PDX通过P38 MAPK通路促进脓毒症性ARDS抗菌肽cathelicidin表达

目的：探究PDX对脓毒症性ARDS抗菌肽cathelicidin（CAMP）的影响及其具体机制。方法：C57BL/6小鼠行盲肠结扎穿孔术建立脓毒症模型,分为：假手术组（Sham组）、脓毒症组（CLP组）、治疗组（CLP+PDX组）、抑制剂组（CLP+PDX+SB203580组）、溶剂对照组（CLP+PDX+DMSO组）、PDX组。采用HE染色观察肺组织损伤情况,进行肺损伤评分,菌落形成单位（CFU）检测细菌清除情况,qPCR检测肺组织CAMP基因表达情况,Western blot检测肺组织CAMP蛋白表达以及P38 MAPK、ERK MAPK通路激活情况。结果：与Sham组比,CLP组ERK MAPK通路无显著变化,P38 MAPK通路受到抑制,CAMP表达显著升高（P＜0.05）;与CLP组相比,CLP+PDX组小鼠肺组织出血、炎性细胞浸润减轻,CFU显著降低,P38 MAPK通路明显活化,且CLP+PDX组中CAMP表达进一步升高（P＜0.05）。结论：PDX通过调控P38 MAPK通路促进脓毒症性ARDS CAMP的表达。     

肾上腺髓质素对腹腔感染所致肺损伤大鼠肺组织中PPAR-γ的影响

目的探讨肾上腺髓质素(ADM)对腹腔感染所致急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)蛋白表达的影响。方法采用盲肠结扎穿孔(CLP)制作大鼠腹腔感染模型,随机分为假手术组(Sham)、Sham ADM组,CLP组和CLP ADM治疗组。持续监测各组大鼠颈动脉压力。分别于手术后6h、18h测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞计数及肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;肺组织HE染色及肺损伤组织学评分;测定肺组织湿/干重比值(W/D);用Westernblot法观察肺组织中PPAR-γ蛋白表达变化。结果各组之间平均动脉压在各时段差异无统计学意义(P>0.05)。CLP组6h、18h时的肺损伤组织学评分(P<0.05)以及BALF中白细胞数(P<0.05)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量均明显高于Sham组和CLP ADM组(P<0.05)。CLP组在18h的W/D值较Sham组和CLP ADM有明显升高(P<0.05),而CLP ADM组18h的W/D值低于CLP组(P<0.05)。CLP组6h、18h大鼠肺组织中PPAR-γ蛋白表达较Sham组和CLP ADM均有显著下降(P<0.05)。结论肾上腺髓质素可以减轻腹腔感染大鼠的肺损伤程度,并且上调肺损伤大鼠肺组织中PPAR-r蛋白的表达。     

脓毒症肺损伤小鼠血清内皮微颗粒的变化

目的 探讨脓毒症相关肺损伤小鼠血清中内皮微颗粒(endothelial-derived microparticles, EMPs)的变化及意义。方法 C57BL/6J 小鼠随机分成结扎盲肠头尾端穿孔术(cecal ligation puncture procedure, CLP)组和假手术(Sham)组。术后24h CLP组存活的小鼠和假手术组小鼠心尖取血,离心后测定血清IL-1β、IL-6、TNF浓度,流式细胞仪检测血清中CD144⁺EMPs浓度水平。取各组肺组织测定肺湿重/干重比值(W/D),光镜下观察肺组织学的改变,电子显微镜下观察肺组织超微结构改变。结果 CLP组小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF浓度均高于Sham组(P<0.01);CLP组小鼠肺组织W/D高于Sham组(P<0.01)。病理学检查显示CLP术后24h小鼠出现急性肺损伤,肺泡内皮细胞损伤明显。CLP组小鼠血清中CD144+EMPs浓度高于Sham组(P<0.01)。结论 CLP术后24h小鼠发生了急性肺损伤,是较好的肺损伤的模型。内皮微颗粒浓度的升高和脓毒症相关性肺损伤密切相关,内皮微颗粒可能参与了急性肺损伤的过程。     

