p38MAPK信号通路在脓毒症大鼠海马区神经元自噬中的作用

  目的  探讨p38丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)信号通路在脓毒症大鼠海马区神经元自噬中的作用。  方法  通过盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture, CLP)建立大鼠脓毒症模型。SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、模型组(CLP组)、溶媒组(CLP+Veh组)、p38MAPK抑制剂组(CLP+SB203580组),每组分为3、6、12、24和48 h亚组;CLP+Veh组和CLP+SB203580组分别侧脑室注射1% DMSO 5 μL和0.1 mmol/L SB203580 5 μL,注射后30 min建立CLP模型,sham组仅翻看盲肠后关腹,未做其他处理。监测大鼠生命体征,包括平均动脉压(mean arterial pressure, MAP)和心率(heart rate, HR);神经行为学评分了解大鼠的脑损伤情况;大鼠脑海马区组织HE染色观察病理改变;透射电镜下观察大鼠脑海马区神经元自噬过程;Western blot检测海马区微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3, LC3)Ⅱ、LC3Ⅰ选择性自噬接头蛋白(p62/sequestosome-1, p62/SQSTM1)、MAPK激活蛋白激酶2(MAPK-activated protein kinase 2, MK-2)、磷酸化MK-2(phosphorylation MK-2, p-MK-2)的蛋白表达;免疫荧光染色观察大鼠海马区神经元LC3和p62/SQSTM1的表达。  结果  在不同时间点,CLP组大鼠MAP低于、HR高于sham组,以造模后12 h变化最明显;CLP组大鼠神经行为学评分最低,海马区组织病理改变明显,透射电镜下观察有较多自噬空泡形成。与CLP组比较,CLP+SB203580组大鼠神经行为学评分回升,海马区病理改变好转,透射电镜下自噬空泡中的包裹物降解;Western blot结果显示,与sham组比较,造模后CLP组大鼠海马组织LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ和p-MK-2/MK-2表达升高,p62/SQSTM1表达下降,前者至12 h达到高峰,后者至12 h达到谷底,CLP+SB203580组与其它组相比,在造模12 h时,大鼠海马组织LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和p-MK-2/MK-2表达升高,而p62/SQSTM1表达进一步下降(P＜0.05);免疫荧光法观察结果显示,海马区LC3和p62/SQSTM1在NeuN的定位及表达与Western blot所测得的结果一致。  结论  脓毒症大鼠抑制p38 MAPK信号通路,可以使自噬进一步激活,对海马区神经元起到保护作用。     

己酮可可碱对大鼠脓毒症急性肺损伤p38MAPK活性的影响

目的　探讨己酮可可碱(pentoxifylline,PTX)对腹腔感染致脓毒症急性肺损伤发挥肺保护作用与p38MAPK活化的关系。方法　采用盲肠结扎穿孔致脓毒症模型,将大鼠随机分为Ⅰ组(Sham组)、Ⅱ组(脓毒症CLP组)、Ⅲ组(脓毒症加西黄著胶CLP+V组)、Ⅳ组(脓毒症加生理盐水CLP+N组)、Ⅴ组(脓毒症加SB203580 CLP+SB组)、Ⅵ组(脓毒症加己酮可可碱CLP+PTX组),其中Ⅲ组、Ⅳ组为溶媒对照组。用Western Blot检测假手术组,脓毒症1,3,6,12,24 h后p38MAPK的磷酸化,然后选择1,6,24 h分别检测应用SB203580或PTX后p38MAPK的表达,同时检测血浆TNF-α、IL-6的含量并观察24 h内肺组织病理改变。结果　与假手术组比较,脓毒症组在各个时间点p38MAPK均有较强的表达,SB203580或PTX预处理后各组的p38MAPK的磷酸化明显受到抑制,且与血浆TNF-α、IL-6的含量以及肺的病理切片变化一致。结论　己酮可可碱可能是通过抑制p38MAPK的磷酸化抑制促炎因子的过度表达,发挥对脓毒症急性肺损伤的保护作用。     

