雷公藤制剂生殖毒性及联用减毒研究进展

雷公藤具有祛风湿、活血通络、消肿止痛、杀虫解毒等功效。目前常见制剂包括雷公藤片、雷公藤多苷片、昆明山海棠片、昆仙胶囊、雷公藤双层片和雷公藤总萜片等。生殖毒性是雷公藤制剂治疗免疫性疾病时最棘手的不良反应之一,而通过联用单味药或复方可明显减小雷公藤制剂生殖毒性。本文就近年该领域研究作一综述,为临床用药提供依据。     

雷公藤多苷致雄性生殖功能损害研究进展

雷公藤多苷作为目前中药治疗肾脏疾病最有效的药物之一,其不良反应表现日益突出。就雷公藤多苷致雄性生殖损害作一综述,从病理生理、生殖内分泌、分子机制、基因遗传等多角度探讨其作用机制。中医认为"肾主生殖",精子的生成有赖于肾阴的濡养和肾阳的温煦,故精子的数量和质量取决于肾中真阳真阴的盛衰,以补肾填精温阳法为治疗之要旨。文章从现代医学和传统中医两方面阐述雷公藤多苷对雄性生殖系统损伤的作用机制,为更安全和广泛的应用雷公藤多苷提供了理论和实验依据。     

雷公藤片对小鼠睾丸组织的毒性作用及其分子机制研究

目的:探讨雷公藤片对小鼠睾丸组织毒性作用及其分子机制.方法:成熟雄性小鼠,分别于每天上午10:00左右灌胃给予雷公藤片105 mg/kg(含雷公藤甲素40 μg/kg),于给药4周后观察精子畸形率;HE染色,光镜观察睾丸组织的形态学变化;免疫组化法观察睾丸组织iNOS、eNOS和凋亡相关基因Fas-L、Bcl-2和Bax的表达;原位杂交观察睾丸组织核转录因子NFκB的表达.结果:给药4周后,与正常对照组相比,给药组精子畸形率明显升高(P＜0.05);组织形态学检查可见给药组小鼠睾丸生精小管内初级精母细胞和精子明显减少,生精细胞排列紊乱,精原细胞和支持细胞也有所减少;与正常对照组相比,给药组睾丸组织iNOS表达无明显改变,eNOS的表达明显下调;凋亡相关基因Fas-L和Bax的表达明显上调,而Bcl-2的表达无显著差异;雷公藤可明显抑制睾丸组织核转录因子NFκB的表达.结论:雷公藤长期毒性主要表现为对生殖系统的毒性作用,其毒性可能与核转录因子NFκB表达的过度抑制,引起睾丸组织凋亡相关基因表达上调,导致睾丸组织凋亡有关,提示预防睾丸组织凋亡将有助于降低雷公藤的生殖毒性.     