脓毒症患者血清外泌体对脓毒症大鼠急性肺损伤的影响

目的 研究脓毒症患者血清外泌体(Exosomes)对脓毒症大鼠急性肺损伤的影响及其机制。方法 采集脓毒症患者血清样本,采用ExoQuick试剤法从血清样本中分离提纯Exosomes?建立脓毒症大鼠动物模型,并将实验大 鼠随机分为假手术组、脓毒症组、实验组和对照组,每组各8只。对各组大鼠进行动脉血气分析、血清炎症介质检测、支 气管肺泡灌洗液(BALF)白细胞计数、肺组织病理学观察和肺组织湿/干质量(W/D)比值检测。结果 与假手术组比 较,脓毒症组和对照组大鼠PH值、P&O2较假手术组明显降低,而PaCO2则明显升高;实验组大鼠PaO2低于脓毒症组, 而PaCC)2则高于脓毒症组(P<0. 05) o与假手术组比较,脓毒症组和对照组大鼠血清TNF asIL 1[3SIL 6和IL 10的浓 度水平值均明显升高;实验组大鼠血清TNFaJLlpJL6和IL 10的浓度水平值则高于脓毒症组(P<0. 05) o脓毒症 组和对照组大鼠BALF中白细胞数量显著增加,明显高于假手术组;实验组大鼠BALF中白细胞数量则高于脓毒症组 (P<0.05)o脓毒症组和对照组大鼠肺组织W/D比值和病理评分均明显高于假手术组,实验组大鼠W/D比值和病理 评分则高于脓毒症组(P<0. 05)。结论 脓毒症患者血清Exosomes会进一步加重脓毒症大鼠急性肺损伤,其机制可能 与Exosomes会加重肺部炎症反应有关。     

盐酸戊乙奎醚对大鼠脓毒症肺损伤的影响

目的 研究盐酸戊乙奎醚(长托宁)对脓毒症大鼠急性肺损伤的影响.方法 采用盲肠结扎穿孔复制大鼠脓毒症肺损伤动物模型,30只SD大鼠随机分为假手术组,脓毒症肺损伤组和长托宁(0.45 mg/kg肌肉注射)治疗组,每组10只,检测4 h后各组大鼠肺泡灌洗液白蛋白浓度,肺组织湿干重比(W/D)及肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,应用免疫组织化学的方法检测肺组织毛细血管内皮细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达.结果 长托宁治疗组大鼠肺泡灌洗液白蛋白浓度、 W/D、肺组织MPO活性与脓毒症肺损伤组有显著差异(P＜0.05),肺组织血管内皮ICAM-1的表达显著低于脓毒症肺损伤组(P＜0.05).结论 长托宁通过抑制肺血管内皮细胞ICAM-1的表达,对大鼠脓毒症肺损伤具有保护作用.     

小剂量胰岛素对脓毒症大鼠急性肺损伤巨噬细胞移动抑制因子和氧化应激的影响

目的 观察小剂量胰岛素对脓毒症大鼠急性肺损伤巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和氧化应激的影响,探讨胰岛素的肺保护作用及其机制.方法 30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、脓毒症组、胰岛素治疗组,以盲肠结扎穿孔法建立脓毒症大鼠模型.各组于建模后12 h处死,分别测定动脉血氧分压(PaO2)、肺湿干质量比(W/D)、肺组织匀浆丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)测定、肺组织NF-K B/p65及MIF表达水平及肺损伤病理程度等.结果 脓毒症组肺W/D、MDA、NF-K B/p65、MIF、MIF mRNA及病理损伤程度较假手术组显著上升(P＜0.05),T-AOC和PaO2显著下降(P＜0.05);而胰岛素治疗组与脓毒症组比较肺W/D、MDA、NF-K B/p65、MIF、MIF mRNA及病理损伤程度显著下降(P＜0.05),T-AOC和PaO2显著上升(P＜0.05).结论 小剂量胰岛素能够下调MIF的表达和抑制氧化应激,对脓毒症大鼠急性肺损伤有保护作用,其机制可能与抑制NF-KB活化有关.     

