FASL、TRAIL在慢性乙型肝炎患者外周血淋巴AICD中的作用

目的:探讨FASL、TRAIL在慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞(Peripheral blood lymphocytes,PBLs)活化诱导细胞凋亡(activation induced cell death,AICD)中的作用。方法:分离20例正常人、24例慢性乙型肝炎患者及24例慢性重型乙型肝炎患者的PBLs,体外单独或与植物血凝素(PHA)共同培养48小时,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)与免疫组化SABC法检测FASL、TRAIL.在慢性乙肝患者PBLs的表达。结果:PHA活化前,FASL.mRNA、TRAIL mRNA在上述3组研究对象外周血淋巴细胞均不表达;PHA活化后;二者表达明显上调,且慢性乙型肝炎组高于正常对照组,慢性重症肝炎组低于正常对照组,差异有显著性(P<0.01)。正常人静息的外周血淋巴细胞不表达FASL和弱表达TRAIL,经PHA活化后,二者表达均明显上调(P<0.01)。结论:FASL、TRAIL参与了乙型肝炎患者外周血淋巴细胞AICD过程,并可能是其重要效应分子。     

慢性乙型肝炎PBMC凋亡及淋巴细胞亚群的检测

目的了解慢性/慢性重型乙型肝炎外周血淋巴细胞激活诱导细胞死亡(AICD)现象的存在情况、各免疫细胞的状况、AICD与淋巴细胞状况的关系,以探讨乙型肝炎慢性化和重型化的机制.方法利用慢性、慢性重型乙型肝炎病人和健康献血员外周血单个核细胞(PBMC)在PHA-P刺激下培养72h,通过流式细胞仪检测PBMC的凋亡情况;采用流式细胞仪结合全自动血液分析仪对慢性、慢性重型乙型肝炎病人及正常对照组外周血各淋巴细胞亚群进行检测.结果慢性乙型肝炎组PBMC凋亡率高于慢性重型乙型肝炎组(P＜0.01),高于正常对照组(P＜0.01).慢性乙型肝炎组总淋巴细胞百分率高于慢性重型乙型肝炎组(P＜0.01),慢性重型乙型肝炎组淋巴细胞数低于正常对照组(P＜0.01);CD3+、CD3+CD4+细胞数低于正常对照组(P＜0.01),低于慢性乙型肝炎组(P＜0.05);CD3+CD8+细胞数低于正常对照组(P＜0.05),低于慢性乙型肝炎组(P＜0.05).单核细胞百分率高于正常对照组(P＜0.01),高于慢性乙型肝炎组(P＜0.05).结论慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞活化与凋亡共存,慢性重型乙型肝炎患者外周血淋巴细胞消耗严重,AICD参与乙型肝炎慢性化、重型化的发生机理.     

重型乙型肝炎患者单核细胞HLA-DR分子表达及临床意义

目的:探讨重型乙型肝炎患者外周血单核细胞功能变化的特点及其意义.方法:应用流式细胞术(FCM)和酶联免疫吸附法对重型肝炎患者单核细胞HLA-DR分子的表达及外周血中白细胞介素.10(IL-10)的水平进行检测,并结合临床资料加以分析.结果:与正常对照组比较,慢性乙型肝炎、肝炎肝硬化、慢性重型肝炎患者外周血单核细胞HLA-DR的表达水平逐渐下降,尤其以慢性重型肝炎患者下降最为明显;而慢性重型肝炎患者外周血中IL-10的水平则明显升高,差异均具有统计学意义(P＜0.01).相关分析表明,HLA-DR的表达水平与凝血酶原活动度呈正相关(rs=0.61,P＜0.01).慢性重型肝炎患者死亡与存活组比较,前者HLA-DR水平明显降低;而IL-10水平明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:外周血单核细胞HLA-DR的表达水平与慢性重型肝炎患者病情严重程度以及预后密切相关,检测外周血单核细胞HLA-DR分子水平有助于评价重型肝炎患者的免疫功能状态以及判断预后.     

