淫羊藿提取物对骨质疏松骨折大鼠愈合过程Notch信号通路的影响

目的观察淫羊藿提取物对骨质疏松骨折大鼠愈合过程Notch信号通路的影响并探讨其机制。方法将雌性SD大鼠分为正常骨折组和骨质疏松组,骨质疏松组去除卵巢3个月后分为骨质疏松骨折组和淫羊藿治疗组。对所有大鼠制备右侧股骨干中段横行骨折模型,淫羊藿治疗组灌胃给予浓度为110 mg/(kg·d)的淫羊藿提取物,其余两组给予等量0.9%氯化钠注射液,连续给予8周,进行骨密度、microCT扫描和病理学检测,并对血清中碱性磷酸酶(ALP)及骨组织中Notch1、骨保护素(OPG)和RANK1蛋白含量的测定。结果骨质疏松骨折组大鼠骨密度、骨体积(BV)、骨体积比(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、Notch1和OPG显著降低,ALP和RANKL含量增加;淫羊藿治疗8周后,大鼠骨密度、BV、BV/TV、Tb.Th、Notch1和OPG显著增加,ALP和RANKL含量降低(P 0.05);正常骨折组和淫羊藿治疗组骨折部位对合良好,骨重塑规则匀称,骨质疏松骨折组骨折端依然存在较明显的间隙。正常骨折组可见成熟骨小梁形成,处于软骨性骨痂向骨性骨痂转换阶段;骨质疏松性骨折组骨痂邻近原骨小梁细小松散,向骨性骨痂转化过程明显延迟;淫羊藿治疗组形态介于正常骨折组和骨质疏松性骨折组之间。结论淫羊藿提取物对骨质疏松骨折大鼠具有较好的治疗作用,其机制可能与调控Notch信号通路有关。     

Influence of total flavonoids of epimedium on the oxidative stress and the expression of peroxisome proliferators activated receptor gamma in hyperlipemia rats

目的 探讨淫羊藿总黄酮对高脂血症大鼠体内过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)表达水平和氧化应激水平的影响.方法 将健康SD雄性大鼠35只随机分为普通饲料组9只和高脂饮食组26只.高脂饮食组给予高脂饲料喂养12周后复制高脂血症大鼠模型.造模成功后随机分为模型对照组8只、淫羊藿大剂量组(200 mg/d)9只及淫羊藿小剂量组(100 mg/d)9只,干预4周后观察各组大鼠血脂水平,检测各组大鼠的超氧化物歧化酶(SOD)活性、血清丙二醛(MDA)水平及PPARγ的表达水平.结果 模型对照组甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平均明显高于普通饲料组(P＜0.01).淫羊藿总黄酮大、小剂量组TG、TC水平均明显低于模型对照组(P＜0.05,P＜0.01),且淫羊藿总黄酮大剂量组对TG、TC水平的改善较淫羊藿总黄酮小剂量组更为明显(P＜0.05).淫羊藿总黄酮大、小剂量组对高密度脂蛋白胆固醇( HDL - C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平的影响无统计学意义(P＞0.05).模型对照组大鼠干预后SOD活性较普通饲料组降低(P＜0.01),MDA水平升高(P＜0.01).淫羊藿总黄酮大、小剂量组SOD活性均较模型对照组升高(P＜0.01),MDA水平降低(P＜0.01),且淫羊藿总黄酮大剂量组较淫羊藿总黄酮小剂量组更能明显增加SOD活性(P＜0.01)和降低MDA水平(P＜0.01).模型对照组大鼠干预后PPARγ表达水平较普通饲料组明显降低(P＜0.05).淫羊藿总黄酮大、小剂量组大鼠PPARγ表达水平均较模型对照组明显升高(P＜0.01),且淫羊藿总黄酮大剂量组升高明显(P＜0.01).结论 淫羊藿总黄酮能够提高高脂血症大鼠血清SOD水平,降低MDA水平,改善氧化应激,对内皮有保护作用,其机制可能是上调体内PPARγ的表达水平.     

