌组织中maspin免疫阳性表达率为24%（6/25）,免疫阳性反应主要位于癌组织的细胞核中。提示：肿瘤抑制基因maspin可能在食管和贲门癌变过程中起一定的作用。     

抑癌基因p16在卵巢肿瘤中的表达及其意义

采用ＳＰ免疫组化染色法对９７例卵巢癌,３５例卵巢良性肿瘤及１６例正常卵巢ｐ１６蛋白表达进行测定,结果ｐ１６蛋白表达阳性率分别为３８．１４％,８２．８３％和８７．５０％,卵巢癌组明显低于正常对照及良性肿瘤（Ｐ＜０．０１）;不同组织类型卵巢癌之间ｐ１６蛋白阳性率无显著性差异（Ｐ＞０．０５）;但随着分化程度的降低,ｐ１６蛋白阳性率明显降低,高分化组（５８．０６％）与低分化组（１３．０４％）有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１）;Ⅰ、Ⅱ期癌和Ⅲ、Ⅳ期癌阳性率分别为５２．２７％和２６．４２％（Ｐ＜０．０５）;ｐ１６蛋白阳性的卵巢癌患者累计生存率明显高于ｐ１６阴性者（Ｐ＜０．０１）。说明ｐ１６基因表达缺失与卵巢癌的发生、分化程度、进展及预后密切相关。     

p16基因在人卵巢上皮癌细胞系中的缺失分析研究

目的：了解新型抑癌基因ｐ１６在人卵巢上皮癌细胞系中的变异情况,为认识卵巢上皮癌的形成和发展依据。方法：应用ＰＣＲ扩增、ｍＲＮＡ原位杂交和免疫细胞化学方法,对５种人卵巢上皮癌细胞系ＣＡＯＶ３、ＯＶＣＡＲ３、ＡＯ、ＨＯ－８９１０及ＨＯ－８９１０ＰＭ进行分析。结果：５种人卵巢上皮癌细胞系中只有ＣＡＯＶ３（２０％）显示ｐ１６基因纯合性缺失,ＣＡＯＶ３细胞亦无ｐ１６基因ｍＲＮＡ及蛋白表达。ＯＶＣＡＲ３、Ｈ０     

抑癌基因P16在涎腺腺样囊性癌中的表达意义

目的：探讨抑癌基因P16与涎腺腺样囊性癌的发生发展的关系。方法：采用免疫组织化学法检测30例腺样囊性癌中P16基因表达情况。结果：腺样囊性癌组织中阳性表达率为76．6％,P16蛋白阳性率在腺样囊性癌的腺样型,管状型,混合型,实体型中分别为90％,100％,42．9％,显示P16蛋白表达阳性率随恶性程度的上升而,降低,P16阳性与阴性之间的5年生存率则无明显差异。结论：抑癌基因P16的表达与肿瘤的病理类型有关,而腺样囊性癌预后好于其它肿瘤可能与P16缺失少有关。     

亚硒酸钠抗氧化作用与抑瘤效应的实验观察

人ｐ１６基因是最近发现的一种肿瘤抑制基因。ｐ１６蛋白作为一种细胞增殖的负调控因子，在恶性肿瘤发生发展中起重要作用。为了进一步探讨ｐ１６基因的抗肿瘤特性，我们通过运用分子克隆技术构建重组人ｐ１６基因表达载体（ｐｃＤＮＡ３－ｐ１６），并通过电穿孔方法将ｐ１６基因导入到人肺腺癌ＮＣＩ－Ｈ４６０细胞中，经Ｃ４１８筛选获得可稳定表达ｐ１６的人肺腺癌细胞，观察ｐ１６基因对人肺腺癌细胞周期的影响和细胞增殖的作用     