白藜芦醇治疗脓毒症大鼠急性肺损伤的作用及机制研究

目的 观察白藜芦醇(Rec)对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用,探讨其相关机制。方法 80只SD大鼠随机分为假手术组(20只)和造模组(60只),造模大鼠术后随机分为脓毒症模型组、低剂量Rec干预组(20mg/kg)和高剂量Rec干预组(40mg/kg),每组20只,干预组尾静脉注射无菌白藜芦醇,其余尾静脉注射等量0.9%NaCl注射液。ELISA法检测TNF-α和IL-6表达。取左肺下叶组织制作HE病理切片,显微镜下进行肺损伤评分。Western blot法检测肺组织细胞核P65的表达。结果 假手术组、脓毒症模型组和低剂量Rec干预组和高剂量Rec干预组的肺损伤评分为1.04±0.22分、12.25±2.14分、8.63±1.36分和5.18±1.13分,4组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。造模24h后低剂量和高剂量Rec干预组TNF-α和IL-6表达显著低于脓毒症模型组(P<0.01),高剂量Rec干预组TNF-α和IL-6表达显著低于低剂量Rec干预组(P<0.01)。肺组织细胞核P65相对灰度值在假手术组、脓毒症模型组、低剂量Rec干预组和高剂量Rec干预组分别为0.14±0.03、0.82±0.15、0.56±0.09、0.25±0.06,各组间比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 白藜芦醇可以下调脓毒症大鼠肺组织细胞核P65蛋白的表达,抑制核因子κB(NF-κB)炎性通路,对肺损伤具有保护作用。     

p38信号通路在呼吸机相关性肺损伤中的作用

呼吸机相关性肺损伤（ventilator-induced lung injury,VILI）是由机械通气产生的严重并发症,VILI的类型主要包括：气压伤（baratrauma）、容积伤（volutrauma）、肺萎陷伤（atelectrauma）、生物伤（biotrauma）,目前临床上仍无有效的治疗策略。丝裂原活化蛋白激酶家族可以在一系列细胞外刺激下参与细胞应答,在哺乳动物中,已经发现了ERKs（extracellular signal-regulated kinase）、JNK/SAPK（c-jun N-terminal/stress-activated protein kinase）、ERK5/BMK1（ERK/big MAP kinase 1）以及p38四个亚家族。随着对VILI的不断深入研究,p38通路被认为参与了VILI的发生机制,深入研究p38信号通路在VILI中的作用,可为临床提供新的治疗靶点。     

P38MAPK信号通路在大鼠肾小球系膜细胞表达VEGF中的作用

目的研究P38信号通路(P38 mitogen-activated protein kinase,P38MAPK)在大鼠肾小球系膜细胞(rat mesangial cells, RMCs)表达血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)中的作用,从而探讨P38MAPK在糖尿病肾病中的作用机制.方法分别以高葡萄糖、糖基化终末产物(Advanced glycation end product ,AGEs)、高胰岛素和过氧化氢孵育RMCs;以P38MAPK特异性抑制剂SB203580预处理RMCs,再以上述4种因素孵育RMCs,观察RMCs P38MAPK和VEGF蛋白的表达.结果 4种刺激因素均可独立激活P38MAPK,VEGF表达量也明显增加;SB203580预处理后,VEGF表达被明显抑制.结论 P38MAPK是VEGF的上游激酶,P38MAPK和VEGF可能参与了糖尿病肾病的发生发展.     