TRAIL及其5种受体DNA片段的扩增与序列分析

目的：制备TRAIL及其5种受体的特异性基因探针。方法：以PHA刺激人外周血淋巴细胞(PBL)增殖，从而诱导TRAIL及其受体的mRNA转录水平提高，然后用RT-PCR方法扩增出TRAIL及其5种受体的DNA基因片段，并采用基因测序法确证所得基因片段序列的正确性。结果：获得了TRAIL及其5种受体的DNA基因片段。结论：所用方法正确，为研究TRAIL及其受体调控细胞凋亡的机制提供了有价值的工具。     

SLE患者淋巴细胞Caspase-3和Annexin V/PI的定量检测

为了研究SLE患者外周血淋巴细胞 (PBL)在体外培养下细胞凋亡指标Caspase 3和AnnexinV/PI的变化 ,使用AnnexinV联合PI染色和FITC标记的ActiveCaspase 3抗体染色 ,流式细胞术检测 4 4例SLE患者和 30例正常人外周血淋巴细胞在体外培养 4 8h后淋巴细胞 (PBL )凋亡的发生率。结果显示在体外培养作用下 ,活动期SLE患者PBL凋亡率较正常人显著增高(P <0 0 1) ,而静止期则无明显差别 (P >0 0 5 )。SLE疾病活动指数SLEDAI,抗dsDNA抗体与淋巴细胞Caspase 3和AnnexinV/PI表达呈明显的正相关 (P <0 0 5 )。活动期SLE患者PBL凋亡较正常人显著增高。淋巴细胞凋亡与SLE疾病活动指数之间具有明显的相关性 ,表明SLE存在体内凋亡或凋亡相关性免疫机制失调     

Poly(I∶C)加重碘过量诱发的NOD鼠慢性淋巴细胞性甲状腺炎

目的:探讨poly(I∶C)作为病毒类似物对碘过量所致NOD鼠慢性淋巴细胞性甲状腺炎的影响。方法:将32只雌性NOD鼠,随机分为4组,每组8只,分别为:(1)对照组;(2)碘过量组;(3)poly(I∶C)组;(4)碘过量联合poly(I∶C)组。作用9周后处死动物:观测体重、甲状腺重量及其解剖形态;采用放射免疫分析法检测血清中甲状腺激素(T4)水平;HE染色观察甲状腺组织形态变化,TUNEL技术检测甲状腺组织细胞凋亡情况,定量PCR法检测凋亡相关基因(TRAIL、TRAIL-sR1)和炎症相关基因(ICAM-1、CXCL10)mRNA表达。结果:碘过量组较对照组、Poly(I∶C)组甲状腺绝对重量及相对重量均明显增加(P0.01);血清总T4水平下降(P0.05);炎症破坏和细胞凋亡明显加强;上调TRAIL、TRAIL-sR1、ICAM-1、CXCL10mRNA表达(P0.05)。碘过量联合poly(I∶C)组较单纯碘过量组甲状腺绝对重量及相对重量均进一步增加;血清总T4水平显著下降(P0.05);炎症进一步加重,破坏程度IV级所占比例升至50.0%;凋亡细胞数量明显增加,进一步上调TRAIL、TRAIL-sR1、ICAM-1、CXCL10mRNA表达(P0.05)。Poly(I∶C)组各值与对照组趋势一致(P0.05)。结论:Poly(I∶C)加重碘过量所致慢性淋巴细胞性甲状腺炎发病程度,其作用途径与增加淋巴细胞浸润和甲状腺细胞凋亡有关。     

