积雪草苷对高氧致新生大鼠支气管肺发育不良的保护作用及其机制研究

目的 基于小分子RNA-155（miR-155）/细胞因子信号抑制因子1（SOCS1）轴研究积雪草苷对高氧致新生大鼠支气管肺发育不良的保护作用。方法 将新生大鼠随机分为对照组、模型组、积雪草苷低剂量（10 mg/kg）组、积雪草苷中剂量（25 mg/kg）组、积雪草苷高剂量（50 mg/kg）组、布地奈德（1.5 mg/kg）组,每组12只。除对照组外的其他各组在高浓度氧中暴露14 d建立新生大鼠支气管肺发育不良模型,同时以相应浓度积雪草苷对不同剂量积雪草苷组进行灌胃,布地奈德组行布地奈德雾化治疗。采用苏木精-伊红染色检测各组大鼠肺组织发育情况,测定放射状肺泡计数（RAC）、肺泡平均截距（MLI）;采用超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）检测试剂盒分别检测肺组织SOD、MDA水平;采用酶联免疫吸附法检测血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素6（IL-6）水平;采用实时荧光定量PCR法检测各组大鼠肺组织中miR-155、SOCS1的mRNA水平;采用蛋白免疫印迹法检测各组大鼠肺组织中SOCS1蛋白的相对表达。结果 与对照组相比,模型组大鼠出现肺组织结构紊乱,肺泡融合增大,肺泡间隔不均,平均间隙增大,肺泡数量明显减少等肺发育不良症状,同时MLI、肺组织MDA水平、血清IL-6及TNF-α水平、肺组织miR-155水平均明显升高（P < 0.05）,肺组织RAC、SOD水平、SOCS1 mRNA及蛋白水平均明显降低（P < 0.05）。与模型组相比,积雪草苷低、中、高剂量组、布地奈德组大鼠上述肺发育不良症状改善,MLI、肺组织MDA水平、血清IL-6及TNF-α水平、肺组织miR-155水平均降低（P < 0.05）,肺组织RAC、SOD水平、SOCS1 mRNA及蛋白水平均升高（P < 0.05）,且积雪草苷对肺发育不良症状及上述指标的改善程度有剂量依赖性（P < 0.05）。积雪草苷高剂量组与布地奈德组相比,上述指标差异均无统计学意义,且均达到对照组水平（P > 0.05）。结论 积雪草苷可减轻高氧导致的新生大鼠肺部炎症损伤,改善支气管肺发育不良症状,且存在剂量依赖性。其作用机制可能与下调miR-155表达、上调SOCS1表达有关。     

宫内炎性预敏及生后高氧暴露对早产大鼠肺血管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的观察宫内炎性预敏及生后高氧暴露对早产大鼠肺血管内皮生长因子（VEGF）及其受体表达的影响,探讨其与新型支气管肺发育不良（BPD）发病机制之间的关系。方法早产大鼠随机分为生理盐水＋高氧组、LPS＋高氧组、LPS组和正常对照组,于生后第1、7和14天随机取8只,行HE染色,观察肺组织形态学结构,做辐射状肺泡计数（RAC）采用Western blot和RT-PCR方法检测各组肺组织VEGF及其受体Fit-1和Flk-1蛋白及mRNA表达水平。结果（1）正常对照组和LPS组在生后1～14d随鼠龄增加,RAC逐渐增多,但LPS组在生后第1～14天RAC均低于对照组（P分别=0．029,0．013,0．009）;生理盐水＋高氧组和LPS＋高氧组则随鼠龄增加RAC逐渐下降,LPS＋高氧组至生后14dRAC低于其他三组（P分别=0.000,0.002,0.012）。（2）VEGF及其受体Flk-1蛋白的表达与其相应肺组织RAC变化规律基本一致。而Fit-1表达在四组中均随鼠龄增加而呈增高趋势。（3）VEGF及其受体mRNA表达规律与其蛋白表达强度变化规律基本一致。结论宫内炎性预敏及生后高氧暴露可能是导致新型BPD发生的重要因素。     