P38MAPK与HO-1在急性肺损伤中的探讨

目的 探讨丝裂原活化蛋白激酶P38(P38MAPK)与血红素加氧酶-1(HO-1)在急性肺损伤中的相互关系.方法 健康雄性Wistar大鼠40只,随机分为5组(n=8).对照组(NS组)、内毒素组(LPS组)、血晶素组(Hemin组)、锌原卟啉Ⅸ组(ZnPPⅨ组)、SB203580组(SB组).于6 h后用Western Blot和免疫组化法分别检测肺组织P38MAPK和HO-1蛋白表达,检测肺泡灌洗液(BALF)中中性粒细胞比、肺组织湿/干重、蛋白含量和动脉血气,并进行病理学观察.结果 与NS组比较,LPS组、Hemin 组、SB组、ZnPPⅨ组P38MAPK含量蛋白表达明显增高(P<0.05),HO-1强阳性表达(P<0.01或P<0.05),肺组织湿/干重明显增加(P<0.05),中性粒细胞比、蛋白含量显著增加(P<0.05或P<0.01),PaO2、PaCO2和HCO3ˉ较NS组显著下降(P<0.05);与LPS组比较,Hemin 组、SB组P38MAPK蛋白表达显著降低(P<0.05),HO-1的表达明显升高(P<0.05),肺组织湿/干重、中性粒细胞比、蛋白含量明显减少(P<0.05),而ZnPPⅨ组恰好相反;Hemin 组、SB组之间无显著差异(P>0.05).ZnPPⅨ组肺组织损伤最重,LPS组次之,Hemin组和SB组最轻.结论 P38MAPK与HO-1在急性肺损伤中各自独立,相互抑制.     

MAPK 通路蛋白在百草枯中毒致急性肺损伤大鼠肺组织中的表达及意义

目的：观察MAPK通路蛋白在百草枯中毒致急性肺损伤大鼠肺组织中的表达并探讨其意义。方法36只SD雄性大鼠随机平均分成两组：PQ组予腹腔注射20 mg／kg百草枯,对照组予腹腔注射生理盐水1 mL。在注射百草枯后8 h、1 d和3 d时,收集血清和肺组织标本。分别使用生化法检测血清中超氧化物歧化酶（ SOD）活性和丙二醛（ MDA）含量,采用ELISA方法检测血清中白细胞介素－1β（ IL－1β）和肿瘤坏死因子－α（ TNF－α）含量,利用血气分析仪检测大鼠动脉血氧分压（ PaO2）,行组织切片HE染色进行肺损伤评分,利用Western blot方法检测肺组织中p－p38MAPK、p－JNK、p－ERK1／2蛋白表达水平。结果百草枯中毒后,与对照组比较,PQ组大鼠血清中SOD活性降低（P＜0.05）,MDA、IL－1β和TNF－α含量明显增加（P＜0.05）;PaO2逐渐下降（P＜0.05）,肺损伤评分时间依赖性增加（P＜0.05）;肺组织中p－p38MAPK、p－JNK、p－ERK1／2表达量均明显上调（P＜0.05）。结论百草枯产生氧自由基,可以激活包括 p38MAPK、JNK、ERK1／2在内的MAPK通路,导致急性肺损伤发生发展。     

黄芩苷对哮喘大鼠 p38 MAPK 信号通路影响初探

目的：初步探讨黄芩苷防治支气管哮喘的作用机理。方法用卵蛋白致敏大鼠制备支气管哮喘动物模型,经黄芩苷干预治疗,运用免疫组化法及 Western Blot 法检测各组大鼠肺组织匀浆中 p38 MAPK 磷酸化蛋白表达量。结果两种检测方法均显示,p38 MAPK 磷酸化蛋白水平在模型组中有明显的增加,地塞米松组、黄芩苷高剂量组和低剂量组的 p38 MAPK 磷酸化蛋白水平均低于模型组（P ＜0．05）。结论黄芩苷能有效治疗哮喘的作用与抑制哮喘大鼠 p38 MAPK 信号通路的表达密切相关。     

