超声分子靶向显像体外胰岛移植立即经血液介导的炎症反应

目的：探讨采用赖氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸(Lys-Gly-Asp-Ser,KGDS)血栓靶向超声造影剂显示体外 胰岛移植立即经血液介导的炎症反应(immediately blood-mediated inflammatory reaction,IBMIR)可行性,为无创、实 时、动态地研究和评价IBMIR探索一种新的分子影像学方法。方法：7 mL新鲜全血+1 000 胰岛当量(islet equivalent quantity,IEQ)新生猪胰岛体外制作IBMIR模型。实验分为3组,均重复3次：A组对照组,不加造影剂;B组加普通 超声造影剂;C组加靶向超声造影剂。将上述各组Loops管道固定于摇床,并浸于37 ℃的水浴中。采用超声造影模式 实时观察Loops管内的回声,记录超声发现血栓出现的时间;并采用Line成像模式存储在硬盘,脱机分析血栓超声增 强强度。实验开始后10,30,60 min 3个时间点,经70 μm过滤网过滤Loops管内血液,测定过滤液体的凝血系统[凝血 酶抗凝血酶复合物(thrombin-antithrombin complex,ATA),D-二聚体(D-dimer)]、补体系统(C3a,C5b-9)及胰岛素含量 等指标,过滤网内血块做病理学检测。结果：A组没有加入造影剂,超声不能发现血栓形成;B组、C组加入超声造 影剂后超声可以发现血栓,其中B组加入自制普通超声造影剂,血栓在超声图像上显示为周边及内部无增强,呈充盈 缺损改变,发现血栓时间为(7.3±0.5) min,相应血栓超声增强强度的灰阶值为31.22±3.56;C组加入靶向超声造影剂, 超声清晰显示环状增强的血栓,发现血栓时间为(13.2±0.6) min,其超声增强强度的灰阶值为75.85±5.21。B组、C组血 栓灰阶值及发现时间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。血液学检测证实各实验组均发生了IBMIR;病理结果显示胰 岛与新鲜全血接触后,其表面形成血栓壳,加入带荧光的靶向超声造影剂,荧光显微镜可以清楚观察到胰岛周边呈 明亮的荧光光环,与血栓壳位置、形态、范围完全吻合。结论：超声分子影像技术可以靶向显像体外IBMIR,为无创 评估IBMIR的发生及其范围、程度提供了可能。     

HER2靶向聚合物超声造影微泡的制备及其体外实验

目的：制备以HER2受体为靶点的靶向聚合物微泡超声造影剂,并观测其理化特性、体外肿瘤靶向性及体外超声显像效果。方法：利用生物素-亲和素法构建HER2靶向聚合物微泡,测定其粒径、电位,评价其稳定性。在体外肿瘤靶向性实验中观察其与HER2（+）的乳腺癌细胞BT-474以及HER2（-）的乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞结合情况。并观察靶向聚合物微泡体外超声显影效果。结果：HER2靶向聚合物微泡平均粒径为（1.78±0.37）μm,平均表面Zeta电位为（-37.40±5.74）mV。12 h内靶向聚合物微泡粒径变化差异无统计学意义（P＞0.05）。HER2靶向聚合物微泡在体外对HER2（+）肿瘤细胞具有特异靶向性。体外超声显像显示靶向聚合物超声造影剂呈细腻均匀的点状密集高回声。结论：HER2靶向聚合物微泡稳定性好,靶向能力较强,具有良好的体外超声显影效果,为进一步进行体内肿瘤靶向超声造影奠定了基础。     