雷公藤多苷片对Ⅱ型胶原诱导性关节炎雄性大鼠生殖毒性的影响

为了解雷公藤多苷片对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)雄性大鼠生殖系统的影响作用,该实验将50只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(Con),模型组(CIA),雷公藤多苷片临床等效剂量1,2,4倍剂量组(9,18,36 mg·kg~(-1)),每组10只,首次免疫后当天开始灌胃给药,每天1次,给药42 d。分别于第21,42天取材,计算睾丸和附睾脏器指数;光镜下观察睾丸和附睾组织病理形态学改变;采用计算机辅助精子分析技术观察附睾组织中精子计数、精子畸形率及精子动力学参数;ELISA法检测血清中睾酮(T)及一氧化氮合酶(NOS)及芳香化酶(CYP19A1)的含量变化;免疫组织化学法观察睾丸、附睾组织凋亡通路相关蛋白Bax和Bcl-2的表达。结果表明,与Con组比较,CIA组能显著增加睾丸生精小管病变及精子畸形率、降低平均路径速度,其他未见显著变化;与CIA组比较,给药42 d,雷公藤多苷片4倍临床等效剂量可明显降低睾丸指数(P0.01),各剂量组均可降低附睾指数(P0.05);雷公藤多苷片各剂量组均可造成睾丸和附睾不同程度的组织病理学损伤,出现睾丸内生精小管病变比例变大,生精小管内各级生精细胞总数减少等,同时,能降低精子数、升高精子畸形率、使各精子动力学参数异常等,这些变化均随给药剂量和时间的增加而严重;4倍剂量雷公藤多苷片均能显著降低血清性激素T及雄激素合成关键酶NOS的含量(P0.05或P0.01),但对CYP19A1作用不明显;2倍和4倍剂量雷公藤多苷片均能提高睾丸和附睾组织中促凋亡蛋白Bax的表达,降低Bcl-2表达(P0.05,P0.01或P0.01)。综上表明,临床等倍和以上剂量雷公藤多苷片给药21 d就可造成CIA雄性大鼠生殖器官明显的毒性反应,并一定程度降低血清性激素T及雄激素合成关键酶NOS水平,引起睾丸和附睾组织中凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2含量的异常变化,相关机制有待进一步的研究阐明。     

“五子四物瓜石汤”对雷公藤多苷所致雄性大鼠生殖系统毒性的对抗作用及其机制研究

目的 研究自拟中药复方“五子四物瓜石汤”（WT）对雷公藤多苷（GTW）所致雄性大鼠生殖系统毒性的对抗作用及其机制。方法 雄性大鼠分别ig大，中，小剂量的WT与固定剂量的GTW，连续给药80d，以单独igGTW或NS为对照，观察各组雄性大鼠睾丸脏器指数，精子精，精子活率，睾丸病理结构的变化。并用免疫放射分析法（IRMA）测定各组雄性大鼠血清性激素水平。结果 与单用GTW组比较，大或中剂量WT可使睾丸重量明显增加，精子精明显升高，精子活率显著提高，其中大剂量WT可完全对抗GTW对生殖上皮的损害，使睾丸结构完全正常，血清睾酮维持了正常水平。结论 “五子四物瓜石汤”能显著对抗雷公藤多苷对雄性大鼠生殖系统的毒性作用，其对抗作用与WT保护睾丸生精上皮免受GTW的损害，并使血清睾酮水平维持于正常有关。     

“壮水之主”法减轻雷公藤多苷所致女性生殖损伤的思路探讨

雷公藤多苷是目前最常用的雷公藤制剂之一,具有抗炎、调节免疫等作用,其对临床上某些自身免疫性疾病及肾脏病的独特疗效几乎是其他类似药物所无法替代的,但其可能引起的生殖损伤是阻碍其在临床应用的瓶颈所在。女性患者在临床使用中常出现月经周期紊乱、经量减少甚至闭经、不孕等症状,其主要的毒性机制在于损伤卵巢的生殖及内分泌功能和抑制卵泡的生长发育等,故在临床用药时,了解雷公藤多苷对女性生殖的损伤作用、掌握其解毒方法十分必要。然而针对以上问题,目前并没有明确的解决方法。中医理论认为“肾主生殖”,且肾阴肾精与女性经卵的关系密切,故考虑雷公藤多苷所致生殖系统损伤隶属于肾虚阴伤精亏范畴,进而提出“壮水之主”法,指出临床使用中可通过补肾滋阴填精而有效减轻雷公藤多苷对女性的生殖毒性损伤,并总结目前中药、经方、验方、针刺等方面的已有相关研究来佐证“壮水之主”法的必要性,以期为雷公藤临床的安全合理用药提供理论指导依据。     

