基于异常黑胆质证载体大鼠模型尿液代谢组学研究

目的探讨异常黑胆质证对大鼠尿液代谢谱的影响。方法在建立异常黑胆质证大鼠模型的基础上,运用代谢组学研究技术,对异常黑胆质证组(17只)及正常对照组(13只)大鼠尿液进行核磁共振氢谱检测,确定两组大鼠尿液中的差异代谢组分。结果与正常对照组相比,异常黑胆质证组大鼠尿液中胍基乙酸、肌酸酐、蛋氨酸、赖氨酸及色氨酸含量升高,苯丙氨酸、天冬氨酸的含量下降(P<0.05)。结论正常对照组与异常黑胆质证组大鼠尿液的代谢谱存在差异,异常黑胆质证大鼠存在糖、脂肪、蛋白质及磷酸肌酸代谢紊乱。     

维吾尔医学异常黏液质证载体模型大鼠血清代谢组学研究

目的：利用磁共振(magnetic resonance,MR)测定技术探讨异常黏液质证载体模型大鼠血清代谢组分的变 化及其与异常黏液质证的关系。方法：将Wistar大鼠(雄性)随机分为正常对照组和异常黏液质证载体模型组,以湿 寒饲料(芫荽实和菠菜实)和环境[温度(6±1) ℃,相对湿度85%~95%]进行干预,建立异常黏液质证载体模型,并进行 鉴定,收集各组大鼠血清,进行磁共振氢谱(1H MR)测定,运用正交偏最小二乘判别(OPLS-DA)分析所采集的图谱, 确认差异性代谢组分。结果：与正常组相比,异常黏液质证载体模型大鼠血清中谷氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、柠檬 酸、β-羟丁酸、乙酰乙酸、丙酮酸和肌酸等代谢组分含量降低,而α-葡萄糖、β-葡萄糖、乳酸、低密度脂蛋白(LDL) 和极低密度脂蛋白(VLDL)等代谢组分的含量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：异常黏液质证载体模型大鼠三 大营养物质分解代谢出现障碍,并处于产能和耗能均较低的状态,三大营养物质及能量代谢障碍可能是异常黏液质 证的分子基础。     

维药异常黑胆质成熟剂对异常黑胆质型支气管哮喘模型大鼠尿液代谢物的影响

目的探讨维药异常黑胆质成熟剂对异常黑胆质型支气管哮喘大鼠尿液代谢物变化的影响。方法应用多因素复合作用建立异常黑胆质证载体动物模型,采用卵清蛋白(OVA)致敏和雾化激发方法建立异常黑胆质型支气管哮喘病证模型,将SD大鼠(84只)随机分为空白对照组、异常黑胆质证载体模型组、异常黑胆质证型支气管哮喘模型组、异常黑胆质成熟剂给药组(分为大、中、小剂量组)、地塞米松给药阳性对照组。收集各组大鼠尿液,利用核磁共振波谱(1 H-NMR)技术测定核磁共振氢谱,建立大鼠尿液的代谢指纹谱,运用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)法分析各组大鼠尿液中代谢产物差异。结果与空白对照组相比,异常黑胆质型哮喘模型组柠檬酸、肌酸酐、甘氨酸等重要氨基酸含量降低,差异有统计学意义(P<0.05);灌胃异常黑胆质成熟剂之后,异常黑胆质型哮喘模型组降低的肌酸酐及乙酸等含量明显增高,牛磺酸、甜菜碱等含量降低,与异常黑胆质型哮喘模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);与异常黑胆质型哮喘模型组相比,地塞米松给药阳性对照组马尿酸、乳酸、丙氨酸等含量升高(P<0.05)。结论异常黑胆质成熟剂对异常黑胆质型哮喘大鼠代谢具有显著影响,其作用机制可能是通过作用于异常黑胆质型支气管哮喘大鼠体内氨基酸代谢与能量代谢途径而发挥预防及治疗异常黑胆质型支气管哮喘的作用。     

