基于UPLC技术的女贞子中主要成分炮制变化规律研究及酒女贞子特色质量标准的探讨

采用UPLC技术建立了女贞子中红景天苷和特女贞苷的同步测定方法,通过测定二者在不同炮制时间的酒女贞子(炮制12,15,18,21,24 h)中的含量探讨女贞子炮制中主要成分的变化规律,并且采用同一方法探讨建立了酒女贞子的特色质量标准。采用Waters Acquity UPLCBEH C18色谱柱(2. 1 mm×50 mm,1. 7μm)进行分离,乙腈-0. 2%甲酸水为流动相,梯度洗脱,检测波长280 nm,流速0. 5 m L·min^-1,柱温40℃。在上述色谱条件下2成分分离良好,红景天苷和特女贞苷分别在10. 19~326,49. 53~1 585 ng线性关系良好,平均加样回收率分别为103. 4%,101. 7%,RSD分别为0. 81%,0. 79%。不同炮制时间的酒女贞子中红景天苷的含量随炮制时间延长逐渐升高,而特女贞苷含量则随炮制时间延长逐渐降低。27批次女贞子药材中红景天苷的质量分数在0. 042 5%~0. 192 4%,特女贞苷在0. 829 7%~5. 218%;25批酒女贞子中前者在0. 229 2%~1. 045 8%,后者在0. 743 8%~3. 645 4%。与女贞子药材相比,酒女贞子中特女贞苷含量和红景天苷含量的比值明显减小。依据实验结果,该文暂定女贞子药材中特女贞苷不低于0. 80%,特女贞苷含量/红景天苷含量不小于15;而酒女贞子中红景天苷不低于0. 20%,特女贞苷不低于0. 70%,二者比值不大于8。该文所建立方法的简便可靠,可用于女贞子样品中红景天苷和特女贞苷的测定,所建立的标准可区分女贞子和酒女贞子。     

不同采收月份女贞子中红景天苷和特女贞苷含量动态变化研究

目的:研究不同采收月份女贞子中红景天苷和特女贞苷的含量变化规律,为确定女贞子的最佳采收时间提供依据。方法:女贞子样品以60%甲醇超声提取30 min,采用高效液相色谱法测定,色谱条件:ACE Excel 5 C18-AR色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5.0μm),流动相:乙腈(A)-水(B),梯度洗脱,检测波长:275 nm,柱温:35℃,流速:1.0 mL·min-1。结果:红景天苷和特女贞苷分别在0.023,74~0.593,6μg(R2=0.999,8)、0.115,8~2.895μg(R2=0.999,9)内线性关系良好,不同采收月份的女贞子随着特女贞苷含量逐渐升高(12月含量最高),红景天苷含量不断下降(9月含量最高)。结论:女贞子的生长过程中可能存在"一分子红景天苷和一分子裂环环烯醚萜转化为一分子特女贞苷"的生物代谢途径,综合考虑红景天苷和特女贞苷总含量变化趋势,建议12月作为株洲女贞子药材的适宜采收期。     

HPLC法测定不同产地女贞子中红景天苷、女贞苷、特女贞苷的含量

目的:针对不同产地的女贞子建立红景天苷、女贞苷、特女贞苷高效液相色谱测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱条件:Aglient Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以水-乙腈为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长282 nm,柱温25℃。结果:10个产地女贞子药材红景天苷、女贞苷、特女贞苷含量分别在2.06～4.34 mg/g、2.52～28.73 mg/g、8.86～46.84 mg/g范围。结论:所建立的高效液相测定方法可用于女贞子药材的质量控制。     

不同加工方法与不同采收期的女贞子质量及关联性分析

目的:研究女贞子的最佳产地加工方法和采收时间.方法:采集10～12月果熟期的女贞子,采用5种不同加工方法处理;建立同时测定女贞子中4种指标性成分含量的高效液相色谱方法;对采收期、加工方法与指标成分进行关联性分析.结果:不同采收期、加工方法的女贞子中红景天苷和特女贞苷含量具有显著性差异,而齐墩果酸、熊果酸的含量差异没有统...     