野山楂根拮抗雷公藤多苷对雄性大鼠生炙鹕俗饔玫难芯

目的观察中药野山楂根水煎剂对雷公藤多苷所致雄性不育大鼠生育力的影响.方法将成年雄性大鼠随机分组,分别给予雷公藤多苷片溶液(10 mg·kg-1),野山楂根水煎剂(1.8,5.4,18 g·kg-1)+雷公藤多苷片溶液(10 mg·kg-1)和蒸馏水(1 mL·kg-1)灌胃,8周后停用雷公藤多苷,中药组继续行野山楂根灌胃.4周后各组动物与成年雌性大鼠交配,观察交配雌鼠妊娠率和平均胚胎、黄体数.测定雄鼠生殖器官性腺脏器指数、附睾精子计数、活力、存活率,观察各组动物睾丸、附睾组织病理和超微结构改变,放射免疫法测定血清和睾丸组织睾酮(T),血清卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH)含量.结果与雷公藤多苷模型组比较,野山楂根组交配雌鼠妊娠胎数、雄鼠睾丸、附睾脏器指数以及附睾精子计数、活力均有提高(P＜0.05);野山楂根组精子超微结构较模型组有明显恢复;睾丸组织匀浆T显著高于模型组(P＜0.01).结论野山楂根能够拮抗雷公藤多苷对雄性大鼠的生殖损伤作用,提高不育症模型雄鼠的生育力.     

野山楂根拮抗雷公藤多苷对雄性大鼠生殖损伤作用的研究

目的:观察中药野山楂根水煎剂对雷公藤多苷所致雄性不育大鼠生育力的影响。方法:将成年雄性大鼠随机分组,分别给予雷公藤多苷片溶液(10 mg.kg^-1),野山楂根水煎剂(1.8,5.4,18 g.kg^-1)+雷公藤多苷片溶液(10 mg.kg^-1)和蒸馏水(1 mL.kg^-1)灌胃,8周后停用雷公藤多苷,中药组继续行野山楂根灌胃。4周后各组动物与成年雌性大鼠交配,观察交配雌鼠妊娠率和平均胚胎、黄体数。测定雄鼠生殖器官性腺脏器指数、附睾精子计数、活力、存活率,观察各组动物睾丸、附睾组织病理和超微结构改变,放射免疫法测定血清和睾丸组织睾酮(T),血清卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH)含量。结果:与雷公藤多苷模型组比较,野山楂根组交配雌鼠妊娠胎数、雄鼠睾丸、附睾脏器指数以及附睾精子计数、活力均有提高(P<0.05);野山楂根组精子超微结构较模型组有明显恢复;睾丸组织匀浆T显著高于模型组(P<0.01)。结论:野山楂根能够拮抗雷公藤多苷对雄性大鼠的生殖损伤作用,提高不育症模型雄鼠的生育力。     

