婴儿早期肠道双歧杆菌构建规律的初探

目的 通过系统分析婴儿早期肠道双歧杆菌种群动态变化,初步探索婴儿肠道8 种双歧杆菌构建的规律。方法 收集2013 年3~4 月间16 例正常足月新生儿第1 次、第2、4、7、10、14、28、90 天的粪便,培养分离粪便中双歧杆菌;使用PCR 对分离菌株进行双歧杆菌属及其8 个种水平的鉴定。结果 从受试婴儿粪便中共检出优势双歧杆菌152 株,以B. breve 的检出率(22.4%)最高;第4 天开始在新生儿肠道检出双歧杆菌,定植率为8%;第7 天后双歧杆菌定植率迅速上升,至第28 天和3 月龄时定植率分别达到54% 和60%,均显著高于生后第4 天(均P<0.05)。第10 天时婴儿肠道已有成人型双歧杆菌B. catenulatum 定植,第14 天时检测到婴儿型双歧杆菌B. infantis 定植;至3 月龄时才在婴儿粪便中检测到高水平的婴儿型双歧杆菌B. infantis,且大部分婴儿肠道双歧杆菌种类总数不超过2 种。结论 本研究受试婴儿早期肠道双歧杆菌的多样性偏低,婴儿型双歧杆菌出现偏迟,相反成人型双歧杆菌发现较早。     

不同分娩方式对母乳喂养婴儿肠道菌群的影响

目的新生儿出生后其肠道立即被来自母体和周围环境中的微生物定植,许多研究表明,消化道早期定植的肠道菌群在婴儿免疫系统的发育过程中起重要的作用。该研究探讨了分娩方式对母乳喂养婴儿肠道菌群和粪便性状的影响。方法以60例40～47日龄的健康足月母乳喂养婴儿为观察对象,按分娩方式分为自然分娩组和剖宫产组(n=30)。在6、8、10、12周龄采集婴儿粪便标本,并同时记录婴儿体质量、头围及粪便性状。应用实时荧光定量PCR技术对婴儿肠道乳酸杆菌属、双歧杆菌属及双歧杆菌亚种(长双歧杆菌和短双歧杆菌)进行定量检测。结果剖宫产娩出的婴儿肠道乳酸杆菌和长双歧杆菌数量低于自然分娩组(P<0.05);自然分娩的婴儿粪便pH值低于剖宫产组(6.2对6.9,P﹤0.05);分娩方式对粪便性状和婴儿的生长发育无影响。结论剖宫产降低母乳喂养婴儿肠道乳酸杆菌和双歧杆菌的水平。     

婴儿肠道菌群形成与喂哺方式及食物过敏的关系

目的观察健康婴儿在不同喂养方式下肠道菌群的定植过程及其在食物过敏时的变化,分析肠道菌群形成与婴幼儿食物过敏的相互关系及母乳喂养的意义。方法采用荧光定量PCR技术测定细菌16SrRNA,对健康无过敏症131例(其中母乳喂养71例,人工喂养60例)及100例过敏症婴儿粪便中乳酸杆菌、双歧杆菌和大肠杆菌进行定量检测。结果婴儿肠道菌群处于动态定植过程。母乳喂养婴儿肠道乳酸杆菌、双歧杆菌数量较人工喂养婴儿高(P<0.05),而大肠杆菌数量较人工喂养婴儿低(P<0.05)。食物过敏婴幼儿肠道乳酸杆菌、双歧杆菌数量较健康婴幼儿低(P<0.05),而大肠杆菌数量较健康婴幼儿高(P<0.05)。结论婴儿期肠道菌群处于动态演替过程。不同的喂养方式对肠道菌群有影响,过敏性疾病婴儿肠道菌群与健康婴幼儿不同,应大力提倡母乳喂养。     

喂养方式对剖宫产婴儿大便性状及肠道菌群的影响

目的 研究纯母乳喂养或纯配方奶喂养组对婴儿大便性状及肠道菌群的影响.方法 以健康足月剖宫产婴儿为观察对象,母乳喂养组和配方奶喂养组婴儿各30例.在婴儿6周龄时采集婴儿粪便标本,同时记录婴儿体质量、头围及大便情况.应用实时荧光定量PCR技术对肠道乳酸杆菌属、双歧杆菌属,以及双歧杆菌的某些重要亚种如长双歧等,进行定量检测.结果 母乳喂养婴儿的大便次数及大便含水量明显高于配方奶喂养婴儿.母乳喂养婴儿的双歧杆菌数量明显高于配方奶喂养婴儿(P ＜ 0.05);长双歧数量母乳喂养婴儿高于配方奶喂养婴儿,但两组间差异无统计学意义.结论 剖宫产母乳喂养儿的肠道双歧杆菌数量明显高于配方奶喂养儿.     

