田基黄水煎剂对Ⅱ型单纯疱疹病毒复制的抑制作用

作者在细胞培养中发现田基黄对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)的复制有明显的抑制作用。它对 Vero-E6细胞的无毒浓度为7.5mg/ml(即相当于每毫升7.5mg 生药),最小有效抑制 HSV-2复制的浓度为2.5mg/ml。抑制指数[即病毒时照的滴度(对数)减去药物处理过的病毒滴度(对数)]为3.25,抑制明显。有效浓度的田基黄(2.5mg/ml)在细胞外对 HSV-2无直接灭活作用。HSV-2在复制周期中的早期即病毒的吸附或穿入阶段对田基黄敏感。此药在2.5mg/ml 的浓度下,抗 HSV-2的作用不亚于环胞苷(5ug/ml)或疱疹净(100ug/ml).因此,提出了用此药预防宫颈癌或与无环乌苷合用治疗HSV-2感染的可能性。     

荔枝核黄酮体外抗单纯疱疹病毒的作用

目的:探讨荔枝核黄酮类提取物(FLC)体外抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的作用。方法:以阿昔洛韦为阳性药物对照,以不同剂量的荔枝核黄酮类提取物分别作用于HSV-1病毒复制周期的各个环节分成3个实验组,以病毒半数感染量(TCID50)、细胞病变效应(CPE)、MTT染色细胞存活率(MTT法)作为评价指标,判断的FLC抗病毒效果。结果:FLC对HEp-2细胞的半数细胞毒浓度(TC50)为239.25 mg/L,FLC对HSV-1病毒有直接杀伤作用和抗HSV-1生物合成作用,其直接杀伤HSV-1的半数有效浓度(IC50)为32.76 mg/L,治疗指数(TI)为7.30,抗HSV-1生物合成作用的半数有效浓度(IC50)为12.72 mg/L,治疗指数(TI)为18.81。结论:荔枝核黄酮类化合物在HEp-2细胞中对单纯疱疹病毒1型有明显抑制作用。     

麻杏石甘汤体外抗A型流感病毒作用靶点的研究

目的研究麻杏石甘汤体外抗A型流感病毒的作用靶点。方法运用细胞培养技术、血凝试验和MTT法检测麻杏石甘汤在4种给药方式中对流感病毒血凝滴度和流感病毒感染的MDCK细胞活性的影响。结果在直接灭活病毒作用中,麻杏石甘汤在3.19￣31.25 mg/mL浓度范围内的血凝滴度低于病毒对照组,在15.63￣31.25mg/mL时病毒血凝滴度低于利巴韦林组;在干预病毒吸附作用中,麻杏石甘汤在1.95￣31.25 mg/mL浓度范围内病毒血凝滴度低于病毒对照组,在7.81￣31.25 mg/mL时病毒血凝滴度低于利巴韦林组;在保护宿主细胞作用中,麻杏石甘汤在3.19￣31.25 mg/mL浓度范围内病毒血凝滴度低于病毒对照组,在7.81￣31.25 mg/mL时病毒血凝滴度低于利巴韦林组,差异均有统计学意义(P<0.01￣0.05)。在这3种给药方式中,麻杏石甘汤对流感病毒感染的MDCK细胞的治疗指数高于利巴韦林。在抑制病毒增殖的作用中,麻杏石甘汤在7.81￣31.25 mg/mL浓度范围内病毒血凝滴度显著低于病毒对照组,差异有统计学意义(P<0.01￣0.05)。与利巴韦林组比较,检测的麻杏石甘汤5个浓度点的作用不明显,在给药方式中,麻杏石甘汤对MDCK细胞的治疗指数也低于利巴韦林组。结论麻杏石甘汤通过直接杀伤病毒、干预病毒吸附、抑制病毒增殖、保护宿主细胞而发挥抗流感病毒作用,该方直接杀伤病毒、干预病毒吸附和保护宿主细胞的作用优于利巴韦林片,抑制病毒增殖的作用不及利巴韦林片。     

热毒宁抗呼吸道合胞病毒(RSV,Long株)作用体外实验研究

目的:研究中草药热毒宁注射液对呼吸道合胞病毒(RSV,Long株)的抑制作用.方法:以病毒唑为阳性对照药,采用细胞培养技术,观察不同药物浓度及不同给药方式下RSV攻击后各组Hep-2细胞的病变效应(CPE),在此基础上采用MTT比色法,测定各组细胞的病毒抑制率.以CPE法计算药物的半数中毒浓度TC50,分别以CPE法及MTT法计算药物的半数有效浓度EC50及治疗指数TI,比较不同药物浓度及不同给药方式下热毒宁对呼吸道合胞病毒(RSV)的抑制作用效果.结果:热毒宁注射液半数中毒浓度TC50为3.972g/L.预防给药方式、细胞外直接灭活及治疗给药方式均有抗RSV作用,其抗RSV的半数有效浓度(EC50)分别为0.428、1.160、1.189 g/L,治疗指数TI分别为9.28、3.42和 3.34,热毒宁对RSV的抑制作用存在着明显的量效反应关系.结论:热毒宁对RSV有直接灭活作用,对RSV侵入Hep-2细胞有阻断作用,对RSV在Hep-2细胞内增殖有抑制作用,相同浓度下,以预防作用更显著.     