胰腺癌靶向的纳米级超声造影剂的制备及体外评价

目的 制备一种胰腺癌靶向的纳米级超声造影剂(T-UCA)并评价其体外靶向性效果。 方法 合成高分子聚合物PLGA-PEG-NHS并利用核磁共振氢谱检测;用乳化挥发法制备包裹全氟溴辛烷(PFOB)的PLGA纳米造影剂后连接Hedgehog抗体;BCA法测定抗体的连接率;透射电镜观察其形态,动态光散射法测定其粒径、电位;采用气相色谱-质谱法测定纳米造影剂的包封率及载药量;利用透析法测定纳米造影剂的体外释放特性;在人胰腺癌细胞株SW1990和CFPAC-1上,利用荧光显微镜和流式细胞仪定性和定量验证其体外靶向能力。 结果 所制得胰腺癌靶向的纳米级超声造影剂平均粒径为198.9nm,zeta电位为-31.8mV,包封率(63.7?Ee3.9%),载药量(14.3?Ee0.9%),48小时释药量为85.3%;体外细胞实验显示靶向造影剂与高表达Hedgehog抗原的SW1990细胞大量结合,而靶向造影剂与不表达Hedgehog抗原的CFPAC-1细胞未见特异性结合。 结论 本研究通过乳化挥发法成功制备了胰腺癌靶向的纳米级超声造影剂,其各项表征符合要求,并能特异性靶向Hedgehog高表达的胰腺癌细胞,有望成为胰腺癌诊断的超声造影剂。     

适配体AS1411修饰的管状DNA瓦在卵巢癌靶向治疗中的应用

目的：研究AS1411适配体修饰的DNA瓦HA-6AS对卵巢癌细胞的靶向性以及载阿霉素（DOX）后对卵巢癌细胞的靶向治疗作用。方法：先用FAM荧光标记AS1411适配体或AS-like，与卵巢癌A2780细胞孵育3 h后离心去除游离的HA-6(FAM-AS)或HA-6(FAM-AS-like)，用流式细胞术测定细胞的荧光强度；HA-6AS与DOX孵育过夜并高速离心去除游离的DOX,A2780细胞种于96孔板后培养过夜，将系列浓度的HA-6AS-DOX、AS1411+DOX和游离DOX加入96孔板，3 h后加入CCK-8试剂孵育，于酶标仪下测定吸光度并计算细胞的活力值。结果：用HA-6(FAM-AS)孵育的A2780细胞平均荧光强度比HA-6(FAM-AS-like)高（P<0.000 1），且具有浓度依赖性；HA-6AS-DOX能在3 h内比AS1411+DOX和游离DOX更快速地对A2780细胞产生杀伤作用（P<0.01）。结论：AS1411能提高HA的靶向性，使HA-6AS-DOX可以对卵巢癌产生靶向治疗作用。     

纳米液态氟碳脂质微球超声造影剂的制备及体外聚集实验研究

目的制备一种新型超声造影剂——纳米液态氟碳脂质微球造影剂,并研究其体外基本特性及聚集后增强超声显影性能。方法采用高压均质法制备纳米液态氟碳脂质微球超声造影剂,检测一般理化性质,再制备生物素化微球,以空白微球为对照组,分别在加入亲和素前后,观察体外聚集情况及超声显影效果,并用DFY超声图像定量分析统计软件计算、比较超声图像平均灰度值。结果所制备的液态氟碳脂质微球为外观呈乳白色的混悬液,镜下微球形态圆整,大小均一,性质稳定,粒径（171.9&#177;91.0）nm;制备的生物素化微球在加入亲和素后聚集成团状,并可增强超声显影,经DFY软件分析,加入亲和素前后超声图像平均灰度值差异有统计学意义。结论成功制备出稳定的纳米液态氟碳脂质超声造影剂,并采用生物素亲和素法证明了该微球具有聚集后增强超声显影性能。     

携载G250单克隆抗体的纳米微泡靶向于肾细胞癌的体内外实验研究

目的 本研究拟制备携载G250单克隆抗体的纳米微泡,在体内和体外研究其对肾细胞癌的靶向性.方法 机械振荡法制备空白脂质纳米微泡并观察其稳定性,生物素-亲和素连接技术将纳米微泡与G250单克隆抗体相连,采用免疫荧光进行验证.细胞免疫荧光实验鉴定所使用的两种肾细胞癌细胞(786-O和ACHN细胞)中G250的表达情况,靶向结合实验鉴别靶向纳米微泡对786-O和ACHN两种肾细胞癌细胞的体外寻靶能力.在肾细胞癌的裸鼠皮下移植瘤模型中,使用纳米微泡进行超声造影,并将采集到的动态图像在定量分析软件Qlab 8.1中进行数据分析.结果 成功制备了平均粒径为404.9 nm空白纳米微泡和平均粒径为611.4 nm靶向纳米微泡,稳定性能好,同时免疫荧光证实了靶向纳米微泡构建成功,能够与FITC标记的二抗结合,从而显示出绿色荧光;细胞免疫荧光证实G250抗原在786-O细胞中呈膜表达,而ACHN细胞中不表达.在细胞结合实验中发现靶向纳米微泡能够特异性的结合786-O细胞,但不能结合于ACHN细胞.体内超声造影显像从平均值和最大值分析,靶向纳米微泡和空白微泡在786-O肾细胞癌细胞的裸鼠模型的显影效果存在显著差异[平均值:(11.74±0.52) vs (16.34±0.40),P=0.001;最大值:(13.07±0.94) vs (18.09±0.82),P=0.003].结论 G250靶向的纳米微泡可在体外能够特异性的结合G250表达阳性的肾细胞癌细胞,在动物体内能够明显的增强移植瘤的超声显影效果.     