雷公藤多苷片和雷公藤片对CIA模型大鼠干预的量毒效比较研究

从量-效-毒角度观察并比较雷公藤多苷片和雷公藤片口服后对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠的干预作用。将SD大鼠随机分为8组:正常组,模型组,雷公藤多苷片给药组(1倍等效剂量0. 009 g·kg-1,4倍等效剂量0. 036 g·kg-1,16倍等效剂量0. 144 g·kg-1)和雷公藤片给药组(1倍等效剂量0. 007 5 mg·kg-1,4倍等效剂量0. 030 mg·kg-1,16倍等效剂量0. 120 mg·kg-1)。首次免疫后当天开始灌胃给药,每天1次。二次免疫后观察大鼠关节红肿和畸形症状,评价关节炎临床积分,分别在第21,42天取材并进行相关观察:HE和Masson染色法检查关节组织病理学变化; ELISA法检测血清中抗Ⅱ型胶原抗体Ig G的表达量;常规检测血液成分;血清酶学方法检测血清中碱性磷酸酶(ALP)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰转移酶(GGT)、总胆红素(TBi L)、肌酐(CRE)和尿素(UREA)含量;光镜评估附睾中精子畸形率,HE染色法分析睾丸及卵巢组织的损伤程度。结果显示,雷公藤多苷片和雷公藤片高、中、低剂量均能不同程度改善CIA模型大鼠炎症关节的红、肿和畸形症状,降低临床积分,抑制关节滑膜炎症、血管翳、软骨侵蚀和骨破坏的病理变化,降低血清Ig G含量,且有一定的剂量依赖关系,其中同倍剂量组相比,4倍雷公藤多苷片的效果明显优于雷公藤片(P0. 05),16倍更显著(P0. 01)。雷公藤多苷片和雷公藤片高剂量能明显升高CIA大鼠肝和脾脏的脏器系数(P0. 01)并降低RBC和HGB,严重者可致死亡,其中雷公藤多苷片比雷公藤片作用更显著(P0. 01); 2种制剂高、中、低剂量给药均未见大鼠胃黏膜损伤以及肝肾形态学变化,但4倍和16倍能明显升高血清ALT和GGT并降低CRE水平(P0. 05或P0. 01); 2种制剂均可不同程度造成CIA雄性大鼠精子畸形率并损伤睾丸曲细精管,其严重度随剂量和时间增加而增加,其中16倍雷公藤多苷片比同倍量雷公藤片作用更显著。雷公藤多苷片和雷公藤片口服均能有效延缓CIA大鼠发病并降低疾病严重度,但同时也能造成雄性生殖损伤,高剂量尚影响造血功能,极高剂量可致死,2种制剂均具有量-效-毒依赖关系,其中,雷公藤多苷片抗类风湿关节炎药效更好,高剂量毒性反应也更明显。相关结论为雷公藤制剂的临床合理用药提供实验参考,也有待进一步的临床研究去证实。     

雷公藤制剂的化学成分及质量研究现状

雷公藤制剂具有免疫抑制、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性,在临床上广泛用于治疗类风湿性关节炎、红斑狼疮和肾病综合征等自身免疫性疾病,疗效确切,但同时由于其成分复杂、毒性较大、治疗窗口窄,患者服用后易引起肝、肾、血液、生殖等多系统损伤,不良反应高发。目前由不同企业生产的雷公藤制剂受原料及生产工艺等因素的影响,存在成分差异较大、质量不够稳定等问题,从而导致临床疗效和毒副作用相差较大,而已有的质量标准在指标成分和限量方面存在争议,不能有效的对制剂的质量进行整体控制。该文主要对雷公藤的4种中药制剂,包括雷公藤片、雷公藤总萜片、雷公藤双层片和雷公藤多苷片的化学成分、质量标准现状及质量控制方法研究等方面进行综述,为该类制剂的质量提高提供思路与借鉴。     

雷公藤内酯醇对雄性大鼠的生殖毒性及其机制研究

评价雷公藤内酯醇的雄性生殖毒性,观察染毒后雄性大鼠精子的畸形率、睾丸组织脂质过氧化物、睾丸组织标志酶活力和血清中激素水平的改变。设阴性和阳性对照组,以低(0.025 mg·kg^-1)、中(0.05 mg·kg^-1)、高剂量(0.1 mg·kg^-1)的雷公藤内酯醇混悬液对健康雄性Wistar大鼠连续灌胃染毒30 d,1次/d,于末次染毒24 h后处死大鼠,测定睾丸组织和血清中各项指标,并考察附睾精子畸形率。结果显示阳性对照组相比阴性对照组,各组具有显著性差异。中剂量染毒组的大鼠睾丸组织SOD,LDH,G-6-PD,Na⁺-K⁺-ATPase,Ca⁺-Mg⁺-ATPase含量较阴性对照组显著降低,并随着染毒达到高剂量,以上各指标的下调更加明显。大鼠睾丸组织GSH-Px和β-G水平只在染毒高剂量时,表现出明显的下降。而各染毒组的MDA,FSH,LH水平均表现差异无统计学意义。雷公藤内酯醇染毒中、高剂量组精子畸形率高于阴性对照组。提示在该实验染毒和剂量范围内,雷公藤内酯醇对睾丸组织具有脂质过氧化作用,导致生精细胞、支持细胞和间质细胞的损伤;同时伴有睾丸标志酶活力的下降,阻碍睾丸组织的有氧代谢和细胞对能量的利用,形成了一条对雄性生殖系统的损伤链。     