苦参素对感染性休克大鼠肺损伤防治作用的实验研究

目的观察苦参素(Oxymatrine,OMT)对感染性休克大鼠肺损伤的防治作用。方法采用大鼠盲肠结扎穿孔法(cecal ligation and puncture,CLP)复制大鼠感染性休克模型,将56只大鼠随机分为假手术组、OMT对照组、模型(CLP)组、CLP OMT 52、26、13 mg/kg剂量组、阳性对照(CLP 地塞米松)组。通过观察血气、肺组织W/D比值、肺系数及肺含水量、肺病理学检查(大体改变及肺病理组织切片)等指标,对肺损伤进行评估。结果CLP组较假手术组比较PaO2、SaO2及BE值均降低(P<0.01);PaCO2、HCO3、W/D比值、肺系数及肺含水量均升高(P<0.05)。CLP OMT 522、6、13 mg/kg剂量组及CLP 地塞米松组较CLP组比较PaO2、SaO2及BE值均升高;PaCO2、HCO3、W/D比值、PWI及肺含水量均降低(P<0.01或P<0.05);CLP OMT 52、26、13 mg/kg剂量组及大鼠双肺肉眼观察与CLP组相比,体积膨大程度有所减轻,淤血较轻,颜色较浅。结论OMT 13、26、52mg/kg对感染性休克大鼠肺损伤性病变有明显的抑制作用。     

异氟烷后处理减轻大鼠盲肠结扎穿孔所致急性肺损伤

目的 研究异氟烷后处理对大鼠盲肠结扎穿孔(CLP)所致急性肺损伤(ALI)的保护作用.方法 将48只Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为4组,每组12只:正常对照组,不做任何处理;假手术组,单纯行开腹关腹术;CLP组,行CLP建立大鼠ALI模型;异氟烷组,CLP模型建立后4h,使大鼠吸入体积分数为0.014的异氟烷2h.分别在实验后6和24 h,每组各处死6只大鼠作为6h亚组和24 h亚组.取腹主动脉血行动脉血气分析,取左肺测定肺组织湿/干重比(W/D),取心脏血测定血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6浓度,取右肺行苏木精-伊红(H-E)染色观察肺组织病理学变化、免疫组织化学染色观察核转录因子(NF)-κB的表达.结果 假手术组大鼠的动脉血氧分压(paO2)、肺组织W/D及血清TNF-α和IL-6水平与正常对照组的差异均无统计学意义(P值均＞0.05).CLP组和异氟烷组的paO2均较正常对照组显著降低(P值均＜0.05),肺组织W/D均较正常对照组显著增大(P值均＜0.05),血清TNF-α和IL-6水平均较正常对照组显著升高(P值均＜0.05);但异氟烷组上述指标的变化均较CLP组小,与CLP组比较的差异均有统计学意义(P值均＜0.05).正常对照组和假手术组大鼠的肺组织无明显损伤;CLP组大鼠的肺组织损伤严重,24 h亚组的损伤更为明显;异氟烷组大鼠的肺组织损伤较CLP组轻.正常对照组和假手术组偶见NF-κB表达阳性细胞,CLP组见大量NF-κB表达阳性细胞,异氟烷组的NF-κB阳性细胞数目较CLP组减少.结论 异氟烷后处理对脓毒症ALI具有保护作用,这种保护作用可能部分是通过抑制炎性因子和NF-κB的表达实现的.     

受体相互作用蛋白140在脓毒症急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞中的表达及其作用

目的 探讨受体相互作用蛋白140 (receptor interacting protein140,RIP140)在脓毒症急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠肺泡巨噬细胞中的表达及其在炎症反应过程中的作用.方法 36只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组和盲肠结扎穿孔术(CLP)致脓毒症肺损伤3、6、12、24 h组.HE染色观察肺组织病理变化;免疫组化检测RIP140在肺组织的表达分布;Western blot及免疫荧光观察肺泡巨噬细胞RIP140的表达变化及定位;RT-qPCR测定肺泡巨噬细胞IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA水平变化.结果 CLP组可见明显肺损伤病理改变且随时间进展逐渐加重.RIP140在脓毒症肺损伤大鼠肺组织中主要表达于炎性渗出细胞,且随时间进展,表达RIP140的细胞数量逐渐增多.CLP术后6h大鼠肺巨噬细胞RIP140蛋白表达水平较正常对照组开始升高(P＜0.05),至12～24 h维持一较高水平,且主要表达于细胞核.CLP术后3h大鼠肺巨噬细胞IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA水平较正常对照组开始升高(P＜0.05),至12～24 h维持一较高水平,下调肺泡巨噬细胞RIP140的表达可明显抑制IL-1 β、TNF-α、IL-6 mRNA的表达.结论 脓毒症肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞可通过上调RIP140表达增强肺组织炎症反应,从而参与早期急性肺损伤的炎症应答.     

