氯化锰对大鼠脑线粒体复合体Ⅰ影响的研究

2000年1月1日,我国颁布新的汽油标准,全国汽油生产企业一律停止生产车用含铅汽油,改产无铅汽油.于是各汽油生产企业纷纷改用美国乙基公司生产的甲基环戊二烯羰基锰(manganese methyl cyclopentadiene carbonyl,MMT,其中的Mn含量为18 mg/L)替代四乙基铅作为新的汽油防爆添加剂.但是,根据美国环保局(EPA)调查,含MMT的汽油燃烧时,30%的锰从汽车排气管排入大气,99.9%的锰转化为氧化锰,因此汽车尾气中的无机锰主要为四氧化三锰Mn3O4、MnO,这些颗粒的直径为0.25～0.4 μm,属于可吸入颗粒物.     

线粒体复合体Ⅲ抑制剂抗霉素A对巨噬细胞免疫功能的影响

目的研究线粒体复合体Ⅲ抑制剂抗霉素A(AMA)对巨噬细胞免疫功能的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 AMA 0.0005,0.05,0.5,5和10 mg·L-1与RAW264.7巨噬细胞分别作用2,24和48 h后,WST-1法检测巨噬细胞增殖;AMA 0.0005,0.05和0.5 mg·L-1与RAW264.7作用2 h后,定量荧光法检测巨噬细胞产生活性氧水平、线粒体膜电位和对白色念珠菌的吞噬作用;Western蛋白印迹法检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)P38蛋白磷酸化水平;Griess法检测细胞培养上清一氧化氮含量。结果 AMA作用2 h对RAW264.7巨噬细胞增殖无明显影响,当作用时间延长到24和48 h后,可显著抑制RAW264.7巨噬细胞增殖(P<0.01)。AMA作用2 h可显著诱导RAW264.7巨噬细胞产生活性氧(P<0.01),降低线粒体膜电位(P<0.01)。AMA可增强RAW264.7巨噬细胞对白色念珠菌的吞噬功能,显著降低脂多糖诱导的巨噬细胞炎症介质一氧化氮的产生(P<0.01)。AMA显著诱导MAPK P38磷酸化(P<0.01)。结论 AMA能够诱导RAW264.7巨噬细胞线粒体损伤,增强巨噬细胞对白色念珠菌的吞噬功用,降低脂多糖诱导的炎症反应,可能与激活MAPK P38磷酸化,进而激活MAPK信号转导通路有关。     

氯化锰对大鼠血-脑脊液屏障的损伤作用

目的探讨氯化锰对大鼠脑脉络丛组织的毒性损伤作用。方法 大鼠ip给予氯化锰6mg(Mn).kg-1建立不同暴露时长(30d,90d及90d后无处理观察30d)的氯化锰中毒动物模型,各时间点染毒结束后采集血清与脑脊液(CSF)样本,提取侧脑室的脉络丛组织。溴甲酚绿法和ELISA法检测血清白蛋白(SALB)与CSF白蛋白(CALB)水平,并计算CSF白蛋白指数。光镜与透射电镜下检测大鼠脉络丛组织、细胞及亚细胞结构的病理形态学改变。结果氯化锰30d组、氯化锰90d组及氯化锰90d+30d恢复组CSF白蛋白、CSF白蛋白指数均明显高于其相应的对照组(P<0.05),并且氯化锰30d组CSF白蛋白、CSF白蛋白指数低于氯化锰90d组与氯化锰90d+30d恢复组(P<0.05),氯化锰90d组CSF白蛋白、CSF白蛋白指数低于氯化锰90d+30d恢复组,但无统计学意义。光镜和电镜观察发现,氯化锰导致脉络丛上皮细胞形状不规则,微绒毛结构紊乱、缩短;胞浆内出现空泡、核质凝聚,线粒体结构破坏,细胞间连接部分断裂或消失等,随染氯化锰时间的延长有加重的趋势,并且脱离氯化锰接触30d后仍表现为进行性加重。结论氯化锰可以引起脉络丛组织病理形态学改变,具有时效性与不可逆性的特征;CSF白蛋白及CSF白蛋白指数与脉络丛的损伤程度呈正相关,可以作为判断血-脑脊液屏障损伤程度的参考指标。     