基于高通量转录组测序的菟丝子黄酮改善雷公藤多苷片致大鼠生殖损伤的机制研究

雷公藤多苷片具有较好的抗炎和免疫调节活性,但其生殖损伤显著。课题组前期研究发现,菟丝子黄酮可通过对生精细胞周期、凋亡及相关蛋白表达的调节改善雷公藤多苷片导致的生精细胞损伤,但其基因层面的作用机制尚不清楚。该研究采用Illumina高通量测序平台对菟丝子黄酮和雷公藤多苷片干预后大鼠生精细胞进行转录组测序,筛选出差异表达基因,并进行差异基因的GO富集和KEGG通路分析,探讨菟丝子黄酮改善雷公藤多苷片所致生殖损伤的作用机制。结果发现,与空白组相比,雷公藤多苷片组筛选出794个上调基因和491个下调基因;与雷公藤多苷片组相比,菟丝子黄酮+雷公藤多苷片组筛选出440个上调基因和784个下调基因。其中,与生殖功能密切相关的基因为DNMT3L。GO功能和KEGG信号通路富集分析显示,上述差异基因主要富集在细胞、细胞过程、催化活性、结合、卵巢类固醇合成和甲状腺激素等功能和通路上。其中甲状腺激素信号通路为2个对比组共同富集通路。总之,菟丝子黄酮改善雷公藤多苷片所致雄性生殖损伤的作用机制与DNMT3L基因及甲状腺激素信号通路密切相关,发现的多种差异基因为菟丝子黄酮和雷公藤多苷片的配伍减毒增效机制研究提供了有价值的信息。     

十八味中药组方对雄性大鼠不育模型生殖激素及生殖器官药理作用研究

目的：观察十八味中药组方对不育大鼠模型内分泌及生殖器官作用的影响。方法：雷公藤多苷建立生殖系统损害大鼠模型,观察十八味中药组方对大鼠睾丸、附睾、精囊腺、前列腺等器官脏器系数及组织学影响及对血清黄体生成素、卵泡刺激素、睾酮、皮质醇等激素分泌的影响。结果：中药组方显著提高大鼠脏器系数及附睾腺壁管厚度,促进生殖激素及皮质醇分泌。结论：中药组方可以修复不育大鼠模型生殖系统损害。     

不同剂量淫羊藿苷对冒公藤多苷模型小鼠睾丸病理损伤的影响

目的 探讨淫羊藿苷拮抗雷公藤多苷小鼠睾丸病理损伤的量效关系.方法 应用雷公藤多苷所致的睾丸生精障碍小鼠模型,观察不同剂量淫羊藿苷对小鼠睾丸病理形态学的影响.结果 模型组小鼠睾丸组织可见明显的病理损伤;3份淫羊藿苷/1份雷公藤多苷治疗组小鼠睾丸生精小管管壁较厚,细胞层次较宽,各级生精细胞排列较规则,基底面至腔面可见精原细胞、初级精母细胞、精子细胞等各个发育阶段的细胞,细胞增殖旺盛,可见较多分裂期细胞,腔内可见成熟精子,间质稀少,血管丰富,间质细胞发育良好.1份淫羊藿苷/1份雷公藤多苷治疗组和9份淫羊藿苷/1份雷公藤多苷治疗组小鼠睾丸病理表现相似,好于模型组,但差于3份淫羊藿苷/1份雷公藤多苷治疗组.结论 在淫羊藿苷/雷公藤多苷的1∶1、3∶1、9∶1三种剂量配比中,3∶1配比具有最好的拮抗雷公藤多苷睾丸病理损伤的作用.     