婴儿肠道菌群的形成及其与食物过敏的关系

目的　观察健康婴儿肠道菌群的定植过程及其在食物过敏症患儿的变化 ,分析肠道菌群形成与婴幼儿食物过敏的相互关系。方法　采用荧光定量PCR技术测定细菌 16SrRNA ,经与标准曲线对照计算细菌数量 ,对 71例健康无过敏症母乳喂养婴儿和 10 0例食物过敏婴儿粪便乳酸杆菌、双歧杆菌和大肠杆菌行定量检测。结果　婴儿肠道菌群处于动态定植过程 ,随生长发育 ,双歧杆菌和乳酸杆菌在肠道定植增加 ,大肠杆菌数量减少。食物过敏婴幼儿肠道乳酸杆菌、双歧杆菌数量较健康婴幼儿低 ,而大肠杆菌数量较健康婴幼儿高。结论　婴儿期肠道菌群仍处于动态演替过程。食物过敏婴儿肠道菌群与健康婴儿不同     

含低聚半乳糖 + 低聚果糖配方奶对婴儿粪便性状及 有益菌水平的影响

目的探讨添加1.34 g/L低聚半乳糖+低聚果糖(GOS+FOS)益生元组合的配方奶对健康足月婴儿大便性状及肠道有益菌水平的影响。方法纳入出生3周内的配方奶(FF组)喂养婴儿25例和母乳喂养(BF组)儿29例,FF组在中位日龄13 d(1~27 d)时全部使用GOS+FOS配方奶喂养。在两组婴儿6、12周龄时进行体格测量,采集粪便标本,同时记录其大便次数和性状。应用实时荧光定量PCR技术检测粪便中乳酸杆菌、双歧杆菌及其亚种水平。结果在6~12周龄的随访期内,FF组婴儿的体质量增加速率为(33.56±7.03)g/d,BF组为(31.18±6.91)g/d,两组间差异无统计学意义(P0.05)。6周龄时,FF组婴儿排便次数较少且粪便偏硬,12周龄时大便性状与BF组相似。FF组6周龄时粪便中双歧杆菌、长双歧杆菌和短双歧杆菌水平均低于BF组,差异有统计学意义(P0.05);12周龄时上述有益菌含量均有增加,且与BF组差距缩小。结论添加低剂量GOS+FOS益生元的配方奶可为健康婴儿提供合理营养,有助于软化粪便并促进肠道双歧杆菌的生长。     

食物过敏婴儿和健康婴儿肠道菌群的差别

目的检测食物过敏(FA)婴儿和健康婴儿的主要肠道菌群,为食物过敏与肠道菌群关系研究提供线索。方法采用病例对照研究,检测2003年5~12月在重庆医科大学儿童医院儿保门诊体检的52例FA婴儿和100例健康婴儿的大便菌群(双歧杆菌属、乳酸杆菌属、肠杆菌科),大便菌群的分析采用GLM的广义析因法。结果FA婴儿大便双歧杆菌计数减少［(9.61±1.16) VS (10.31±1.20) Log10CFU/g,P<0.001］,肠杆菌计数增多［(9.54±0.60)VS (9.07±0.64) Log10CFU/g,P<0.001］。不同喂养方式下FA婴儿大便的肠道菌群改变相似。结论食物过敏婴儿肠道菌群与健康婴儿的肠道菌群存在显著差别。     