不同产地酒女贞子红景天苷、特女贞苷含量测定及聚类分析

目的:研究不同产地酒女贞子红景天苷和特女贞苷含量,为女贞子饮片质量标准提供依据.方法:采用HPLC测定不同产地酒女贞子红景天苷和特女贞苷含量,运用聚类分析法,结合SPSS统计软件对测定结果进行综合分析.比较不同产地女贞子炮制前后含量变化.结果:通过高效液相色谱测定得到红景天苷在0.1～0.5 mg范围内呈良好的线性关系...     

HPLC测定女贞子中特女贞苷的含量及指纹图谱的建立

目的:研究市售不同产地的女贞子特女贞苷含量的差异,完善女贞子药材的行业质量标准。方法:用高效液相色谱法鉴别测定23批市售女贞子药材中特女贞苷的含量,并建立女贞子指纹图谱。结果:22批女贞子的特女贞苷含量符合《中华人民共和国药典》标准,只有1批低于《中华人民共和国药典》标准;其中安徽产的女贞子中特女贞苷含量最高,达3.74%,而江苏产的N07女贞子中特女贞苷含量最低,仅为0.35%。结论:23批市售女贞子的含量测定和指纹图谱结果表明,该方法简便,快速,可靠,为女贞子行业质量标准的完善和提高提供了参考。     

蒸制工艺对酒女贞子外观性状和主要成分的影响

目的:探究女贞子酒制过程中外观性状及主要成分随蒸制时间的变化规律,为修订《中华人民共和国药典》(以下简称《中国药典》) 2015年版酒女贞子含量测定的方法提供依据。方法:按《中国药典》 2015年版方法制备不同蒸制时间的酒女贞子样品,结合PANTONE色卡观察酒女贞子性状变化,采用高效液相色谱法(HPLC)对样品中特女贞苷、红景天苷、酪醇、松果菊苷、毛蕊花糖苷、芦丁6个成分含量进行测定,采用统计软件分析酒女贞子蒸制过程中性状、主要成分随蒸制时间的变化规律。结果:随蒸制时间的增加,酒女贞子颜色逐渐加深,并伴有白霜,酒蒸6～24 h的样品符合《中国药典》 2015年版酒女贞子性状标准,蒸制时间超过12h时,酒女贞子的性状不再发生变化;女贞子在酒蒸过程中,特女贞苷、松果菊苷、毛蕊花糖苷含量降低,芦丁含量略有下降,红景天苷和酪醇含量升高。结论:经酒制后,女贞子外观性状、内在成分均发生明显变化,两者存在一定相关性,可反映女贞子的炮制质量,建议以含量相对较高、含量差异较小且生物活性强的红景天苷作为酒女贞子含量测定的指标成分。     

女贞子“一测多评”法测定

目的:建立女贞子"一测多评"(QAMS)法,以实现女贞子中多指标成分控制。方法:采用HPLC法,以建立女贞子中红景天苷、女贞苷、特女贞苷、橄榄苦苷和oleonuezhenide含量测定方法为基础,以特女贞苷为参照物,统计其他成分的相对校正因子(fi,s)作为定量参数,同时统计其他组分与特女贞苷的相对保留时间(γi,s)作为定性参数。结果:各成分分离良好,系统适应性与方法学考察结果符合含量测定要求,在测定浓度范围内线性关系良好,相关系数均0.999 5,平均回收率为96.8%~105.0%(RSD≤3%),在系统适应性范围内各fi,s的RSD均5%,各γi,s的RSD均2%,比较校正因子法与外标法的测定值,显示无显著差异。结论:建立的QAMS法准确、快速,结果可靠,具有可操作性,可用于女贞子多指标成分质量控制。     