补肾法对雷公藤多苷片致大鼠生殖功能损伤保护作用的研究

目的:研究补肾法对雷公藤多苷片致大鼠生育功能损伤的保护作用。方法:将24只SPF级4~5周龄SD雄性大鼠随机分为4组:空白组(蒸馏水)、雷公藤多苷组(30mg/kg·d~(-1))、六味地黄丸组(六味地黄丸1g/kg·d~(-1)+多苷30mg/kg·d~(-1))、肾气丸组(肾气丸1g/kg·d~(-1)+多苷30mg/kg·d~(-1))。持续混悬液灌胃4周后,处死大鼠,留取睾丸组织,并称取重量,计算脏器指数;采用HE染色观察组织形态学变化,免疫组化法检测睾丸C-kit蛋白的表达。结果:与空白组比较,雷公藤多苷组大鼠睾丸重量、脏器指数、C-kit的表达均明显下降(P0.01);六味地黄丸组、肾气丸组与雷公藤多苷组相比可以明显提高C-kit蛋白表达(P0.05);空白组大鼠睾丸重量、脏器指数、生精细胞数、C-kit蛋白表达较六味地黄丸组、肾气丸组高,差异不具有统计学意义(P0.05);肾气丸组大鼠睾丸重量、脏器指数、C-kit蛋白表达高于六味地黄丸组,但差异不具有统计学意义(P0.05);HE染色比较:空白组睾丸组织病理形态正常,雷公藤多苷组睾丸组织中细胞排列紊乱,各级生精细胞明显减少,精子量减少,六味地黄丸组与肾气丸组睾丸损伤较雷公藤多苷组轻。结论:温补肾气及填补肾精法对雷公藤多苷所致雄性生殖损伤皆具有修复作用,可能与促进睾丸C-kit蛋白的表达,进而促进精原细胞的增殖分化有关。     

雄黄灌胃给药对雄性大鼠精子质量的影响

目的观察雄黄对雄性成年大鼠精子质量的影响。方法利用部分雄黄灌胃给药生殖毒性Ⅰ段试验雄性大鼠进行精子质量分析。将SD雄性大鼠50只随机分为阴性对照组、阳性对照雷公藤多苷组（10 mg/kg）及雄黄低、中、高剂量组（50、125、250 mg/kg）。各给药组连续灌胃给予相应药物6周,每日1次。给药结束后,取大鼠一侧附睾用计算机辅助精子分析系统（CASA）做精子的数量、活力、运动能力检查,并取睾丸、附睾做HE染色,观察组织病理学变化。结果阳性对照雷公藤多苷组精子活率、精子活力、有效精子数、精子密度及各项运动参数（除鞭打频率外）均明显低于阴性对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。雄黄各剂量组精子活率、活力、有效精子数、精子密度及各项运动参数与阴性对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,且各剂量组间差异亦无统计学意义（P〉0.05）。组织病理学观察显示,阳性对照雷公藤多苷组的睾丸局部生精小管萎缩,生精细胞减少,附睾管腔内可见大量降解的生精细胞及细胞碎片,精子细胞减少,静纤毛缩短。雄黄高剂量组附睾、睾丸未见明显组织学病理改变。结论雄黄对雄性大鼠的精子没有明显的毒性作用。     

不同企业雷公藤多苷片的制剂质量比较与评价

目的:依托国家药品评价抽验项目,采用标准检验与探索性研究相结合的方法对雷公藤多苷片制剂进行质量评价及安全性研究。方法:采用国家药品监督管理局颁标准(WS3-B-3350-98-2011)对10个企业171批次雷公藤多苷片进行标准检验,综合评价产品质量,发现标准存在的问题;同时开展体外毒性实验,初步探讨雷公藤多苷片中潜在肝毒性成分。结果:实验发现,现行标准存在项目设置不合理及设置不足的问题,同时雷公藤多苷片产品质量参差不齐,崩解时间差异大,雷公藤甲素及雷公藤内酯甲含量相差悬殊。此外,体外肝细胞毒性实验显示雷公藤多苷片中单体对琨B及雷公藤红素具有潜在肝毒性风险。结论:雷公藤多苷片质量波动不稳定的主要原因是制剂生产工艺不统一、不固定导致,建议统一该制剂生产工艺;此外针对标准不合理项目建议修订薄层鉴别项下对照品使用浓度,雷公藤甲素检查项增设下限控制,同时增加潜在毒性成分对琨B及雷公藤红素的检查设置。     