高迁移率族蛋白B1在高氧致支气管肺发育不良的表达

目的：检测高迁移率族蛋白B1（HMGB1）在高浓度氧（60% O2）暴露新生小鼠肺组织损伤模型中的表达水平,探讨HMGB1在支气管肺发育不良（BPD）发病机制中的作用。方法：新生足月C57BL/6小鼠随机分为BPD组和对照组,制备高氧浓度致新生鼠BPD模型,应用苏木精-伊红染色、Masson染色、放射性肺泡计数（RAC）、免疫荧光和实时荧光定量PCR技术,观察氧暴露后3 d、7 d、14 d肺组织病理改变及HMGB1的蛋白和mRNA表达水平。结果：BPD组在氧暴露后随时间推移,出现肺泡上皮肿胀,肺泡壁增厚,间质水肿,炎症细胞浸润,胶原样物质产生,肺泡结构紊乱,数量减少,较空白对照组明显发育迟滞。在氧暴露后7 d、14 d,HMGB1及其mRNA表达均强于对照组（P＜0.05）。结论：高氧暴露所致BPD中,HMGB1表达增加。BPD的病理过程可能与HMGB1表达增加有关。［中国当代儿科杂志,2010,12（3）：219-223］     

HoxB5基因在高氧致早产鼠慢性肺疾病中的表达及其作用

目的 探讨高氧致慢性肺疾病（CLD）早产鼠肺组织HoxB5基因表达规律及其对肺发育的影响。方法 将80只早产鼠随机分为实验组及对照组,采用高浓度氧诱导早产鼠CLD模型,应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）等技术,测定肺组织HoxB5 mRNA水平,并同时观察放射状肺泡计数（RAC）的变化。结果 生后1、3d,两组HoxB5 mRNA水平及RAC差异无统计学意义（P〉0.05）,7d时两者均开始降低（P〈0.05）,14d继续下降,21d降至最低（P〈0.01）,且肺组织HoxB5 mRNA水平及RAC呈明显正相关（P〈0.01）。结论 暴露高氧中早产鼠肺组织HoxB5基因呈低表达状态,其表达水平与肺泡发育障碍程度相一致。     

丹参提取物和超氧化物歧化酶对新生大鼠高氧肺损伤的防治作用

目的 探讨并比较丹参提取物764-3和人工合成的超氧化物歧化酶(SOD)对高氧暴露14 d新生大鼠高氧肺损伤的早期预防及晚期治疗作用.方法 采用Sprague Dawley新生大鼠建立高氧肺损伤模型.分别用SOD和丹参提取物在出生后1～7 d和7～14 d两个不同时间段进行干预,比较高氧对照组、空气对照组、SOD干预组和丹参提取物干预组肺系数、丙二醛(MDA)含量、SOD活性、辐射状肺泡计数(RAC)及肺细胞凋亡指数(AI).结果 除了丹参提取物预防组的AI高于SOD预防组(P＜0.05或P＜0.01)及SOD治疗组SOD活性高于丹参提取物治疗组外,丹参提取物和SOD对大鼠体重、肺系数、MDA含量及RAC影响的差异,均无统计学意义(P＞0.05),且两组的肺系数、MDA含量和AI均低于高氧预防对照组(P＜0.01),体重、SOD活性和RAC则高于高氧预防对照组(P＜0.05或P＜0.01).结论 丹参提取物与SOD一样对新生大鼠高氧肺损伤有一定的预防及治疗作用.     