淫羊藿总黄酮对高脂血症大鼠氧化应激水平的相关研究

目的探讨淫羊藿总黄酮对高脂血症大鼠体内过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)表达水平和氧化应激水平的影响。方法将健康SD雄性大鼠35只随机分为普通饲料组9只和高脂饮食组26只。高脂饮食组给予高脂饲料喂养12周后复制高脂血症大鼠模型。造模成功后随机分为模型对照组8只、淫羊藿大剂量组(200 mg/d)9只及淫羊藿小剂量组(100 mg/d)9只,干预4周后观察各组大鼠血脂水平,检测各组大鼠的超氧化物歧化酶(SOD)活性、血清丙二醛(MDA)水平及PPARγ的表达水平。结果模型对照组甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平均明显高于普通饲料组(P<0.01)。淫羊藿总黄酮大、小剂量组TG、TC水平均明显低于模型对照组(P<0.05,P<0.01),且淫羊藿总黄酮大剂量组对TG、TC水平的改善较淫羊藿总黄酮小剂量组更为明显(P<0.05)。淫羊藿总黄酮大、小剂量组对高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平的影响无统计学意义(P>0.05)。模型对照组大鼠干预后SOD活性较普通饲料组降低(P<0.01),MDA水平升高(P<0.01)。淫羊藿总黄酮大、小剂量组SOD活性均较模型对照组升高(P<0.01),MDA水平降低(P<0.01),且淫羊藿总黄酮大剂量组较淫羊藿总黄酮小剂量组更能明显增加SOD活性(P<0.01)和降低MDA水平(P<0.01)。模型对照组大鼠干预后PPARγ表达水平较普通饲料组明显降低(P<0.05)。淫羊藿总黄酮大、小剂量组大鼠PPARγ表达水平均较模型对照组明显升高(P<0.01),且淫羊藿总黄酮大剂量组升高明显(P<0.01)。结论淫羊藿总黄酮能够提高高脂血症大鼠血清SOD水平,降低MDA水平,改善氧化应激,对内皮有保护作用,其机制可能是上调体内PPARγ的表达水平。     

淫羊藿醇提物对去卵巢大鼠骨质疏松治疗作用及机制研究

目的评价淫羊藿醇提物对去除卵巢致骨质疏松大鼠的治疗作用,初步探讨其作用机制。方法 SD大鼠切除双侧卵巢,造成骨质疏松大鼠模型。手术4周后,以阳性药依普黄酮片(200 mg/kg)和不同剂量的淫羊藿醇提物(170、85 mg/kg)连续ig给药8周,然后取血清测定其碱性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)活性;采用免疫组化法测定股骨中骨保护素(OPG)、破骨细胞分化因子(RANKL)蛋白表达;采用三点弯曲法测定其胫骨的生物力学性质;最后运用micro-CT对股骨远端的骨小梁参数进行分析,并对其进行三维重建,得到骨小梁的3D图形来直观地说明淫羊藿醇提物对骨质疏松大鼠的作用。结果淫羊藿醇提物高剂量组不仅能够显著降低血清ALP和StrACP活性,还能显著增加OPG蛋白表达,降低RANKL蛋白表达,且能有效地改善胫骨生物力学性质和股骨骨小梁参数。结论淫羊藿醇提物高剂量(170 mg/kg)对骨质疏松大鼠具有明显的治疗作用,其可能是通过促进成骨细胞活性、抑制破骨细胞活性来实现的。     

淫羊藿总黄酮抑制去势大鼠骨吸收的研究

目的：探讨淫羊藿总黄酮对去势大鼠骨吸收的抑制作用。方法：将60只10月龄SPF级雌性SD大鼠随机分为6组,除正常对照组外,均行双侧卵巢切除术,术后1周给予淫羊藿总黄酮高、中、低剂量和雌二醇进行干预,观察各组雌二醇水平与子宫系数、全身及不同骨密度、血清生化指标的变化情况。结果：正常对照组和雌激素组的子宫系数、血清雌激素水平和全身骨密度均显著高于其他各组。淫羊藿总黄酮低、中、高剂量组对子宫系数和血清雌激素水平均无明显影响;淫羊藿总黄酮中剂量组及高剂量组能明显促进腰椎骨密度的增加,抑制血清碱性磷酸酶的升高。结论：淫羊藿总黄酮能抑制去势大鼠的骨吸收,血清生化指标的相关变化与骨密度变化趋于一致,表明骨代谢生化指标与骨密度变化具有相关性。     