婴儿肠道菌群与分娩方式、喂养方式及胆汁淤积性肝病的关系

目的分析分娩方式和喂养方式对健康婴儿肠道菌群的影响,探讨肠道相关分子微生态在胆汁淤积性肝病中的作用及意义。方法收集37例健康婴儿(其中阴道分娩21例,剖宫产16例;母乳喂养15例,人工喂养22例)及84例胆汁淤积性肝病婴儿粪便,提取粪便中细菌DNA并测量A260值;应用实时荧光定量PCR反应测定粪便中双歧杆菌、乳酸杆菌及大肠杆菌3种代表菌的数量。结果阴道分娩婴儿与剖宫产婴儿比较,母乳喂养婴儿与人工喂养婴儿比较,粪便标本中细菌DNA A260值和3种代表菌数量差异均无统计学意义(Pa>0.05)。健康对照组与胆汁淤积性肝病组粪便标本中细菌的DNA A260值分别为(1.94±0.47)g.L-1和(0.40±0.09)g.L-1,2组比较差异有统计学意义(t=8.91,P=0.00);健康对照组与胆汁淤积性肝病组3种细菌数(lg拷贝数/g湿便)的对数值比较差异均有统计学意义(双歧杆菌9.49±0.59 vs 7.68±0.57;t=15.96,P=0.00;乳酸杆菌8.58±0.32 vs 8.16±0.70;t=3.46,P=0.00;大肠杆菌6.87±0.67 vs 7.26±0.86;t=-2.41,P=0.02)。结论不同的分娩方式、喂养方式对婴儿期肠道菌群无影响;胆汁淤积性肝病婴儿肠道菌群与健康婴儿不同,粪便中细菌总量减少,双歧杆菌及乳酸杆菌数量明显减少,大肠杆菌的数量则明显增多,提示肠道菌群失调与婴儿胆汁淤积性肝病的发生、发展有一定关系。     

Features of intestinal flora in children with food protein-induced proctocolitis based on high-throughput sequencing北大核心CSCD

目的 通过高通量测序分析食物蛋白诱导性直肠结肠炎（food protein-induced proctocolitis，FPIP）患儿肠道菌群特征。 方法 选取2018年10月至2021年2月遵义医科大学第三附属医院门诊就诊的小于6月龄纯母乳喂养发生FPIP患儿31例纳入FPIP组，正常健康婴儿31例纳入健康对照组；采集两组粪便样本提取DNA并通过PCR扩增，采用高通量测序分析粪便样品中的16S rDNA V3~V4片段并进行相关生物信息学分析。 结果 肠道菌群多样性分析示FPIP组菌群多样性Shannon指数低于健康对照组，但差异无统计学意义（P>0.05）；菌群丰富度Chao指数高于健康对照组（P<0.01）。在门水平上，两组菌群组成均主要由厚壁菌门、放线菌门、变形菌门、拟杆菌门4个菌门构成；与健康对照组相比，FPIP组中放线菌门构成比显著降低（P<0.001），变形菌门构成比明显增加（P<0.05）。在属水平上，FPIP组主要由大肠埃希氏菌属、梭状芽孢杆菌属、肠球菌属、克雷伯氏菌属和双歧杆菌属组成；健康对照组主要由双歧杆菌属、链球菌属组成；与健康对照组相比，FPIP组中双歧杆菌属和瘤胃球菌属构成比明显降低（P<0.05），梭状芽孢杆菌属和志贺氏菌属构成比明显增加（P<0.05）。 结论 FPIP组与健康对照组相比，肠道菌群多样性下降，丰富度升高；在菌群组成结构上某些细菌菌属存在差异。提示在FPIP的发生发展过程中，肠道微生物群在属水平上的构成改变可能起到了重要作用。     

PCR-变性梯度凝胶电泳法初探婴儿期肠道菌群菌种演替

目的通过研究婴儿粪便菌种组成,探索婴儿期肠道菌群定植规律。方法收集15例健康婴儿出生后第0、2、4、7、10、14、28天,以及3、6、12月时的新鲜粪便,采用PCR-变性梯度凝胶电泳(DGGE)检测肠道菌群结构,对其优势菌种进行测序,分析婴儿期肠道菌群菌种演替过程。结果 DGGE指纹图谱可见,婴儿期的肠道菌群结构随出生后时间变化显著;克隆测序结果显示,变形菌门的细菌定植最早,以专性需氧菌肠杆菌、假单胞菌为主,其次是厚壁菌门的专性厌氧菌(梭状芽孢杆菌、小韦荣球菌)和兼性厌氧菌(多枝梭菌)定植,随后疣微菌门定植,放线菌门定植最晚,以双歧杆菌为主,并逐渐成为优势菌群。结论婴儿期肠道中专性需氧菌首先定植,随后是专性厌氧菌和兼性厌氧菌。变形菌门细菌定植最早,厚壁菌门细菌次之,随后是疣微菌门细菌,以双歧杆菌为主的放线菌门细菌定植最晚。     