丹参对高体积分数氧致新生大鼠支气管肺发育不良的影响

目的 探讨丹参对高体积分数氧(高氧)致新生大鼠慢性支气管肺发育不良(BPD)的影响.方法 出生2 d的新生SD大鼠随机分为空气加9 g/L盐水组(Ⅰ组)、空气加丹参组(Ⅱ组)、高氧加9 g/L盐水组(Ⅲ组)、高氧加丹参组(Ⅳ组).Ⅲ和Ⅳ组持续暴露于高氧中,Ⅱ和Ⅳ组予腹腔注射丹参10 mg/(kg·d),Ⅰ和Ⅲ组腹腔注射同等体积的9 g/L盐水,生后14 d对各组大鼠行肺组织病理学检查,分别采用硫代巴比妥酸法、亚硝酸盐法、二硝基苯甲酸法检测辐射状肺泡计数(RAC),检测各组大鼠肺组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平.采用SPSS 11.5软件进行组间t检验.结果 1.Ⅲ、Ⅳ组显示明显的肺泡发育受阻,肺纤维化明显,RAC值较Ⅰ、Ⅱ组均减少(Pa＜0.05),但Ⅳ组RAC(8.6±0.2)较Ⅲ组(7.2±0.5)显著增加(P＜0.05).2.Ⅲ、Ⅳ组肺湿质量/干质量重(W/D)均高于Ⅰ、Ⅱ组(Pa＜0.05),提示高氧组肺纤维化、肺水肿均较空气组严重,使用丹参后肺W/D显著下降(P＜0.05).3.Ⅲ、Ⅳ组MDA水平显著高于Ⅰ、Ⅱ组(Pa＜0.05),Ⅳ组MDA水平较Ⅲ组明显下降(P＜0.05),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组SOD、GSH-Px比较无明显差异,使用丹参后其水平上升,与Ⅲ组比较有统计学差异(P＜0.05).结论 丹参可部分抑制高氧所致的慢性BPD,其机制可能是通过抗氧自由基、减轻肺部炎性反应而发挥作用.     

丹参提取物764-3对新生大鼠高氧所致急性肺损伤的保护作用

目的 探讨丹参提取物764-3对高氧暴露所致新生大鼠急性肺损伤的保护作用,并将其作用与超氧化物歧化酶(SOD)进行比较.方法 采用新生Sprague Dawley大鼠置于≥90%O2中7 d以建立高氧急性肺损伤模型,分别用SCD和764-3进行干预,对比肺系数、丙二醛(MDA)含量、SOD活性、辐射状肺泡计数(RAC)和病理形态学变化,并采用脱氧核糖核酸转移酶介导的细胞凋亡标记技术法(TUNEL)检测肺细胞凋亡情况.结果 SOD干预组和764-3干预组在高氧暴露7 d时的MDA含量和凋亡细胞数均低于高氧对照组(P<0.05或P<0.01),病理形态学改变要轻于高氧对照组,RAC及SOD活性则要高于高氧对照组(P<0.05或P<0.01),且两种抗氧化剂作用近似(P>0.05).但764-3干预组的肺水肿与高氧对照组差异无显著性(P>0.05).结论 764-3对新生大鼠高氧所致的急性肺损伤有一定的保护作用.     

洛沙坦对高氧致慢性肺疾病新生大鼠肺纤维化的影响

目的：血管紧张素II除了调节血压,还参与肺纤维化的发生。研究血管紧张素II 1型受体拮抗剂洛沙坦对高氧致慢性肺疾病（CLD）新生大鼠肺组织的影响,探讨洛沙坦在抗纤维化的作用及可能的机制。方法：将Waistar新生大鼠生后24 h内随机分为：空气组、高氧组、高氧+注射用水组、高氧+ 洛沙坦组,高氧组氧浓度为85%~90%,高氧+注射用水组、高氧+洛沙坦组在生后6 d每天用注射用水或洛沙坦(5 mg/kg)灌胃至实验结束,于7,14,21 d处死。观察病理组织学改变;生化检测肺组织超氧化物歧化酶活性(SOD)、丙二醛(MDA)和羟脯氨酸(HYP)的含量。结果：高氧暴露后大鼠肺泡数目减少,终末气腔扩张,次级隔数目减少,肺泡间隔显著增厚,甚至出现肺出血和肺实变。洛沙坦干预后肺泡间隔变薄,但肺泡腔没有明显缩小,且肺泡次级隔仍较少。高氧后14和21 d新生大鼠肺组织HYP含量较同期空气组显著增加(P<0.01),洛沙坦治疗2周后肺组织HYP含量较高氧组明显下降 (471.46±30.63 μg/kg vs 545.15±34.90 μg/kg, P<0.01); 高氧组在高氧暴露7 d时,SOD活力呈代偿性增加,之后逐渐下降至空气组水平;MDA水平在高氧暴露后显著增加,但随日龄增加呈下降趋势。洛沙坦治疗能增加高氧肺组织SOD的活力, 21 d时差异有显著性(82.94±4.62 U/mg protein vs 67.78±8.02 U/mg protein, P<0.01),同时降低MDA的水平(30.54±5.89 nmol/mg protein vs 48.75±8.09 nmol/mg protein, P<0.01)。结论：洛沙坦治疗能减轻高氧诱导新生鼠CLD肺纤维化的程度,该过程可能与肺组织抗氧化酶活性增加以及膜脂质过氧化减轻密切相关。［中国当代儿科杂志,2007,9（6）：591-594］     