阿托伐他汀对脓毒症大鼠肺损伤的保护作用

目的探讨阿托伐他汀对脓毒症大鼠肺损伤的保护作用。方法 60只大鼠随机分为假手术组、脓毒症组和干预组,每组20只。采用盲肠结扎穿孔(CLP)脓毒症大鼠模型,干预组分别于术后6、18 h腹腔注射阿托伐他汀(0.2 mg.kg-1),假手术组和脓毒症组同时间点给予等体积温生理盐水腹腔注射。观察各组大鼠术后20 h肺组织病理学改变、肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平及术后7 d生存率。结果与脓毒症组比较,干预组大鼠术后7 d生存率显著提高,病理示肺损伤明显减轻,肺组织SOD活性显著升高(P<0.01),而MDA水平显著降低(P<0.01)。干预组SOD活性及MDA水平与假手术组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论阿托伐他汀可显著提高脓毒症大鼠的生存率,并可能通过减少肺氧自由基的产生,减轻肺损伤。     

激活大麻素受体2可减轻实验性脓毒症大鼠的急性肺损伤

目的 探讨激活大麻素受体2(CB2)对大鼠脓毒症急性肺损伤的保护作用及机制。方法 将48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、CB2激动剂组和P38 MAPK抑制剂组（12只/组）。对照组腹腔注射生理盐水,其余3组均腹腔注射脂多糖造模6 h;CB2激动剂组在注射脂多糖前30 min腹腔注射CB2激动剂JWH133(3 mg/kg),P38 MAPK抑制剂组在CB2激动剂组基础上提前30 min腹腔注射P38 MAPK抑制剂SB203580(5 mg/kg)。观察和检测肺组织病理学、含水率、液体清除率、炎症因子的变化情况,肺组织CB2、紧密连接的基因及蛋白表达情况以及P38 MAPK磷酸化情况。结果 与对照组相比,模型组大鼠的肺泡结构破坏严重,液体清除率、肺组织中CB2、occludin和ZO-1蛋白的mRNA及蛋白表达降低,肺组织含水率、P38 MAPK的磷酸化程度、肺灌洗液中TNF-α、IL-1β均增加,差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组相比,CB2激动剂组肺泡形态有所恢复,但仍有炎性浸润,肺组织含水率、P38 MAPK磷酸化程度、肺灌洗液中TNF-α、IL-1β降低,液体...     

Casp-8通过调控NLRP3炎性小体介导的细胞焦亡减轻脓毒症引起的急性肺损伤

目的:分析半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-8(Casp-8)对脓毒症引起的急性肺损伤(ALI)的作用及其相关分子机制。方法:对40只C57BL/6小鼠使用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症诱导的小鼠ALI模型,将造模成功的小鼠随机分为模型组(CLP组)和CLP+Casp-8抑制剂组(CLP+Z-IETD-FMK组),每组20只。另取20只正常饲养的小鼠设为假手术组(sham组)。采用称质量法测定小鼠肺组织湿干质量比值(W/D),HE染色观察小鼠肺组织病理变化,TUNEL染色检测肺组织细胞凋亡情况,ELISA检测小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子水平,qRT-PCR检测肺组织中Casp-8 mRNA表达,Western blotting检测小鼠肺组织中Casp-8蛋白、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体及细胞焦亡相关蛋白表达。结果:与sham组比较,CLP组小鼠24 h存活率明显降低(P<0.05);小鼠肺组织充血水肿,肺泡结构严重破坏,肺间质内大量炎症细胞浸润;肺组织W/D,细胞凋亡率,BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、I...     