不同孕期母亲免疫水平对婴儿牛奶蛋白过敏的影响

目的 探讨不同孕期母亲Th1/Th2免疫水平与婴儿牛奶蛋白过敏（CMPA）之间的关联。方法 选取2016年7月至2018年12月于山东省潍坊市益都中心医院及青州市中医院就诊的单胎健康孕妇及其子代为研究对象。检测母亲孕中期、孕后期的白细胞介素（IL）-2、干扰素-γ（IFN-γ）、IL-4和IL-10水平,并分别于出生后1年内进行CMPA问卷调查,对临床怀疑CMPA的婴儿进行食物回避及牛奶口服激发试验,将符合CMPA的48例婴儿纳入CMPA组,其余977例正常婴儿纳入对照组。对CMPA婴儿进行单因素分析,并采用泊松回归分析不同孕期母亲各Th1/Th2型细胞因子水平与CMPA之间的关联。结果 CMPA的检出率为4.68%,临床表现包括消化系统症状、皮肤表现、呼吸系统症状及其他表现。单因素分析结果显示,CMPA组母亲食物过敏、母亲过敏性疾病史的发生率均明显高于对照组（P < 0.05）,母乳喂养率明显低于对照组（P < 0.05）。CMPA组的母亲IL-2（孕中期和孕后期）、IFN-γ（孕后期）较对照组明显降低（P < 0.05）。母亲孕后期低IFN-γ及孕中期、孕后期低IL-2与婴儿CMPA存在显著关联（P < 0.05）;校正母乳喂养、母亲食物过敏及母亲过敏性疾病史等因子后发现,母亲孕后期低IL-2、低IFN-γ与婴儿CMPA仍存在显著关联（P < 0.05）。结论 孕后期母体的Th1型细胞因子水平下降,可能会导致胎儿的免疫改变,从而增加其子代出生后罹患CMPA的风险。     

早期康复介入降低早产儿宫外生长发育迟缓的研究

目的 探讨早期康复介入对早产儿宫外生长发育迟缓（EUGR）及早期疾病发生的影响。方法 研究对象为生后24 h内入住新生儿重症监护室（NICU）、胎龄 < 34周、出生体重1 000~ < 2 000 g的适于胎龄早产儿。采用前瞻性、随机、对照研究法将研究对象分为康复干预组和对照组。康复干预组患儿在生命体征平稳后进行早期康复治疗,包括口部感觉及肌力训练和新生儿头部、胸部、腹部、四肢和手足的压力抚触。主要观察结果是两组早产儿达到独立经口喂养的时间、住院天数、EUGR发生率等。次要观察结果是两组早产儿疾病如呼吸暂停、喂养不耐受、败血症等发生情况。结果 共有97例早产儿符合入组标准且资料完整。其中对照组48例,干预组49例。干预组达到独立经口喂养时间短于对照组（P < 0.05）。干预组患儿的住院天数以及出院时纠正胎龄低于对照组（P < 0.05）。干预组的EUGR发生率低于对照组（P < 0.05）。干预组呼吸暂停、喂养不耐受和败血症的发生率低于对照组（P < 0.05）。结论 对NICU中的早产儿进行早期康复介入,可减少呼吸暂停和喂养不耐受的发生率,更早地完成独立经口喂养,降低EUGR的发生率。     