HoxB5基因在高氧致早产鼠慢性肺疾病中的表达及其作用

目的探讨高氧致慢性肺疾病(CLD)早产鼠肺组织HoxB5基因表达规律及其对肺发育的影响。方法将80只早产鼠随机分为实验组及对照组,采用高浓度氧诱导早产鼠CLD模型,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等技术,测定肺组织HoxB5 mRNA水平,并同时观察放射状肺泡计数(RAC)的变化。结果生后1、3d,两组HoxB5 mRNA水平及RAC差异无统计学意义(P>0.05),7d时两者均开始降低(P<0.05),14d继续下降,21d降至最低(P<0.01),且肺组织HoxB5 mRNA水平及RAC呈明显正相关(P<0.01)。结论暴露高氧中早产鼠肺组织HoxB5基因呈低表达状态,其表达水平与肺泡发育障碍程度相一致。     

罗格列酮对新生大鼠高氧肺损伤的保护作用

目的：探讨PPAR-γ配体罗格列酮在新生大鼠高氧肺损伤中的保护作用。方法：取新生Sprague-Dawley大鼠96只,随机分为对照组、高氧组和罗格列酮治疗组。对照组在空气中饲养,后两组暴露在85%～90%氧气中。治疗组给予罗格列酮腹腔内注射每日1次（2 mg/kg）。3组于实验第1、3、7、14 d各处死8只大鼠并取其肺组织,行苏木精-伊红染色观察其病理形态改变,同时取其肺泡灌洗液（BALF）,检测其中的丙二醛（MDA）含量及白细胞计数。结果：对照组在各时间点均未见明显病理性改变;高氧组3 d时肺泡上皮细胞肿胀,肺泡腔内可见大量炎性渗出液,14 d时肺泡减少,肺间质增厚,肺泡发育受阻;与高氧组相比,罗格列酮治疗组炎症反应表现较轻,肺泡发育障碍有所缓解。与对照组相比,高氧组3 d时辐射状肺泡计数(RAC)明显下降（P<0.05）,MDA和白细胞计数明显增高（P<0.05）,这种变化一直持续至14 d（P<0.05）;与高氧组相比,罗格列酮治疗组3、7、14 d各亚组RAC明显增高（P<0.05）,MDA和白细胞计数水平较低（P<0.05）。结论：高氧肺损伤时出现肺部的急性炎症反应和肺泡发育受阻,罗格列酮对高氧肺损伤可能具有保护作用。     

SUMO化修饰C/EBPα在高氧暴露所致支气管肺发育不良早产大鼠中的动态表达及作用

目的 探讨小泛素相关修饰物（SUMO）化修饰CCAAT增强子结合蛋白α（C/EBPα）在支气管肺发育不良（BPD）早产大鼠中的表达及其作用。方法 将18只早产大鼠随机分为空气组和高氧组（n=9），建立高氧暴露早产大鼠BPD模型。分别在4 d、7 d及14 d，每组各取3只大鼠采集肺组织，糖原染色观察肺组织分化情况；免疫组化检测Ki67表达；Western blot检测SUMO1及C/EBPα蛋白表达；免疫共沉淀检测SUMO化C/EBPα表达。结果 与同时间点空气组相比，高氧组大鼠肺组织糖原染色强度4 d时减弱，7 d及14 d时明显增强；随高氧暴露时间延长，高氧组大鼠肺组织中Ki67表达逐渐升高，且均高于同时间点空气组；与空气组相比，高氧组C/EBPα蛋白4 d时表达增加，7 d及14 d时表达降低（P < 0.05）；高氧组SUMO1及SUMO化C/EBPα蛋白表达呈逐渐上升趋势，均明显高于同时间点空气组（P < 0.05）。高氧组SUMO化C/EBPα表达与糖原染色强度及核增殖抗原Ki67均呈正相关（r=0.529、0.671，P < 0.05）。结论 高氧暴露所致早产大鼠BPD模型中，肺泡上皮细胞过度增殖与分化障碍可能与SUMO化C/EBPα表达增加相关。     