KGDS血栓靶向超声造影剂的制备及其初步评价

目的：探讨制备靶向结合活化血小板的脂质超声造影剂的新方法,评价制备的靶向超声造影剂体外与血栓靶向结合的能力。方法：首先合成荧光标记的,能与血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体特异性结合的赖氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸多肽-棕榈酸化合物（KGDS-Palm）。采用“超声-高速剪切”法,以带荧光FITC的KGDS-Palm为主要原料之一,制备靶向脂质超声造影剂。马尔文公司粒径测定仪检测微泡大小及分布;Coulter计数仪分析浓度;荧光显微镜下观察KGDS多肽与微泡的结合情况;流式细胞仪评价多肽与微泡的结合效率;观察靶向微泡在体外的稳定性;采用体外血栓模型,检测靶向微泡与血栓靶向结合的特异性。结果：KGDS靶向超声造影剂呈淡黄色混悬液,微泡浓度约为1.5×109/mL,平均粒径为1.5 μm,98%的微泡小于5 μm。荧光显微镜显示靶向超声造影剂表面呈明亮的绿色荧光;流式细胞仪检测KGDS结合效率为90.04%;体外4 ℃保存48 h后微泡浓度及粒径无显著改变;体外靶向及其拮抗实验证实,靶向超声造影剂与血栓特异性结合。结论：采用“超声-高速剪切法”制备靶向超声造影剂,方法简单易行,有利于靶向造影剂的制备及纯化;KGDS靶向超声造影剂稳定性好、靶向结合特异性强。     

主动靶向乳腺癌的pH响应纳米粒子的构建及体外评价

目的 制备主动靶向乳腺癌的pH响应负载多烯紫杉醇(docetaxel,DTX)的纳米粒子,并考察其理化性质、载药和药物缓释特征及对人乳腺癌MCF-7细胞的靶向和杀伤效果.方法 采用纳米沉淀法和基于聚多巴胺(polydopamine,PDA)的表面修饰方法制备主动靶向MCF-7细胞的载DTX的叶酸(folic acid,FA)和PDA修饰的胆酸-聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒子(DTX-loaded CA-PLGA@PDA-PEG-FA/NPs);采用透射电镜观察纳米粒子的形貌,纳米粒度仪分析纳米粒子的粒径和zeta电位,X射线光电子能谱仪(XPS)分析纳米粒子表面修饰情况;采用透析法和高效液相色谱法研究纳米粒子的载药率、包封率以及体外释放曲线;采用激光扫描共聚焦显微镜和流式细胞仪分析负载荧光探针的纳米粒子的体外细胞摄取;采用MTT法研究载药纳米粒子对MCF-7细胞的存活率的影响.结果 本研究制备的DTX-loaded CA-PLGA@PDA-PEG-FA/NPs呈“核-壳”结构,水合粒径为(166.4±3.9)nm,zeta电位为(-11.7±3.8)mV,载药量为(9.67±0.45)％,包封率为(88.32±3.10)％,在pH5.0的释放介质中药物释放较在pH7.4的释放介质中快,XPS分析结果显示PDA和叶酸在纳米粒子表面的修饰,MCF-7细胞摄取的主动靶向的纳米粒子多于未连接主动靶向配体的纳米粒子,载药主动靶向纳米粒子的细胞毒性明显优于DTX的临床制剂泰素帝(R).结论 主动靶向乳腺癌的pH响应的载药纳米粒子表现出良好的主动靶向性和MCF-7细胞杀伤效果.     