异常黑胆质证2型糖尿病大鼠模型的血浆代谢组学研究

目的建立与分析2型糖尿病(T2DM)维吾尔医异常黒胆质证大鼠模型血浆代谢组学变化特点。方法建立T2DM维吾尔医异常黑胆质证大鼠模型并采集血浆样本,测试核磁共振氢谱,对数据进行多变量分析。结果单纯的异常黑胆质证组大鼠血浆中葡萄糖和乳酸含量下降的同时VLDL、LDL和肉碱的含量明显增加(P0.05);病证结合的T2DM维吾尔医异常黑胆质证组大鼠血浆中多种氨基酸(丙氨酸、异亮氨酸、、缬氨酸、亮氨酸、酪氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、甲基组氨酸、甘氨酸)以及乳酸、丙酮酸、糖蛋白、柠檬酸、肌酸酐、β-羟丁酸、乙酰乙酸、乙酸、肌酸、肉碱、鲨肌醇、VLDL、LDL的含量均降低,而葡萄糖和牛磺酸含量明显增加(P0.05)。结论蛋白质代谢、苯丙氨酸和酪氨酸代谢通路、糖酵解通路和脂代谢通路在病证结合的T2DM维吾尔医异常黑胆质证模型大鼠体内发生了明显的变化;血浆代谢组学变化在一定程度上反映病证结合的T2DM维吾尔医异常黑胆质证大鼠模型体内发生的病理变化过程。     

毛细管电泳对大鼠炎症模型的代谢组学研究

目的 建立尿液代谢物组的毛细管电泳分析方法,了解炎症模型大鼠的尿液代谢物轮廓变化.方法 基于代谢组学方法,利用毛细管区带电泳分析正常大鼠、炎症模型大鼠尿液代谢物数据,用计算机辅助相似度评价系统进行峰匹配和数据分析,结合主成分分析方法,研究炎症模型大鼠的尿液代谢轮廓.结果 大鼠尿液毛细管电泳图谱经主成分分析显示炎症大鼠尿...     

脾虚水湿不化证大鼠尿液代谢组学研究

目的?以基于液质联用的代谢组学方法对脾虚水湿不化证模型及正常对照组大鼠的尿液进行研究,寻找模型大鼠尿液中差异代谢物,探讨脾虚水湿不化证的分子机制。方法?采用高脂低蛋白饲料加力竭游泳法复制脾虚水湿不化大鼠模型,收集模型组和正常对照组尿液,运用高效液相色谱-四极杆-时间飞行串联质谱仪技术检测2组尿液样本中的小分子代谢产物,对所得到的代谢指纹图谱进行主成分分析和偏最小二乘法-判别分析,找出具有差异的特征代谢物。结果?与正常对照组相比,模型组大鼠尿液差异代谢物为:α-酮戊二酸、瓜氨酸、乳酸、柠檬酸、5-羟色胺、谷氨酰胺等6种。结论?脾虚水湿不化模型大鼠机体糖、蛋白质代谢均出现紊乱,能量供应不足,胃肠功能下降,抗氧化能力下降,其机制可能与这些小分子代谢产物的变化有关。      

维医异常胆液质证的相关指标特点研究

目的：探讨异常胆液质证区别于非异常体液质证的医学指标特点,为今后建立量化的体液质分型标准提供依据。方法对新疆和田地区策勒县维吾尔族志愿者进行维医辩证分型,收集645例异常体液质证人群（异常胆液质证组138例,非异常胆液质证组507例）的全血及血清样本,采用全自动血细胞分析仪和全自动生化分析仪检测23项血常规指标和17项生化指标,比较两组各项指标的差异,筛选差异指标进行异常胆液质证与非异常胆液质证相关危险因素的非条件 Logistic 回归分析。结果与非异常胆液质证组相比,异常胆液质证组血常规、生化各指标中白细胞计数（WBC）、中性粒细胞计数（NEU）、淋巴细胞数目（LEM）、血红蛋白（HGB）、红细胞压积（HCT）、平均红细胞体积（MCV）、总胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇酯（LDL-C）水平偏低,高密度脂蛋白胆固醇酯（HDL-C）水平偏高,差异均有统计学意义（P均＜0．05）,经多变量 Logistic回归分析,建立回归方程,入选指标有 HDL-C、LDL-C、LEM和 HCT。结论 HDL-C、LDL-C、LEM、HCT 4项指标可成为判断异常胆液质证与非异常胆液质证的指标。     