罗布麻总黄酮干预p38MAPK/NF-κB信号通路治疗大鼠动脉粥样硬化作用及机制研究

目的:观察罗布麻叶总黄酮对动脉粥样硬化大鼠胸主动脉中p38MAPK/NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响,探讨罗布麻叶总黄酮干预AS的作用及其可能的作用机制。方法:72只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阳性药对照组及罗布麻叶总黄酮低、中、高剂量组。除正常对照组外,其他各组连续3天注射维生素D3后喂饲高脂饲料9周,进行造模,造模结束后各组分别给药4周。实验结束后,取大鼠胸主动脉,常规制备石蜡标本,HE染色,光镜下观察大鼠胸主动脉的病变情况;分光光度法检测血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平;Western-bloting法检测p38MAPK、p-p38MAPK、NF-κB、IL-6蛋白的表达。结果:罗布麻叶总黄酮中、高剂量组能显著改善胸主动脉壁病变,减少胸主动脉内皮下泡沫细胞及脂质空泡,并可降低大鼠血清中LDL-C、TC、TG水平以及hs-CRP的含量,提高HDL-C;同时发现罗布麻叶总黄酮中、高剂量组可以抑制p38MAPK的磷酸化,降低NF-κB、IL-6蛋白的表达。结论:罗布麻叶总黄酮对大鼠动脉粥样硬化具有明显的治疗作用,其抗AS的作用可能是通过干预p38MAPK/NF-κb信号通路下调相关蛋白来实现的。     

大麻素受体2在脓毒症大鼠急性肺损伤中的作用及其机制

目的 探讨大麻素受体2 (CB2R)对脓毒症大鼠急性肺损伤的作用及其机制。方法 将SD大鼠随机分为对照组、模型组、CB2R激动剂（JWH133）组和CB2R拮抗剂（AM630）组。模型组腹腔注射脂多糖（LPS）构建脓毒症模型;JWH133组和AM630组在注射LPS前30 min注射JWH133和AM630。6 h后光镜和电镜下观察肺组织结构改变;检测肺组织含水率以及支气管肺泡灌洗液（BALF）中TNF-α、IL-1β的含量;实时定量PCR检测肺组织ERK1/2及NF-κB p65 mRNA的表达;Western blotting检测肺组织TNF-α、IL-1β、ERK、p-ERK、NF-κB p65、p-NF-κBp65的蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组肺泡结构破坏,大量炎症细胞浸润,超微结构破坏;肺组织含水率升高;BALF中TNF-α、IL-1β水平升高（P <0.05）;肺组织ERK1/2、NF-κB p65 mRNA表达及TNF-α、IL-1β、p-ERK1/2、p-NF-κB p65蛋白表达水平升高（P <0.05）。与模型组相比,JWH133组病理改变及超微...     

P38MAPK信号通路对大鼠肝星状细胞凋亡的影响

〗［摘 要］
目的：探讨P38MAPK信号传导通路在乙醛刺激的大鼠肝星状细胞株（HSC-T6）凋亡过程中的作用及P38蛋白表达的变化,为肝纤维化的临床治疗提供依据。方法：实验设阴性对照组（HSC-T6加含10%小牛血清的DMEM培养液）、乙醛组（对照组基础上加乙醛）和实验组（乙醛组基础上加P38MAPK抑制剂SB203580,使其终浓度为4、8、16 μmol·L^-1）,流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡率;Western blotting法检测磷酸化P38MAPK表达水平,SABC法检测caspase-3蛋白表达。结果：与对照组比较,乙醛组HSC-T6的凋亡率和caspase-3蛋白阳性表达率均降低（P<0.05或P<0.01）,P38MAPK磷酸化水平表达增高（P<0.01）。抑制剂SB203580作用后,细胞凋亡率逐渐增高(P<0.01);P38MAPK磷酸化水平降低(P<0.01);caspase-3蛋白水平升高（P<0.01）;且随剂量的增加,磷酸化水平不断降低,蛋白表达水平不断升高。结论：P38MAPK抑制剂SB203580能促使乙醛刺激的HSC-T6凋亡,且凋亡的发生可能与SB203580抑制P38MAPK的磷酸化途径和caspase-3的活化有关。     