P16抑癌基因在卵巢肿瘤中的表达

 目的:研究抑癌基因P16与卵巢癌的关系, 方法:用免疫组织化学及原位杂交方法检测T72例卵巢肿瘤组织中P16抑癌基因蛋白及其mRNA的表达情况。 结果:免疫组化显示:P16在卵巢癌、良性卵巢肿瘤、交界性肿瘤及正常卵巢组织中的检出率分别为:7.89％、60.00％、6.67％和83.30％, 各组与卵巢癌组相比有显著差异(P<0.01)。 原位杂交表明在上述不同组织中P16mRNA的阳性率分别为21.05％、70.00％、58.33％和75.00％, 各组与卵巢癌组相比有显著差异(P<0.05)。结论:P16在卵巢癌中的表达明显低于其它卵巢肿瘤及正常卵巢组织中, 表明P16作为一种重要的抑癌基因, 它的突变与缺失可能与卵巢癌的发生发展密切相关     

癌基因CD_(44)及抑癌基因p16在头颈部肿瘤中的表达及意义

综述癌基因CD4 4 和抑癌基因p16在头颈部肿瘤中的最新研究进展。主要内容包括CD4 4 和p16的研究现状 ,CD4 4 高表达可增加头颈部肿瘤颈淋巴结转移的危险性 ;而p16高表达则降低其淋巴结的转移。研究显示 ,CD4 4 及p16基因检测很有可能在临床应用价值方面具有广阔的发展前景。     

胆囊癌组织中nm23-H1和p16蛋白表达的意义

目的 :探讨胆囊癌组织中nm2 3 H1和p16基因蛋白表达的意义。方法 :应用免疫组织化学方法检测 4 2例胆囊癌组织中nm2 3 H1和p16蛋白的表达 ,并与良性胆囊组织作对比研究。结果 :4 2例胆囊癌组织中nm2 3 H1和p16蛋白的阳性表达率分别为 4 0 5 %、4 7 6 % ,均明显低于胆囊良性组织 ,且其表达水平与肿瘤的临床病理分期、转移及预后有密切关系。结论 :检测nm2 3 H1和p16蛋白表达水平可以作为判断胆囊癌转移和预后的指标。     

p16和bcl—2基因在膀胱癌中的表达及意义

目的：探讨p16抑癌基因和 bcl-2凋亡抑制基因与膀胱癌生物学行为的关系。方法：采用免疫组化和核酸原位杂交等方法检测67例膀胱癌中p16和bcl-2基因的表达。结果：67例膀胱癌p16蛋白表达阳性率52．23％（35／67），失表达率47．76（32／67），其中Ⅰ，级，Ⅱ级，Ⅲ级的肿瘤p16蛋白失表达率各为14．55％，60．53％，71．43％（P＜0．05），p 16 mRNA失表达率分别为20％，40％，80％，40％，60％，100％（P＜0．05），免疫组化和原位杂交结果一致（P＞0．05），结论：p16基因表达与细胞分化呈负相关，bcl-2基因表达与细胞分化呈正相关，提示p16基因的缺失，突变和高甲基化，bcl-2基因的异常表达在膀胱癌的发生和发展中起重要的推动作用。两者均可作为判断膀胱癌生物学行为的参考指标。     

人抑癌基因FHIT真核表达质粒的构建与鉴定

[目的]构建人抑癌基因FHIT真核细胞表达载体。[方法]采用PCR方法，从人胎脑组织的总cDNA中扩增出444bp的人FHIT cDNA片段，然后定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA3．1／myc-His（-）B中，用限制性内切酶EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切后酶切分析和DNA序列分析鉴定重组质粒；用该表达质粒转染COS-7细胞，Western blot法检测FHIT蛋白的表达情况。[结果]人FHIT基因cDNA以正确方向插入到真核细胞表达载体DcDNA3．1／myc-His（-）B中；转染COS-7细胞后，可见转染细胞有Fhit蛋白的表达。[结论]本实验成功地构建了人抑癌基因FHIT的真核表达质粒pcDNA3．1／myc-His（-）B-FHIT，为研究FHIT基因在肿瘤的发生中的作用提供了有效的工具。