基于尿液代谢组学的土三七诱导大鼠肝损伤的机制研究

目的:采用代谢组学技术检测土三七干预后大鼠尿液中内源性代谢物的变化,分析土三七诱导大鼠肝脏损伤的可能机制。方法:12只SD大鼠,随机分为对照组和土三七组,每组6只。土三七组大鼠灌胃给予7.5 g·kg-1·d-1土三七水煎液,对照组大鼠灌胃给予等体积纯净水,连续给药14 d。末次给药后,代谢笼收集大鼠尿液,并分离大鼠血清和肝脏组织。生化分析仪检测血清ALT、AST、TBIL和TG水平; HE染色后光镜下观察肝组织病理形态学变化。液质联用(LC-MS)技术检测尿液样本,主成分分析评价组间代谢谱差异,筛选并鉴定差异性代谢物,分析代谢通路。结果:与对照组比较,土三七组大鼠血清ALT、AST和TBIL水平显著增高(P0.05,P0.01); HE染色结果显示,土三七组大鼠肝组织结构破坏,细胞排列紊乱,有炎性细胞浸润。代谢组学分析显示,组间代谢谱差异明显,尿液样本中共鉴定出马尿酸、苯丙氨酸、N-甲基烟酰胺、氧化三甲胺等40个差异代谢物,涉及缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成,苯丙氨酸代谢,烟酸和烟酰胺代谢,Vit B2代谢等主要代谢通路。结论:土三七诱导大鼠肝脏损伤,其机制可能与苯丙氨酸生物合成和代谢、烟酸和烟酰胺代谢、Vit B2代谢等有关。     

维医不同证候肿瘤患者血浆氨基酸含量的比较分析

目的认识与异常黑胆质证相关的体内氨基酸代谢变化机制,探讨从体内氨基酸代谢差异认知维医不同证候的可能性。方法选择225例维医不同证候肿瘤患者,其中异常黑胆质证患者102例,异常胆液质证患者50例,异常粘液质证患者57例,异常血液质证患者16例。采用高效液相色谱法（HPLC）对患者血浆进行19种氨基酸的定量检测,应用SIMCA—P＋软件对各组样本的血浆氨基酸含量进行正交偏最小二乘判别分析（Orthogonal partial least—squares discriminant analysis,OPLS-DA）,并对异常黑胆质证患者与其他3种证候患者之间的不同氨基酸含量的差异性采用SPSSl6．0软件进行独立样本的f检验。结果与其他3种证候患者比较,异常黑胆质证患者血浆天冬酰胺、胱氨酸、酪氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸和苯丙氨酸等氨基酸含量高（P〈O．05）;丝氨酸和牛磺酸2种氨基酸在异常粘液质证与异常血液质证2种证候患者体内的含量比异常黑胆质证患者低（P〈O．05）;与异常黑胆质证患者比较,天冬氨酸、苏氨酸和赖氨酸3种氨基酸在异常粘液质证患者血浆中的含量较低（P〈O．05）,而谷氨酸和甘氨酸2种氨基酸在异常血液质证患者血浆中的含量较低（P〈O．05）。结论采用HPLC法进行血浆氨基酸分析町以发现潜在的、与证候有关的代谢机制差异,这将从代谢差异性预测维医不同证候及阐述不同证候发生、发展的机制提供可能性。     

基于不同模式识别方法的大鼠尿液核磁共振氢谱分析

目的采用核磁共振波谱技术测试不同性别大鼠尿液代谢物,探讨不同模式识别方法对结果的影响。方法利用主成分分析（principal component analysis,PCA）、偏最小二乘法判别分析（partial least squares discriminant analysis,PLS-DA）、正交偏最小二乘法判别分析（orthogonal to partial least squares discri minant analysis,OPLS-DA）等方法分析不同性别大鼠尿液中的差异性代谢物。结果数据进行中心化处理后进行PCA和PLS-DA分析可以判别两组尿液中具有差异性的缬氨酸、乙酸、尿囊素、鸟氨酸、肌酸酐、二甲胺、丙氨酸、柠檬酸等代谢物,而进行OPLS-DA分析除了判别出以上具有差异性的代谢物外还确定了氨基马尿酸、甲胺、延胡索酸等两组中有显著差异的代谢物。结论 OPLS-DA分析是代谢组学研究中比较灵明的数据分析方法。     