大鼠心肌缺血预处理中COX2与P38MAPK间信号传导关系的研究

目的 :探讨大鼠心肌细胞缺血预处理时COX2 的作用及其与P38MAPK的关系。方法 :实验分为 4组 (对照组、缺血预处理组、SB组和NS3 98组 ) ,用Westernblotting法测定心肌细胞的COX2 表达量和Phosph -P38MAPK量 ,以LDH释放和台盼蓝排斥试验判断心肌细胞损伤程度。结果 :缺血预处理组的LDH释放较对照组少、细胞存活率则较高 ;SB组和NS3 98组LDH释放较缺血预处理组多、细胞存活率则较低。NS3 98组的Phosph -P38MAPK量与缺血预处理组无差异 (P >0 .0 5 ) ,SB组的COX2 表达量比缺血预处理组低 ,差异显著 (P <0 .0 1)。结论 :缺血预处理时COX2 和P38MAPK表达、活化 ,COX2 活化依赖P38MAPK ,在其信号传导中 ,P38MAPK活化是COX2 的上游。     

内毒素性急性肺损伤小鼠肺组织中P38MAPK的表达

目的探讨内毒素性急性肺损伤(ALI)过程中P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)的表达。方法腹腔注射脂多糖(LPS)20mg/kg建立小鼠ALI模型。心脏穿刺查血气分析,并获取肺脏标本,观察肺组织形态学改变。采用免疫组织化学法和Western blot技术检测小鼠肺组织中磷酸化P38MAPK的表达。结果与对照组比较,ALI组各时相点小鼠肺组织中磷酸化P38MAPK阳性表达明显增加,且在2h达到峰值,主要分布于浸润的炎症细胞、上皮细胞、血管内皮细胞。结论内毒素性ALI过程中启动了P38MAPK信号传导通路。     

栝楼瞿麦汤干预糖尿病肾病大鼠P38MAPK炎症信号通路机制

目的?研究栝楼瞿麦汤干预糖尿病肾病大鼠p38MAPK炎症信号通路的机制,探讨其对糖尿病肾病的作用机制及治疗效果。方法?通过对SD大鼠采用单侧肾切除及一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）的方法构建大鼠糖尿病肾病（DN）模型。造模成功后,随机分为:DN模型组,栝楼瞿麦汤高、中、低剂量组,阳性药物（缬沙坦）组,另设正常组。治疗组从实验开始第4周起,栝楼瞿麦汤高、中、低剂量组分别以5.6、2.8、1.4g/kg ig,缬沙坦4.8×10g/kg ig,正常组及模型组均给予2.8g/kg蒸馏水ig,每日1次,连续12周。于末次给药12h后,剖杀取大鼠肾组织。观察大鼠一般情况;光镜观察大鼠肾小球、肾小管组织结构变化;ELISA检测大鼠肾组织中碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、胰岛素生长因子（IGF）及单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的含量;Western blot法检测大鼠肾组织p-p38、p-CREB、FN蛋白表达情况。逆转录聚合酶链反应（qPCR）法检测大鼠肾组织FNmRNA基因表达情况。结果?DN模型组大鼠与正常组大鼠比较,肾组织出现明显的病理变化,肾组织中bFGF、IGF、MCP-1含量显著升高（P<0.01）;p-p38MAPK、p-CREB、FN蛋白表达水平显著上调（P<0.05）;FNmRNA基因表达水平显著上升（P<0.05）。经栝楼瞿麦汤干预后,各治疗组与DN模型组比较,肾组织病理变化有不同程度的改善;肾组织中bFGF、IGF、MCP-1含量有不同程度的减少,差异具有统计学意义（P<0.05~0.01）;肾组织中p-p38MAPK、p-CREB、FN蛋白表达水平下调;FNmRNA基因表达水平下调,差异具有统计学意义（P<0.05~0.01）。结论?栝楼瞿麦汤能通过抑制DN大鼠肾组织中p38MAPK炎症信号通路的激活,使损伤的组织得以修复,从而延缓DN的病理进程。      

p38 MAPK信号传导通路与胚泡植入的研究进展

胚泡植入是生殖过程的关键环节，是指在特定的植入窗口期，胚泡定位、附着并侵入子宫内膜的全过程，也是人类和哺乳动物妊娠早期母体和胚胎建立密切的营养和信息交流的关键环节。关于胚泡植入机制的研究不仅是生殖生物学中的一个极其重要的理论问题，而且是生育、不育和计划生育中的一个重要应用课题。国内外许多专家学者对此进行了广泛深入的研究。     

大黄素对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的保护作用及对MAPK通路的影响

[目的]观察大黄素对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠肺损伤的保护作用,并初步探究其作用机制.[方法]将80只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级SD大鼠随机分为对照组、模型组、大黄素高剂量组和大黄素低剂量组,每组20只.除对照组外,其余组...     