极低/超低出生体重儿甲状腺功能减退的临床分析

目的 分析极低/超低出生体重（VLBW/ELBW）患儿甲状腺功能减退的危险因素和治疗情况。方法 选择2018年9月至2019年12月诊断为甲状腺功能减退的VLBW/ELBW患儿为病例组（n=29）,按照1：3比例匹配甲状腺功能正常的VLBW/ELBW患儿作为对照组（n=87）,比较两组患儿的临床特征,分析甲状腺功能与出生胎龄、出生体重的相关性及甲状腺功能减退的危险因素。结果 符合纳入标准的VLBW/ELBW患儿共162例,其中病例组29例,甲状腺功能减退发生率为17.9%。出生体重越低,甲状腺功能减退发生率越高（P < 0.05）;三碘甲状腺原氨酸（T3）、游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）与出生胎龄呈正相关（P < 0.05）,T3、游离甲状腺素（FT4）与出生体重呈正相关（P < 0.05）。小于胎龄儿、多胎、孕母≥35岁、使用多巴胺是发生甲状腺功能减退的独立危险因素（P < 0.05）。病例组中16例患儿给予左旋甲状腺素（每日5~10 μg/kg）治疗,甲状腺功能在治疗2周后恢复正常。结论 VLBW/ELBW患儿甲状腺功能减退的发生率较高,小于胎龄儿、多胎、孕母高龄、应用多巴胺是其发生甲状腺功能减退的危险因素,应用左旋甲状腺素治疗的患儿需定期随访,以保证用药剂量适宜。     

头孢曲松对乳鼠肠道上皮组织及肠道菌群的影响

目的 探究头孢曲松对生命早期小鼠肠道上皮组织及肠道菌群的影响,以及对成年期小鼠肠上皮组织恢复及菌群再建的影响。方法 36只BALB/C新生小鼠随机分为对照组和实验组（n=18）。实验组小鼠在出生后21 d内,每日用头孢曲松（100 mg/kg）灌胃,对照组用等量生理盐水灌胃。采用免疫组化法检测小鼠肠道各部位上皮细胞相关蛋白（Ki67、Muc2、ZO-1）表达;qPCR和二代测序法分析小鼠粪便细菌总浓度及粪便细菌组成。结果 头孢曲松干预21 d时,与对照组比较,实验组小鼠体重、肠上皮细胞相关蛋白Ki67、ZO-1表达降低,Muc2表达升高（P < 0.05）;总细菌浓度下降但丰富度及多样性增高（P < 0.05）;粪便细菌以厚壁菌门为主,含较多葡萄球菌和肠球菌。生后56 d时,实验组小鼠肠道上皮组织有所恢复,但体重、菌群群落结构等仍和对照组比较差异有统计学意义（P < 0.05）。结论 早期头孢曲松干预能显著损伤机体早期肠道上皮组织的发育和肠道菌群的构建,肠道菌群在生命早期的损伤会部分地延续到成年期,有可能继续影响机体在成年期各种生长发育及生理代谢。     

北京地区25家医院晚期早产儿住院期间母乳喂养对感染相关性疾病发生的影响

目的 了解北京地区晚期早产儿住院期间感染性疾病的发生率,分析感染性疾病发生的危险因素,探讨母乳喂养对感染性疾病发生的影响。方法 收集北京地区25家医院新生儿病房在2015年10月23日至2017年10月30日住院的晚期早产儿资料。根据喂养方式分为母乳喂养组和配方奶喂养组,比较两组一般情况、感染性疾病的发生率,并应用多因素logistic回归分析感染性疾病发生的危险因素。结果 纳入1 576例晚期早产儿,其中母乳喂养组153例,配方奶喂养组1 423例。发生感染性疾病共计484例（30.71%）,其中母乳喂养组感染性疾病发生率显著低于配方奶喂养组（22.88% vs 31.55%,P=0.033）。多因素logistic回归分析显示,母乳喂养是感染性疾病发生的独立保护性因素（OR=0.534,P=0.004）,而男婴、胎膜早破、妊娠糖尿病、窒息是发生感染性疾病的危险因素（分别OR=1.328、5.386、1.535、2.353,均P < 0.05）。结论 母乳喂养可降低晚期早产儿住院期间感染性疾病的发生,是晚期早产儿感染性疾病的保护因素,应积极提倡晚期早产儿住院期间实施母乳喂养。     