类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中TRAIL、c-FLIP 等表达水平及临床意义

目的:分析类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL、c-FLIP、Caspase-8等基因表达情况,探讨其在RA中的临床意义,为RA的临床诊治寻找更有效的途径和方法提供实验基础。方法:采用实时荧光定量PCR的方法检测外周血单个核细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL、c-FLIP、caspase-8 mRNA 表达水平;采用蛋白免疫印迹法检测PBMC 中TRAIL、c-FLIP、caspase-8 蛋白表达水平。结果:各组RA 患者PBMC 的TRAIL、c-FLIP、Caspase-8 的mRNA 表达水平:中活动组(M)中TRAIL的mRNA为(3.26±0.78),高于健康对照(N)(1.30±0.20,P=0.028)。低活动组(L)和高活动组(H)(1.56±0.37、1.83±0.26),略高于健康对照(N)(P=0.048、0.043);L、M、H 组c-FLIP mRNA相对表达量分别为1.27±0.28,1.32±.34,1.93±0.40,均高于N组1.08±0.12(P 分别为0.035、0.034、0.030),差异有统计学意义;caspase-8 mRNA L、M、H 组中分别为(2.77±0.97)、(4.52±0.85)、(2.13±0.44),均高于N 组(1.04±0.13,P=0.023,0.012,0.032)。RA 患者PBMC 中TRAIL、c-FLIP、caspase-8 蛋白表达:M 组TRAIL 蛋白表达明显高于N 组(P=0.013 ),H 组稍高于N 组(P=0.043),L组与N组无明显统计学差异(P=0.058),M 组明显高于L、H 组(P=0.011,0.021);c=FLIP 蛋白表达中M组明显高于N 组(P<0.01),而L、H 组与N 组无显著差异(P =0.062,0.053);L 组表达与N 组无显著差异(P>0.05),而M、H组caspase-8 蛋白表达明显高于N 组(P=0.003,0.001)。结论:在RA 的不同活动期中,外周血单个核细胞TRAIL、c-FLIP 和Caspase-8 等表达水平总体趋势增加,可为RA 的临床诊治及后续研究提供实验参考。     

LPS提高单核细胞TRAIL表达及诱导肝细胞凋亡的研究

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNFrelatedapoptosisinducingligand,TRAIL)是近年来新发现的TNF家族中成员〔1〕,与TNF、FasL不同,它除了诱导肿瘤细胞及病毒转染细胞发生凋亡外,最近研究发现TRAIL同样能诱导正常肝细胞凋亡〔2〕,其在病毒性肝炎发病机理中的作用受到重视。本实验从脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)致单核细胞TRAIL表达情况作研究,探讨LPS通过TRAIL致肝细胞凋亡途径在重型病毒性乙型肝炎致病机理中的可能作用。材料和方法实验对象:疾病组共80例,其中慢性病毒性乙型肝炎38例,年龄38.1±8.6岁,慢性重型病毒性乙…     

重组人可溶性TRAIL的制备及其联合硼替佐米诱导肿瘤细胞的凋亡作用

目的:构建重组人肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)原核表达质粒p ET-28a(+)-TRAIL114-281,优化蛋白表达和纯化条件,制备重组人可溶性TRAIL并鉴定其活性。方法:使用CCK-8初步验证TRAIL是否具有抑制肿瘤细胞生长的生物活性;将制备的TRAIL单独或联合50 nmol/L硼替佐米应用于H460细胞(对TRAIL敏感)和K562细胞(对TRAIL抵抗)24 h,流式细胞术检测细胞凋亡率,比色法检测caspase-8、-9、-3的活化程度,Western blot分析细胞中Bax、Bcl-2和c FLIP蛋白的表达。流式细胞术检测硼替佐米处理H460细胞和K562细胞24 h后DR4和DR5的表达量变化。结果:制备了具有生物学活性且性质稳定的重组人可溶性TRAIL,且成功诱导H460和K562细胞凋亡。不同浓度TRAIL处理H460细胞后其凋亡率随着TRAIL浓度升高而显著升高(P0.05),但K562细胞凋亡率并未随着TRAIL浓度明显升高。联合用药组的H460和K562细胞凋亡率均显著高于单独用药组(P0.05),凋亡过程中caspase-8、-9、-3均被活化,药物处理组的Bcl-2和c FLIP表达量均比对照组下降,尤其联合用药组表达量下降最为显著(P0.05),而Bax表达量无明显变化。硼替佐米处理H460和K562细胞后DR4和DR5表达量均上调(P0.05)。结论:硼替佐米能协同TRAIL启动内源性凋亡途径诱导H460和K562细胞凋亡,其可能机制是通过上调死亡受体DR4和DR5的表达量、下调抗凋亡蛋白Bcl-2和c FLIP的表达量来实现的。     