细胞因子风暴在脓毒症急性肺损伤中的作用机制研究进展

<正>脓毒症是全世界死亡和危重疾病的主要原因,也是导致住院死亡的首要因素,是全球范围内的主要疾病负担^[1]。脓毒症被定义为由宿主对感染的反应失调引起的危及生命的器官功能障碍,脓毒症对感染反应失调主要变现为细胞因子风暴和免疫抑制,这种不平衡的免疫反应影响重要器官的生理稳态,包括肾脏、肝脏、肺和心脏,并演变成多器官功能障碍综合征（MODS）[2]。在受伤的器官中,肺是第一个也是最常见的器官衰竭,     

P38MAPK信号:治疗溃疡性结肠炎的又一新策略

近年来,P38MAPK信号通路调控细胞凋亡的作用日益受到人们的关注,文献整理中发现其调控细胞凋亡的六个途径和溃疡性结肠炎的发病呈密切相关性,提示调控P38MAPK信号信号通路可能是治疗溃疡性结肠炎的有效的新的策略之一。     

白藜芦醇抑制小肠缺血再灌注继发肺损伤中P38MAPK通路及下游凋亡、炎症、氧化应激分子的表达

目的:研究白藜芦醇对小肠缺血再灌注继发性肺损伤的保护作用及其对P38MAPK通路功能的影响。方法:选择成年雄性SPF级SD大鼠并分为对照组、I/R组、Res-L组、Res-M组、Res-H组,建立小肠缺血再灌注模型,Res-L组、Res-M组、Res-H组分别给予5.0mg/kg、10.0mg/kg、15.0mg/kg白藜芦醇干预。检测肺脏中P38MAPK通路分子及下游凋亡分子、炎症因子、氧化应激产物的含量。结果:I/R组大鼠肺组织中P38MAPK、MAPKK、MAPKKK、Fas、FasL、caspase-8、caspase-9、NF-kB、TNF-α、IL-1β的表达量以及显ROS、MDA的含量显著高于对照组;Res-L组、Res-M组、Res-H组大鼠肺组织中P38MAPK、MAPKK、MAPKKK、Fas、FasL、caspase-8、caspase-9、NF-kB、TNF-α、IL-1β的表达量以及显ROS、MDA的含量著低于I/R组。结论:白藜芦醇能够通过抑制P38MAPK通路功能来减轻细胞凋亡、炎症反应和氧化应激反应,进而保护小肠缺血再灌注继发性肺损伤。     

氢气对急性肺损伤大鼠肺组织p38 MAPK活化的影响

目的探讨氢气对脂多糖（LPS）诱导急性肺损伤大鼠的肺保护作用及其可能的分子生物学机制。方法采用腹腔注射LPS
法建立大鼠急性肺损伤模型。32只雄性SD大鼠（体质量200~250 g）随机分为4组（n=8）：生理盐水组（SA组）、氢气吸入组（SH
组）、急性肺损伤组（LA组）和急性肺损伤+氢气吸入组（LH组）,氢气治疗为腹腔注射生理盐水或LPS后持续吸入混有低浓度
氢气（2%）的空气6 h,用Western blot 技术检测肺组织中p38 MAPK 的表达,用ELISA法检测肺组织及血清中TNF-α的浓度。
结果氢气吸入可以使肺组织中的活化的p38 MAPK明显降低,同时降低其下游因子TNF-α在肺组织及血清中的浓度。结论
氢气吸入可下调肺组织及血清中TNF-α的表达,此作用可能与抑制肺组织中p38 MAPK活化有关。