瞬时受体电位阳离子通道蛋白6在肾脏的表达

目的探讨瞬时受体电位阳离子通道蛋白6（TRPC6）在正常人、小鼠和大鼠肾组织及小鼠足细胞系（MPC5）的表达和分布,为研究TRPC6在肾脏的功能及其与足细胞分子间的关系奠定基础。方法1.应用免疫组织化学方法观察TRPC6在正常人、小鼠和大鼠肾组织及MPC5分布。2.通过反转录酶-聚合酶链反应（RT-PCR）检测TRPC6在小鼠肾组织和MPC5表达。3.应用免疫蛋白印迹检测TRPC6在正常人、小鼠和MPC5表达。结果1.TRPC6在正常人肾小球呈弱表达,在肾小管和肾血管表达较强,在小鼠和大鼠主要沿肾小球毛细血管袢和系膜区分布,肾间质也有少许表达。TRPC6在MPC5的荧光染色为阳性,在分化态细胞主要分布于胞膜表面。2.在小鼠肾组织及MPC5均检测到特异性TRPC6的PCR产物条带。3.在正常人、小鼠肾组织及MPC5均检测到特异性的相对分子质量为106的TRPC6蛋白条带。结论TRPC6在正常人、小鼠和大鼠肾小球均有表达,在mRNA及蛋白水平均证实MPC5能表达TRPC6,为从离子通道的角度利用MPC5探讨蛋白尿发生的分子机制奠定基础。     

瞬时受体电位阳离子通道蛋白6与肾脏疾病

瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(transient receptor potential cation channel 6,TRPC6)是一个非选择性阳离子通道,定位于足细胞膜,为6次跨膜蛋白.TRPC6与裂孔隔膜分子nephrin以及podocin间存在相互作用,其共同组成裂孔隔膜复合体,突变TRPC6干扰了该复合体的功能,导致足细胞不能维持正常的生物学功能.研究发现TRPC6基因突变与遗传性和非遗传性肾脏疾病发病密切相关,突变的TRPC6可能通过使足细胞动力学发生改变以及足细胞数量减少而引起肾脏疾病.阻断TRPC6通道可能是一种治疗蛋白尿性肾脏疾病的有效方法 ,将给肾病患者带来长期的临床效应.     

瞬时受体电位阳离子通道蛋白6在肾小球足细胞损伤中的作用

瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)是新近发现的肾小球足细胞分子,定位于足细胞裂孔隔膜,与nephrin、podocin和CD2AP存在共定位分布,共同参与信号转导,并维持足细胞正常的结构和功能。TRPC6基因突变可以导致常染色体显性家族性局灶节段性肾小球硬化,患者表现为大量蛋白尿和足细胞损伤,体外试验也表明其高表达可通过增加钙离子内流损伤足细胞,说明TRPC6与蛋白尿的发生、发展密切相关。现将阐明TRPC6在足细胞损伤中的作用,有望为肾脏病的诊断和治疗提供新的靶点。     

儿童原发性肾病综合征肾组织瞬时受体电位阳离子通道蛋白6表达及意义

目的探讨原发性肾病综合征(PNS)患儿肾组织中瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)的表达与足细胞损伤的关系及其临床意义。方法获取18例PNS患儿的肾组织,常规切片染色光镜观察肾脏组织病理改变,电镜观察足细胞的结构变化,分别用q PCR和免疫组化测定组织中TRPC6 m RNA和蛋白的表达,并将TRPC6 m RNA表达分别与血清白蛋白(Alb)、肌酐(Cr)、三酰甘油(TG)、胆固醇(Tch)、补体C3水平及24 h尿蛋白定量和评估的肾小球滤过率(e GFR)进行相关性分析。结果 PNS患儿肾组织中TRPC6蛋白表达较对照组上调,差异有统计学意义(P0.05)。PNS患儿肾组织中TRPC6 m RNA的相对表达量与肾组织TRPC6蛋白表达呈显著正相关(r=0.508,P0.05),与血清Alb、Cr、TG、Tch、补体C3、e GFR水平以及24 h尿蛋白定量无相关性(P0.05)。结论 PNS患儿的病理类型仍以足细胞病变为主,其肾小球足细胞中TRPC6蛋白表达升高。TRPC6检测可能有助于足细胞病变诊断。     