SLE患者外周血IFN-γ及IL-4细胞因子mRNA的表达研究

为利用实时监测定量PCR技术检测细胞因子mRNA的表达 ,从mRNA水平探讨IFN γ、IL 4mRNA的变化。对初诊SLE患者外周血IFN γ、IL 4的mRNA表达进行检测 ,并同时使用LPS及PHA作刺激剂研究其对SLE患者细胞因子mRNA表达的影响。结果是PHA刺激后 ,正常组IFN γmRNA的表达明显高于SLE组 (P =0 0 2 4 ) ;LPS对正常对照的IFN γ和IL 4的mRNA表达均能明显上调 ,但SLE患者仅表现为IFN γ升高 ,IL 4升高不明显 ;未刺激组SLE患者与正常对照的比较结果显示IFN γ的表达及IFN γ/IL 4有明显降低 (P =0 0 14 ,P =0 0 33)。故SLE患者与正常对照相比 ,IFN γmRNA的表达下降 ,同时SLE患者的IFN γ、IL 4mRNA表达对LPS及PHA的反应下降。由于不同的患者受累系统不同 ,临床表现不一 ,可能T细胞的异常并不相同 ,其免疫系统紊乱的机制也不一致     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

局部注射辛伐他汀对骨质疏松大鼠股骨髁骨小梁的改建效应

背景：局部注射具有成骨作用的辛伐他汀,可显著增加骨质疏松大鼠股骨颈及股骨髁部的骨密度及力学强度,分析局部注射辛伐他汀对股骨髁骨小梁的影响。 目的：进一步研究骨质疏松大鼠股骨内局部注射辛伐他汀对股骨髁骨小梁的影响。为将辛伐他汀应用于临床骨质疏松局部治疗提供实验基础。 方法：18只雌性SD大鼠双侧卵巢切除后3个月,制备大鼠骨质疏松模型。实验大鼠随机数字表法均分为3组,分别在实验大鼠的右侧股骨髓腔内单次注射辛伐他汀溶液5 mg、10 mg,对照组单纯注射空白载体。分别在注射后1个月处死大鼠并取材。Micro-CT扫描并定量分析骨组织形态变化。 结果与结论：给药后1个月,Micro-CT扫描结果显示,辛伐他汀治疗组的骨微结构参数如骨皮质厚度、骨小梁密度及连接率明显优于对照组。说明疏松骨骼单次注射小剂量辛伐他汀可显著促进股骨髁部骨小梁改建,改善骨骼微结构,可为强化局部、防治骨质疏松骨折的新选择进一步提供实验基础。     

石斛属民族药用植物的分类及生药学研究

中药石斛早在《神农本草经》中就被列为上品,其应用历史悠久,具有养阴生津、补肾益气、润喉护嗓、活血明目、抗癌防老等功效。本文对国内外石斛属民族药用植物的分类及生药学研究进行了综述。     

膝关节骨性关节炎的关节镜治疗体会

目的我科自2001～2005年4月对59例67膝的骨性关节炎（0A），进行关节镜检查及镜下清理术。方法镜检：膝关节骨性关节炎伴不同程度滑膜炎，滑膜皱壁粘连纤维片，关节软骨不同程度破坏。镜下清除增生滑膜，松解粘连，去除剥脱软骨、修复关节面。结果随访2月～4年，平均1.5年，术后综合评估2月～1年，优良率94％；1～2年，优良率79.2％；2年以上优良率54.8％。结论关节镜对膝关节骨性关节炎诊断能提供了比较全面的资料，并对骨性关节炎早期有良好疗效，具有创伤小、恢复快、并发症少和重复治疗等优点。     