早产儿出院后追赶生长的随访观察及宫外发育迟缓的影响因素

目的 研究早产儿纠正月龄6个月内追赶生长的情况,并分析宫外发育迟缓（EUGR）的影响因素。方法 选取在新生儿重症监护病房治疗后出院的,并建立序贯化定期随访档案且有完整随访记录的早产儿321例,按2015年“早产儿保健工作规范”出院后分组随访标准分为低危早产儿组（n=69）和高危早产儿组（n=252）。采用Z评分法对体重、身长和头围进行评估,分析早产儿纠正月龄6个月内追赶生长情况。并采用多因素logistic回归分析探讨6月龄EUGR发生的危险因素。结果 低危组和高危组两组早产儿体重、身长和头围的Z值 < -2（未达追赶生长）的百分比均随纠正月龄增加而逐渐下降,其中低危组早产儿纠正月龄6个月时体重、身长和头围未达追赶生长的比例分别降为1.4%（1/69）、2.9%（2/69）和 1.4%（1/69）,高危组早产儿相应的比例为1.2%（3/252）、1.6%（4/252）和3.6%（9/252）。高危组纠正6月龄EUGR发生率高于低危组（28.2% vs 15.9%,P=0.039）。多因素logistic回归分析显示,早产儿纠正6月龄EUGR的危险因素包括多胎（OR=2.68,P=0.010）、出生体重较低（<1 000 g：OR=14.84,P < 0.001;1 000~1 499 g：OR=2.85,P=0.005）、宫内发育迟缓（OR=11.41,P < 0.001）,而出生后营养强化可降低EUGR的风险（OR=0.25,P < 0.001）。结论 早产儿多可在纠正月龄6个月内达追赶生长;高危早产儿6月龄EUGR发生率较高;多胎、低出生体重、宫内发育迟缓为早产儿EUGR的危险因素,而出生后合理营养强化可降低早产儿EUGR的发生。     

振幅整合脑电图对早产儿脑损伤的诊断价值及其影响因素

目的　探讨振幅整合脑电图(aEEG)对早产儿脑损伤(BIPI)的诊断价值及其影响因素。方法　将116例胎龄27~36+6周早产儿纳入研究, 对所有早产儿生后 6 h 内aEEG进行评分; 依据BIPI诊断结果将116例早产儿分为BIPI组(n=63)和非BIPI组(n=53), 采用logistic回归分析对导致BIPI发生的危险因素进行评估; 依据aEEG检测结果再将116例早产儿分为aEEG正常组(n=58)和aEEG异常组(n=58), 对影响早产儿aEEG结果的因素行单因素分析。结果　BIPI组中aEEG异常52 例(83%); 非BIPI组中aEEG 异常6例(11%), 两组aEEG异常率比较差异有统计学意义(P<0.05)。将早产儿依据胎龄27~33+6周和34~36+6周进行划分, BIPI组aEEG评分明显低于同胎龄非BIPI组(P<0.01)。Logistic回归分析显示：小胎龄(<32周)、低出生体重(<1 500 g)、胎盘胎膜及脐带异常和母孕期高血压是导致BIPI发生的高危因素(P<0.05)。aEEG异常组与aEEG正常组在胎龄、出生体重、胎盘胎膜及脐带异常和母孕期高血压4方面比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 导致BIPI发生的危险因素与影响早产儿aEEG结果的因素相一致, 提示aEEG有助于BIPI的早期诊断。     

不同剂量氨茶碱在极低出生体重儿中的药代动力学及药效学研究

目的 探索不同剂量氨茶碱在不同校正胎龄、体重及日龄的极低出生体重儿中药代动力学和药效学特点。方法 选取发生呼吸暂停的极低出生体重儿40例,予以负荷剂量(5 mg/kg)氨茶碱静脉注射后随机分为两组,分别给予不同维持剂量(1 mg/kg及2 mg/kg,每8 h给药一次)。在治疗后8 h、3 d、7 d监测血药浓度及肝肾功能,记录呼吸暂停发作情况,比较两组药代动力学数据。结果 2 mg/kg组的稳态血药浓度、血浆清除率明显高于1 mg/kg组,半衰期低于1 mg/kg组(P<0.05)。2 mg/kg组患儿生后7 d内呼吸暂停发作天数明显较1 mg/kg组少(P<0.05)。两组患儿的氨茶碱血浆清除率与生后日龄及校正胎龄呈正相关(P<0.05)。结论 极低出生体重儿中不同维持剂量氨茶碱药代动力学及药效学参数具有差异,2 mg/kg氨茶碱治疗呼吸暂停效果优于1 mg/kg;临床上对氨茶碱进行剂量调整时应考虑患儿校正胎龄及生后日龄,同时进行常规血药浓度监测。