从内质网应激途径探讨淫羊藿总黄酮对衰老大鼠心肌细胞的保护作用

摘要 目的：研究淫羊藿总黄酮对自然衰老大鼠心肌细胞的影响及其机制。方法：将SD雄性大鼠随机分为青年对照组(9月龄组)，自然衰老组(24月龄组)，淫羊藿总黄酮低、中、高剂量组，每组10只。淫羊藿总黄酮低、中、高剂量组大鼠从18月龄开始分别给予淫羊藿总黄酮10mg/kg，20mg/kg，60mg/kg灌胃给药，青年对照组和自然衰老组大鼠灌胃1% 羧甲基纤维素钠(CMC-Na)。每周停药一天，持续6个月。HE染色观察心脏的组织形态，电镜观察心肌细胞中线粒体的超微结构，Western blot检测心脏组织中GRP78、CHOP、Bax、P-JNK蛋白表达情况。结果：HE染色和电镜结果显示，与自然衰老组相比，淫羊藿总黄酮低、中、高剂量组心脏组织的形态结构和超微结构均有所改善。淫羊藿总黄酮还可抑制GRP78蛋白的表达，降低CHOP、Bax和P-JNK蛋白的表达。结论：淫羊藿总黄酮对自然衰老大鼠心肌细胞具有保护作用。其机制可能是通过抑制内质网应激的发生，减少心肌细胞的凋亡，从而发挥对心脏的保护作用。     

Influence of Total Flavonoids from YinYangHuo on Calcium and Phosphorus Metabolism of Emasculate Rat

目的:探讨淫羊藿总黄酮对去势大鼠钙、磷代谢的影响.方法:将60只10月龄SPF级雌性SD大鼠按照体质量以随机数字表法分为正常对照组、模型对照组、淫羊藿总黄酮低、中、高剂量组和β-雌二醇组6组,除正常对照组外,其余各组均行双侧卵巢切除术,术后一周给予淫羊藿总黄酮高、中、低剂量和雌二醇进行干预,观察各组雌二醇水平与子宫系数、全身及不同骨密度、血清生化指标的变化情况.结果:模型对照组较其余各组尿钙/肌酐、尿磷/肌酐显著上升(P＜0.01),各组间血钙、磷差异无统计学意义.结论:大鼠去势后尿钙/肌酐、尿磷/肌酐显著上升,淫羊藿总黄酮可抑制去势大鼠钙、磷的丢失.     

淫羊藿苷对去卵巢大鼠骨质疏松症的保护机制研究

目的:探讨淫羊藿苷在去卵巢大鼠骨质疏松症中的保护作用及机制。方法:将55只大鼠(均为雌性,6个月龄)随机分为5组(对照组、模型对照组、西药组、淫羊藿小剂量组及大剂量组),每组均为11只。手术取出大鼠双侧卵巢以建立骨质疏松大鼠模型,14天后开始给药,西药组大鼠给予尼尔雌醇(1mg·kg~(-1))灌胃,小剂量及大剂量组分别给予淫羊藿苷(50mg·kg~(-1)、100mg·kg~(-1))灌胃,1次/天。给药84天后,进行下腹主动脉取血并处死。观察大鼠骨组织形态学、骨密度(BMD)、细胞凋亡蛋白的变化。结果:与对照组比较,模型对照组大鼠的BMD水平明显降低(P0.01);西药组、小剂量组、大剂量组分别与模型对照组比较,BMD水平明显升高(P0.01)。与对照组比较,模型对照组大鼠的血清钙水平明显降低,血清磷水平明显升高(P0.05);与模型对照组比较,给予淫羊藿苷治疗的小剂量组及大剂量组大鼠血清钙水平明显升高,血清磷水平明显降低(P0.05);与对照组比较,模型对照组大鼠的骨组织中Caspase蛋白、Bax蛋白表达水平明显上调,而Bcl-2蛋白水平明显下调,P均0.05;与模型对照组比较,西药组、小、大剂量组大鼠骨组织中的Caspase蛋白、Bax蛋白表达明显下降,而Bcl-2蛋白水平明显升高,P均0.05。结论:淫羊藿苷在去卵巢大鼠骨质疏松症治疗中有保护作用,且其保护机制可能和细胞凋亡蛋白受到抑制有关。     