Anatomical study of distribution of valves of the cutaneous veins of adult''s limbs

Since the cutaneous veins of the four limbs have been used as autogenous grafts in the treatment of cardiovascular disorders, knowledge of distribution of the valves is increasingly required depending upon the use. In the gross anatomical study of distribution of valves of the trunci venae, there has been argument about locational relationships between the venous roots and the valves in the vicinity of the roots and the inter-valvular distance. However, there have been only few reports discussing detailed information about valves of the cutaneous veins of the four limbs. The authors observed patterns of distribution of the cutaneous venous valves of the four limbs of cadavers prepared for practice in anatomy. The following parts were excised from each cadaver: the cephalic, basilic, and the great saphenous veins, which originate from the acral venous network and flow into the proximal deep veins, and the venous roots communicating with these veins. An incision was made on each excised vein in the direction of the long axis under observation with a stereoscopic microscope, and the inter-valvular distance and the distance between the valve and the orifice of venous root in the vicinity of the valve were measured. The inter-valvular distance varied with type of the truncus venae, and it varied according to area even in the same truncus venae.     

Pathways of the realization of immunomodulating effects of neurotransmitters

Translated fromByulleten' Eksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 115, N ^o 4, pp. 401–404, April, 1993     

Characterization of sterols of three digenetic trematodes of buffalo

Sterols of three digenetic trematodes were isolated and characterized by infrared and 1H nuclear magnetic resonance spectroscopies, and gas-liquid chromatography and gas chromatography-mass spectrometry. Sterols identified were cholesterol, cholestanol, 24-methylcholesterol, 24-methylcholestanol, 24-ethyl-22-dehydrocholesterol, 24-ethyl-22-dehydrocholestanol, 24-ethylcholesterol and 24-ethylcholestanol.     

Mechanisms of generation of slow components of bioelectric activity in diagnostics of functional state of the gastrointestinal tract

New electrophysiologic devices were used for the diagnostics of the state of excitable structures in the gastrointestinal tract and correction of their motor functions. Bioelectrical and biomechanical activities form the basis of functioning of internal organs. The mechanisms of generation of slow bioelectrical activity that are important for clinical and physiological studies are described. One of these mechanisms is a capacitance parametric transducer converting the energy of contractions into specific electric signals reflecting muscle functions. Another mechanism results from slow oscillations of resting potentials of interrelated excitable cells in large neuromuscular structures of internal organs. The elaborated procedure is efficient for preventing early postoperative paresis of the gastrointestinal tract. Translated fromByulleten' Eksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 128, No. 10, pp. 448–452, October, 1999     

胃小弯侧血管弓的MDCT解剖

目的：研究正常胃小弯侧血管弓及其属支血管的多排螺旋CT表现。方法：回顾性分析51例正常成人的上腹部CT资料,观察胃小弯侧血管弓及其属支血管的显示情况、血管弓形态及其与胃壁的关系。结果：51例均显示胃小弯侧血管弓,血管弓贲门部属支、胃体部属支和幽门部属支分别显示46例、15例和10例;血管弓与胃壁紧邻41例。结论：MDCT检查可良好显示正常胃小弯侧血管弓及其属支血管。     

Assessment of the efficacy of treatment of hemangiomas

Assessment of the aftereffects of cryoexposure and ultrahigh-frequency cryoexposure on hemangioma tissue of various types, cavernous and squamous, showed a higher cryogenic effect in hemangiomatous tissue preexposed to ultrahigh-frequency waves. A quantitative criterion is proposed for assessing the efficacy of the studied methods of exposure. Translated fromByulleten' Eksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 119, N ^o 6, pp. 669–672, June, 1995