泛素-特异性蛋白酶7在高氧暴露早产鼠肺组织中的表达及意义

目的 探讨泛素-特异性蛋白酶7（USP7）及Wnt信号通路中关键因子在高氧暴露早产大鼠肺组织中的表达及意义。方法 将180只新生早产Wistar大鼠随机均分成空气对照组、空气干预组、高氧对照组及高氧干预组,每组45只。干预组早产鼠每天腹腔注射USP7特异性抑制剂P5091（5 mg/kg）,高氧组建立早产大鼠高氧暴露肺损伤动物模型。分别于实验过程第3、5、9天时处死动物收集早产鼠肺组织标本,通过苏木精-伊红染色病理切片观察肺组织病理变化;采用RT-PCR及Western blot技术检测肺组织中USP7及Wnt信号通路关键因子β-catenin、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的mRNA及其蛋白表达水平。结果 空气各组肺组织形态结构基本正常;高氧对照组3 d、5 d时可见肺泡明显压缩、结构紊乱,有明显炎症细胞、红细胞渗出及间质水肿改变;高氧对照组9 d时可见肺泡结构紊乱、肺泡间隔明显增厚;高氧干预组肺组织结构紊乱、炎症细胞浸润、红细胞渗出情况均较相应时间点的高氧对照组有所减轻;各时间点高氧各组放射状肺泡计数（RAC）均明显低于相应空气各组（P < 0.05）,且高氧干预组RAC较高氧对照组明显升高（P < 0.05）。实验第3、5、9天时,高氧各组USP7、β-catenin mRNA及USP7、β-catenin、α-SMA蛋白表达均较相应空气各组增加（P < 0.05）;高氧干预组β-catenin mRNA及β-catenin、α-SMA蛋白表达较高氧对照组减少（P < 0.05）;高氧干预组USP7 mRNA及蛋白表达与高氧对照组相比差异无统计学意义（P > 0.05）,空气干预组USP7、β-catenin mRNA及USP7、β-catenin、α-SMA蛋白表达与空气对照组相比差异无统计学意义（P > 0.05）。结论 高氧暴露可激活Wnt/β-catenin信号通路;USP7可能通过Wnt/β-catenin信号通路参与高氧肺损伤;USP7特异性抑制剂P5091可能通过加强β-catenin的泛素化来加速其降解,减少肺上皮-间质转化,从而对高氧肺损伤具有一定的保护作用。     

血液灌流治疗儿童重症腹型过敏性紫癜的临床疗效和机制探讨

目的 观察血液灌流（HP）治疗儿童重症腹型过敏性紫癜（HSP）的疗效并初步探讨其机制。方法 24例重症腹型HSP患儿分为常规治疗组（12例）和血液灌流组（12例），并以10例健康体检儿童作为对照组。采用化学发光法检测对照组以及两个治疗组治疗前后的血清白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平，以及硫代巴比妥酸比色法检测血浆丙二醛（MDA）水平，羟胺法检测血浆超氧化物歧化酶（SOD）水平，化学比色法检测血浆总抗氧化能力（T-AOC）。结果 与健康组比，常规组及HP组治疗前的IL-6、TNF-α、MDA明显增多，SOD、T-AOC明显下降（P < 0.05），但常规组及HP组之间的差异无统计学意义（P > 0.05）；与治疗前比较，治疗后常规组及HP组患儿的IL-6、TNF-α、MDA水平均下降，SOD、T-AOC均回升，差异均有统计学意义（P < 0.05），而且HP组变化较常规组更显著，但与健康组相比差异仍有统计学意义（P < 0.05）。与HP组比较，治疗后第4天常规组消化道症状控制的比例较低，皮疹和消化道症状控制所用的时间较长，差异有统计学意义（P < 0.05）；与常规组比较，HP组激素用量较小，病程6个月内发生血尿和/或蛋白尿的几率小，差异均有统计学意义（P < 0.05）；两组在住院时间以及病程6个月以内的皮疹、腹痛复发率的差异无统计学意义（P > 0.05）。结论 HP可以降低重症腹型HSP患儿激素用量、肾损伤发生几率，机制可能与HP有效清除IL-6、TNF-α、MDA有关。     