罗汉果皂苷V对胎粪吸入综合征大鼠的保护作用及其初步机制研究

目的 观察罗汉果皂苷V对胎粪吸入综合征(MAS)大鼠急性肺损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法 将48只健康Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、罗汉果皂苷V低、中、高剂量组(2.5、5、10 mg/kg)和地塞米松组(0.5 mg/kg),8只/组;采用经口直视气管插管法构建MAS模型;罗汉果皂苷V低、中、高剂量组及地塞米松组于造模后灌胃给药,模型组和假手术组给予等量生理盐水灌胃。采用HE染色观察肺组织病理变化;测量肺组织湿干质量比(W/D);ELISA法检测血清和肺泡灌洗液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-10)、白介素1β(IL-1β)水平;比色法检测肺组织中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;Western blot检测肺组织c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)蛋白表达。结果 与假手术组比较,模型组肺组织病理评分、W/D升高(P<0.05),肺泡灌洗液及血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高(P<0.05),肺组织MDA与MPO水平升高、SOD水平降低(P<0.05),肺组织p-JNK蛋白表达...     

二氧化硫对脓毒症致急性肺损伤大鼠炎症反应的抑制作用

目的 探讨二氧化硫(sulfur dioxide,SO2)对盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)诱导的脓毒症大鼠急性肺损伤炎症反应的作用及其机制.方法 雄性SD大鼠32只随机分成4组,每组8只:假手术+生理盐水(Sham+NaCl)组,假手术+外源性SO2供体Na2SO3/NaHSO3(Sham+SO2)组,盲肠结扎穿孔术+生理盐水(CLP+NaCl)组及盲肠结扎穿孔术+外源性SO2供体Na2SO2/NaHSO3(CLP+SO2)组.对各组大鼠肺组织显微镜下形态学观察,进行肺损伤半定量评分(index of quantitative assessment,IQA),测量肺湿干重比(wet/dry weight,W/D);采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织中TNF-α、IL-6含量;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测肺组织中NF-κB信号通路中磷酸化IκBα(p-IκBα)、IκBα、p-p65蛋白含量.结果 光镜下,Sham+SO2组与Sham+NaCl组相比,形态结构无明显变化;CLP+NaCl组肺组织明显变化,肺组织结构不完整,肺泡间隔明显增厚,肺间质以及肺泡水肿;与CLP+NaCl组相比,CLP+SO2组肺泡结构较完整,肺泡间隔变窄,间质水肿减轻.与Sham+NaCl组相比,CLP+NaCl组大鼠IQA、W/D增加;与CLP+NaCl组相比,CLP+SO2组大鼠IQA、W/D降低.与Sham+NaCl组相比,CLP+NaCl组大鼠肺组织中TNF-α、IL-6含量均升高;与CLP+NaCl组相比,CLP+SO2组大鼠肺组织中TNF-α、IL-6含量均下降.与Sham+NaCl组相比,CLP+NaCl组大鼠肺组织中p-IκBα、p-p65的表达增强,IκBα的表达减弱;与CLP+NaCl组相比,CLP+SO2组大鼠肺组织中p-IκBα、p-p65的表达减弱,IκBα的表达增强.结论 SO2在脓毒症大鼠肺损伤中通过抑制炎性反应起保护作用,机制与抑制NF-κB信号通路有关.     

葛根芩连汤对脂多糖诱导的急性肺损伤大鼠MAPK/NF-κB信号通路的调节及肺组织保护作用*

目的 探讨葛根芩连汤(GQL)对脂多糖诱导的急性肺损伤大鼠MAPK/NF-κB信号通路的调节及肺组织保护作用。方法 75只大鼠按照随机数字表法分为5组,分别为对照组、模型组、GQL低、中、高剂量组,15只/组。除对照组外,其余大鼠采用腹腔注射脂多糖(LPS)法建立急性肺损伤大鼠模型,GQL低、中、高剂量组按照2.5 mL/kg的剂量灌胃给予大鼠不同剂量的葛根芩连汤,对照组及模型组灌胃给予大鼠等量生理盐水,1次/d,共给药8周。ELISA法测定各组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)及白介素-1β(IL-1β)水平、肺泡灌洗液中性粒细胞(PMN)计数、肺湿干重比值、超氧化物歧化酶(SOD)及肺组织丙二醛(MDA)水平,苏木精-伊红染色法进行大鼠肺组织病理学检查,实时定量PCR检测大鼠肺组织NF-κB/P65及P38/MAPK mRNA水平,Western blot检测大鼠肺组织p-NF-κB/P65、NF-κB/P65、P38/MAPK、p-P38/MAPK蛋白水平。结果 与模型组比较,GQL各剂量组大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平、肺泡灌洗液PMN计数、肺组织湿干重比值及MDA水平、肺组织NF-κB/P65及P38/MAPK mRNA水平、p- NF-κB/P65、NF-κB/P65、P38/MAPK、p-P38/MAPK蛋白水平显著降低(均P＜0.05),肺组织SOD活性显著升高(P＜0.05),大鼠肺组织病理学明显改善。结论 葛根芩连汤能够显著降低急性肺损伤大鼠体内炎症因子水平,改善肺组织氧化应激损伤及病理学变化,其机制可能与调节MAPK/NF-κB信号通路有关。     