葛根芩连配方颗粒在大肠湿热证模型大鼠尿液中代谢产物研究

目的 研究葛根芩连配方颗粒（简称葛根芩连颗粒）在大肠湿热证模型大鼠尿液中的代谢产物。方法 采用综合因素（高糖和高脂饮食＋高温和高湿环境＋肠产毒性大肠杆菌致病因子）制备大肠湿热证大鼠模型;利用HPLC-DAD-MS技术对大鼠ig葛根芩连颗粒后尿液中代谢产物进行分析,检测波长272 nm;流动相A为0.1%甲酸水溶液,流动相B为乙腈-甲醇（6∶4）,梯度洗脱。结果 从给予葛根芩连颗粒的大鼠尿液中发现并鉴定了5种主要代谢产物,分别为葛根素、异甘草素、甘草素、汉黄芩素、千层纸素A,其中葛根素来自葛根,汉黄芩素与千层纸素A来自黄芩,异甘草素与甘草素来自甘草。结论 在大肠湿热证模型大鼠尿液中,葛根芩连颗粒中黄芩与甘草的代谢产物主要以苷元为主,葛根中的葛根素主要以原形排出。     

异常黑胆质载体动物模型支配器官组织细胞超微结构观察

目的：探讨异常黑胆质载体动物模型支配器官细胞的超微结构及其与异常黑胆质的相关性。方法：选择健康ICR雄性小鼠30只，分为模型组和正常对照组，每组15只。造模后，各组实验动物眼球放血处死，并迅速取出支配器官脑（下丘脑）、心脏、肝脏等器官，采用透射电镜观察细胞超微结构改变。结果：异常黑胆质载体动物模型实验动物脑（下丘脑）、心脏、肝脏细胞都有不同程度的线粒体肿胀、粗面内质网扩张和空化、细胞变形、核周隙增宽、核变形等超微结构的损伤。结论：模型组小鼠支配器官细胞超微结构有明显的改变。异常黑胆质的产生可能与支配器官细胞超微结构的改变有关。     

成人原发性肾病综合征激素疗效差异的相关因素

目的：通过分析经肾活检确诊的成人原发性肾病综合征(primary nephrotic syndrome,PNS)的临床资料,以 了解影响该病激素疗效的相关因素。方法：回顾性分析2013年1月至2014年1月间中南大学湘雅二医院肾脏科425例经 肾活检确诊的PNS患者的一般资料、实验室检查及肾病理类型。结果：轻微病变、局灶节段肾小球硬化、IgA肾病对 激素治疗敏感(P<0.05);14~24岁患者较其他年龄组的患者对激素的敏感性要高(P<0.05)。激素抵抗组与非激素抵抗型 肾病综合征组比较IgA水平明显下降(P<0.05),激素抵抗型肾病综合征组治疗前后24 h尿蛋白定量的比较,差异无统计 学意义(P>0.05),非激素抵抗型肾病综合征组治疗前后24 h尿蛋白定量的比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：肾 疾病的病理类型及患者的年龄与激素疗效存在一定的关系。IgA水平的相对降低可能与PNS激素疗效有关。     

基于UPLC—Q—TOF/MS的大鼠体内茵芋苷代谢特征分析

目的：应用超高效液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱法（UPLC-Q-TOF/MS）鉴定并分析大鼠茵芋苷给药后的代谢途径及其在胆汁、血浆、尿液、粪便中的代谢产物。方法：通过UPLC-Q-TOF/MS分析大鼠给药前、灌胃和静脉注射给药后得到的不同时间段的生物样品,并在电喷雾正负离子模式下获取生物样品的质谱数据;使用MassLynx V4.1软件处理UPLC-Q-TOF/MS数据;鉴定茵芋苷在胆汁、血浆、尿液、粪便中的代谢产物。结果：在大鼠的血浆、胆汁、尿液、粪便样品中除原型外共鉴定得到10种代谢产物,其中有8种代谢产物均通过肾脏途径代谢。结论：水解、葡萄糖苷酸结合、氧化、羟基化等是茵芋苷在体内代谢的主要途径;根据尿液中广泛代谢的结果,应重视茵芋苷经肾途径代谢的临床用药指导。     