前列腺素E1对高氧诱导新生大鼠脑损伤的保护作用

目的 探讨前列腺素E1（PGE-1）对高氧诱导新生大鼠脑损伤的保护作用,并观察糖调节蛋白78（GRP78）、CHOP蛋白表达的变化,为临床应用PGE-1治疗高氧引起的新生儿脑损伤提供理论依据。方法 将60只新生Wistar大鼠随机分成空气对照组、高氧脑损伤模型组和高氧脑损伤+PGE-1组。除空气对照组外均制备高氧脑损伤模型,从造模第1天起,高氧脑损伤+PGE-1组腹腔注射PGE-1,剂量为每日2 μg/kg,连续7 d,其他两组以生理盐水替代。检测各组大鼠脑组织含水量,苏木精-伊红染色观察脑组织病理变化,核染色结合TUNEL染色观察脑细胞凋亡情况,Western blot法检测脑组织GRP78、CHOP蛋白水平。结果 高氧脑损伤模型组脑组织含水量高于高氧脑损伤+PGE-1组及空气对照组（P < 0.05）;高氧脑损伤+PGE-1组脑组织含水量高于空气对照组（P < 0.05）。脑组织病理切片结果显示：高氧脑损伤模型组大鼠脑实质可见炎症细胞浸润增多,轻度脑血管水肿;高氧脑损伤+PGE-1组大鼠脑实质周围炎症及水肿较高氧脑损伤模型组减轻。高氧脑损伤模型组脑组织细胞凋亡指数高于高氧脑损伤+PGE-1组及空气对照组（P < 0.05）;高氧脑损伤+PGE-1组脑组织细胞凋亡指数高于空气对照组（P < 0.05）。高氧脑损伤模型组脑组织GRP78、CHOP蛋白的相对表达高于高氧脑损伤+PGE-1组和空气对照组（P < 0.05）;高氧脑损伤+PGE-1组GRP78、CHOP蛋白的相对表达高于空气对照组（P < 0.05）。结论 PGE-1对高氧诱导脑损伤新生大鼠具有保护作用,其机制可能为通过下调GRP78、CHOP蛋白表达,从而抑制细胞凋亡。     

脐血单个核细胞移植联合高压氧治疗对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的影响

目的 观察脐血单个核细胞(UCBMC)联合高压氧(HBO)治疗对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠远期行为学及组织学的影响。方法 7 日龄 Sprague-Dawley 新生大鼠随机分为正常对照组、缺氧缺血性脑损伤(HIBD)组、UCBMC 移植组及 UCBMC 联合HBO(UCBMC+HBO)组。采用Rice 法制成HIBD 模型。HBO 于造模 3 h 进行,造模后 24 h 行 UCBMC 移植。采用Western blot 法观察联合治疗对 HIBD 大鼠脑内IL-1β、TNF-α 蛋白的影响,采用T 迷宫、放射性迷宫试验及尼氏染色法,观察联合治疗对 HIBD 大鼠远期行为学及HIBD 大鼠脑海马 CA1 区组织学的影响。结果 移植后24 h,UCBMC+HBO 组大鼠脑内 IL-1β、TNF-α 蛋白的表达水平均显著低于HIBD 组与 UCBMC 组(P<0.05)。HIBD 组学习记忆及运动能力均减退,海马CA1 区锥体细胞数减少,UCBMC+HBO 组大鼠学习记忆及运动能力均较UCBMC 组及HIBD 组有改善,海马CA1 区锥体细胞数显著多于UCBMC 组及HIBD 组(P<0.05)。结论 UCBMC 联合HBO 治疗可减轻HIBD 新生大鼠IL-1β、TNF-α 蛋白的表达,促进脑损伤的修复并改善远期行为学。     