肾小球足细胞骨架结构的适应性应变

肾小球足细胞肌动蛋白骨架是一个复杂的网络结构,其形态结构的稳定性与裂孔隔膜、足突顶端、足突基底等区域的相关蛋白分子密切相关,面对外力作用,在RhoA/Rho激酶信号通路、瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)等参与下,足细胞骨架能在一定范围内进行适应性应变,以维护肾小球的正常滤过功能.     

钙神经蛋白及瞬时受体电位阳离子通道蛋白6对足细胞骨架的影响研究进展

原发性肾病综合征蛋白尿的形成是由于肾小球滤过屏障受损所致,足细胞作为滤过屏障的关键部分,目前已被认为是参与尿蛋白产生及病情进展的关键细胞,足细胞骨架的结构和功能完整是其发挥生理功能的前提条件.以肌动蛋白为中心的细胞骨架损伤是各种因素作用于足细胞引起足突融合的“共同的最后道路”.该文对裂孔隔膜蛋白瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(transient receptor potential cation channel 6,TRPC6)、钙神经蛋白(calcineurin,CaN)及其相互作用关系对细胞骨架的影响进行综述.     

GH／IGF—1轴对肾脏的影响

生长激素（GH）/胰岛素样生长因子（IGF）-1轴由GH、IGF-1、GH受体、IGF-1受体、GH结合蛋白、IGF结合蛋白组成。除GH外,其余各成分在肾脏中都有表达并有各自特定的分布。对肾小管重吸收功能及肾小球血液动力学有影响,并与肾脏疾病,尤其是肾小球硬化的发生、发展有关。本文就GH/IGF-1轴对肾脏在生理和病理状态下的影响进行综述。     

干扰素α对乙型肝炎病毒X蛋白诱导小鼠足细胞系凋亡的影响及分子机制研究

目的 观察干扰素α（INF-α）对乙型肝炎病毒X （HBx）蛋白诱导的小鼠足细胞系（MPC5）凋亡的影响及其分子机制。方法 以携带HBx基因的pEX质粒转染MPC5细胞,采用逆转录PCR检测不同时间点HBx mRNA表达水平。将MPC5细胞分为对照组：正常条件下培养的MPC5细胞;INF-α组：正常MPC5细胞与INF-α共培养;HBx组：HBx诱导的MPC5细胞;HBx+INF-α组：HBx诱导的MPC5细胞与INF-α共培养。不同实验条件下干预48 h后,采用流式细胞术检测各组MPC5细胞凋亡情况;采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测足细胞裂孔隔膜相关蛋白（nephrin、CD2AP、synaptopodin）和细胞骨架相关蛋白（TRPC6）的mRNA及其蛋白的表达。结果 pEX-HBx转染MPC5细胞后48 h HBx mRNA表达最高（P < 0.05）。HBx组MPC5细胞凋亡率显著高于对照组、INF-α组和HBx+INF-α组（P < 0.05）。与对照组和INF-α组相比,HBx组nephrin、synaptopodin、CD2AP mRNA及其蛋白的表达水平明显降低,TRPC6 mRNA及其蛋白的表达水平明显增高（P < 0.05）。与HBx组相比,HBx+INF-α组nephrin、synaptopodin、CD2AP mRNA及其蛋白的表达水平明显增高,TRPC6 mRNA及其蛋白的表达水平明显降低（P < 0.05）。结论 INF-α可抑制HBx诱导的MPC5细胞凋亡,其机制可能与INF-α可调节HBx诱导的足细胞裂孔隔膜相关蛋白（CD2AP、nephrin、synaptopodin）和细胞骨架相关蛋白（TRPC6）的异常表达恢复正常有关。     