黄芪党参水煎剂对阿霉素诱导的大鼠肾病综合征的治疗作用

目的探讨黄芪党参水煎剂对阿霉素诱导的大鼠肾病综合征的治疗作用。方法按6．5mg／kg尾静脉注射阿霉素建立大鼠肾病综合征模型,随机分为三组,对照组、模型组、治疗组。治疗组5周后予以黄芪党参水煎剂每天灌胃,持续2周。观察动物一般情况,检测24h尿量、尿蛋白、血清生化学指标,进行肾脏形态学检查。结果模型组24h尿蛋白增加,血浆清蛋白（ALB）降低、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）明显升高（P〈0．05,P〈0．01）、肾组织病理学检查异常,治疗组上述指标明显好转。结论黄芪党参水煎剂对阿霉素诱导的大鼠肾病综合征有良好的治疗作用．     

UPLCPDA法研究Liguzinediol在大鼠体内的排泄

目的?采用UPLCPDA法对Liguzinediol及其代谢产物在大鼠体内的排泄进行研究。方法?SD大鼠雌雄各6只,尾静脉注射给药10mg/kg,按照时间点分别收集尿液、胆汁、粪便,样品经甲醇处理后,取上清液N₂吹干,流动相复溶。采用UPLCPDA法对大鼠尿液、胆汁、粪便中Liguzinediol及其代谢产物进行测定,通过代谢产物与原型药物的吸收系数之比及分子量折算确定代谢产物的换算因子,计算Liguzinediol在大鼠体内的累计排泄量占剂量的百分比（Dose%）。结果?雌雄大鼠尿液、胆汁及粪便排泄过程略有差异,Liguzinediol及其主要代谢产物在雌性大鼠的尿液、胆汁及粪便的Dose%分别为47.94%、16.67%、0.648%,体内累计Dose%为65.26%;Liguzinediol及其主要代谢产物在雄性大鼠的尿液、胆汁及粪便的Dose%分别为35.00%、20.37%、1.156%,体内累计Dose%为56.53%。结论?采用加换算因子的UPLCPDA法可以简便、快速地对Liguzinediol 在大鼠体内的物质平衡进行探索性研究,为开展药物临床研究提供实验依据。      

妇人,母猪,雌性大白鼠食用大豆后,尿中大豆异黄酮代谢物

目的：研究妇人，母猪，雌性大白鼠食用后，尿中大豆异黄酮代谢物成份的比较。方法：妇人食用大豆食品或以含大豆饲料喂食母猪，雌性大白鼠后，收集尿液，以液质联用分析仪分析尿液中大豆异黄酮代谢物的种类及含量。结果：在尿液样品中检测出大豆异黄酮及其糖苷酸代谢物。在大白鼠尿液中的大豆异黄酮代谢物主要为7—4’—异黄烷二醇葡萄糖百酸(equol glucuronide conjugate)，其次为7，5，4’—三羟基异黄酮糖苷酸(genistein glucuronide conjugate)及7，4’—二羟基异黄酮糖苷酸(daidzein glucuronide conjugate)。在妇人尿液中大豆异黄酮糖苷酸代谢物超过90％，在母猪尿液中大豆异黄酮糖苷酸代谢物介于80．5％—84．5％之间。在雌性大白鼠尿液中大豆异黄酮糖苷酸代谢物约有50％的大豆异黄酮糖百酸代谢物。结论：7．4’—异黄烷二醇为大白鼠尿液中的主要大豆异黄酮代谢物。猪模型比大白鼠模型较合适用来模拟人类食用大豆食品后的代谢研究。     

Disposition and metabolism of 1-nitropropane in rats and chimpanzees

The metabolic fate of 1-nitropropane (1-NP) has not been previously reported. In this study male rats and chimpanzees were given single doses of 40 mg/kg ip and 5 mg/kg iv 1-[1-14C]NP, respectively. The quantitative extent of urinary and fecal elimination was similar in both species. The rats excreted 16.5% of the dose in urine and 1.7% in feces. For chimpanzees the respective values were 14.8 and 1.2%. Experiments with rats demonstrated that the major route of elimination was by exhalation. With a total elimination via the lungs of 72.6%, rats expired 10.3% of the dose as unchanged 1-NP. Five polar metabolites were isolated from the urine of chimpanzees. The two major metabolites were identified as 3-hydroxypropionic acid and N-methyl-N-2-(methylsulfinyl)ethylpropionic acid amide (NMPA). Both substances were also excreted in rat urine. The two identified metabolites indicate that 1-NP was degraded to propionic acid, part of which was modified to 3-hydroxypropionic acid or NMPA. A hypothetical pathway for the biochemical generation of NMPA is suggested.