淫羊藿苷在不同骨质疏松大鼠模型中肠道吸收代谢研究

该实验比较淫羊藿苷在不同骨质疏松大鼠模型中肠道吸收代谢情况。分别采用卵巢摘除和环磷酰胺灌胃的方法复制2种大鼠骨质疏松的模型,在此基础上,对其进行淫羊藿苷的在体肠灌流,HPLC检测并计算淫羊藿苷的表观渗透系数及代谢产物的生成量;Western blot考察2种模型肠段LPH酶的表达情况。实验结果表明,卵巢摘除和环磷酰胺4.5 mg·kg~(-1)灌胃可诱发大鼠骨密度降低,成功复制骨质疏松模型;20μmol·L~(-1)的淫羊藿苷灌流液在假手术组大鼠各肠段的表观渗透系数Papp按十二指肠、空肠、回肠、结肠顺序依次为5.695,5.224,1.492,0.520;在卵巢摘除组中为3.876,3.608,0.863,0.291;在生理盐水组中为4.945,3.601,1.990,1.042;在环磷酰胺致骨质疏松模型组为3.301,2.108,1.209,1.233;此外,蛋白表达结果显示2种模型组肠段中LPH酶的表达水平均比正常组低。淫羊藿苷在2种骨质疏松模型中的吸收代谢比假手术组和生理盐水组低,不同骨质疏松模型大鼠肠段的LPH酶表达均降低,是导致淫羊藿苷肠道吸收代谢降低的原因之一。     

淫羊藿总黄酮含药血清对成骨细胞OPG/OPGL基因表达的影响

目的研究淫羊藿总黄酮含药血清对体外培养成骨细胞骨保护素(OPG)和骨保护素配体(OPGL)基因表达的影响,进一步揭示淫羊藿"补肾壮阳,益精健骨"的作用机制。方法采用中药血清药理学方法制备含淫羊藿总黄酮大鼠血清;用多次酶消化法体外培养成骨细胞;将含淫羊藿总黄酮大鼠血清(SRAT)以5%的质量浓度加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液中,研究它们对OPG/OPGL基因表达水平的影响。OPG/OPGL基因表达水平用RT-PCR法检测。结果半定量RT-PCR显示5%含淫羊藿总黄酮大鼠血清干预成骨细胞时,存在OPG mRNA的转录,在此浓度下,随着时间的延长转录水平逐渐增加,而OPGL mRNA水平随着时间的延长转录水平逐渐减弱。结论淫羊藿总黄酮代谢产物能上调成骨细胞中OPG mRNA的表达、抑制OPGL mRNA的表达,说明淫羊藿总黄酮代谢产物具有促进骨形成活性。     

淫羊藿总黄酮对去势大鼠钙、磷代谢的影响

目的：探讨淫羊藿总黄酮对去势大鼠钙、磷代谢的影响。方法：将60只10月龄SPF级雌性SD大鼠按照体质量以随机数字表法分为正常对照组、模型对照组、淫羊藿总黄酮低、中、高剂量组和β-雌二醇组6组,除正常对照组外,其余各组均行双侧卵巢切除术,术后一周给予淫羊藿总黄酮高、中、低剂量和雌二醇进行干预,观察各组雌二醇水平与子宫系数、全身及不同骨密度、血清生化指标的变化情况。结果：模型对照组较其余各组尿钙/肌酐、尿磷/肌酐显著上升（P〈0.01）,各组间血钙、磷差异无统计学意义。结论：大鼠去势后尿钙/肌酐、尿磷/肌酐显著上升,淫羊藿总黄酮可抑制去势大鼠钙、磷的丢失。     