五加皮体外抗甲型流感病毒的作用

目的筛选出五加皮最佳的给药方式并找出五加皮水浸液体外抗流感病毒的最大无毒浓度。方法采用流感病毒H1N1鸡胚传代,用血凝实验测定病毒效价;病毒感染细胞后观察CPE,采用Karber公式计算病毒的TCID50,用100TCID50的病毒液感染MDCK细胞;五加皮的水浸液作用于未经病毒感染的MDCK细胞48h,采用MTT法检测找出药物对细胞的最大无毒浓度。分别采用治疗给药、预防给药、直接灭活3种方式作用于MDCK细胞,观察药物对病毒的作用,并计算药物的抗病毒有效率（ER）。结果 1病毒感染MDCK细胞浓度为：100TCID50=2.14×10^-3;2药物作用于MDCK细胞的最大无毒浓度为1.78 mg/m L,其细胞存活率高达99.4%;33种给药方式中,五加皮水浸液治疗给药组没有作用（ER﹤0）,预防给药组（ER=78.26%）及直接灭活病毒组（ER=27.78%）抗病毒均有效,其中预防给药组的抗病毒有效率最高,作用效果最好。结论五加皮在体外具有较好的抗甲型流感病毒的作用,且预防给药方式抗病毒效果最好。     

钝顶螺旋藻多糖抗单纯疱疹病毒2型的作用

 【目的】探讨钝顶螺旋藻多糖(PSP)抗单纯疱疹病毒2型(HSV-2)的作用及可能机制,为进一步开发该药提供理论依据。【方法】实验选用HSV-2标准株(333株),以不同剂量的PSP作用于HSV-2复制周期的不同阶段,终点以病毒半数感染量(TCID50)、细胞病变效应(CPE)、MTT染色细胞保护率(MTT法)及荧光定量PCR(FQ-PCR)作为评价手段,判断PSP的抗病毒效果。【结果】PSP对Vero细胞毒性极低(TC50为1750μg/mL),对HSV-2无直接灭活作用,可抑制病毒吸附和感染细胞内病毒的复制,其中50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL浓度的PSP对病毒复制的抑制率分别为63.94%、81.41%、85.63%;FQ-PCR结果显示随着PSP浓度及作用时间的增加,PSP对HSV-2DNA的抑制作用明显增强,具有良好的剂量和时效关系。【结论】PSP在体外具显著的抗HSV-2病毒作用,此作用发生在病毒吸附、病毒基因复制等多个环节上。     

荔枝核提取物体外抗病毒活性及其机制研究

目的:研究荔枝核提取物(LSE)的体外抗病毒活性,并初步研究其抗病毒的作用机制.方法:采用细胞病变效应(CPE)减少法和MTY法检测LSE对柯萨奇B3病毒(Cox B3)、呼吸道合胞病毒(RSV)以及单纯疱疹病毒1型和2型(HSV-1和HSV-2)的体外抗病毒活性,并通过观察直接杀病毒作用、对宿主细胞的保护作用、抑制病毒吸附作用以及在病毒感染后不同时间加入实验,对LSE抑制HSV-1的作用机制进行探讨.结果:LSE有一定的细胞毒性,它不能抑制Cox B3在宿主细胞内的增殖,但对RSV、HSV-1和HSV-2表现出明显的浓度依赖性抗病毒活性,其IC<,50>值分别为32.3,27.9和20.4μg/mL.该提取物预培养Vero细胞后不能保护细胞免受HSV-1感染,但它对HSV-1有直接的灭活作用.LSE可影响HSV-1对Vero细胞的吸附,当浓度为31.3μg/mL时对病毒吸附的抑制率为51%.ISE对HSV-1在细胞内的增殖表现出很强的抑制活性.结论:LSE具有较强的体外抗RSV和HSV活性,它对HSV的抑制作用可能通过多种方式和途径实现.     