不同价态锰对大鼠心肌线粒体酶活力的影响

随着锰在工农业、交通以及医药上的广泛应用，人群与锰的职业性与非职业性接触也越来越多，其与健康的关系日趋受到重视。流行病学资料表明地区高锰与冠心病死亡率之间成明显的正相关，触锰作业者猝死的死亡率也明显增高。已有研究表明高锰可使心功能降低和心肌损伤，但锰的心脏毒作用机制还未明了，而且目前对锰毒性的研究多集中于二价锰，而在职业性接触中，三价锰亦是主要成分，因此本研究拟通过测定不同价态锰对大鼠线粒体酶活力的影响，深入探讨锰对心脏的毒作用机制及不同价态锰对心脏的毒性作用强度的异同。     

氯化锰对大鼠动脉血与静脉血主要血液生化指标的影响与比较

目的在非临床毒理学安全性评价的动物试验中,血常规与血清生化指标等常作为一般毒性的反映指征,但国内外各标准指南中对于血样的采集方式却没有统一的要求,有时会影响试验结果的准确性。本研究即以氯化锰为受试物,通过短期内连续大剂量暴露于大鼠后,比较其对动脉血与静脉血的血常规及血清生化等指标的影响。方法48只SD大鼠按体重随机分为6组,分别为动脉采血与静脉采血的对照组、低剂量组(25 mg/kg·bw)及高剂量组(50 mg/kg·bw)。低剂量组与高剂量组通过腹腔注射给予MnCl_(2)·4H2O(对照组相同处理给予生理盐水)7 d后,按预定计划采血后分别检测血常规、血清生化及电解质等。结果氯化锰染毒后,大鼠的体重明显下降且具有剂量依赖性(F=22.904,F=18.897,P<0.01);低剂量组主要引起动脉血MCV、MCH、MONO%、ALT、AST、UREA、CREA的下降与PLT、Cl^(-)的升高(P<0.05),而静脉血则表现为MCV、MCH、ALT、ALB、CREA的下降以及NEUT%、PLT与Na^(+)的升高(P<0.05);高剂量组主要引起动脉血MCV、MCH、MONO%、ALT、AST、UREA、CREA的下降与RBC、HGB、HCT、NEUT%、CHOL、Ca^(2+)、Cl^(-)的升高(P<0.05),而静脉血则表现为MCV、MCH、ALT、ALB、CREA的下降(P<0.05);析因分析提示,氯化锰处理是引起RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、NEUT%、PLT、ALT、AST、GLU、ALB、CREA、CHOL、Ca^(2+)、Na^(+)与Cl^(-)差异的主要因素(P<0.05),而采血方式则是引起RBC、HGB、HCT、AST、GLU、ALB、TP、UREA、CREA、Ca^(2+)、K^(+)、Na^(+)与Cl^(-)差异的主要因素(P<0.05)。结论氯化锰作用下,动脉血与静脉血样中红细胞系、肝功能相关指标、肾功能相关指标以及电解质等的变化均有一定的差别,相比较而言,动脉血能更好地反映氯化锰作用下血液中各临床指标的变化。     

延伸护理对线粒体脑肌病患者依从性的影响

<正>线粒体脑肌病(mitochondrial encephalomyopathy,ME)是一组由于线粒体结构和(或)功能异常,ATP生成减少导致以脑和肌肉受累为主的多系统疾病的特殊类型线粒体病,属于母系遗传病,预后效果不理想。患者出院后需遵医嘱继续服药,进行运动、饮食管理是减轻并发症的重要方法。但由于线粒体脑肌病病程长、临床表现多样,患者的依从性是医护人员面临的重要问题,延伸护理在提高线粒体脑肌病患者出院后的依从性方面彰显了较好的优势。笔者所在医院2011年12月至今收治40例线粒     