淫羊藿苷对尾悬吊模拟失重诱导大鼠骨丢失的防护作用

目的 研究淫羊藿苷对尾悬吊模拟失重大鼠骨丢失的影响。方法 大鼠随机分为空白组、模型组、阿仑膦酸钠组(2.0 mg/kg)、淫羊藿苷组(30 mg/kg),每组10只。大鼠灌胃给药6周,每周称重1次,从第3周开始,除空白组外,其他各组均给予尾悬吊处理。6周后,ELISA法检测大鼠相关骨代谢标志物水平;双能X线骨密度仪检测大鼠骨密度;三点弯曲力学实验分析大鼠股骨生物力学性能;Micro-CT扫描仪观察大鼠股骨形态结构特性并对骨小梁进行三维重建,测定相关空间结构参数;Schr9dinger Maestro 12.8软件将阿仑膦酸钠、淫羊藿苷分别与BMP-2、OPG、RANK、RANKL蛋白进行分子对接;Western blot法检测股骨组织BMP-2、OPG、RANK、RANKL蛋白表达。结果 与模型组比较,淫羊藿苷组骨吸收相关标志物水平降低(P<0.05,P<0.01),骨形成相关标志物水平、骨密度、股骨骨应力、弹性模量及最大载荷、股骨组织BMP-2和OPG蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);淫羊藿苷较阿仑膦酸钠与骨代谢蛋白对接更好,更易发生作用。结论 淫羊...     

淫羊藿总黄酮和黄芪多糖配伍对骨质疏松大鼠的保护作用

目的:观察淫羊藿总黄酮和黄芪多糖配伍对去势骨质疏松大鼠的保护作用.方法:采用双侧卵巢切除术复制大鼠骨质疏松(OP)模型,将50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、淫羊藿总黄酮组、黄芪多糖组和淫羊藿总黄酮+黄芪多糖组(各10只),分别给予相应药物灌胃,正常组和模型组给予等体积生理盐水.12周后处死大鼠,取血测定血钙(Ca)...     

淫羊藿总黄酮对自然衰老大鼠睾丸细胞凋亡及p-P53、p-P38表达的影响

目的:探讨淫羊藿总黄酮对自然衰老雄性大鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响及其延缓睾丸衰老的作用机制。方法:将30只18月龄SD雄性大鼠随机分为自然衰老组及淫羊藿总黄酮低、高剂量组,每组各10只,10只3月龄SD大鼠作为青年对照组。淫羊藿总黄酮低、高剂量组分别以10、20 mg/kg剂量灌胃给药,同时青年对照组和自然衰老组大鼠均灌胃给予1%羧甲基纤维素钠,共持续给药6个月。HE染色观察各组大鼠睾丸组织形态,TUNEL法检测各组大鼠睾丸细胞凋亡情况,Western Blot检测各组大鼠睾丸组织中Bcl-2、Bax、p-P53、p-P38蛋白表达情况。结果:与自然衰老组大鼠比较,淫羊藿总黄酮低、高剂量组大鼠睾丸的形态结构均有明显改善,且发生凋亡的生殖细胞数明显减少。此外,淫羊藿总黄酮还可显著升高自然衰老组睾丸组织中Bcl-2蛋白表达,显著降低Bax、p-P53、p-P38蛋白表达。结论:淫羊藿总黄酮对自然衰老大鼠睾丸细胞凋亡有较好的保护作用,其机制可能是通过抑制p38活化进而减少P53磷酸化,从而减少睾丸内生殖细胞的凋亡,以延缓睾丸衰老。     