己酮可可碱对大鼠脓毒症急性肺损伤p38MAPK活性的影响

目的　探讨己酮可可碱(pentoxifylline,PTX)对腹腔感染致脓毒症急性肺损伤发挥肺保护作用与p38MAPK活化的关系。方法　采用盲肠结扎穿孔致脓毒症模型,将大鼠随机分为Ⅰ组(Sham组)、Ⅱ组(脓毒症CLP组)、Ⅲ组(脓毒症加西黄著胶CLP+V组)、Ⅳ组(脓毒症加生理盐水CLP+N组)、Ⅴ组(脓毒症加SB203580 CLP+SB组)、Ⅵ组(脓毒症加己酮可可碱CLP+PTX组),其中Ⅲ组、Ⅳ组为溶媒对照组。用Western Blot检测假手术组,脓毒症1,3,6,12,24 h后p38MAPK的磷酸化,然后选择1,6,24 h分别检测应用SB203580或PTX后p38MAPK的表达,同时检测血浆TNF-α、IL-6的含量并观察24 h内肺组织病理改变。结果　与假手术组比较,脓毒症组在各个时间点p38MAPK均有较强的表达,SB203580或PTX预处理后各组的p38MAPK的磷酸化明显受到抑制,且与血浆TNF-α、IL-6的含量以及肺的病理切片变化一致。结论　己酮可可碱可能是通过抑制p38MAPK的磷酸化抑制促炎因子的过度表达,发挥对脓毒症急性肺损伤的保护作用。     

脓毒症大鼠的急性肺损伤机制研究

目的 探讨脓毒症大鼠急性肺损伤的机制。方法 采用盲肠结扎穿孔术(CLP) 建立大鼠脓毒症模型。健康成年雄性SD大鼠48只,随机分为假手术组、脓毒症组,每组24只：动物模型制备成功后,各组在腹腔注入参附注射液(10 ml／kg)或等量生理盐水后,于术后3小时、12小时和24小时检测肺组织匀浆标本黄嘌呤氧化酶(XO)活力、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量。光学显微镜下观察肺组织病理改变。结果 与假手术组比较,脓毒症大鼠肺组织XO、MDA活性显著升高,SOD、GSH-Px活性显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 脓毒症大鼠存在急性肺损伤,其机制可能跟氧化应激相关。     

CD200/CD200R在大鼠脓毒症急性肺损伤中的表达

目的研究脓毒症致大鼠急性肺损伤肺组织中CD200/CD200R的表达。方法采用盲肠结扎穿孔术复制大鼠脓毒症急性肺损伤(ALI)模型,将36只大鼠随机分为急性肺损伤组和假手术组,每组设8、16、24 h 3个观察时间点,急性肺损伤组为A、B、C组,假手术组与之相对应的时间点分别为D、E、F组,各组大鼠在相应的时间点行动脉血气分析、检测IL-4、肺湿/干质量比测定、肺组织病理学观察,采用RT-PCR法检测肺组织CD200/CD200R mRNA表达、免疫印迹法检测肺组织CD200/CD200R的蛋白表达。结果①CD200/CD200R蛋白及mRNA表达情况:急性肺损伤A、B组较相应对照D、E组表达显著降低(P<0.05),而急性肺损伤C组与相应对照F组比较无显著差异(P>0.05);B组较A组表达显著上升(P<0.05),C组较B组表达显著上升(P<0.05),急性肺损伤组随着病情进展CD200/CD200R的蛋白及mRNA逐渐恢复至假手术对照组水平,各组间差异有统计学意义(P<0.05);②动脉血气分析:A组较相应对照D组无显著差异(P>0.05),B、C组较相应对照E、F组显著降低(P<0.05);急性肺损伤组随着病情进展动脉血氧分压逐渐降低;③IL-4检测:A组较相应对照D组无显著差异(P>0.05),B、C组较相应对照E、F组显著升高(P<0.05),急性肺损伤组随着病情进展IL-4浓度逐渐增加,差异有统计学意义(P<0.05);④肺湿/干质量比:A组较相应对照D组无显著差异(P>0.05),B、C组较相应对照E、F组显著升高(P<0.05),急性肺损伤组随着病情进展肺湿/干质量比逐渐增加,差异有统计学意义(P<0.05);肺组织病理变化:急性肺损伤组随病情进展,病理变化逐渐加重,假手术组病理学变化不明显。结论急性肺损伤组大鼠肺组织CD200/CD200R蛋白及mRNA早期表达降低,至24 h恢复至假手组水平,IL-4呈逐渐升高趋势,参与肺损伤炎症反应,提示CD200/CD200R参与脓毒症ALI。     