人前列腺癌靶向超声造影剂的制备及其体外实验研究

目的制备人前列腺细胞癌靶向超声造影剂,并对其进行鉴定,探讨其体外寻靶能力.方法静电吸附法制备免疫脂质体微泡造影剂;免疫荧光染色试验证明抗体与脂质体微泡的结合,普通光镜和荧光显微下观察微泡与前列腺癌细胞的结合情况,探讨靶向脂质体微泡对癌细胞的体外寻靶能力;同时以普通微泡作为对照.结果免疫脂质体微泡的荧光免疫染色试验为阳性;体外寻靶试验显示携带PSM(C-15)抗体的靶向脂质体微泡能较好地粘附于癌细胞周边;而对照组未见微泡与靶细胞的结合.结论采用静电吸附法成功制备了具有良好免疫活性的的人前列腺癌靶向脂质体造影剂,该造影剂在体外能高效特异性地与人前列腺癌细胞结合.     

超声弹性成像技术初步评价黄酒对动脉粥样硬化患者大动脉弹性的改善作用

目的 应用超声弹性成像技术评价黄酒对动脉粥样硬化患者大动脉弹性的改善作用。方法 纳入经血管彩色多普勒超声诊断为动脉粥样硬化（AS）患者90例,另选取年龄和性别相匹配的40例志愿者作为正常对照组。AS患者随机分为AS对照组（n=45）和AS+黄酒组（n=45）并进行相应干预。干预前后各组均行颈动脉、股动脉血管彩色多普勒超声检查,测量血管壁内中膜厚度（IMT）,血管阻力指数（RI）;另采用超声弹性成像技术评估大动脉弹性,计算血管壁与血管内血液的应变率比值（B/A）。最后对各组资料进行对比研究。结果 干预前,AS对照组与AS+黄酒组IMT、RI、B/A值均高于正常对照组,差异有统计学意义（P<0.01）。干预后,AS+黄酒组RI、B/A值较AS对照组显著降低（P<0.05）,IMT较AS对照组略降低（P>0.05）,但上述指标仍高于正常对照组（P<0.01）。与干预前比较,干预后AS+黄酒组RI、B/A值较干预前显著降低（P<0.05）,IMT较干预前略降低（P>0.05）。结论 黄酒对动脉粥样硬化患者大动脉弹性具有一定的改善作用,超声弹性成像技术可以方便、快捷、无创地评估大动脉弹性改变,具有重要的临床意义。     

长春瑞滨联合顺铂与紫杉醇联合顺铂方案治疗晚期非小细胞肺癌的疗效比较

目的：比较NP和TP方案治疗晚期非小细胞肺癌的疗效和毒副反应。方法：61例经病理或细胞学证实的晚期非小细胞肺癌患者随机分为两组,NP组30例,TP组31例。NP组：NVB25mg／m^2,静注,第1、8天;PDD20mg／m^2,静脉滴注,第1—5天。IP组：PTX135mg／m^2,静脉滴注,第1天,持续3—4小时;PDD20mg／m^2,第2—6天。2—3周为一周期。结果：NP组30例,总有效率40．0％,1年生存率为36．7％,中位生存期10．7个月;TP组31例,总有效率45．2％,1年生存率41．9％,中位生存期10．2个月。两组间总有效率、1年生存率比较差异均无显著性（P〉0．05）。骨髓抑制为主要的剂量限制性毒性,NP组较TP组稍重,白细胞减少发生率分别为86．7％和67．7％。NP组静脉炎和胃道肠反应较TP组重,而TP组脱发和周围神经毒性／疼痛较NP组重。结论：NP方案和TP方案治疗晚期非小细胞肺癌疗效肯定,毒性反应可以耐受。两方案疗效差异无显著性。     