胰岛素样生长因子-1对缺氧缺血性脑损伤大鼠远期焦虑行为的影响

目的 了解围产期缺氧缺血性脑损伤（HIBD）恢复期大鼠焦虑行为的变化,并通过胰岛素样生长因子-1（IGF-1）的干预来探讨IGF-1 对HIBD 大鼠远期焦虑行为的影响和相关机制。方法 将90 只新生7日龄（P7）大鼠随机分为正常对照组、HIBD 组和HIBD+IGF-1 组,每组30 只。Rice 法制作新生大鼠HIBD 模型,HIBD+IGF-1 组于缺氧缺血（HI）后即刻腹腔注射IGF-1（0.2 mg/kg）,其余两组腹腔注射等量的生理盐水。各组于P21 和P28 时采用高架十字迷宫检测动物的焦虑行为,并于P14、P21、P28 时采用免疫组织化学方法检测中脑黑质酪氨酸羟化酶（TH）的表达。结果 P21、P28 时,HIBD 组和HIBD+IGF-1 组的开放臂停留时间和开放臂停留时间比率均明显低于正常对照组（均P<0.05）,但HIBD 组与HIBD+IGF-1 组之间差异均无统计学意义（均P>0.05）;这两个时间点开放臂进入次数比率在3 组间的差异均无统计学意义（均P>0.05）。P14 时各组的TH免疫染色阳性面积百分比差异无统计学意义（P>0.05）;P21 和P28 时,HIBD 组和HIBD+IGF-1 组的TH 免疫染色阳性面积百分比均明显低于正常对照组（均P<0.05）,但HIBD 组与HIBD+IGF-1 组之间差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论 围产期HI 损伤可使大鼠青春期焦虑行为发生改变,其机制可能与脑黑质TH 表达的减少相关;初生时给予IGF-1 干预对大鼠HIBD 远期焦虑行为的异常不产生作用,且IGF-1 不影响脑黑质TH 的表达,大鼠青春期焦虑样行为的改变可能不受IGF-1 调控。     

不同程度支气管肺发育不良早产儿的临床特征及预后分析

目的 探讨不同程度支气管肺发育不良（BPD）早产儿的临床特点及预后。方法 收集2014年3月至2016年3月入住NICU诊断为BPD且胎龄 < 32周的144例早产儿的临床资料,其中轻度组81例,中重度组63例,对轻度组与中重度组围生期高危因素及治疗情况、合并症及并发症、呼吸系统预后等情况进行比较和分析。结果 中重度组胎龄大于轻度组（P < 0.05）,但小于胎龄儿比例高于轻度组（P < 0.05）。中重度组重度子癎前期比例高于轻度组（P < 0.05）,先兆早产比例低于轻度组（P < 0.05）。中重度组生后2周仍需机械通气比例、机械通气时间、总氧疗时间、住院时间、肺炎及胆汁淤积综合症发生率高于轻度组（均P < 0.05）,枸橼酸咖啡因应用率低于轻度组（P < 0.05）。多因素logistic回归分析显示,小于胎龄儿（OR=5.974）、肺炎（OR=2.590）、出生2周仍需机械通气（OR=4.632）是BPD程度较重的危险因素（P < 0.05）。纠正胎龄40周肺功能检测中,中重度组达峰时间比（TPTEF/TE%）、达峰容积比（VPEF/VE%）及25%潮气量时呼吸流速（TEF25%）均低于轻度组（P < 0.05）。随访至纠正胎龄1岁,中重度组因肺炎反复入院率及喘息发作率均高于轻度组（P < 0.05）。结论 小于胎龄儿、肺炎、机械通气时间较长与BPD的严重程度相关,可加重BPD程度。中重度BPD患儿肺功能较差,易出现反复感染、喘息等并发症,应关注其远期预后。     