淫羊藿总黄酮对自然衰老大鼠睾丸细胞凋亡及p-P53、p-P38表达的影响北大核心CSCD

目的:探讨淫羊藿总黄酮对自然衰老雄性大鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响及其延缓睾丸衰老的作用机制。方法:将30只18月龄SD雄性大鼠随机分为自然衰老组及淫羊藿总黄酮低、高剂量组,每组各10只,10只3月龄SD大鼠作为青年对照组。淫羊藿总黄酮低、高剂量组分别以10、20 mg/kg剂量灌胃给药,同时青年对照组和自然衰老组大鼠均灌胃给予1%羧甲基纤维素钠,共持续给药6个月。HE染色观察各组大鼠睾丸组织形态,TUNEL法检测各组大鼠睾丸细胞凋亡情况,Western Blot检测各组大鼠睾丸组织中Bcl-2、Bax、p-P53、p-P38蛋白表达情况。结果:与自然衰老组大鼠比较,淫羊藿总黄酮低、高剂量组大鼠睾丸的形态结构均有明显改善,且发生凋亡的生殖细胞数明显减少。此外,淫羊藿总黄酮还可显著升高自然衰老组睾丸组织中Bcl-2蛋白表达,显著降低Bax、p-P53、p-P38蛋白表达。结论:淫羊藿总黄酮对自然衰老大鼠睾丸细胞凋亡有较好的保护作用,其机制可能是通过抑制p38活化进而减少P53磷酸化,从而减少睾丸内生殖细胞的凋亡,以延缓睾丸衰老。     

淫羊藿-女贞子配伍对糖皮质激素性骨质疏松大鼠TGF-β1/Smads通路的影响

目的:观察淫羊藿-女贞子煎剂及其有效成分提取物配伍对糖皮质激素性骨质疏松(GIOP)大鼠转化生长因子-β_1(TGF-β_1)/Smads通路相关蛋白的影响,并探讨其相关的作用机制。方法:雄性SPF级SD大鼠49只,随机分为正常组,模型组,淫羊藿-女贞子提取物高、低剂量组(200,100 mg·kg~(-1)),淫羊藿-女贞子水煎剂高、低剂量组(7,3.5 g·kg~(-1))和钙尔奇组(0.277 3 g·kg~(-1))。除正常组外,大鼠两大腿内侧交替肌肉注射地塞米松(1 mg·kg~(-1))造模,每周2次。8周后,观察大鼠体重变化,取大鼠股骨,称量其湿重、干重以及煅烧后的灰重,计算股骨湿重、干重、灰重和体积的比值,采用免疫荧光法检测大鼠股骨TGF-β_1,磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3),Smad4,Smad7蛋白的表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠体重和骨量均降低(P0.01),骨组织TGF-β_1,p-Smad2/3及Smad4蛋白表达显著降低(P0.01),Smad7蛋白表达显著升高(P0.01);与模型组比较,各给药组体重和骨量均显著增加,各淫羊藿-女贞子煎剂及提取物组大鼠股骨TGF-β_1,p-Smad2/3及Smad4蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01),Smad7蛋白表达显著降低(P0.01)。结论:淫羊藿-女贞子通过上调TGF-β_1/Smads通路中TGF-β_1,p-Smad2/3及Smad4蛋白表达,下调Smad7蛋白表达,增强成骨细胞功能,减少GIOP大鼠骨量丢失。     

淫羊藿总黄酮对大鼠成骨细胞代谢调控的机制研究

目的：探讨淫羊藿总黄酮对大鼠成骨细胞代谢调控的影响。方法:取新生SD大鼠的颅骨,胶原酶法培养成骨细胞。应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法(PNPP)和RT-PCR方法观察淫羊藿总黄酮对体外培养成骨细胞的增殖、碱性磷酸酶活性和OPG mRNA,RANKL mRNA表达的影响。结果:淫羊藿总黄酮能刺激成骨细胞增殖,提高碱性磷酸酶活性,增强OPG mRNA的表达（P<0.05或P<0.01）。结论:淫羊藿总黄酮能促进成骨细胞的增殖、分化,增加OPG mRNA的表达,对RANKL的表达无明显影响。     