菟丝子醇提液对衰老模型小鼠肝线粒体氧化损伤和复合体酶活性的影响

目的:研究菟丝子醇提液对D-半乳糖致衰小鼠抗氧化作用和线粒体呼吸链复合体和活性的作用。方法:纯系昆明种小鼠50只,随机分为青年组10只,衰老模型组10只,菟丝子醇提液组30只(15d组、30d组和45d组)。D-半乳糖注射法制作衰老模型。给药组灌服菟丝子醇提液。测定各组小鼠肝线粒体Mn-SOD活性、呼吸链复合体、呼吸链复合体活性及MDA含量的变化,同时观察给药15d、30d和45d时上述指标的变化。结果:D-半乳糖可诱导小鼠产生拟衰老变化,与青年对照组比较,表现出肝组织线粒体SOD活性下降(P<0.05),MDA含量升高(P<0.05),呼吸链复合体、呼吸链复合体活性降低(P<0.05)。菟丝子醇提液可提高衰老模型小鼠Mn-SOD、呼吸链复合体和呼吸链复合体活性。结论:菟丝子醇提液可通过提高衰老小鼠肝线粒体MnSOD活性和清除自由基能力,降低自由基代谢产物的含量,提高线粒体酶复合物活性,其作用随给药时间的延长而更显著。     

杏仁核复合体与药物依赖

杏仁核复合体(amygdaloid complex)简称杏仁核(amygdala),在细胞结构、神经化学、纤维联系以及功能方面[1]均有其独特的特征,杏仁核复合体受损或功能异常与癫痫、老年痴呆、帕金森氏病、精神分裂症、抑郁、应激障碍以及精神活性物质的依赖等均有密切关系[2].本文仅就杏仁核复合体与精神活性物质的依赖等有关研究的进展作一概述.     

不同场强的电磁脉冲辐照对大鼠脑线粒体功能的影响

电磁脉冲属非电离辐射,频谱范围宽,作用时间短,携带能量巨大,属于严重环境污染的一种。电磁脉冲可致全身性损害,而中枢神经系统最为敏感,研究表明电磁脉冲可影响大鼠的学习记忆能力、促进神经元的坏死和凋亡,但是其作用机制尚无定论,是否与电磁脉冲对脑线粒体的损伤有关亦未见报道。为了明确电磁脉冲对线粒体损伤与神经元损伤之间的内在关系,选用大鼠为实验对象,观察了连续45d不同场强电磁脉冲辐照对大鼠脑线粒体膜功能、呼吸功能、抗氧化能力的影响。结果显示电磁脉冲辐照后大鼠脑线粒体明显肿胀,膜磷脂降解、膜流动性下降,呼吸功能衰减,呼…     

线粒体脑肌病分子诊断的初步研究

目的探讨线粒体脑肌病的分子生物学诊断方法。方法以2对寡核苷酸为引物对3例患者血液和骨骼肌DNA进行聚合酶链反应(PCR)扩增,在PCR反应最后一个循环加入-α32P-dCTP,产物经Apa和BglⅠ酶酶切后进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,放射自显影,吸光度扫描仪扫描分析。结果病例1和2线粒体DNA存在A3243G点突变,病例1血液和骨骼肌突变型mtDNA分别为34.2%和66.8%,病例2为37.5%和73.3%;病例3存在A8344G点突变,血液和骨骼肌突变型mtDNA分别为46.2%和76.4%。结论PCR结合限制性内切酶分析可作为线粒体脑肌病的分子诊断方法,可为其确诊提供有力的分子遗传学证据。     