淫羊藿苷对雷公藤多苷模型小鼠睾丸病理损伤的影响

目的:探讨淫羊藿苷对雷公藤多苷模型小鼠睾丸病理损伤的影响.方法:应用雷公藤多苷所致的睾丸生精障碍小鼠模型,观察淫羊藿苷对小鼠睾丸病理形态学的影响.结果:模型组小鼠睾丸组织可见明显的病理损伤;淫羊藿苷治疗组小鼠睾丸生精小管管壁较厚,细胞层次较宽,各级生精细胞排列较规则,基底面至腔面可见精原细胞、初级精母细胞、精子细胞等各个发育阶段的细胞,细胞增殖旺盛,可见到较多分裂期细胞,腔内可见成熟精子,间质稀少,血管丰富,间质细胞发育良好.结论:淫羊藿苷具有拮抗雷公藤多苷睾丸病理损伤的作用.     

不同产源雷公藤多苷对睾丸组织病理及生精细胞凋亡的影响

目的比较不同产源的雷公藤多苷对大鼠睾丸组织病理改变及生精细胞凋亡的影响。方法 SD大鼠,随机分为4组,给予不同产源的雷公藤多苷灌胃,8周后取睾丸组织检测指标。光镜观察睾丸组织的形态学变化,原位末端标记法检测生精细胞凋亡率,免疫组化法检测凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2的表达。结果睾丸生精细胞凋亡率和Bax/Bcl-2表达各组间有差异,其中Bax表达各给药组和空白组比较,差异有统计学意义(P0.05),Bcl-2表达比较,各组间差异没有统计学意义(P0.05)。结论促进Bax表达是雷公藤多苷生殖损伤的机理之一;三种不同产源的雷公藤多苷对雄性生殖的损伤作用有差异。     

6个不同厂家雷公藤多苷片大剂量致正常大鼠慢性多脏器损伤的比较研究

比较6个不同厂家雷公藤多苷片对正常大鼠多脏器损伤作用的差异,并从细胞凋亡和氧化应激角度初步探索其肝毒性机制。大鼠随机分为正常、浙江、湖南、湖北、上海、江苏和福建共7组,每组16只,雌雄各半,各给药组大鼠分别以144 mg·kg~(-1)·d~(-1)(16倍临床等效剂量)的不同厂家雷公藤多苷片连续灌胃给药20 d,然后观察一般状况并取材,检测各项指标。主要发现:①给药15 d,浙江组8只雌性大鼠死亡;湖北、福建和上海组大鼠血清NEUT比正常大鼠明显降低;②各给药组均可不同程度升高大鼠血清AST,ALT和/或TBiL含量,湖南、湖北、福建和上海组尚可增加正常大鼠血清BUN和/或CRE;③各给药组均可降低正常大鼠的睾丸和卵巢系数,并可明显降低精子数、增加精子畸形率,并致精子动力学参数异常,其中江苏和浙江组较严重;④各给药组均可导致正常大鼠的肝脏组织病理学异常改变,出现肝细胞凋亡,其中江苏和湖北最严重;⑤各给药组均能抑制肝组织中Nrf2,HO-1和Bcl-2并升高Bax的蛋白表达水平。结果显示,6个不同厂家雷公藤多苷片超大剂量口服给药,均能引起正常大鼠慢性多脏器损伤,但各具特点,江苏和浙江总体毒性偏大;各厂家对Bax/Bcl-2细胞凋亡途径激活和对Nrf2/HO-1氧化应激通路的抑制可能是其引起大鼠肝损伤的共同机制之一。鉴于该研究是针对正常大鼠超大剂量用药的动物实验,相关结果仅供后续研究借鉴和参考。