“肺肠同治”法对脓毒症大鼠肺基质金属蛋白酶及其抑制物表达的影响

目的根据"肺合大肠"理论拟定治肺、治肠、肺肠同治方药,观察不同治法对脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织MMP-9、TIMP-1及MMP-9/TIMP-1比值的变化,探讨"肺肠同治"法治疗脓毒症肺损伤的作用机制。方法将清洁级SD雄性大鼠50只随机分为假手术组、模型组、治肺组、治肠组、肺肠同治组,每组10只。以盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症大鼠模型,观察CLP术后24h大鼠肺组织匀浆中MMP-9、TIMP-1及MMP-9/TIMP-1比值、肺湿/干重比(W/D)的情况。结果与假手术组比较,模型组、治肺组、治肠组、肺肠同治组大鼠肺湿/干重比均明显增大(P0.01);与模型组比较,治肺组、治肠组、肺肠同治组的大鼠肺湿/干重比均显著减小(P0.01或P0.05)。与假手术组比较,模型组、治肺组、治肠组、肺肠同治组的大鼠MMP-9、TIMP-1显著增高(P0.01或P0.05),TIMP-1/MMP-9比值显著下降(P0.01或P0.05)。与模型组比较,治肺组、治肠组、肺肠同治组大鼠MMP-9降低[(12.56±0.76)、(12.50±0.98)、(10.50±0.71)比(14.80±0.59),P0.05],TIMP-1显著下降[(14.10±1.12)、(14.30±1.30)、(10.90±0.53)比(17.70±1.06),P0.05],TIMP-1/MMP-9比值显著升高[(0.91±0.04)、(0.90±0.04)、(0.98±0.03)比(0.84±0.03),P0.05]。结论 "治肺"法、"治肠"法、"肺肠同治"法均可以下调肺损伤模型大鼠肺组织MMP-9基因与TIMP-1基因表达,从而减轻脓毒症大鼠的肺损伤,对肺脏有一定的保护作用,其中以肺肠同治法效果最好。     

黄芪对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤^p38 MAPK表达的影响

目的探讨脂多糖（LPS）诱导急性肺损伤（ALI）大鼠肺组织磷酸化p^38 MAPK表达的变化以及黄芪对其之影响。方法静脉注射LPS复制大鼠ALI模型。随机分成3组：正常对照组、ALI组和黄芪组。采用蛋白质印迹检测肺组织磷酸化p^38 MAPK的表达,并观察大鼠动脉血氧分压（PaO2）、肺湿/干重比（W/D）、支气管肺泡灌洗液（BALF）白蛋白、血清TNF-α的变化以及肺组织病理学改变。结果LPS诱导大鼠ALI时肺组织磷酸化p^38 MAPK的表达较正常对照组显著增加（P〈0.01）。黄芪注射液可显著抑制大鼠肺组织磷酸化p^38MAPK表达,降低W/D、BALF白蛋白以及血清TNF-α含量,使下降的PaO2回升,减轻肺组织病理学损伤。结论ALI时肺组织p^38 MAPK磷酸化表达增加;黄芪注射液对内毒素性肺损伤有保护作用,其机制可能与抑制磷酸化p^38 MAPK的表达有关。