逍遥散对抑郁大鼠运动能力和肝脏线粒体的影响

目的 研究逍遥散对抑郁大鼠运动能力及肝脏线粒体结构和功能的影响。方法 将SD大鼠随机分为对照组、模型组、文拉法辛（给予盐酸文拉法辛胶囊35mg·kg^-1）组和逍遥散（生药21.2g·kg^-1）组,除对照组外,采用慢性不可预知温和应激（CUMS）建立抑郁模型,于造模同时ig给药,连续28d,每周称体质量。造模结束后进行旷场实验、糖水偏好实验、爬杆实验和转棒实验行为学测试;通过透射电镜观察肝脏线粒体超微结构;通过试剂盒测定血清睾酮、皮质酮水平和线粒体腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）和线粒体呼吸链复合体（MRCC）I、III、IV、V水平。结果 与对照组比较,模型组大鼠体质量增长缓慢（P＜0.01）,糖水偏爱率、旷场实验的穿越格数及直立次数、爬杆实验得分和转棒实验在棒时间均显著下降（P＜0.05、0.01）;血清皮质酮水平显著增加（P＜0.05）,睾酮水平和睾酮-皮质酮比值（T/C）显著降低（P＜0.05、0.01）;大鼠肝脏线粒体数目减少,外膜模糊,基质疏松;肝脏线粒体ATP水平及MRCCⅠ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ活性降低（P＜0.05、0.01）。与模型组比较,逍遥散组大鼠体质量显著增加（P＜0.05）,旷场实验穿越格数和直立次数增加（P＜0.05、0.01）,糖水偏好率显著增高（P＜0.05）,爬杆实验得分显著增加（P＜0.01）,转棒实验的在棒时间显著延长（P＜0.05）;血清睾酮水平显著升高（P＜0.05）,皮质酮水平显著降低（P＜0.05）,T/C显著升高（P＜0.01）;大鼠肝脏线粒体嵴清晰,结构较为完整;肝脏线粒体ATP水平和MRCCⅠ、Ⅴ活性显著增加（P＜0.05）。结论 逍遥散能够显著改善CUMS大鼠肝脏线粒体形态和功能,提高其运动能力,发挥抗抑郁作用。     

溴氰菊酯对大鼠肝线粒体呼吸功能影响的研究

溴氰菊酯在体外对线粒体呼吸功能有明显抑制作用,还明显抑制唬珀酸脱氢酶和琥珀酸-细胞色素C还原酶的活性,降低线粒体膜的渗透肿胀作用,使线粒体膜过氧化脂质的含量明显增加。但在体内试验中,未见其有明显抑制线粒体呼吸和有关酶活性的作用。因此认为溴氰菊酯经体内代谢后对线粒体毒性可能降低。在体外对线粒体呼吸功能的抑制可能与其改变线粒体膜脂质成份,进而导致线粒体有关酶活性和膜通透性改变有关。     

早期糖尿病肾病大鼠肾脏线粒体功能及超微结构变化

目的观察早期糖尿病肾病大鼠肾脏线粒体功能和结构变化。方法将20只健康雄性大鼠随机分为正常对照组和糖尿病组,每组10只。糖尿病组大鼠采用链脲佐菌素诱导糖尿病模型。第10周末测定2组血糖、肾重/体质量、24h尿蛋白定量;检测各组肾脏线粒体丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）含量及锰超氧化物歧化酶（Mn-S0D）、总一氧化氮合酶（T-NOS）、组分ATP酶活性和线粒体呼吸控制率（RCR）,分析线粒体比表面。结果与正常对照组比较,糖尿病组血糖、肾重/体质量、24 h尿蛋白定量明显增加（P〈0.01）,肾脏线粒体MDA、NO含量、T-NOS明显增加（P〈0.01）,Mn-S0D、组分ATP酶活性、线粒体RCR及比表面明显减少（P〈0.01）。结论早期糖尿病肾病大鼠肾脏线粒体存在明显的氧化损伤和功能、结构障碍。     

脑康泰胶囊对阿尔茨海默氏病大鼠学习记忆作用的影响

目的：观察脑康泰胶囊对阿尔茨海默氏病模型大鼠学习记忆作用的影响。方法：采用脑立体定向颅内注射啉酸所致阿尔第默氏病（Alzheimers disease.AD)大鼠模型的方法。结果：脑康泰胶囊可显著增加强AD大鼠被动学习和主动学习的能力。调节脑组织中单胺类递质含量及血清中相关激素水平,并显著改善AD模型大鼠的脑电图。结论：脑康泰胶囊显著改善AD大鼠学习记忆能力的作用,其机制与其调节中枢递质及激素水平等相关。     