女贞子中2种主要裂环环烯醚萜苷类成分的含量考察

目的：建立分析女贞子中主要裂环环烯醚萜苷类成分女贞苷(nuezhenoside)及女贞苷G13(G13)的HPLC定量分析方法，并考察了不同采集时间及不同产地女贞子样品中上述2种成分的含量。方法：以国产YMG-C₁₈(4.6 mm×250 mm，10 μm)为色谱柱，流动相为乙腈-水，梯度洗脱(乙腈：0 min，20%;15 min，25%)，流速为1 mL·min^-1，检测波长240 nm，室温(25 ℃)。结果：女贞苷和女贞苷G13分别在0.341～34.1 μg，0.331～33.1 μg与峰面积线性良好；平均回收率分别为97.5%，RSD 1.4%(n=3)和98.1%，RSD 1.8%(n=3)。不同地区女贞子药材中女贞苷和女贞苷G13的含量差别较大，可能与不同品种来源及加工炮制方法等因素有关；实验数据表明，采集期在11月初至中旬上述2种成分的含量最高。结论：所建立的HPLC梯度洗脱法可用于同时测定女贞子药材中主要裂环环烯醚萜苷类成分女贞苷及女贞苷G13的含量，可作为女贞子中水溶性指标性成分的检测方法，为全面控制女贞子药材内在质量提供参考。     

女贞子指纹图谱研究及红景天苷、特女贞苷的含量测定

目的建立女贞子药材的高效液相指纹图谱,并同时测定女贞子中红景天苷和特女贞苷的含量。方法采用高效液相法测定,色谱条件:Ultimate AQ C-18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水,梯度洗脱;检测波长为275nm;体积流量为1.0 ml·min-1;柱温为35℃。结果红景天苷、特女贞苷分别在进样量0.113 2~5.66μg(r=0.999 9)、0.146 9~7.345μg(r=0.999 8)范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.3%、100.8%,按此方法建立了女贞子药材的HPLC指纹图谱,包含12个共有峰。结论该试验同时对女贞子的两种成分和指纹图谱进行分析,快速、简便、准确,为控制女贞子药材的质量提供了可靠的分析方法。     

酒制对女贞子饮片主要化学成分含量的影响

目的:分析酒制对女贞子饮片中主要化学成分含量的影响,为完善女贞子及酒女贞子饮片的质量标准提供实验依据。方法:采用HPLC,流动相乙腈-水梯度洗脱,流速1.0 m L·min~(-1),检测波长224 nm,柱温35℃,对女贞子及酒女贞子饮片中主要化学成分进行定量分析。结果:与相同企业或同一企业同一批次女贞子饮片比较,酒女贞子饮片中特女贞苷和橄榄苦苷的含量均明显降低,红景天苷、酪醇和羟基酪醇的含量有不同程度的升高;其中红景天苷、酪醇及羟基酪醇的质量分数分别升高了200%,5%,40%以上。结论:酒制后女贞子饮片化学成分含量的变化主要是由于特女贞苷在高温及水蒸气的作用下会水解生成红景天苷,红景天苷进一步水解生成酪醇;橄榄苦苷在高温下不稳定,同样发生水解,生成羟基酪醇;从而导致特女贞苷和橄榄苦苷的含量显著降低,红景天苷、酪醇和羟基酪醇的含量增高。     

基于DPPH、ABTS和FRAP的中药女贞子抗氧化谱效关系研究

运用HPLC测定不同加热条件处理的女贞子药材的特征图谱,通过DPPH、ABTS和FRAP法测定不同条件处理女贞子的抗氧化能力,运用偏最小二乘法进行数据分析,研究女贞子量化特征图谱和抗氧化活性的相关性,探讨女贞子抗氧化活性的物质基础,并筛选活性色谱峰。从35个匹配特征图谱中筛选出S_1,S_2,S15,S_(24),S_(27),S_(29),S_(32),S_(33),S_(35)与女贞子清除DPPH自由基能力呈显著正相关;S_1,S_2,S_5,S_8,S_(16),S_(27),S_(33)与女贞子清除ABTS自由基显著正相关;S_(12),S_(20),S_(22),S_(28),S_(30),S_(31),S_(32),S_(34)与女贞子还原Fe~(3+)能力显著正相关。其中S_1,S_2,S_(27),S_(33)与女贞子清除DPPH自由基、ABTS自由基均正相关,S_(32)与女贞子清除DPPH自由基、还原Fe~(3+)能力均正相关。通过与对照品比对确定了S_3为红景天苷、S_(19)为木犀草苷、S_(21)为特女贞苷、S_(22)为橄榄苦苷、S_(23)为女贞苷、S_(33)为木犀草素、S_(34)为芹菜素。试验结果表明特女贞苷和红景天苷等虽是规定的表征女贞子药材优劣的指标成分,但女贞子药效并不是靠个别成分含量决定。通过分析与药效相关的化合物群的含量才能真实反映药材的质量。     