红树林淡紫拟青霉胞外多糖体外抗HSV-1 的实验研究

目的 探讨红树林淡紫拟青霉胞外多糖体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型（HSV-1）感染的活性,为开 发新型抗病毒药物提供实验基础。方法 以Vero 细胞为病毒感染靶细胞,以不同浓度淡紫拟青霉胞外多糖 作用于HSV-1 感染的各个阶段,以细胞病变程度测定病毒半数感染量,MTT 法检测淡紫拟青霉胞外多糖对 Vero 细胞的毒性作用、对HSV-1 的直接灭活作用、对病毒吸附和生物合成的影响。结果 淡紫拟青霉胞 外多糖对Vero 细胞的半数有毒浓度（CC50）为1 724.2μg/ml,该多糖浓度<900μg/ml 时,细胞存活率仍> 90%,且对细胞无增殖作用;在25 ～ 1 000μg/ml 浓度范围内,该多糖可在一定程度上抑制病毒吸附,并表 现出一定的量效关系,半数抑制浓度（IC50）为650.7μg/ml ;该多糖还具有抑制HSV-1 生物合成的作用, 其IC50 为547.7μg/ml,在25 ～ 1 000μg/ml 浓度范围内,抑制率与药物浓度呈量效关系,未发现该多糖对 HSV-1 有直接灭活作用。结论 淡紫拟青霉胞外多糖对Vero 细胞毒性较小,是一种非常安全的多糖;该多 糖具有一定的抗病毒作用,在一定浓度范围内可抑制HSV-1 吸附和生物合成,且表现出一定的量效关系。     

999感冒灵颗粒抗呼吸道合胞病毒的初步研究

目的 探究999感冒灵颗粒在体外抗呼吸道病毒的作用.方法 采用细胞病变抑制法(CPE)及CCK-8法,观察在999感冒灵颗粒作用下,感染呼吸道合胞病毒( RSV)的HEp-2细胞的CPE变化情况以及吸光值,从而比较不同给药方式(直接灭活、抑制吸附、抑制增殖和阻断作用)及不同给药浓度下对 RSV的抑制作用.测定细胞的半数中毒浓度(TC50)、药物半数抑制浓度(IC50)以及治疗指数(TI).结果 细胞的TC50为25 mg/ml;直接灭活和抑制增殖均对RSV有明显作用( P ＜0.01 );采用直接灭活方式时,其 IC50为7.43 mg/ml,TI为3.36;采用抑制病毒增殖时,其IC50为4.42 mg/ml,TI为5.66. CCK-8 法结果显示,在阻断以及抑制吸附两种给药方式下,病毒抑制率与病毒对照组之间差异无统计学意义.结论 999 感冒灵颗粒在直接灭活以及抑制病毒增殖两种给药方式下对RSV有一定的抑制作用.     

大蒜新素注射液抗鼠肝炎病毒3型的体外实验研究

目的：探讨大蒜新素（allitridin）在细胞水平对鼠肝炎病毒3型（mice hepatitis virus,MHV-3）的抑制作用.方法：细胞培养、蚀斑试验测定病毒滴度;MTT法进行药物毒性试验;蚀斑抑制试验检测大蒜新素的抗MHV-3活性,改变给药时间探索大蒜新素抗MHV-3作用环节.结果：大蒜新素半数中毒浓度（TC50）为75 mg/L,抗MHV-3病毒的半数有效浓度（IC50）为2.7 mg/L,治疗指数（TI）为27.78,大蒜新素对MHV-3病毒的抑制作用存在明显的量效反应关系（P＜0.01）,并且对MHV-3病毒有预防和中和作用（P＜0.01）.结论：大蒜新素在L2细胞中对MHV-3病毒有明显的抑制作用,其作用机制是多途径的.     

The anti-HSV-2 effect of alumen: In vitro and in vivo experimental studies

This study investigated the anti-HSV-2 effect of alumen through in vitro and in vivo expe-riments.Viable cell counting was employed to assess the toxicity of alumen on Vero cells.The inhibition rate of HSV-2 was defined as the cytopathic effect(CPE)of the cells infected with the virus.Alumen suppositories of different concentrations were vaginally applied to the guinea pigs which were then infected with HSV-2 via a vaginal route.The clinical symptoms were observed and the local virus titer calculated.The results showed that alumen had an in vitro anti-HSV-2 effect by means of antiviral dup-lication,direct killing of the virus,and antiviral adsorption.Alumen suppositories of different concen-trations could reduce or completely inhibit HSV-2 infection in guinea pigs.It was concluded that alumen had an in vitro anti-HSV-2 effect through multiple approaches and it could suppress in vivo vaginal HSV-2 infection of guinea pig to some extent.     