铝对大鼠海马神经细胞线粒体酶的影响

目的探讨线粒体酶在铝致大鼠凋亡神经细胞中的改变。方法健康雄性SD大鼠40只，按体重随机分为4组：生理盐水、AL^3＋ 2．5、5、10mg／kg组。腹腔注射染毒60d后处死，用TUNEL法检测细胞凋亡，电镜观察线粒体结构的改变，用试剂盒测定线粒体超氧化物歧化酶（SOD），琥珀酸脱氢酶（SDH），三磷酸腺苷（ATP）酶（总ATP、Na^＋-K^＋ATP，Ca^2＋ ATP和Mg^2＋ ATP酶）活力。结果 随染铝剂量的增高，凋亡指数（AI）逐渐升高（P〈0．05），Na^＋-K^＋ ATP酶、Ca^2＋ ATP酶、Mg^2＋ ATP酶和SOD均降低（P〈0．05）；海马神经细胞SDH均数降低，但差异无显著性（P〉0．05）。海马神经细胞凋亡指数与Na^＋-K^＋ ATP酶、Ca^2＋ ATP酶、Mg^2＋ ATP酶和SOD呈负相关（r=-0．439，-0．501，-0．530，-0．815，P〈0．05），与SDH没有相关性（r=0．287，P〉0．05）。结论铝可以诱导大鼠海马神经细胞凋亡，并引起线粒体结构和线粒体酶活力的改变。     

二氮嗪对大鼠心肌线粒体膜电位及呼吸功能的影响

目的 :研究二氮嗪对大鼠心肌线粒体功能的影响 ,以探讨其心肌保护作用的可能机理。方法 :以罗丹明 12 3为荧光探针测定线粒体膜电位 ,氧电极法测线粒体呼吸 ,观察二氮嗪对正常大鼠心肌线粒体跨膜电位及呼吸的影响。结果 :5 0 μmol·L-1的二氮嗪可引起线粒体膜电位去极化 ,此影响可被钾通道阻滞剂消除 ;二氮嗪 10 0 μmol·L-1可降低大鼠心肌线粒体琥珀酸链的R3、R4速率 ,但不影响呼吸控制率。结论 :二氮嗪可调节大鼠心肌线粒体功能 ,这与其抗心肌缺血保护作用有关。     

人参皂苷Rb3 对脑缺血大鼠脑线粒体损伤的保护作用

目的研究人参皂苷Rb3对脑缺血大鼠脑线粒体损伤的保护作用,探讨人参皂苷Rb3抗缺血性脑中风的机制.方法用栓线法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)模型,测定线粒体肿胀度、膜流动性、膜磷脂含量、呼吸功能、线粒体呼吸酶、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和Ca2+等.结果大鼠MCAO后24 h,脑线粒体损伤明显,表现为肿胀、膜流动性降低,膜磷脂降解、呼吸功能衰减,呼吸酶和SOD活性降低,Ca2+和MDA含量升高;静脉注射人参皂苷Rb3(5,10 mg·kg-1)能明显抑制缺血脑线粒体膜流动性的降低和膜磷脂的降解,减少脑缺血引起的线粒体肿胀,抑制NADH脱氢酶、琥珀酸脱氢酶和细胞色素C氧化酶活性的降低,改善线粒体呼吸功能;明显降低脑缺血大鼠脑神经细胞线粒体MDA含量,升高SOD活性,抑制Ca2+过多摄入.结论人参皂苷Rb3对缺血脑神经细胞线粒体的损伤有明显的保护作用,该作用可能与清除氧自由基、抑制脂质过氧化、拮抗Ca2+有关.     

络瘀通胶囊对大鼠脑血流量的影响

络瘀通胶囊对大鼠脑血流量的影响@康爱群$西安医科大学临床药理研究所!710061@朱芳$西安医科大学临床药理研究所!710061@王美纳$西安医科大学临床药理研究所!710061@鞠敏$西安医科大学临床药理研究所!710061@韩许亮$西安医科大学学生科学技术协会科研小组@金晨旺$西安医科大学学生科学技术协会科研小组