淫羊藿-女贞子抗维甲酸致大鼠骨质疏松症的作用机制探讨

目的:研究淫羊藿女贞子水煎剂及其有效成分提取物防治维甲酸(RA)致大鼠骨质疏松症(OP)的作用机制。方法:SPF级雄性Wistar大鼠36只,随机分为6组,即正常组、模型组、淫羊藿-女贞子水煎剂组、淫羊藿-女贞子提取物低、中、高剂量组,RA(70 mg·kg-1)ig造模,造模的同时给药,给药组分别给予淫羊藿-女贞子水煎剂(9.5 g·kg-1)及药对有效成分提取物低、中、高3个剂量(50,100,200 mg·kg-1)ig治疗2周,免疫组化法检测骨组织中凋亡相关因子B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),p53的蛋白表达;实时RT-q PCR法检测骨组织中转化生长因子-β1(TGF-β1),果蝇MAD类似基因2(Smad2),Smad3,Smad7 mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠骨组织Bcl-2蛋白表达明显降低,而p53蛋白表达显著升高,骨组织TGF-β1及Smad2,Smad3 mRNA相对表达量均明显下降,Smad7 mRNA相对表达量明显升高,均具有统计学差异(P0.05,P0.01);与模型组比较,各给药组可不同程度上调Bcl-2以及TGF-β1,Smad2,Smad3的表达水平,下调p53,Smad7的表达水平,均具有明显统计学差异(P0.05,P0.01)。结论:淫羊藿-女贞子抗OP的作用机制可能与其维持凋亡与抗凋亡间的平衡,抑制骨组织细胞凋亡以及调控TGF-β/Smads通路信号转导有关。     

从AMPK介导的自噬研究淫羊藿总黄酮对自然衰老大鼠小肠屏障功能的调节作用

目的:从AMPK介导的自噬探讨淫羊藿总黄酮对自然衰老大鼠小肠屏障功能的调节作用。方法:SD大鼠按其不同发育阶段分为6月龄成年对照组,24月龄衰老组及淫羊藿总黄酮低、中、高剂量(10、20、60 mg/kg)组。用D-乳酸试剂盒检测各组血清D-乳酸含量;采用免疫组化检测各组小肠Claudin-1、Occludin、p-AMPK表达情况;Western blot检测小肠自噬相关蛋白Lc3Ⅱ、Beclin1表达情况。结果:与成年组比较,衰老组血清D-乳酸含量显著升高,小肠Claudin-1、Occludin、p-AMPK、Lc3Ⅱ、Beclin1表达显著降低(P0.01);与衰老组比较,淫羊藿总黄酮中、高剂量组血清D-乳酸水平显著降低,小肠紧密连接蛋白与自噬相关蛋白的表达显著升高(P0.01)。结论:淫羊藿总黄酮可能通过上调AMPK介导的自噬,增加肠上皮细胞间紧密连接蛋白的表达,从而改善衰老大鼠肠道黏膜屏障功能障碍。     

肾阳虚大鼠血清对OB-OC共育体系中β-catenin/OPG/RANKL表达的影响及淫羊藿苷的调控作用

目的:观察肾阳虚大鼠血清对共育体系中骨保护素(OPG),胞质蛋白(β-catenin)及核转录因子-κB受体活化因子配体(RANKL)蛋白表达的影响及淫羊藿苷对其的调控,进一步探究其诱导骨质疏松发生的可能机制。方法:取16只雄性SD大鼠,随机分为空白组和模型组,每组8只,模型组以10 mL·kg-1腺嘌呤灌胃建立肾阳虚模型,造模成功后收集血清。体外分离培养成骨细胞(OB)和破骨细胞(OC),采用茜素红、碱性磷酸酶(ALP)及姬姆萨染色观察并鉴定OB,OC用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色鉴定,transwell小室建立OB-OC共育体系,设置淫羊藿苷组(100μmol·L-1),空白组,淫羊藿苷(100μmol·L-1)+血清组(10%肾阳虚血清),血清组(10%肾阳虚血清)及Dickkopf1(DKK-1)药物组(100μg·L-1),干预共育体系2 d后,对OC进行计数,微板酶标法检测培养液中TRAP及ALP的含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组OPG,β-catenin及RANKL蛋白的表达。结果:与空白组比较,血清组ALP活性,β-catenin及OPG蛋白表达均明显降低(P0. 05),而OC数量,TRAP活性及RANKL蛋白的表达明显升高(P0. 05);与血清组比较,淫羊藿苷组ALP活性显著降低(P0. 01),与淫羊藿苷组比较,淫羊藿苷+血清组ALP活性及OPG蛋白表达明显降低(P0. 05),TRAP活性及RANKL表达明显升高(P0. 05)。结论:肾阳虚大鼠血清能诱导骨质疏松的发病,其作用机制可能是通过降低ALP活性,下调OPG及β-catenin蛋白的表达,同时提高TRAP活性,上调RANKL蛋白的表达来实现的。