GH/IGF-1轴对肾脏的影响

生长激素（ＧＨ）／胰岛素样生长因子（ＩＧＦ）－１轴由ＧＨ、ＩＧＦ－１、ＧＨ受体、ＩＧＦ－１受体、ＧＨ结合蛋白、ＩＧＦ结合蛋白组成。除ＧＨ外，其余各成分在肾脏中都有表达并有各自特定的分布。对肾小管重吸收功能及肾小球血液动力学有影响，并与肾脏疾病，尤其是肾小球硬化的发生、发展有关。本文就 ＧＨ／ＩＧＦ－１轴对肾脏在生理和病理状态下的影响进行综述。     

B7/CD28共刺激分子参与肾脏疾病的免疫机制研究进展

机体特异性免疫应答是一个需要一系列免疫细胞和免疫分子共同参与的异常复杂的过程,这些免疫细胞及分子之间相互调节又相互制约。目前大多数肾脏疾病发病机制尚不明确。B7(CD80)位于调节CD4+和CD8+T细胞的抗原提呈细胞上,通过与细胞上的糖蛋白CD28结合发挥信号传递作用、增强或放大免疫反应的功能,或者与细胞毒性T细胞蛋白-4(cytotoxic T lymphocyte-associated antigen4 CTLA-4)结合后抑制免疫应答。通常肾组织不表达或低表达B7,然而某些肾小球疾病的发生与B7的增加有关,其降低了足细胞附着肾小球基底膜的能力,增加炎症反应及肾脏纤维化。当B7与CTLA-4相结合时,免疫反应就会被减弱。因此通过阻断CD28或增强CTLA-4信号可能阻止疾病的发生。该文就共刺激分子B7/CD28在足细胞损伤、原发性肾小球肾炎、紫癜性肾炎、狼疮性肾炎等肾脏疾病的发病机制中的作用,以及B7阻滞剂在部分肾脏疾病靶向治疗的研究进展进行综述。     

足细胞相关突变基因致激素耐药型肾病综合征的机制研究进展

激素耐药型肾病综合征的治疗十分棘手,其发病机制尚未完全阐明。近年来,相关研究发现一些足细胞突变基因可能在激素耐药型肾病综合征病例的发病过程中起到了重要作用,研究较为深入的突变基因有NPHS2、NPHS1、WT1、TRPC6、MDR-1、PLCE1、LMX1B、LAMB2等,本文就以上突变基因的致病特性加以概述,以期为早期明确肾病类型并采取正确治疗措施,同时对预后判断和产前诊断提供帮助。     

The intermediate filament nestin is highly expressed in normal human podocytes and podocytes in glomerular disease.

The intermediate protein nestin is expressed in proliferating embryonic tissues and adult tissues undergoing repair. Recently this protein been identified in rodent podocytes. Its role in this cell is unknown, since podocytes are believed to be terminally differentiated and nondividing. We report the first study of nestin in human kidney. Nestin expression in normal mature human glomeruli was confined to podocytes. In developing kidney, nestin was detected in metanephric blastema and in podocytic cells at all stages of glomerular development. Nestin co-localized with vimentin but not with actin or heavy chain myosin IIA, using a mouse podocyte cell line. Knockdown of nestin in a murine podocyte cell line failed to produce any obvious phenotypic change or alteration in vimentin distribution but was associated with increased cell cycling. A survey of glomerular diseases failed to identify any condition lacking nestin, indicating that the protein is critical for some aspect of podocyte function. Perhaps through an association with vimentin, nestin serves to bolster the mechanical strength of these cells that experience high tensile stress during glomerular filtration. Nestin was also expressed in podocytes that are reported to be 'dysregulated' (lacking podocyte markers). Thus, nestin has a potential as a reliable podocyte marker, even for podocytes that are not completely differentiated (for example, during development) or 'dedifferentiated' in glomerular disease.     