基于市售样品质量考察的“猪腰”和“豆豉”女贞子比较

目的 对市售女贞子质量进行考察，比较“猪腰”和“豆豉”2种不同性状女贞子的水分、浸出物、有效成分含量等，以期为提高女贞子药材及饮片利用率提供依据。方法 采用2020年版《中华人民共和国药典》（以下简称《中国药典》）（一部）“女贞子”项下方法对市售女贞子的性状、水分、总灰分、醇溶性浸出物含量进行测定并进行薄层色谱法（TLC）检测；建立高效液相色谱法（HPLC）指纹图谱，对有效成分红景天苷、特女贞苷含量进行测定，流动相0.2%磷酸水溶液（A）-乙腈（B）梯度洗脱（0~70 min，92%~65%A），检测波长程序为0~14 min，220 nm；14~70 min，225 nm。利用以上指标对2种不同性状女贞子进行综合比较。结果 13批市售女贞子除其中1批为抢青采收质量不符合规定外，其余12批均符合2020年版《中国药典》的相关规定，但存在2种不同性状的现象。对比2种不同性状的女贞子发现，猪腰女贞子水分、总灰分、浸出物含量、红景天苷及特女贞苷质量分数分别为2.22%~5.19%、3.91%~4.49%、32.56%~40.95%、0.073%~0.170%、1.45%~4.14%；豆豉女贞子水分、总灰分、浸出物含量、红景天苷及特女贞苷质量分数则分别为3.57%~5.61%、3.65%~4.44%、41.31%~46.70%、0.041%~0.067%、3.01%~4.20%。结论 豆豉女贞子浸出物、特女贞苷含量大部分高于猪腰女贞子，而红景天苷含量却低于猪腰女贞子，两者的水分、总灰分和TLC鉴别差别不大。建议若以提取红景天苷为主要目的，则选择猪腰女贞子；若以女贞子入药为主要目的，建议选择豆豉女贞子。     

从女贞子中提取红景天苷的工艺研究

红景天苷是藏药红景天(Rhadolia raseaL.)的主要活性成分[1],也是其适应高山恶劣环境所必需的成分。研究表明红景天苷具有扩张阻力血管和容量血管,抗心肌缺血[2]、抗肝纤维化[3]等多种药理作用,红景天苷已作为药品和保健食品得到广泛的开发应用。但红景天植物生长于高原地区,资源贫乏、且价格昂贵。中药女贞子为木犀科植物女贞Ligus-trum lucidumA it.的干燥成熟果实,含有多种活性成分[4],包括含量可观的红景天苷[5]。我国女贞子植物分布广泛、资源丰富、且价格低廉,但从女贞子中获得较高纯度的红景天苷提取物至今未见报道,本文对女贞子中…     

3种不同炮制方法对女贞子中7种化学成分变化的影响

目的:考察不同炮制方法对女贞子中7种化学成分含量变化的影响。方法:应用高效液相色谱法(HPLC)多波长切换梯度洗脱技术,采用Agilent Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈(A)-0.15%甲酸(B)为流动相,流速为1.0 mL·mim~(-1);检测波长为224 nm (检测红景天苷和酪醇)、235 nm (检测特女贞苷、女贞苷、女贞苷G13和橄榄苦苷)、349 nm (检测木犀草苷);柱温为28℃;进样量为10 μL。结果:特女贞苷、红景天苷、女贞苷、女贞苷G13、木犀草苷、酪醇、橄榄苦苷分别在6.645～66.450、3.616～36.160、1.621～16.210、3.690～36.900、1.634～16.340、0.843～8.428、3.557～35.570 μg·mL~(-1) 线性关系良好(r≥0.999 4);精密度、稳定性、重复性试验RSD均小于2.0%;平均回收率为96.28%～101.57%,RSD为0.72%～1.44%。女贞子经酒制后特女贞苷、女贞苷、女贞苷G13及橄榄苦苷的含量明显降低,而红景天苷和酪醇的含量则显著升高;净制及盐制后女贞子中7种化学成分含量变化不明显。结论:基于HPLC测定女贞子中7种化学成分在3种不同炮制方法下的含量,通过7种化学成分具体的含量变化,为进一步对女贞子不同炮制方法引起的质量和药效物质基础变化研究提供参考。     