邻苯二甲酸酐修饰卵清蛋白体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型的活性研究

摘要：目的研究邻苯二甲酸酐修饰卵清蛋白（3-Hydroxyphthalic anhydride-modified ovalbumin, HP-OVA）体外对抗单纯
疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）的活性。方法采用化学修饰的方法将3-羟基-邻苯二甲酸酐（HP）修饰卵清蛋白（OVA）,合成酸酐
修饰蛋白HP-OVA;选用HSV-2 333病毒株及非洲绿猴肾细胞（Vero 细胞）靶细胞,采用MTT比色法检测HP-OVA的体外
抗HSV-2病毒活性及其对Vero细胞的体外细胞毒性;镜检观察HP-OVA对17株阴道收集的乳酸杆菌的抑菌作用。结果
酸酐修饰卵清蛋白HP-OVA对HSV-2病毒具有明显抑制作用,其IC50为23.56±8.33 μg/ml,且其对病毒作用靶细胞毒性较
低,CC50>1 mg/ml,对17株阴道乳酸杆菌均无明显抑制作用,MIC>1 mg/ml。结论酸酐修饰蛋白HP-OVA体外有较好的
抗HSV-2病毒的活性,有望被开发为预防性传播性疾病的候选杀微生物剂。     

Antiviral effects of Lactobacillus crispatus against HSV-2 in mammalian cell lines

Background

Herpes simplex virus type 2 (HSV-2) infectious disease is one of the most common viral sexually transmitted diseases. As regards, vaginal lactobacilli play an important role in protecting host against the urogenital pathogens; here we assessed the potential antiviral activity of Lactobacillus crispatus against HSV-2 infection in vitro.

荔枝核黄酮类化合物的体外抗腺病毒作用

目的:探讨荔枝核提取物成分黄酮类化合物(FLC)体外抑制腺病毒(AdV)增殖的作用。方法:采用细胞病变效应(CPE)、四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)等方法检测不同浓度的FLC分别作用于AdV复制周期的3个阶段的抗病毒作用。结果:FLC可在病毒感染后通过抗病毒生物合成方式抑制AdV增殖,其半数细胞毒性浓度(TC50)和半数有效抑制浓度(IC50)分别为116.83mg/L,15.46mg/L,且FLC在1.25-40mg/L浓度范围内随药物浓度增加,其抗病毒作用越明显,病毒抑制率最高达84.31%,治疗指数为7.56。但研究未发现FLC具有抗病毒吸附和直接杀伤病毒的作用。结论:FLC体外可通过抗病毒生物合成的方式明显抑制AdV在人喉癌细胞(HEp-2)中的增殖。FLC有望成为一种新的有效抗腺病毒药物。     

茶多酚主要成分EGCG体外抗流感病毒FM1株作用

【目的】研究茶多酚主要成分EGCG体外抗甲型流感病毒FM1株感染及抑制病毒复制的作用。【方法】细胞培养测定抗病毒效价,采用细胞病变抑制(CPE)法和空斑减少试验法,在不同试验策略(治疗、保护)下,评价其体外抗流感病毒作用。【结果】CPE法观察及四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测结果显示:在治疗及保护模式下,4～32 mg/mL EGCG均有显著抑制病毒、提高细胞存活率的作用(P<0.01)。空斑减少试验结果显示:2种模式下EGCG治疗指数(TI)分别为39.31及43.48,能有效抑制流感病毒,符合CPE法的结果。【结论】EGCG具有一定的体外抗甲型流感病毒FM1株的作用。     

抗病毒药物筛选中两种方法的比较

目的：比较四甲基偶氮唑盐（MTT）法与细胞病变效应（CPE）在筛选抗病毒药物中的异同。方法：在体外用两种方法检测阿昔洛韦（ACV）对细胞毒性作用和抗单纯疱疹病毒1型（HSV-1）的作用。结果：MTT法较CPE法敏感、客观、准确。结论：MTT法是一种快速、敏感、客观和准确的筛选和评价抗病毒药物的方法。     

穿心莲水提取物的抗Ⅰ型单纯疱疹病毒作用

目的观察穿心莲水提取物体外抗Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-Ⅰ)的作用。方法以无环鸟苷(ACV)为阳性对照,将不同稀释浓度的穿心莲水提取物在兔肾细胞上进行治疗、预防及中和实验,通过观察细胞病变(CPE),观察穿心莲水提取物抗HSV-Ⅰ的作用效果。结果穿心莲水提取物半数毒性浓度(TC50)为2.50g/L,有效抑制浓度为0.63g/L,对Ⅰ型疱疹病毒的感染有抑制病毒生长和对病毒颗粒有直接杀伤作用。结论穿心莲水提取物体外有明显的抗Ⅰ型疱疹病毒的作用。