桂枝茯苓胶囊对动脉粥样硬化大鼠动脉基质的影响

目的观察桂枝茯苓胶囊对动脉粥样硬化(AS)模型大鼠动脉基质的影响。方法 Sprague-Dawley大鼠随机分为空白组12只和造模组38只。空白组予普通饲料;造模组予高脂饲料+维生素D3腹腔注射,造模成功后随机分为模型组、西药组、观察组(每组各12只),分别予生理盐水、辛伐他汀联合卡托普利、桂枝茯苓胶囊灌胃,16周末处死动物。免疫组织化学法检测主动脉细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)的表达。结果模型组的总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)与空白组比较明显升高(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平与空白组比较明显降低(P<0.05);西药组的TC、TG、LDL-C较模型组明显下降(P<0.05),HDL-C水平升高(P<0.05);观察组的TC、TG、LDL-C、HDL-C水平与模型组比较有改善趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。模型组主动脉壁的ICAM-1、MMP-9阳性表达高于空白组、西药组及观察组,差异均有统计学意义(P<0.05);西药组、观察组的ICAM-1、MMP-9阳性表达高于空白组(P<0.05);西药组与观察组间的ICAM-1、MMP-9阳性表达差异无统计学意义(P>0.05)。模型组的TIMP-1阳性表达高于空白组(P<0.05),西药组、观察组的TIMP-1阳性表达高于模型组(P<0.05),西药组与观察组间TIMP-1的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论桂枝茯苓胶囊具有抗AS的作用。     

UbcH10基因沉默联合多柔比星抑制耐药乳腺癌细胞体内成瘤实验

目的 观察UbcH10基因沉默对多柔比星抑制耐药乳腺癌细胞株MCF-7/ADR体内成瘤作用的影响.方法 采用慢病毒系统在MCF-7/ADR细胞中进行UbcH10基因沉默.将基因沉默后的肿瘤细胞及对照肿瘤细胞接种至裸鼠皮下,通过裸鼠尾静脉连续给予多柔比星或生理盐水2周并停药1周,测量肿瘤体积,分析UbcH10沉默对多柔比星抑制MCF-7/ADR体内成瘤作用的影响.采用蛋白质印迹分析检测瘤体中的UbcH10及BCL-2蛋白含量,分析UbcH10与肿瘤细胞化疗敏感性之间的调控关系.结果 通过慢病毒实验系统成功建立UbcH10基因沉默细胞株MCF-7/ADR UbcH10-RNAi.经过3周给药处理,多柔比星组肿瘤体积与对照组比较差异无统计学意义,肿瘤抑制率为4.16％;基因沉默+多柔比星组肿瘤体积与对照组差异有统计学意义(P＜0.05),肿瘤抑制率为41.8％.瘤体内蛋白含量检测结果显示,对照组、多柔比星组、基因沉默+多柔比星组UbcH10蛋白表达量分别为0.81±0.16、0.78±0.12、0.18±0.04,基因沉默+多柔比星组其余两组比较差异均有统计学意义(P＜0.05);BCL-2蛋白表达量组间差异与UbcH10一致,二者之间具有正相关性.结论 UbcH10基因沉默可以显著增强多柔比星抑制耐药乳腺癌细胞MCF-7/ADR的体内成瘤作用.     

不同浓度的碳二亚胺乙醇溶液处理对牙本质自酸蚀粘接剂粘接强度的影响

目的：采用微剪切方法分析不同浓度碳二亚胺［1-ethyl-3-（3-dimethylaminopropyl）carbodiimide,EDC］乙醇溶液处理牙本质表面对自酸蚀粘接剂粘接强度和断裂模式的影响。方法： 收集离体健康智齿80颗,随机分为5组,每组16颗。低速切割机暴露牙合面中层牙本质后使用两步法自酸蚀粘接剂（Clearfil SE Bond）进行牙本质粘接,所有试件设计为粘接半径1 mm、高3 mm的树脂柱试件。粘接时除空白组按常规步骤完成粘接外, 其余4组在Ⅰ液（底涂剂）处理后,分别采用3种浓度（0.01 mol/L、0.3 mol/L、0.5 mol/L）的EDC乙醇溶液和乙醇溶剂对牙本质表面处理1 min 后涂布Ⅱ液（粘接剂）完成粘接。将所有试件放入含0.5%（质量分数）氯胺T生理盐水浸泡24 h后进行微剪切实验,并在体式显微镜下观察试件断裂模式。结果： 0.01 mol/L、0.3 mol/L、0.5 mol/L EDC处理组、乙醇溶剂处理组的即刻微剪切粘接强度分别为（35.29±8.97） MPa、（40.24±9.68） MPa、（37.38±9.66） MPa、（37.49±7.76） MPa,高于空白组（33.81±7.98） MPa,各组差异均无统计学意义（P>0.05）;断裂模式在各组间差异也无统计学意义（P>0.05）。结论： 不同浓度的EDC乙醇溶液处理对牙本质自酸蚀粘接剂的即刻粘接强度、断裂模式没有影响。     