女贞子HPLC指纹图谱及多指标成分测定

目的建立女贞子HPLC指纹图谱及多指标成分测定方法,为女贞子质量标准提升提供参考。方法采用HPLC法,以乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,体积流量1.0 m L/min,检测波长224 nm,建立女贞子指纹图谱,采用HPLC-Q/TOF-MS~E指认共有峰,并同时测定红景天苷、松果菊苷、特女贞苷、橄榄苦苷4种成分的量。结果建立了女贞子的HPLC指纹图谱,标定了14个共有峰,指认出其中12个色谱峰,10批样品相似度在0.994~1.000;红景天苷、松果菊苷、特女贞苷、橄榄苦苷4个被测组分均达到基线分离,在线性范围内具有良好的线性关系,r均大于0.990,平均回收率分别为97.40%、98.99%、97.03%和100.55%。结论该方法准确可靠,重复性好,可有效地控制和评价女贞子的质量。     

近红外光谱法快速测定酒女贞子中女贞苷含量

目的:利用近红外光谱技术(NIRS)快速测定酒女贞子中女贞苷含量。方法:采用3个不同产地的黄酒对女贞子进行炮制,以HPLC测定样品中女贞苷的含量为参考,运用近红外光谱技术结合偏最小二乘法(PLS)建立酒女贞子中女贞苷含量的定量分析模型。结果:女贞苷的定量分析模型内部交叉验证决定系数(R2)为0.967 89,校正均方根偏差(RMSEC)为0.107,预测均方根偏差(RMSEP)为0.103,交互验证均方根偏差(RMSECV)为0.256 69,主因子数为8。结论:该方法简便快速,准确无损,所建模型能够对酒女贞子中女贞苷的含量进行快速测定。     

不同产地不同采收期蔷薇红景天中红景天苷的含量测定

目的 对不同产地、不同采收时期的蔷薇红景天中主要活性成分红景天苷含量进行对比研究.方法 以红景天苷为指标,采用HPLC法,测定了蔷薇红景天药材中的红景天苷含量.色谱条件为PLATISTLTMC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),水∶甲∶乙腈为流动相,检测波长为275nm.结果 蔷薇红景天苷的含量在0.52～5.2μg范围内峰吸光度与浓度线性关系良-好(r =0.999 8).由于产地和采收时间不同,蔷薇红景天中红景天苷含量有差异,以8月采收的新疆塔城额敏县的蔷薇红景天的含量最高,其为1.297％,RSD为1.519％.结论 该方法操作简便,结果准确,重复性好,实验结果可用于指导合理采收开发蔷薇红景天资源.     

RP-HPLC法比较青海不同产地红景天属药材中成分组成的差异性

目的:通过研究青海不同产地、不同种的红景天原植物药材中红景天苷和没食子酸的组成成分差异,为全面评价青海红景天属药材质量提供依据。方法:通过反向高效液相色谱法对青海不同产地或不同种的14个红景天样品中红景天苷和没食子酸进行了定量分析,并计算分析各成分间的结构比。结果:不同品种、不同来源的红景天原植物药材中,红景天苷和没食子酸的含量及其组成成分的结构比有较大差异。结论:由于产地、品种的不同,红景天属原植物药材中成分的组成和结构比存在差异性;成分间的结构比的差异性可能是红景天药材药效差异的根本原因,红景天属药材的质量应该从成分量和结构比两方面进行严格控制。     

炮制对女贞子中特女贞苷含量的影响

目的:研究炮制对女贞子中特女贞苷含量的影响,探讨女贞子酒制过程中特女贞苷含量的变化规律.方法:用高效液相色谱法测定女贞子生品和不同炖制时间酒炖品中特女贞苷的含量.结果:6种酒炖品中特女贞苷含量较生品降低了4.76%～60.71%;且随着炖制时间的延长,炮制品中特女贞苷含量逐渐降低.结论:该实验结果为女贞子饮片的炮制及其质量控制提供了依据.