1例肾单位肾痨12型的临床特点及TTC21B基因型研究

肾单位肾痨（NPHP）是一组常染色隐性遗传，主要累及肾小管间质的囊性肾病。该文报道1例TTC21B基因突变所致的NPHP 12型。患儿女，起病隐匿，3岁6个月首次就诊时即存在中量蛋白尿、肾功能损害、高血压2期，并伴有内脏反位、短指/趾，4岁前进展到终末期肾病。尿蛋白电泳以肾小球性蛋白尿为主。尿β2-微球蛋白、尿α1-微球蛋白等肾小管指标均明显增高。基因检测显示TTC21B基因存在c.1552T > C （p.C518R）、c.752T > G （p.M251R）复合杂合突变，前者来自父亲，后者来自母亲。c.752T > G为新发突变。TTC21B基因突变患儿的肾脏病理除了NPHP典型的肾小管改变外，多同时存在显著的肾小球损害。     

Genetics of idiopathic nephrotic syndrome

Nephrotic syndrome (NS) is a pathological entity characterized by massive proteinuria and has diverse etiology. Although it is one of the most common renal diseases in children, the etiological factors responsible for idiopathic NS/FSGS remain largely unknown. Previous studies had implicated a variety of factors including genetic factors, although NS is generally regarded as a sporadic disease. Familial cases of NS have however been reported periodically, and both autosomal dominant and recessive forms have been identified. Studies of familial NS /FSGS have led to the discovery of several genes that are expressed in podocytes and are associated with proteinuria. These discoveries have shifted the focus from glomerular basement membrane (GBM) to recognition of the central role of podocytes in maintaining glomerular perm selectivity and pathogenesis of NS/FSGS. Associations with various genes (NPHS1, ACTN4, NPHS2, WT-1) and linkage to several chromosomal regions (such as 19q13,11q21,11q24) have been reported in patients with familial NS/FSGS.     

TRPC6基因变异致儿童激素耐药型肾病综合征四例并文献复习

目的:探讨TRPC6基因变异致儿童激素耐药型肾病综合征(SRNS)的特征、治疗及预后。方法:回顾性分析2017年1月至2019年12月在上海市儿童医院肾脏风湿科住院的4例(SRNS)且经基因检测为TRPC6变异患儿的临床资料。以“肾病综合征”“TRPC6”“儿童”“nephrotic syndrome”“TRPC6 variation”“child”为检索词,检索建库至2020年8月中国知网数据库、万方数据库、维普数据库及PubMed数据库并进行文献复习。结果:4例SRNS患儿中,男1例、女3例,起病年龄4岁1月龄至12岁2月龄。临床均以浮肿、大量蛋白尿、低蛋白血症起病,4例出现贫血,2例出现继发性甲状旁腺功能亢进,1例肾萎缩。肾脏病理结果示1例为免疫复合物相关性肾炎,3例为局灶节段肾小球硬化。4例患儿病初予足量糖皮质激素治疗4周以上,均为激素耐药,后予糖皮质激素联合免疫抑制剂(如环磷酰胺、钙调神经磷酸酶抑制剂、霉酚酸酯)治疗,症状没有改善。4例患儿2~6个月进展为终末期肾病。全外显子测序显示4例患儿TRPC6基因变异类型分别为c.2684G>T、c.523C>T、c.2678G>A、c.2683C>T,均为新发变异。文献检索纳入中文文献1篇,外文文献9篇,共27例。汇总分析31例(包括本组)病例资料,其中18例错义变异,移码变异、同义变异、剪切变异各1例。起病年龄4月龄至14岁,18例患儿临床表现为大量蛋白尿、低蛋白血症,6例仅表现为蛋白尿,19例患儿病理类型为局灶节段肾小球硬化,IgA肾病、微小病变各2例,塌陷性肾小球病、C1q肾病、免疫复合物相关性肾小球肾炎各1例。18例患儿激素治疗无效,11例钙调神经磷酸酶抑制剂类药物无效。该疾病预后不佳,12例患儿出现肾衰竭,进展至终末期肾病时间为4个月至13.8年。结论:TRPC6基因变异致SRNS的患儿起病年龄较小,病理特征多为局灶节段肾小球硬化,激素及免疫抑制剂治疗多无效,进展迅速预后差。