糖皮质激素对高氧诱导新生大鼠肺组织RAGE-NF-κB通路的影响

目的探讨RAGE-NF-κB信号通路在新生大鼠高氧肺损伤过程中的变化,以及糖皮质激素对其的影响。方法 24只新生大鼠随机分为空气对照组、高氧模型组和激素干预组。模型组新生大鼠于生后即暴露于95%氧气浓度环境中1周,空气对照组大鼠生后仅暴露于同室内空气中饲养7 d,激素干预组于造模后行尾静脉注射地塞米松(1 mg/kg),隔天1次,共3次。日龄13 d时处死全部大鼠,RT-PCR检测各组肺组织RAGE m RNA及NF-κB m RNA的表达;Western blot检测RAGE及NF-κB蛋白水平;ELISA法检测血清及肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α和s RAGE含量;苏木精-伊红染色后行肺组织病理学评估。结果与对照组和激素干预组相比,高氧模型组肺组织RAGE、NF-κB的m RNA和蛋白表达水平均明显增高(均P0.05),血清中s RAGE含量明显升高(P0.01),BALF中s RAGE含量下降(P0.01);与对照组相比,激素干预组肺组织RAGE、NF-κB的m RNA和蛋白表达水平明显升高(P0.05),血清中s RAGE含量明显升高(P0.05),而BALF中s RAGE含量明显下降(P0.05)。结论 RAGE-NF-κB通路在高氧诱导的新生大鼠肺损伤中活化增强,糖皮质激素可能通过下调RAGE-NF-κB信号通路对高氧肺损伤发挥保护作用。     

重组人促红细胞生成素对新生大鼠高体积分数氧肺损伤细胞炎症的影响

目的探讨人重组促红细胞生成素(rhEPO)对新生大鼠高体积分数氧(高氧)肺损伤炎症的影响。方法将72只新生SD大鼠按随机数字表法分为4组:对照组、支气管肺发育不良(BPD)组、高氧+低剂量促红细胞生成素[EPO(L)]组、高氧+高剂量促红细胞生成素[EPO(H)]组。BPD组、高氧+EPO(L)组和高氧+EPO(H)组新生大鼠暴露于850 mL/L氧气中,高氧+EPO(L)组和高氧+EPO(H)组分别于高氧暴露后1、3、7 d给予800 IU/kg、2000 IU/kg rhEPO皮下注射,对照组和BPD组注射等量9 g/L盐水。实验开始后3、7、14 d记录各组体质量。HE染色,光镜下观察其肺组织形态结构的改变,检测肺组织放射状肺泡计数(RAC)。免疫荧光染色法检测核因子-κB(NF-κB)的表达,Western blot技术检测肺组织磷酸化NF-κB(pNF-κB)、抑制蛋白(IκB)及Caspase-3的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液中白细胞介素-1β(IL-1β)的表达。结果1.BPD组新生大鼠14 d时体质量明显低于对照组[(18.97±3.21)g比(27.97±2.30)g],差异有统计学意义(P<0.05);14 d时,高氧+EPO(L)组和高氧+EPO(H)组新生大鼠体质量[(24.16±2.15)g、(26.04±1.97)g]均显著高于BPD组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。2.HE染色观察肺组织形态学结构显示,与对照组比较,BPD组3 d肺泡间隔有少量炎性细胞渗出,7 d更为明显,肺泡腔有渗出,14 d出现肺泡数量减少,肺大疱形成,间隔增厚,RAC明显减少(5.50±1.29比14.33±2.80),差异均有统计学意义(P<0.01);高氧+EPO(L)组和高氧+EPO(H)组新生大鼠肺组织病理改变减轻,炎性细胞浸润减少,RAC值在14 d均明显高于BPD组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。3.免疫荧光结果显示,BPD组NF-κB p65阳性细胞数目明显增多,荧光强度增强,给予EPO处理后可减少NF-κB p65阳性细胞数目,荧光强度减弱。4.Western blot结果显示,与对照组比较,BPD组pNF-κB p65及Cleaved Caspase-3显著增高,差异均有统计学意义(均P<0.05);IκB明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与BPD组比较,高氧+EPO(L)组和高氧+EPO(H)组pNF-κB p65及Cleaved Caspase-3显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05),IκB均明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。5.ELISA结果显示,与对照组比较,BPD组IL-1β表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);高氧+EPO(L)组和高氧+EPO(H)组IL-1β表达则显著低于BPD组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论EPO能通过NF-κB途径抑制细胞炎性反应,减轻高氧诱导的肺组织凋亡,对新生大鼠高氧肺损伤起保护作用。