血管生长抑素和血管内皮生长因子与子痫前期发病的关系

目的:检测外周血中血管生长抑素(AS)、血管内皮生长因子(VEGF)水平,探讨与子痫前期发病的关系。方法:取58例孕妇外周血,其中正常妊娠组20例;轻度子痫前期组17例;重度子痫前期组21例。ELISA方法检测血清AS、VEGF的浓度。结果:①子痫前期组AS水平显著高于对照组,差别有显著性(P<0.05)。②子痫前期组VEGF平均水平显著低于对照组,差别具有显著性(P<0.05)。③轻度子痫前期组和重度子痫前期组之间AS、VEGF水平差别均没有显著性(P>0.05)。④在子痫前期患者中AS与VEGF之间存在关联关系,呈显著负相关(r=-0.560,P<0.05;r=-0.572,P<0.05)。结论:AS和VEGF在子痫前期患者外周血中有显著变化,两者之间呈显著负相关,可能是子痫前期发病的重要因素之一。     

卡维地洛与非洛地平对高血压病患者心肌纤维化指标影响的比较

目的 :比较卡维地洛与非洛地平对高血压病患者心肌纤维化指标的影响。方法 :66例高血压病患者随机分为卡维地洛组与非洛地平组 ,治疗 12周 ,治疗前后测定血压、心率、血清Ⅲ型前胶原氨基端肽 (Aminotermi nalpropeptideoftypeⅢprocollagen ;PⅢNP)、一氧化氮 (nitricoxide ;NO)与血浆去甲肾上腺素 (norepinephrine ;NE)浓度进行比较。结果 :卡维地洛与非洛地平治疗 12周均能有效降压 ,二组之间无明显差别 (P >0 .0 5 ) ;卡维地洛治疗后心率减慢 (P <0 .0 5 ) ,而非洛地平对心率影响不大 (P >0 .0 5 ) ;二组均能降低高血压病患者血清中增高的PⅢNP(P <0 .0 5 ) ,但卡维地洛组效果优于非洛地平组 (P <0 .0 5 ) ;二组血清NO治疗后 12周较治疗前显著增加 (P <0 .0 5 ) ,非洛地平组优于卡维地洛组 (P <0 .0 5 ) ;卡维地洛治疗后血浆NE降低 (P <0 .0 5 ) ,而非洛地平组无明显改变 (P >0 .0 5 )。结论 :卡维地洛与非洛地平短期治疗 ( 12周 )均能降低高血压病患者血清中增高胶原含量 ,卡维地洛优于非洛地平。     

量子点的制备及其与葡萄球菌蛋白A偶联条件的优化

目的:制备量子点与葡萄球菌蛋白A(Staphylococcal protein A,SPA)的偶联物,探究偶联反应的最佳条件.方法:采用"经典注入法"制备碲化镉量子点,使用1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基丁二酰亚胺(NHS)作为偶联剂用于偶联量子点和SPA,采用单因素考察法,分别探究...     

靶向mTOR siRNA的合成及对MCF-7细胞mTOR基因表达的影响

目的:合成靶向哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)siRNA,观察其对人乳癌MCF-7细胞mTOR基因表达的影响。方法:以mTOR基因434～452序列为靶点,设计并体外合成mTORsiRNA,用100和150nmol/L的siRNA转染MCF-7细胞24、48、72h,同时设无关对照组(转染非特异性siRNA)和正常对照组(不转染),运用免疫组化SP法和原位杂交技术检测各组细胞mTOR蛋白及mRNA的表达水平。结果:转染24、48和72h后,与各对照组相比,siRNA转染组细胞mTOR蛋白及mRNA的表达均降低(P均<0.05),2个siRNA转染组之间差异无统计学意义(P均>0.05)。不同时间点mTOR蛋白及mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:设计合成的siRNA可有效抑制乳癌MCF-7细胞mTOR基因的表达。